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基于iTRAQ技术分析早期糖尿病肾病肾阴虚证患者血浆蛋白质组学

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中医学报 2024年第2期39卷 400-405页

作者：耿宇轩赵青郭文涛程吟黄怡冯龙卢洪梅河南中医药大学河南郑州450046 广东医科大学广东东莞523808 广东医科大学附属东莞第一医院广东东莞523808

目的:筛选糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)肾阴虚证敏感的血浆分子标志物,探究糖尿病肾病肾阴虚证的生物学基础及其发病机制。方法:收集24例早期DN肾阴虚患者(DN阴虚证组)的血浆和24例正常人群血浆(NC组),应用同位素标记的相对和... 详细信息

目的:筛选糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)肾阴虚证敏感的血浆分子标志物,探究糖尿病肾病肾阴虚证的生物学基础及其发病机制。方法:收集24例早期DN肾阴虚患者(DN阴虚证组)的血浆和24例正常人群血浆(NC组),应用同位素标记的相对和绝对定量(isobaric tag for relative and absolute quan-tification,iTRAQ)标记的二维液相色谱串联质谱(two-dimensional liquid chromatography-tandem mass spectrometry,2DLC-MS/MS)方法检测血浆蛋白质,利用基因本体论(Gene Ontology,GO)、京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)及蛋白质互作网络等方法筛选血浆差异蛋白,采用Western blot对筛选出来的蛋白进行验证。结果:与NC组比较,DN阴虚证组中共鉴定出37个差异蛋白质(差异倍数>2,P中医证型研究提供潜在分子标志物。

关键词：糖尿病肾病肾阴虚证蛋白质组学 iTRAQ技术

伤科接骨片对兔下颌骨缺损修复中骨保护素及配体基因表达的影响

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中国中西医结合杂志 2013年第1期33卷 109-113页

作者：翁春辉赖晓宇詹春华戴丽冰钟志勇暨南大学医学院第四附属医院广州市红十字会医院口腔科广州510220 暨南大学医学院第四附属医院广州市红十字会医院广州市创伤外科研究所广州510220 广东省医学动物实验中心比较医学实验室广东省广州528248

目的探讨伤科接骨片在下颌骨缺损修复中的作用机制。方法健康雄性新西兰兔72只,随机分为正常对照组(24只)、模型组(24只)和伤科接骨片组(24只),建立下颌骨缺损模型。正常对照组、模型组动物给予正常饲料,伤科接骨片组动物给予伤科接骨... 详细信息

目的探讨伤科接骨片在下颌骨缺损修复中的作用机制。方法健康雄性新西兰兔72只,随机分为正常对照组(24只)、模型组(24只)和伤科接骨片组(24只),建立下颌骨缺损模型。正常对照组、模型组动物给予正常饲料,伤科接骨片组动物给予伤科接骨片饲料。分别于建模后第7、14、28、56天处死相同例数动物(n=6),收集下颌骨缺损处骨组织块。采用RT-PCR技术检测骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、骨保护素配体(osteoprotegerin ligand,OPGL)基因表达,免疫组化检测骨组织染色强度和面积。结果与正常对照组比较,模型组兔下颌骨组织OPGmRNA表达在建模后第7天显著上调(P强,面积更广,建模后第14天OPGL mRNA表达下调明显(P<0.05),骨组织阳性染色更弱,面积更小,OPG mRNA/OPGL mRNA比值在建模后第14、28、56天明显上调(P<0.05)。结论伤科接骨片促进下颌骨缺损修复的作用可能与其调节OPGmRNA、OPGL mRNA表达水平有关。

关键词：下颌骨缺损伤科接骨片骨保护素骨保护素配体基因表达

半边旗二萜类化合物5F对高转移卵巢癌HO-8910PM细胞中癌相关基因表达的影响

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中国药理学通报 2008年第1期24卷 117-122页

作者：何太平覃燕梅莫丽儿吴科锋梁念慈广东医学院生物化学与分子生物学研究所广东湛江524023 广东天然药物研究与开发重点实验室广东湛江524023

目的深入探讨半边旗(Pteris semipinnataL,PsL)二萜化合物5F(PsL5F)抗癌作用的分子机制,全面了解其对卵巢癌中癌相关基因表达的影响。方法应用人癌相关基因芯片观察PsL5F对多种癌相关基因表达的影响,并用实时定量PCR和Western blot对部... 详细信息

目的深入探讨半边旗(Pteris semipinnataL,PsL)二萜化合物5F(PsL5F)抗癌作用的分子机制,全面了解其对卵巢癌中癌相关基因表达的影响。方法应用人癌相关基因芯片观察PsL5F对多种癌相关基因表达的影响,并用实时定量PCR和Western blot对部分基因和蛋白进行验证。结果在芯片所含440种基因中,PsL5F明显上调52个基因的表达,明显下调25个基因的表达。差异表达明显的基因可粗略分为3类:影响p53及相关基因;②影响TGF-β通路相关基因;③抑制细胞外基质和粘附分子的表达。结论芯片结果明显深化了对PsL5F抗癌分子机制的认识,其作用机制与p53、TGF-β相关基因及细胞外基质和粘附分子表达有关。

关键词：半边旗卵巢癌表达

氧化槐果碱诱导SW480细胞凋亡的实验研究

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中国临床药理学杂志 2014年第8期30卷 712-714页

作者：张绪慧梁磊蔡长青广东省第二人民医院肿瘤二科广州510317 广州军区广州总医院药剂科广州510010

目的考察氧化槐果碱(OSC)抑制SW480细胞及诱导其产生凋亡的作用。方法根据用药剂量分组,用MTT法测定氧化槐果碱对SW480细胞增殖的影响,荧光双染观察细胞形态变化,计数凋亡细胞比率;定时定量聚合酶链式反应(real-time PCR)检测凋亡基因ca... 详细信息

目的考察氧化槐果碱(OSC)抑制SW480细胞及诱导其产生凋亡的作用。方法根据用药剂量分组,用MTT法测定氧化槐果碱对SW480细胞增殖的影响,荧光双染观察细胞形态变化,计数凋亡细胞比率;定时定量聚合酶链式反应(real-time PCR)检测凋亡基因caspase-3和Bcl-2的变化。结果 OSC对体外培养的SW480细胞增殖具有明显抑制作用;OSC作用后凋亡细胞比例显著增加;凋亡基因caspase-3 mRNA表达上调而Bcl-2 mRNA表达下调。结论OSC可抑制体外培养的SW480细胞生长增殖,其作用机制与阻滞细胞周期进程、诱导细胞凋亡有关。

关键词：氧化槐果碱 SW480细胞株抑制凋亡

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正丁酸盐诱导的大鼠非炎症性结肠致敏模型

世界华人消化杂志 2009年第15期17卷 1552-1557页

作者：叶建明胡品津薛存宽何学斌蒋朋汪晓珍中山市人民医院消化内科广东省中山市528403 中山大学附属第一医院消化内科广东省广州市510080 华中科技大学同济医学院老年医学研究所湖北省武汉市430077 中山市人民医院儿科广东省中山市528403

目的:研究正丁酸盐结肠灌注对大鼠结肠敏感性的影响,探讨结肠致敏模型制作的新方法.方法:Wistar大鼠每天接受浓度为300mmol/L丁酸盐1mL从肛门灌肠2次,共6d.分别在造模3、6d后以半定量的方法观察大鼠对直肠扩张(CRD)的反应,进行结肠敏感... 详细信息

目的:研究正丁酸盐结肠灌注对大鼠结肠敏感性的影响,探讨结肠致敏模型制作的新方法.方法:Wistar大鼠每天接受浓度为300mmol/L丁酸盐1mL从肛门灌肠2次,共6d.分别在造模3、6d后以半定量的方法观察大鼠对直肠扩张(CRD)的反应,进行结肠敏感性评估,记录初始感觉压力和最大耐受压力.实验后处死大鼠,取距肛门10cm的结直肠,观察肠黏膜损伤指数,病理检查观察组织病理改变.结果:模型组和盐水对照组均未见黏膜及黏膜下层组织结构破坏,黏膜下嗜酸性粒细胞计数、肥大细胞计数无显著差异.造模6d模型组结肠运动最大压力较盐水对照组明显升高,差异有显著意义(t=9.25,P<0.01).模型组初始压力感觉及最大耐受压力较盐水对照组明显降低,差异有显著意义(t=36.71,15.02,均P<0.01).结论:正丁酸盐灌肠可以使结肠敏感性增加,不破坏结肠黏膜组织结构,结肠黏膜致敏与肥大细胞无关.

关键词：正丁酸盐肠易激综合征内脏高敏性大鼠直肠扩张

氧化苦参碱对人结肠癌SW620细胞p16/cyclinD1/CDK4通路的影响

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中草药 2014年第15期45卷 2201-2205页

作者：张绪慧郑堰心张丽邓虹珠梁磊广东省第二人民医院肿瘤二科广东广州510317 南方医科大学中医药学院广东广州510515 广州军区广州总医院药剂科广东广州510010

目的观察氧化苦参碱诱导人结肠腺癌细胞株SW620凋亡的作用并探讨其可能机制。方法采用MTT法检测氧化苦参碱对SW620细胞的增殖抑制作用;Hoechst33258荧光染色检测氧化苦参碱对SW620细胞凋亡的影响;流式细胞仪检测氧化苦参碱对SW620细胞... 详细信息

目的观察氧化苦参碱诱导人结肠腺癌细胞株SW620凋亡的作用并探讨其可能机制。方法采用MTT法检测氧化苦参碱对SW620细胞的增殖抑制作用;Hoechst33258荧光染色检测氧化苦参碱对SW620细胞凋亡的影响;流式细胞仪检测氧化苦参碱对SW620细胞周期的影响;实时定量PCR法检测细胞内p16、cyclinD1及CDK4基因表达水平;免疫印迹法检测细胞内p16、CyclinD1及CDK4蛋白表达水平。结果氧化苦参碱抑制SW620细胞增殖作用呈剂量依赖性,其作用24 h的IC50为4.02μmol/L;与对照组相比,苦参碱处理后的SW620细胞G1期比例明显增高,G2期细胞比例下降(P<0.05);氧化苦参碱作用后SW620细胞p16基因和蛋白水平升高(P<0.05),cyclinD1及CDK4基因和蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。结论氧化苦参碱在体外能抑制SW620细胞的增殖,诱导细胞在G1期阻滞,其诱导作用与其调控p16、cyclinD1及CDK4基因和蛋白表达有关。

关键词：氧化苦参碱细胞周期 SW620细胞 p16 cyclinD1 CDK4

乳化氟碳联合川芎嗪对大鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用

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南方医科大学学报 2016年第2期36卷 250-254页

作者：郑志雄彭雪梅席露胡冬华卢春英暨南大学附属第一医院麻醉科广东广州510630 广州医科大学第三附属医院麻醉科广东广州510150

目的探讨乳化氟碳联合川芎嗪对肺缺血再灌注损伤的影响及其机制。方法建立大鼠肺缺血再灌注模型,随机分为对照组(C组)、川芎嗪组(T组)、乳化氟碳组(P组)和乳化氟碳联合川芎嗪组(TP组),每组10只,分别在恢复血供前5 min由尾静脉给药,并在... 详细信息

目的探讨乳化氟碳联合川芎嗪对肺缺血再灌注损伤的影响及其机制。方法建立大鼠肺缺血再灌注模型,随机分为对照组(C组)、川芎嗪组(T组)、乳化氟碳组(P组)和乳化氟碳联合川芎嗪组(TP组),每组10只,分别在恢复血供前5 min由尾静脉给药,并在恢复血供3 h后处死动物,取肺脏组织测定丙二醛(MDA)、髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,观察肺脏组织病理改变并评分。结果 T组、P组、TP组肺组织MDA、MPO含量显著低于C组(P0.05);C组肺组织可见明显水肿、肺泡腔可见红细胞及渗出;T组、P组肺组织未见明显水肿,可见少量红细胞及渗出;TP组肺组织未见明显水肿,可见少量渗出;C组病理积分大于T组、P组及TP组,T组及P组病理积分大于TP组(P<0.05)。结论乳化氟碳及川芎嗪可提高内源性清除氧自由基的能力,抑制中性粒细胞在肺内聚集,减少肺缺血再灌注损伤,两者联合使用效果更好。

关键词：乳化氟碳川芎嗪肺缺血再灌注损伤

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缬草波春对大鼠非炎症性结肠致敏模型的影响

世界华人消化杂志 2009年第25期17卷 2616-2620页

作者：叶建明王钰汪晓珍何学斌蒋朋薛存宽胡品津中山市人民医院消化内科广东省中山市528403 中山市人民医院儿科广东省中山市528403 华中科技大学同济医学院老年医学研究所湖北省武汉市430077 中山大学附属第一医院消化内科广东省广州市510080

目的:探讨中药提取物缬草波春对大鼠非炎症性结肠致敏模型的影响.方法:将32只雄性Wistar大鼠随机分为4组(n=8):空白对照组、模型对照组、吗啡对照组及缬草波春药物实验组.正丁酸钠灌注直肠法制造大鼠非炎症性结肠致敏模型,缬草波春药物... 详细信息

目的:探讨中药提取物缬草波春对大鼠非炎症性结肠致敏模型的影响.方法:将32只雄性Wistar大鼠随机分为4组(n=8):空白对照组、模型对照组、吗啡对照组及缬草波春药物实验组.正丁酸钠灌注直肠法制造大鼠非炎症性结肠致敏模型,缬草波春药物实验组给予缬草波春2.5mg/(kg-d),吗啡对照组吗啡0.4mg/(kg-d),生理盐水对照组和模型对照组等量生理盐水灌胃,共2wk.直肠扩张法检验大鼠直肠的敏感性,水囊通过压力感受器记录结肠用药前后直肠压力改变.分析各组直肠初始压力感觉与最大压力,结肠平均压力与最大耐受压力.结果:缬草波春组与模型对照组比较,在压力为0、1.33、2.66kPa时,直肠扩张积分差异无统计学意义,在压力为3.99、5.32、6.65、7.98kPa时,则有统计学意义(t=-2.50,-4.58,-3.00,-2.38,P<0.05或P<0.01),而与吗啡对照组比较,在上述压力下差异均无统计学意义;缬草波春组与模型对照组初始感觉压力比较明显升高,差异有显著意义(t=5.892,P<0.01),而与吗啡对照组比较,差异无显著意义;缬草波春组与模型对照组初始感觉压力和最大压力耐受值比较明显升高,差异有显著意义(t=5.892,5.075,均P<0.01),而与吗啡对照组上述两项指标差异无显著意义;缬草波春组与模型对照组和与吗啡组比较结肠运动平均压力与其运动最大压力明显降低,差异有显著意义(t=-6.583,-3.85,-3.698,-2.440,P<0.01或0.05).结论:缬草波春可降低大鼠非炎症性结肠致敏模型结、直肠的敏感性,抑制模型大鼠的结肠运动.

关键词：缬草波春缬草三酯正丁酸钠肠易激综合征内脏高敏感

局部^(125)I粒子植入联合丹皮酚灌胃对裸鼠肺癌移植瘤的治疗观察

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山东医药 2017年第7期57卷 31-33页

作者：邓咏梅李园张金山刘少颜广州医科大学附属第三医院广州510150

目的观察局部125I粒子植入治疗联合丹皮酚灌胃对A549裸鼠肺癌移植瘤的抑瘤效果,并探讨其可能作用机制。方法 Balb/c裸鼠52只,均制作A549裸鼠肺癌移植瘤模型,随机分成A、B、C、D组,每组13只。A组采用丹皮酚150 mg/kg灌胃治疗,1次/d,共治... 详细信息

目的观察局部125I粒子植入治疗联合丹皮酚灌胃对A549裸鼠肺癌移植瘤的抑瘤效果,并探讨其可能作用机制。方法 Balb/c裸鼠52只,均制作A549裸鼠肺癌移植瘤模型,随机分成A、B、C、D组,每组13只。A组采用丹皮酚150 mg/kg灌胃治疗,1次/d,共治疗14 d;B组采用直视下经皮穿刺125I(0.4 mci/粒)放射性粒子植入术治疗;C组先行125I粒子植入联合治疗,后采用150 mg/kg丹皮酚灌胃,1次/d,共治疗14 d;D组为"冷粒子"(表观活度为0)植入对照。治疗14 d时处死各组裸鼠,称取瘤重(g),计算肿瘤体积、肿瘤抑制率。观察各组肿瘤组织细胞凋亡情况,检测各组肿瘤细胞水通道蛋白5(AQP5)、生存素(Survivin)蛋白。结果治疗14 d时A、B、C组瘤重均低于D组(P均<0.05),A、B、C组肿瘤体积均小于D组(P均<0.05);A、B、C组抑瘤率分别为35.6%、57.3%、74.4%,组间两两比较,P均<0.05。A、B、C、D组细胞凋亡指数分别为20.15%±3.07%、46.00%±12.00%、67.30%±9.80%、9.49%±1.52%,组间两两比较,P均<0.05。A、B、C、D组AQP5蛋白的阳性表达率分别为30.1%±8.5%、27.3%±5.4%、33.9%±7.6%、28.4%±6.1%,B、D组比较,P<0.05。A、B、C、D组Survivin蛋白的阳性表达率分别为18.0%±7.0%、16.0%±5.0%、9.5%±2.4%、43.0%±11.0%,组间两两比较,P均<0.05。结论局部125I粒子植入联合丹皮酚灌胃对A549裸鼠肺癌移植瘤的的抑瘤效果较好,其机制可能与其上调肿瘤组织AQP5蛋白表达、下调Survivin表达,促进肿瘤细胞凋亡。

关键词：肺癌肺肿瘤丹皮酚 125I粒子植入治疗水通道蛋白5 生存素