基于iTRAQ技术分析早期糖尿病肾病肾阴虚证患者血浆蛋白质组学

作     者：耿宇轩 赵青 郭文涛 程吟 黄怡 冯龙 卢洪梅 GENG Yuxuan;ZHAO Qing;GUO Wentao;CHENG Yin;HUANG Yi;FENG Long;LU Hongmei

作者机构：河南中医药大学河南郑州450046 广东医科大学广东东莞523808 广东医科大学附属东莞第一医院广东东莞523808 

出 版 物：《中医学报》 (Acta Chinese Medicine)

年 卷 期：2024年第39卷第2期

页      面：400-405页

学科分类：100506[医学-中医内科学] 1006[医学-中西医结合] 1005[医学-中医学] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

基　　金：广东省基础与应用基础研究基金联合基金项目(2019A1515110017) 广东省医学科研基金资助项目(B2021056) 广东省中医药局科研项目(202111220) 东莞市科技特派员项目(20201800500142) 广东医科大学学科建设项目(4SG21229GDGFYO1) 

主　　题：糖尿病肾病 肾阴虚证 蛋白质组学 iTRAQ技术 

摘      要：目的:筛选糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)肾阴虚证敏感的血浆分子标志物,探究糖尿病肾病肾阴虚证的生物学基础及其发病机制。方法:收集24例早期DN肾阴虚患者(DN阴虚证组)的血浆和24例正常人群血浆(NC组),应用同位素标记的相对和绝对定量(isobaric tag for relative and absolute quan-tification,iTRAQ)标记的二维液相色谱串联质谱(two-dimensional liquid chromatography-tandem mass spectrometry,2DLC-MS/MS)方法检测血浆蛋白质,利用基因本体论(Gene Ontology,GO)、京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)及蛋白质互作网络等方法筛选血浆差异蛋白,采用Western blot对筛选出来的蛋白进行验证。结果:与NC组比较,DN阴虚证组中共鉴定出37个差异蛋白质(差异倍数2,P0.05),包括20个上调蛋白和17个下调蛋白。这些蛋白主要涉及胆固醇代谢、补体及凝血级联反应、脂肪消化吸收等与心血管疾病有明显关系的通路。进一步验证发现HP和FGG蛋白表达高于NC组,载脂蛋白AI表达低于NC组(P0.05),Western blot结果与iTRAQ质谱结果具有一致性。结论:iTRAQ结合2DLC-MS/MS技术可以有效筛选出DN肾阴虚证中差异的蛋白,本研究鉴定的37种蛋白有可能为DN的早期诊断和中医证型研究提供潜在分子标志物。