检索结果-南通市图书馆

中华肝脏病杂志 2005年第11期13卷 862-864页

作者：高毅唐力军慕宁南方医科大学珠江医院普外科广州510282

本实验用免疫磁性分离(MACS)方法分选骨髓间充质干细胞(MSCs)亚群MAPCs[1],用成纤维细胞生长因子-4(FGF-4)及肝细胞生长因子(HGF)诱导其向肝细胞方向分化,并采用不同方法鉴定了细胞分化能力.

关键词：肝细胞生长因子成纤维细胞生长因子细胞分化免疫磁珠分离法骨髓间充质干细胞多能成体祖细胞细胞因子诱导人骨髓免疫磁性分离分化能力

共培养诱导人骨髓多能成体祖细胞分化为肝细胞样细胞

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华医学杂志 2007年第6期87卷 414-418页

作者：蒋泽生高毅慕宁南方医科大学珠江医院普外科广州510282

目的探索人骨髓来源多能成体祖细胞（ZHJ-MAPC）在与人肝细胞系L02在体外共培养条件下诱导分化为肝细胞的可行性。方法（1）间接共培养：将ZHJ-MAPC和人肝细胞系L02仅培养液相通行间接共培养。分别于培养第1、3、5、7天应用免疫细胞化... 详细信息

目的探索人骨髓来源多能成体祖细胞（ZHJ-MAPC）在与人肝细胞系L02在体外共培养条件下诱导分化为肝细胞的可行性。方法（1）间接共培养：将ZHJ-MAPC和人肝细胞系L02仅培养液相通行间接共培养。分别于培养第1、3、5、7天应用免疫细胞化学法鉴定ZHJ-MAPC的白蛋白、甲胎蛋白（AFP）、细胞角蛋白-18（CK-18）、细胞角蛋白-19（CK-19）等肝细胞特征性表型的表达情况。（2）直接共培养：将荧光染料羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯（CFSE，绿色）标记的ZHJ-MAPC与L02细胞（均为1×10^4个／ml）按照各50％比例混合行直接共培养。5d后采用荧光免疫细胞化学SABC-Cy3法（红色）双标后在激光共聚焦显微镜下分别观察ZHJ-MAPC表达白蛋白、AFP、CK-18的情况。结果（1）间接共培养结果：AFP在ZHJ-MAPC间接共培养第1天即表现为强阳性，随后表达逐渐减弱；白蛋白在第5天达到高峰；CK-18在第5天开始出现阳性，第7天出现较强表达。CK-19在各时间点均为阴性。（2）直接共培养结果：共培养第5天在检测白蛋白和CK-18表达情况时呈黄色荧光的阳性细胞即向肝细胞分化的ZHJ-MAPC出现较多，而AFP阳性表达则较少。结论人骨髓来源的ZHJ-MAPC与人肝细胞系L02行间接或直接共培养均能够诱导其向成熟肝样细胞定向分化。

关键词：骨髓干细胞肝细胞细胞培养

人骨髓来源多能成体祖细胞与人肝细胞系L02体外共培养向肝样细胞分化的实验研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华肝脏病杂志 2007年第3期15卷 174-178页

作者：慕宁王明元林雨冬高毅解放军福州总医院95临床部普外科福建省莆田351100 南方医科大学珠江医院普外科

目的探索人骨髓来源多能成体祖细胞（hMAPCs）在与人肝细胞系L02在体外共培养条件下诱导分化为肝细胞的可行性，为其在组织工程学研究和临床医学中的广泛应用奠定基础。方法（1）取健康成人志愿者适量骨髓采用CD45、糖化蛋白A（GlyA）... 详细信息

目的探索人骨髓来源多能成体祖细胞（hMAPCs）在与人肝细胞系L02在体外共培养条件下诱导分化为肝细胞的可行性，为其在组织工程学研究和临床医学中的广泛应用奠定基础。方法（1）取健康成人志愿者适量骨髓采用CD45、糖化蛋白A（GlyA）免疫微磁珠负分选，纯化培养CD45^-、GlyA^-hMAPCs。（2）间接共培养：将分别接种于盖玻片上的传代hMAPCs和人肝细胞系L02（密度均为1×10^5／ml）按照各50％比例共置于直径10cm培养皿中，培养液共通，实现间接共培养。分别于第1、3、5、7天免疫细胞化学鉴定hMAPCs的Alb、AFP、细胞角蛋白18（CK18）、细胞角蛋白19（CK19）等肝细胞特征性表型表达变化情况，并设阳性对照（单独培养的L02细胞）和阴性对照（单独培养未经诱导的hMAPCs），计数阳性细胞比率。（3）直接共培养：将CFSE荧光（绿色）标记的hMAPCs与L02（密度均为1×10^4／ml）按照各50％比例混合后接种于激光共聚焦显微镜检查专用培养皿内，实现直接共培养。5d后用SABC-Cy3免疫荧光（红色）双标后在激光共聚焦显微镜下分别观察hMAPCs表达Alb、AFP、CK18的情况。同样设阳性对照（单独培养的CFSE标记L02细胞）和阴性对照（单独培养的CFSE标记MAPCs）。镜下表达黄色荧光的细胞即是向肝细胞分化的MAPCs，为阳性细胞；单纯表达绿色荧光的细胞为未分化的MAPCs；单纯表达红色荧光的细胞为L02细胞。结果（1）间接共培养结果：AFP作为不成熟肝细胞的表型标志，在间接共培养第l天表现为强阳性表达，随后逐渐减弱，至第7天，AFP的阳性表达已经很少。而Alb在第l天有可疑阳性表达，第3天，Alb即出现较强的阳性表达，第5天，Alb的阳性表达就达到高峰，第7天，密集生长的细胞仍广泛的阳性表达Alb。第l、3天检测CK18均为阴性，至第5天CK18开始出现阳性表达，第7天CK18阳性表达较前增强。CK19在各时间点均为阴性着色。阳性对照细胞Alb及CK18有较强的阳性表达，AFP弱阳性表达，CK19阴性表达。阴性对照细胞均为阴性表达。（2）直接共培养结果：Alb和CK18检测时，较多细胞质内出现黄色荧光表达，而AFP阳性荧光表达则仅出现在极个别细胞质内，该结果与阳性对照细胞荧光表达类似，而阴性对照细胞未见有阳性荧光表达。结论（1）与人肝细胞系L02间接共培养能够诱导人骨髓来源的MAPCs向成熟肝样细胞定向分化。（2）与人肝细胞系L02直接共培养能够诱导人骨髓来源的MAPCs向成熟肝样细胞定向分化，且时间有提前趋势。

关键词：肝细胞共同培养细胞分化显微镜检查共焦人骨髓来源多能成体祖细胞

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

硝酸盐制备三维有序大孔金属氧化物材料研究

化学学报 2005年第10期63卷 891-896,i001页

作者：邬泉周尹强廖菊芳邓景衡李玉光中山大学化学与化学工程学院广州510275

用硝酸盐、柠檬酸和乙醇/水按一定摩尔比配置成前驱物溶液,采用胶晶模板法,制备了三维有序大孔金属氧化物材料:Al2O3,CeO2,Cr2O3,NiO,MgO,In2O3,CeO2/Al2O3,Cr2O3/Al2O3和NiO/***观察表明,材料中大孔有序排列,大孔间由小孔相连,形成三... 详细信息

用硝酸盐、柠檬酸和乙醇/水按一定摩尔比配置成前驱物溶液,采用胶晶模板法,制备了三维有序大孔金属氧化物材料:Al2O3,CeO2,Cr2O3,NiO,MgO,In2O3,CeO2/Al2O3,Cr2O3/Al2O3和NiO/***观察表明,材料中大孔有序排列,大孔间由小孔相连,形成三维规则的笼状网络结构.XRD和TEM测试表明,大孔孔壁由具有纳米尺寸的金属氧化物粒子组成.实验表明,加入乙醇、柠檬酸,提高溶液对胶球润湿性,改善溶液渗透能力,避免粒子团聚,有利于有序大孔结构的形成.这一研究表明,根据硝酸盐的物理化学性质,调整溶液组成,选择合适的热处理温度,能得到大孔排列有序、三维规整性好的大孔结构材料.此法具有原料易得,操作简单的特点,是3DOM材料的一种新型高效制备路线.

关键词：三维有序大孔硝酸盐金属氧化物材料研究 Al2O3 Cr2O3 物理化学性质 CeO2 AL2O3 氧化物材料 In2O3 SEM观察氧化物粒子热处理温度有序排列网络结构纳米尺寸渗透能力大孔结构溶液组成结构材料高效制备 3DOM 柠檬酸

免疫磁珠法分选人骨髓多能成体祖细胞及初步鉴定

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

第二军医大学学报 2006年第10期27卷 1048-1051页

作者：慕宁汪艳谢金敏朱应乾高毅第二军医大学长征医院器官移植研究所上海200003 南方医科大学珠江医院普通外科广州510282

目的：应用免疫磁珠法分选人骨髓多能成体祖细胞,观察其分选效果,建立体外分选纯化及培养人骨髓来源多能成体祖细胞（hMAPCs）的方法.方法：取健康成人志愿者适量骨髓后采用梯度密度离心法分离获取单个核细胞,在自制培养基下贴壁培养后... 详细信息

目的：应用免疫磁珠法分选人骨髓多能成体祖细胞,观察其分选效果,建立体外分选纯化及培养人骨髓来源多能成体祖细胞（hMAPCs）的方法.方法：取健康成人志愿者适量骨髓后采用梯度密度离心法分离获取单个核细胞,在自制培养基下贴壁培养后,将获取的骨髓贴壁细胞通过CD45、血糖蛋白A（GlyA）免疫微磁珠（miniMACS）负分选,锥虫蓝拒染实验计数MACS分选前后细胞活力.流式细胞仪鉴定分选后细胞纯度;流式细胞仪分析培养细胞CD29、CD44、CD34和HLA-DR表达情况.结果：通过MACS分选,平均每1×106/ml骨髓贴壁细胞可分选出约（5～10）×104/ml hMAPCs,分选后的hMAPCs细胞生长良好,最长传代到第20代.分选前后细胞活力分别为（96.7±1.7）%和（96.0±2.4）%,无明显差异;流式细胞仪分析获取的CD45-、GlyA-细胞纯度大于98%;流式细胞仪检测hMAPCs中CD29阳性表达细胞比率为99.2%,CD44阳性细胞比率为98.3%,CD34阳性细胞比率为1.2%,HLA-DR阳性细胞比率为5.3%.结论：CD45、GlyA免疫微磁珠负分选可从骨髓中分离高纯度的hMAPCs;分选后hMAPCs在自行研制的培养基中有较强的增殖能力.

关键词：骨髓祖代细胞多能成体祖细胞免疫磁化分离细胞培养技术

人骨髓间充质干细胞亚群ZHJ-MAPCs特征表型及细胞遗传学分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国临床康复 2006年第37期10卷 4-6,i0001页

作者：蒋泽生高毅慕宁南方医科大学珠江医院普外科广东省广州市510282

目的:对经过CD45,血型糖蛋白-A免疫微磁珠体外负分选纯化并传代培养的ZHJ-MAPCs进行体外部分细胞学鉴定,了解其特异性标志物表达及增殖、传代过程中的遗传学稳定性。方法:实验于2004-01/12在珠江医院中心试验室完成。①原代冻存的ZHJ-MA... 详细信息

目的:对经过CD45,血型糖蛋白-A免疫微磁珠体外负分选纯化并传代培养的ZHJ-MAPCs进行体外部分细胞学鉴定,了解其特异性标志物表达及增殖、传代过程中的遗传学稳定性。方法:实验于2004-01/12在珠江医院中心试验室完成。①原代冻存的ZHJ-MAPCs经复苏培养、传代。②利用流式细胞仪对其进行CD29,CD44,CD34和HLA-DR流式细胞分析,以对照管作为空白定标,计算10000个细胞,记录标本的阳性细胞百分率。③分别在传代至第6代和第13代时进行细胞核型分析了解细胞核型变化。④细胞计数及细胞活力检测方法:细胞数/mL=四个大方格总数/4×104×稀释倍数。细胞存活率=5g/L锥虫蓝染色阴性细胞/100个细胞/高倍镜×100。结果:①流式细胞仪检测结果:流式细胞仪检测ZHJ-MAPCs中CD29阳性表达细胞比率为99.2%,CD44阳性细胞比率为98.3%,CD34阳性细胞比率为1.2%,HLA-DR阳性细胞比率为5.3%。②细胞核型分析结果:ZHJ-MAPCs在增殖传代过程中表现出非正常二倍体特征,染色体干系数目在第6,13代均为55～58条,占80%,染色体数介于超二倍体和亚三倍体之间,镜下见细胞均发生染色体变异,且变异形态多样。结论:①ZHJ-MAPCs具有骨髓间充质干细胞的特征及较高的纯度。②ZHJ-MAPCs在增殖传代过程中表现出非正常二倍体特征,染色体数介于超二倍体和亚三倍体之间,染色体变异形态多样。

关键词：骨髓细胞间质干细胞表型

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

双阴性选择法纯化培养人骨髓多能成体祖细胞

第一军医大学学报 2005年第5期25卷 535-537页

作者：慕宁高毅唐力军南方医科大学珠江医院普外科广东广州510282

目的建立体外分选纯化及培养人骨髓来源多能成体祖细胞(MAPCs)的方法.方法取健康成人志愿者适量骨髓采用梯度密度离心法分离获取单个核细胞,贴壁培养后,将获取的骨髓贴壁细胞通过CD45、血糖蛋白A(GlyA)免疫微磁珠(miniMACS)负分选,流式... 详细信息

目的建立体外分选纯化及培养人骨髓来源多能成体祖细胞(MAPCs)的方法.方法取健康成人志愿者适量骨髓采用梯度密度离心法分离获取单个核细胞,贴壁培养后,将获取的骨髓贴壁细胞通过CD45、血糖蛋白A(GlyA)免疫微磁珠(miniMACS)负分选,流式细胞术鉴定分选后细胞纯度;对传代到不同阶段的细胞进行CD45、GlyA流式细胞分析,初步了解MAPCs在培养、增殖过程中的免疫学稳定性.结果通过miniMACS分选,平均每1×106/ml骨髓贴壁细胞可分选出约(5～10)×104/ml的MAPCs,分选前后细胞活力分别为(96.7±1.7)%和(96.0±2.4)%,无明显差异;自制的培养基培养分选后的MAPCs生长良好,最长传代到第16代;流式细胞仪分析获取的CD45、G1yA-细胞纯度大于98%;流式细胞仪分析传代第4、8、12代MAPCs,CD45-、G1yA-细胞纯度大于98%.结论CD45、GlyA miniMACS负分选可从骨髓中分离高纯度的MAPCs;MAPCs在本室自制的人MAPCs培养基中体外有较强的增殖能力,且能保持较长时间的稳定状态.

关键词：人骨髓来源多能成体祖细胞免疫磁珠分离法分离纯化细胞培养流式细胞术

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

输注同种异基因凋亡淋巴细胞在受体内的分布

免疫学杂志 2006年第2期22卷 151-154页

作者：汪艳高毅孙尔维陈忠华南方医科大学珠江医院普通外科药剂科广州510282 南方医科大学珠江医院器官移植科广州510282 华中科技大学同济医学院器官移植研究所武汉430030

目的探讨供体凋亡淋巴细胞诱导移植耐受模型中转输细胞的作用。方法用荧光标记供体脾淋巴细胞,诱导凋亡后分离纯化。将标记细胞经尾静脉输入受者,于不同时间点取肝、脾、肺脏进行荧光细胞分布观察与测定。结果除最初30 min内荧光标记细... 详细信息

目的探讨供体凋亡淋巴细胞诱导移植耐受模型中转输细胞的作用。方法用荧光标记供体脾淋巴细胞,诱导凋亡后分离纯化。将标记细胞经尾静脉输入受者,于不同时间点取肝、脾、肺脏进行荧光细胞分布观察与测定。结果除最初30 min内荧光标记细胞在肺脏短暂汇集,从开始到其后12 h内一直以肝脏内荧光细胞比例最高。脾脏内荧光细胞比例远远低于肝脏。12 h各器官荧光细胞基本消失。结论异源供者凋亡淋巴细胞经转输后主要聚集并驻留于肝脏。鉴于肝脏本身的特殊免疫功能,初步推测肝脏为转输异源凋亡细胞发生作用的关键位点。

关键词：静脉输注凋亡淋巴细胞移植耐受肝脏

人骨髓来源多能成体祖细胞ZHJ-MAPCs与人肝细胞系L02体外共培养向肝样细胞的分化

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

世界华人消化杂志 2006年第23期14卷 2294-2300页

作者：王海澜高毅蒋泽生慕宁南方医科大学珠江医院普外科广东省广州市510282

目的:探索人骨髓来源多能成体祖细胞(ZHJ-MAPCs)在与人肝细胞系L02在体外共培养条件下诱导分化为肝细胞的可行性．方法:(1)间接共培养:将第4代ZHJ-MAPCs和人肝细胞系L02仅培养液相通行间接共培养．分别于培养第1、3、5、7天应用免疫细... 详细信息

目的:探索人骨髓来源多能成体祖细胞(ZHJ-MAPCs)在与人肝细胞系L02在体外共培养条件下诱导分化为肝细胞的可行性．方法:(1)间接共培养:将第4代ZHJ-MAPCs和人肝细胞系L02仅培养液相通行间接共培养．分别于培养第1、3、5、7天应用免疫细胞化学法鉴定ZHJ-MAPCs的ALB、AFP、CK-18、CK-19等肝细胞特征性表型表达情况,并设阳性对照和阴性对照,计数阳性细胞比率;(2)直接共培养:将CFSE荧光(绿色)标记的第4代ZHJ-MAPCs与L02(密度均为1×107／L)按照各50％比例混合行直接共培养．5 d后用SABC-Cy3免疫荧光(红色)双标后在激光共聚焦显微镜下分别观察ZHJ—MAPCs表达ALB,AFP,CK-18的情况．同样设阳性对照和阴性对照．结果:(1)间接共培养:AFP在ZHJ-MAPCs间接共培养第1天即表现为强阳性,随后表达逐渐减弱．ALB在共培养第1天有可疑阳性,第3天出现较强的阳性,第5天达到高峰．CK-18在培养第1、3天检测均为阴性,至第5天开始出现阳性,第7天表达较前增强．CK-19在各时间点均为阴性着色．(2)直接共培养:胞质内呈黄色荧光ALB和CK18的阳性细胞即向肝细胞分化的ZHJ-MAPCs在共培养5 d时出现较多,而AFP阳性表达则仅出现在极个别细胞,该结果与阳性对照细胞荧光表达类似．结论:人骨髓来源的ZHJ-MAPCs与人肝细胞系L02行间接或直接共培养均能够诱导其向成熟肝样细胞定向分化,且直接共培养有提前趋势．

关键词：人骨髓来源多能成体祖细胞肝细胞直接共培养间接共培养

维普期刊数据库评论

在线全文

维普期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

降低软磁铁硅铝磁粉芯损耗的研究

东北大学学报（自然科学版） 2009年第6期30卷 837-840页

作者：李庆达连法增尤俊华陈玉兰东北大学材料与冶金学院辽宁沈阳110004 梅州磁性材料厂广东梅州514031

为制备高性能的软磁铁硅铝磁粉芯，研究了降低铁硅铝磁粉芯损耗的方法．采用扫描电镜、金相显微镜、BH分析仪检测样品的内部结构、形貌、磁性能．研究结果表明，压制后的退火处理是降低铁硅铝磁粉芯损耗的关键，增加热处理温度能够有效... 详细信息

为制备高性能的软磁铁硅铝磁粉芯，研究了降低铁硅铝磁粉芯损耗的方法．采用扫描电镜、金相显微镜、BH分析仪检测样品的内部结构、形貌、磁性能．研究结果表明，压制后的退火处理是降低铁硅铝磁粉芯损耗的关键，增加热处理温度能够有效地降低磁粉芯的涡流损耗和磁滞损耗，过高的热处理温度会增大涡流损耗，最佳的热处理温度区间为660-720℃；添加绝缘剂能够有效地提高磁粉芯的电阻，降低其涡流损耗，对磁滞损耗的影响不大；增大成型压力可降低铁硅铝磁粉芯的损耗和矫顽力，最佳的成型压力为1800MPa．

关键词：磁滞损耗涡流损耗成型压力退火矫顽力