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Nesfatin-1对饥饿小鼠氧化应激及自噬的影响

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黑龙江畜牧兽医 2024年第3期 10-15页

作者：王铭玉斯日古楞陈宇飞谢志凤罗雨晨么宏强内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018

为了研究在急性禁食状态下Nesfatin-1对机体氧化应激及自噬的影响,试验构建小鼠饥饿模型,将50只小鼠随机均分为阴性对照组、禁食24 h组、禁食48 h组、Nesfatin-1+禁食24 h组、Nesfatin-1+禁食48 h组。禁食24,48 h组小鼠分别禁食24 h及48... 详细信息

为了研究在急性禁食状态下Nesfatin-1对机体氧化应激及自噬的影响,试验构建小鼠饥饿模型,将50只小鼠随机均分为阴性对照组、禁食24 h组、禁食48 h组、Nesfatin-1+禁食24 h组、Nesfatin-1+禁食48 h组。禁食24,48 h组小鼠分别禁食24 h及48 h;Nesfatin-1+禁食24 h组及Nesfatin-1+禁食48 h组分别在禁食24,48 h基础上按每20 g体重腹腔注射1.25 nmol/g Nesfatin-1 0.26 mL;阴性对照组腹腔注射同等剂量PBS。对各组小鼠进行眼球采血,处死后解剖取脑、肝脏组织。采用化学荧光法测定各组小鼠肝脏氧化基因指标活性氧(reactive oxygen species,ROS)荧光强度,采用ELISA方法测定各组小鼠血清丙二醛(malonaldehyde,MDA)和Nesfatin-1含量,运用实时荧光定量PCR方法测定各组自噬相关基因Beclin-1、LC3、P62 mRNA相对表达量。结果表明:与阴性对照组相比,禁食24 h组及禁食48 h组小鼠ROS荧光强度、MDA含量极显著升高(P<0.01),脑组织Beclin-1、LC3 mRNA相对表达量显著或极显著上调(P<0.05或P<0.01),P62 mRNA相对表达量极显著降低(P<0.01);在禁食24,48 h后,小鼠血清Nesfatin-1含量显著降低(P<0.05),使用Nesfatin-1干预后,其含量极显著升高(P<0.01);与禁食24 h组相比,Nesfatin-1+禁食24 h组小鼠的ROS、MDA含量和Beclin-1、LC3 mRNA相对表达量极显著降低(P<0.01),P62 mRNA相对表达量显著升高(P<0.05);与禁食48 h组相比,Nesfatin-1+禁食48 h组小鼠的ROS、MDA含量和Beclin-1、LC3 mRNA相对表达量极显著降低(P<0.01),P62 mRNA相对表达量极显著升高(P<0.01)。说明急性禁食会使小鼠体内Nesfatin-1含量降低,氧化应激与自噬水平上调,Nesfatin-1能增强细胞活力,注射Nesfatin-1后可以降低小鼠体内的氧化应激水平,也能够降低小鼠在急性禁食状态下上调的自噬水平。

关键词： Nesfatin-1 饥饿氧化应激活性氧自噬

环氧二十碳三烯酸对肥胖大鼠白色脂肪棕色化的影响

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黑龙江畜牧兽医 2024年第11期 15-20页

作者：陈宇飞玉斯日古楞萨启乐谢志凤么宏强内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010011

为了研究环氧二十碳三烯酸(epoxyeicosatrienoic acids, EET)对肥胖大鼠白色脂肪棕色化的影响,试验将32只4周龄雄性SD大鼠随机分为对照组(n=8)和高脂组(n=24),高脂组大鼠连续饲喂高脂饲料15周,将建模成功的肥胖大鼠再随机分为模型对照组... 详细信息

为了研究环氧二十碳三烯酸(epoxyeicosatrienoic acids, EET)对肥胖大鼠白色脂肪棕色化的影响,试验将32只4周龄雄性SD大鼠随机分为对照组(n=8)和高脂组(n=24),高脂组大鼠连续饲喂高脂饲料15周,将建模成功的肥胖大鼠再随机分为模型对照组和EET组(11,12-EET组和14,15-EET组),每组8只。EET组大鼠每天按体重30μg/kg皮下分别注射11,12-EET和14,15-EET,对照组和模型对照组皮下注射同等剂量生理盐水,每周测量体重。10 d后采用ELISA、实时荧光定量PCR方法检测大鼠血脂含量、口服糖耐量及脂肪组织中棕色化相关指标解偶联蛋白1(uncoupling protein 1,UCP-1)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factors, VEGF)和过氧化物酶体增殖激活受体γ辅激活因子1α(peroxisome prolifertor-activated receptor-γ coactivator-1α,PGC-1α)基因的相对表达量。结果表明:高脂饲料饲养15周后,高脂组体重显著高于对照组(P<0.05)。与模型对照组相比,11,12-EET组和14,15-EET组大鼠在口服葡萄糖2 h后,血糖浓度缓慢恢复至正常值;11,12-EET组和14,15-EET组大鼠血清三酰甘油(TG)含量显著降低(P<0.05);11,12-EET组大鼠腹股沟脂肪组织中UCP-1基因相对表达量显著升高(P<0.05),14,15-EET组大鼠肩胛骨脂肪组织中UCP-1基因相对表达量显著升高(P<0.05);14,15-EET组和11,12-EET组大鼠腹股沟和肩胛骨脂肪组织中VEGF基因相对表达量均显著降低(P<0.05);14,15-EET组和11,12-EET组大鼠肩胛骨脂肪组织中PGC-1α基因相对表达量显著降低(P<0.05),腹股沟脂肪组织中PGC-1α基因相对表达量显著升高(P<0.05)。说明EET可能通过改善糖脂代谢促进肥胖大鼠白色脂肪棕色化过程。

关键词：环氧二十碳三烯酸(EET) 肥胖白色脂肪棕色化解偶联蛋白1(UCP-1) 血管内皮生长因子(VEGF) 糖尿病

双峰驼血浆外泌体对HCC细胞增殖的影响及其转录组水平分析

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中国兽医科学 2024年

作者：陈碧君爱东于雯李子怡牛雅如贺星川玉斯日古楞内蒙古农业大学兽医学院阿拉善盟农牧局农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室

为了探索双峰驼血浆外泌体对肝细胞癌(HCC)增殖的影响机制，本研究通过利用构建的荧光蛋白LUC转染细胞系，建立裸鼠肝原位肿瘤模型，并把肝癌裸鼠随机分为对照组和试验组。试验组又分为正常体型双峰驼血浆外泌体(N-Exo)和消瘦体型双峰... 详细信息

为了探索双峰驼血浆外泌体对肝细胞癌(HCC)增殖的影响机制，本研究通过利用构建的荧光蛋白LUC转染细胞系，建立裸鼠肝原位肿瘤模型，并把肝癌裸鼠随机分为对照组和试验组。试验组又分为正常体型双峰驼血浆外泌体(N-Exo)和消瘦体型双峰驼血浆外泌体(T-Exo)组。各组裸鼠分别经尾静脉注射PBS、N-Exo和T-Exo干预3周，采用活体成像系统和HE染色方法检测双峰驼血浆外泌体对HCC细胞增殖的影响，并进一步分析两组外泌体在转录组水平上的差异。结果显示，利用筛选的稳定MHCC-97H-LUC细胞系，成功构建裸鼠肝原位肿瘤模型。经双峰驼血浆外泌体处理后，T-Exo组裸鼠肝小叶结构消失，肿瘤细胞呈团块状、实性生长，肝脏荧光信号强度较高，与对照组无显著差异；N-Exo组裸鼠肝组织形态正常，未见炎性细胞浸润，其荧光信号强度显著降低(P<0.05)。转录组分析发现，两种外泌体中共鉴定出40个差异miRNAs(DE-miRNAs)，包括miR-21-5p、miR-320c、miR-144-3p/5p等。这些DE-miRNAs在Ras、Rap1、PI3K-Akt等信号通路中显著富集。以上结果表明，双峰驼血浆外泌体可能通过上述DE-miRNAs来调控相关信号通路，从而影响HCC细胞的增殖。

关键词：双峰驼肝细胞癌外泌体转录组水平

AA-CYP表氧化酶代谢产物对胰岛β细胞增殖和细胞周期的影响

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中国兽医杂志 2022年第11期58卷 59-64页

作者：玉斯日古楞白兆星吴贞思陈彦汝么宏强内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010011 农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010011

花生四烯酸(AA)经过细胞色素P450(CYP)表氧化酶途径生成环氧二十碳三烯酸(EETs)和20-羟基二十碳四烯酸(20-HETE)。为探讨EETs和20-HETE对胰岛β细胞增殖和细胞周期的影响及其机制,本试验将培养的MIN6小鼠胰岛β细胞分为空白对照组和不... 详细信息

花生四烯酸(AA)经过细胞色素P450(CYP)表氧化酶途径生成环氧二十碳三烯酸(EETs)和20-羟基二十碳四烯酸(20-HETE)。为探讨EETs和20-HETE对胰岛β细胞增殖和细胞周期的影响及其机制,本试验将培养的MIN6小鼠胰岛β细胞分为空白对照组和不同浓度EETs和20-HETE处理组,分别采用CCK-8法、流式细胞术和Western blot法检测EETs和20-HETE对胰岛β细胞增殖和细胞周期的影响。CCK-8法结果显示,14,15-EET促进胰岛β细胞增殖,且在一定范围内呈时间和浓度依赖性;流式细胞术结果显示,EETs作用后G1期细胞减少,S期和G2/M期细胞增多,从而促进胰岛β细胞的增殖;Western blot试验结果显示,11,12-EET和14,15-EET能够激活AKT磷酸化水平及PI3K活化状况。本试验结果表明,EETs和20-HETE联合使用时,对胰岛β细胞的增殖没有促进作用,但EETs能够促进小鼠胰岛β细胞增殖,其分子机制可能是EETs激活了PI3K/AKT信号转导通路。

关键词： EETs 20-HETE 胰岛β细胞细胞增殖细胞周期

Nesfatin-1对禁食小鼠多巴胺奖赏系统的影响

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黑龙江畜牧兽医 2023年第19期 8-12页

作者：罗雨晨么宏强谢志凤陈宇飞王铭玉斯日古楞内蒙古农业大学兽医学院/农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018

为了探究Nesfatin-1对禁食小鼠多巴胺奖赏系统的影响,试验将40只C57BL/6小鼠随机分为阴性对照组、禁食24 h组、禁食48 h组、禁食24 h+Nesfatin-1组、禁食48 h+Nesfatin-1组,每组8只。禁食24 h、48 h组小鼠分别禁食24 h及48 h;禁食24 h+N... 详细信息

为了探究Nesfatin-1对禁食小鼠多巴胺奖赏系统的影响,试验将40只C57BL/6小鼠随机分为阴性对照组、禁食24 h组、禁食48 h组、禁食24 h+Nesfatin-1组、禁食48 h+Nesfatin-1组,每组8只。禁食24 h、48 h组小鼠分别禁食24 h及48 h;禁食24 h+Nesfatin-1组及禁食48 h+Nesfatin-1组小鼠分别在禁食24 h及48 h基础上按体重120 mg/kg腹腔注射Nesfatin-1;阴性对照组小鼠腹腔注射等体积的PBS。注射Nesfatin-1后等待观察4 h,各组小鼠眼球采血后断颈处死,解剖取脑组织,采用ELISA方法检测各组小鼠血清Nesfatin-1及多巴胺含量;应用实时荧光定量PCR方法检测各组小鼠脑组织酪氨酸羟化酶(TH)基因和即刻早期基因(cFOS基因)的相对表达量。结果表明:与阴性对照组相比,禁食24 h组及禁食48 h组小鼠血清Nesfatin-1、多巴胺含量显著降低(P<0.05);与禁食24 h组相比,禁食24 h+Nesfatin-1组小鼠血清Nesfatin-1、多巴胺含量极显著升高(P<0.01);与禁食48 h组相比,禁食48 h+Nesfatin-1组小鼠血清Nesfatin-1、多巴胺含量极显著升高(P<0.01)。与阴性对照组相比,禁食24 h组及禁食48 h组小鼠脑组织TH基因的相对表达量极显著下降(P<0.01),cFOS基因的相对表达量极显著升高(P<0.01);与禁食24 h组相比,禁食24 h+Nesfatin-1组小鼠脑组织TH及cFOS基因相对表达量极显著升高(P<0.01);与禁食48 h组相比,禁食48 h+Nesfatin-1组小鼠脑组织TH及cFOS基因相对表达量显著升高(P<0.05)。说明Nesfatin-1对禁食小鼠多巴胺奖赏系统有一定影响。

关键词： Nesfatin-1 禁食多巴胺酪氨酸羟化酶即刻早期基因

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白色脂肪棕色化及其与疾病的相关性研究进展

黑龙江畜牧兽医 2022年第5期 30-33页

作者：王铭玉斯日古楞罗雨晨张雅文张光杰么宏强内蒙古农业大学兽医学院/农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018

脂肪组织主要包括白色脂肪组织和棕色脂肪组织。白色脂肪组织的主要功能是储存能量,棕色脂肪组织的主要功能是产热耗能。白色脂肪棕色化的信号通路复杂多样,其相关的转录因子有过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferator-acti... 详细信息

脂肪组织主要包括白色脂肪组织和棕色脂肪组织。白色脂肪组织的主要功能是储存能量,棕色脂肪组织的主要功能是产热耗能。白色脂肪棕色化的信号通路复杂多样,其相关的转录因子有过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferator-activated receptors, PPARs)、PR结构域蛋白16(PR domain containing 16, PRDM16)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助激活因子-1α(peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1α, PGC-1α),同时也受骨形态发生蛋白(bone morphogenetic proteins, BMPs)和鸢尾素(irisin)的调节。白色脂肪棕色化能够激活米色细胞,增加机体的产热耗能,是治疗肥胖、胰岛素抵抗、脂肪肝、心脑血管疾病等的新方向。然而,白色脂肪棕色化是一把双刃剑,可能引起动脉粥样硬化、恶病质和肝脂肪变性等多种疾病。因此,文章对白色脂肪棕色化的调控因素、信号通路及其对疾病的影响进行综述,以期为发挥白色脂肪棕色化的优势、减少其对机体的消极作用提供参考。

关键词：脂肪组织白色脂肪棕色化过氧化物酶体增殖物激活受体疾病肥胖

骆驼胎盘提取物对小鼠免疫功能和巨噬细胞极化的影响

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畜牧与兽医 2023年第8期55卷 37-43页

作者：么宏强赵素洵陈宇飞谢志凤王铭罗雨晨斯日古楞内蒙古农业大学兽医学院/农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010011

为了探究骆驼胎盘提取物(camel placenta extract,CPE)的免疫作用及其对巨噬细胞极化的影响,本研究将60只BALB/c小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、阳性对照组和试验组。试验组小鼠又分为CPE高、中、低剂量(1.2、0.6、0.3 mg/mL)组,... 详细信息

为了探究骆驼胎盘提取物(camel placenta extract,CPE)的免疫作用及其对巨噬细胞极化的影响,本研究将60只BALB/c小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、阳性对照组和试验组。试验组小鼠又分为CPE高、中、低剂量(1.2、0.6、0.3 mg/mL)组,腹腔注射CPE连续14 d。除空白对照组外,其余组小鼠试验结束前7 d注射环磷酰胺致免疫抑制。通过ELISA、流式细胞术、组织病理学、荧光定量PCR和Western blot方法分别检测各组小鼠血浆IgG、细胞因子、淋巴细胞亚群、淋巴器官形态学变化以及腹腔巨噬细胞表面分子iNOS、CD206的mRNA和蛋白表达水平,以评估CPE对小鼠免疫功能和巨噬细胞极化的影响。结果显示,试验组小鼠的脾脏和胸腺指数,CD19^(+)、CD40^(+)细胞百分比和IgG水平均显著高于模型对照组(P<0.05);与模型对照组相比,试验组CD4^(+)、CD8^(+)细胞百分比和IL-4水平显著升高(P<0.05),而IL-2水平极显著降低(P<0.01);试验组巨噬细胞CD206 mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P<0.05),而iNOS的表达无显著变化。以上结果表明,CPE对小鼠T、B细胞功能以及抑炎表型巨噬细胞极化均具有促进作用。

关键词：骆驼胎盘提取物免疫功能淋巴细胞亚群巨噬细胞极化

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Nesfatin-1对糖代谢和脂肪代谢调节的研究进展

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动物医学进展 2020年第12期41卷 108-114页

作者：白兆星吴贞思李慧萍么宏强玉斯日古楞内蒙古农业大学兽医学院/农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018

Nesfatin-1作为一种新的能量调节肽,在对机体的糖代谢和脂肪代谢调节中具有重要的作用。其中nesfatin-1在调节机体脂肪代谢中,通过影响机体自身的能量消耗、抑制食欲以及抑制脂肪细胞的分化以起到对脂肪代谢的调节作用。其在调节机体糖... 详细信息

Nesfatin-1作为一种新的能量调节肽,在对机体的糖代谢和脂肪代谢调节中具有重要的作用。其中nesfatin-1在调节机体脂肪代谢中,通过影响机体自身的能量消耗、抑制食欲以及抑制脂肪细胞的分化以起到对脂肪代谢的调节作用。其在调节机体糖代谢的过程中,通过中枢和外周的方式对机体的血糖稳态和机体胰岛素的分泌进行刺激以达到调节机体糖代谢的功能。通过调节机体的糖代谢和脂肪代谢,nesfatin-1对糖尿病患者具有潜在治疗作用。nesfatin-1通过对机体的能量调节说明其对肥胖具有潜在的治疗作用。探究nesfatin-1调节机体的糖代谢和脂肪代谢的具体作用,以期为nesfatin-1在应对肥胖和糖尿病以及临床应用方面提供理论依据。

关键词： Nesfatin-1 糖代谢脂肪代谢肥胖

EETs对胰岛β细胞增殖及胰岛素分泌的影响

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内蒙古农业大学学报（自然科学版） 2020年第1期41卷 1-4页

作者：程铭么宏强武志红玉斯日古楞内蒙古农业大学兽医学院呼和浩特010018 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018 内蒙古自治区畜牧工作站呼和浩特010011

本实验旨在分析不同浓度的EETs对胰岛β细胞的影响,为防治2型糖尿病提供理论依据。体外培养MIN6小鼠胰岛瘤细胞,经不同浓度EETs处理细胞后,分别采用CCK-8法和ELISA法检测细胞活性和胰岛素含量。浓度为100 nM的11,12-EET和14,15-EET对胰... 详细信息

本实验旨在分析不同浓度的EETs对胰岛β细胞的影响,为防治2型糖尿病提供理论依据。体外培养MIN6小鼠胰岛瘤细胞,经不同浓度EETs处理细胞后,分别采用CCK-8法和ELISA法检测细胞活性和胰岛素含量。浓度为100 nM的11,12-EET和14,15-EET对胰岛β细胞增殖及胰岛素分泌能力具有显著促进作用。100 nM11,12-EET和14,15-EET均显著增加胰岛β细胞的增殖以及其胰岛素分泌能力。

关键词： EETs 胰岛β细胞增殖胰岛素分泌能力