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猪伪狂犬病疫苗效力评价方法比较研究

中国兽药杂志 2024年第8期58卷 63-69页

作者：赵俊杰徐璐李琰邹兴启夏应菊李芳韬刘业兵中国兽医药品监察所(农业农村部兽药评审中心) 国家/WOAH猪瘟参考实验室北京100081

猪伪狂犬病是一种严重危害养猪业的急性病毒性传染病,疫苗免疫是其防控的有效手段。目前正式通过注册生产上市的产品有14个,涉及10个毒株,其效力评价方法及标准不统一。就猪伪狂犬病疫苗的效力评价方法进行比较研究,以期为进一步规范疫... 详细信息

猪伪狂犬病是一种严重危害养猪业的急性病毒性传染病,疫苗免疫是其防控的有效手段。目前正式通过注册生产上市的产品有14个,涉及10个毒株,其效力评价方法及标准不统一。就猪伪狂犬病疫苗的效力评价方法进行比较研究,以期为进一步规范疫苗效力评价方法、建立通用质量标准提供思路。

关键词：猪伪狂犬病疫苗免疫效力评价

分光光度法与活菌计数法测定副鸡禽杆菌菌液浓度的相关性研究

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中国兽药杂志 2024年第4期58卷 34-42页

作者：佟仁冬冯妍张一帜任小侠刘燕朱良全郝力力姚文生中国兽医药品监察所(农业农村部兽药评审中心) 北京100081 西南民族大学畜牧兽医学院成都610041

为建立一种快速测定副鸡禽杆菌菌液浓度的方法,本研究选取副鸡禽杆菌血清A、B和C型代表性菌株(CVCC254株、CVCC257株和CVCC256株),培养制备菌液,分别在450、540、600、650 nm波长测定其吸光度值(OD值),同时测定活菌计数值。回归分析两... 详细信息

为建立一种快速测定副鸡禽杆菌菌液浓度的方法,本研究选取副鸡禽杆菌血清A、B和C型代表性菌株(CVCC254株、CVCC257株和CVCC256株),培养制备菌液,分别在450、540、600、650 nm波长测定其吸光度值(OD值),同时测定活菌计数值。回归分析两组数据,获取回归方程及标准曲线,分析回归方程的测定系数(R^(2))和标准曲线的点线离散度,确定最适测定波长。再选取不同培养时间点(10、12、14、16、18、20 h)的菌液,在最适波长下测定其OD值并代入回归方程获取活菌数,同时采用活菌计数法获取活菌计数值,将两组数据使用SPSS 17.0软件进行统计分析,进一步验证分光光度法与活菌计数法测定菌液浓度的相关性。结果显示,3株菌液在600 nm波长测定的OD值与活菌计数值之间均呈最佳的线性关系,确定其菌液浓度最适测定波长均为600 nm,其回归方程分别为y=14.302x-0.1441(R^(2)=0.9962)、y=14.464x-0.2746(R^(2)=0.995)和y=14.681x-0.01326(R^(2)=0.9989),y为活菌计数值(×10^(8)CFU/mL),x为OD600值。3株培养至衰退期前的菌液在600 nm波长测定的OD值代入回归方程计算获得的活菌数值与其活菌计数值无显著差异(P>0.05)。研究结果表明,衰退期前副鸡禽杆菌菌液的分光光度法与活菌计数法具有良好的相关性。因此,该分光光度法可用于快速测定衰退期前副鸡禽杆菌菌液浓度。

关键词：副鸡禽杆菌菌液浓度分光光度法活菌计数法

血清1型马立克氏病病毒单克隆抗体的制备及其特异性鉴定

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中国兽药杂志 2024年第3期58卷 1-9页

作者：苏佳赵炜翟天舒白洪旭刘伟洁薛麒薛青红陈晓春中国兽医药品监察所(农业农村部兽药评审中心) 北京100081

为制备血清1型马立克氏病病毒(Marek’s disease virus,MDV)单克隆抗体,以超速离心浓缩的血清1型MDV CVI988/Rispens毒株免疫BALB/c小鼠,应用杂交瘤技术制备单克隆抗体。通过亚克隆、间接ELISA和间接免疫荧光(Indirect immunofluorescen... 详细信息

为制备血清1型马立克氏病病毒(Marek’s disease virus,MDV)单克隆抗体,以超速离心浓缩的血清1型MDV CVI988/Rispens毒株免疫BALB/c小鼠,应用杂交瘤技术制备单克隆抗体。通过亚克隆、间接ELISA和间接免疫荧光(Indirect immunofluorescence assay,IFA)筛选,获得3株分泌特异性抗血清1型MDV单克隆抗体的杂交瘤细胞系,分别命名为4D9、1C5和1F10,并对其进行特异性分析。间接ELISA结果显示,4D9、1C5和1F10制备的腹水ELISA效价分别达5.1×10^(4)、82×10^(5)、4.1×10^(5),可用于后续建立ELISA检测方法;IFA结果显示,4D9、1C5和1F10制备的腹水与不同血清1型MDV毒株具有良好的反应性,效价可分别达1∶12800、1∶25600和1∶12800,与血清3型MDV毒株和其他常见禽源病毒均没有交叉反应,特异性良好;亚型检测结果显示,4D9抗体为IgG2a/κ型,1C5抗体为IgG2b/κ型、1F10抗体为IgG1/κ型;应用1C5建立的IFA方法能检出至少5PFU CVI988/Rispens毒株感染,适用于血清1型MDV的检测。综上,制备的单克隆抗体可用于血清1型MDV的检测,为MDV致病机制研究及诊断试剂研发提供基础。

关键词：马立克氏病病毒单克隆抗体鉴定

蛋鸡兽用抗菌药使用减量化养殖现状与研究对策

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中国兽药杂志 2024年第2期58卷 81-88页

作者：赵琪孙红洋陈超超张璐李霆王亦琳张玉洁崔明全程敏郝利华张纯萍王鹤佳农业农村部动物源细菌耐药性监测重点实验室北京100081 中国兽医药品监察所(农业农村部兽药评审中心) 北京100081 中国农业大学动物医学院北京100193

不合理使用抗菌药严重威胁到蛋鸡养殖健康,引起鸡蛋中药物残留和细菌耐药性产生风险,影响鸡蛋食品安全和公共卫生安全。本文基于我国自2018年起开展的涵盖蛋鸡养殖的兽用抗菌药使用减量化行动,从蛋鸡养殖的减量化现状、问题、对策等方... 详细信息

不合理使用抗菌药严重威胁到蛋鸡养殖健康,引起鸡蛋中药物残留和细菌耐药性产生风险,影响鸡蛋食品安全和公共卫生安全。本文基于我国自2018年起开展的涵盖蛋鸡养殖的兽用抗菌药使用减量化行动,从蛋鸡养殖的减量化现状、问题、对策等方面进行综述,以期为推动蛋鸡兽用抗菌药使用减量化养殖提供参考。

关键词：蛋鸡养殖兽用抗菌药使用减量化对策研究

羊链球菌CVCC55001、CVCC55002株对昆明小鼠的致病性研究

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中国兽药杂志 2024年第2期58卷 18-27页

作者：张一帜任小侠辛凌翔朱良全孙淼李建张媛冯妍王秀丽刘元杰刘燕中国兽医药品监察所(农业农村部兽药评审中心) 北京100081

为研究羊链球菌CVCC55001、CVCC55002株对昆明系(KM)小鼠的致病性,使用羊链球菌CVCC55001、CVCC55002株分别对昆明小鼠进行毒力测定,观察临床和剖检症状,对死亡小鼠进行细菌分离培养,并对典型菌落进行形态、生化特性以及PCR鉴定。毒力... 详细信息

为研究羊链球菌CVCC55001、CVCC55002株对昆明系(KM)小鼠的致病性,使用羊链球菌CVCC55001、CVCC55002株分别对昆明小鼠进行毒力测定,观察临床和剖检症状,对死亡小鼠进行细菌分离培养,并对典型菌落进行形态、生化特性以及PCR鉴定。毒力测定结果显示CVCC55001对于昆明小鼠的最小致死剂量为9 CFU,CVCC55002对于昆明小鼠的最小致死剂量为11 CFU。感染羊链球菌死亡小鼠主要剖检症状为肝脏出血、肠道液化性坏死、脾脏肿大,病理变化为肝细胞出现大量坏死、肠道黏膜层广泛自溶、脾脏组织广泛坏死出血。本研究建立了羊链球菌CVCC55001、CVCC55002株的昆明小鼠攻毒感染模型,确定了最小致死剂量,对羊链球菌感染和致病性研究展开初步探索,为疫苗研究及评价提供了平台支撑。

关键词： CVCC55001 CVCC55002 细菌鉴定毒力测定小鼠模型

动物源细菌耐药性监测实验室菌株管理系统建设研究

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中国兽药杂志 2024年第1期58卷 23-28页

作者：程敏李霆崔明全赵琪张璐陈玉王鹤佳张纯萍中国兽医药品监察所北京100081 农业农村部动物源细菌耐药性监测重点实验室北京100081

动物源细菌耐药性监测实验室的菌株保藏管理是一项基础性工作,具有重要的生物安全和资源安全意义。为妥善保存监测实验室积累的细菌资源,研究建立了监测实验室菌株管理系统。系统由低温存储设备、专用冻存耗材、扫描器、信息管理软件组... 详细信息

动物源细菌耐药性监测实验室的菌株保藏管理是一项基础性工作,具有重要的生物安全和资源安全意义。为妥善保存监测实验室积累的细菌资源,研究建立了监测实验室菌株管理系统。系统由低温存储设备、专用冻存耗材、扫描器、信息管理软件组成,从菌株存储位置、信息数据和使用过程控制多角度对监测菌株进行安全管理,切实提高了实验室菌株管理和资源利用的效率,在确保菌株安全、信息安全和生物安全以及防范数据资源和生物资源流失等方面发挥了积极作用,将为耐药性菌种资源的储备、开发和利用提供重要支撑。

关键词：耐药性监测资源管理菌株保藏管理系统

一株鸡传染性贫血病毒对不同日龄SPF鸡的致病性研究

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中国兽药杂志 2024年第3期58卷 16-23页

作者：陈玲杨宵玥荣俊蒋桃珍中国兽医药品监察所(农业农村部兽药评审中心) 北京100081 长江大学湖北荆州434025

为评价鸡传染性贫血病毒AV1550株的致病性,取1日龄、7日龄和14日龄SPF鸡分别经胸部肌肉注射不同病毒含量的病毒液,同时设置正常对照,隔离饲养观察21 d。感染后14 d采血测定红细胞压积,21 d统计死亡率、体重变化以及胸腺、骨髓、法氏囊... 详细信息

为评价鸡传染性贫血病毒AV1550株的致病性,取1日龄、7日龄和14日龄SPF鸡分别经胸部肌肉注射不同病毒含量的病毒液,同时设置正常对照,隔离饲养观察21 d。感染后14 d采血测定红细胞压积,21 d统计死亡率、体重变化以及胸腺、骨髓、法氏囊病变情况并测定1日龄SPF鸡感染后不同组织中的病毒载量。结果表明,1日龄SPF鸡感染AV1550株后,表现出精神沉郁、增重减缓、贫血等明显的临床症状,死亡率为53.9%;死亡鸡或观察期结束时存活鸡剖检,可见胸腺萎缩,骨髓变成淡黄色;不同剂量感染后14 d,均能引起红细胞压积显著下降;21 d时,胸腺病毒载量最高,可达10^(6.7) copies/mg。7日龄SPF鸡感染后,出现增重减缓,高感染剂量(100000EID_(50))出现贫血,部分鸡出现胸腺萎缩和骨髓病变,但病变率低于30%。14日龄SPF鸡感染后,不引起明显临床症状。研究证实,CAV对SPF鸡的致病性具有明显的日龄依赖性,红细胞压积降低、骨髓病变、胸腺萎缩以及胸腺病毒载量测定可作为评价CAV致病的指标。

关键词：鸡传染性贫血病毒 SPF鸡致病性

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链球菌病类活疫苗活菌计数参考品的研制

生物工程学报 2021年第7期37卷 2554-2562页

作者：辛凌翔王秀丽吕文静臧莲娜朱冬梅罗颖张媛李晓宁刘博李俊平中国兽医药品监察所北京100081 天津瑞普生物技术股份有限公司空港分公司天津300300 华派生物工程集团有限公司四川简阳641400

研制链球菌病类活疫苗活菌计数参考品,可以更加科学地评价活菌计数结果的准确性和有效性。首先,制备了一批链球菌病类活疫苗活菌计数参考品,对其物理性状、纯粹性、真空度、剩余水分进行检验,并对其均一性、运输稳定性、热稳定性进行测... 详细信息

研制链球菌病类活疫苗活菌计数参考品,可以更加科学地评价活菌计数结果的准确性和有效性。首先,制备了一批链球菌病类活疫苗活菌计数参考品,对其物理性状、纯粹性、真空度、剩余水分进行检验,并对其均一性、运输稳定性、热稳定性进行测定,另组织3家单位通过协作标定的方式对参考品活菌数进行赋值,用协作标定法统计参考品在12个月内的保存期。参考品的性状检查、纯粹检验、真空度测定和剩余水分测定结果均符合《中国兽药典》的规定;均一性试验结果显示,参考品计数结果的变异系数小于10%,均一性良好;运输稳定性试验证明,参考品在夏季和冬季用泡沫盒加冰袋的方式运输3日内数值仍能保持稳定;加速热稳定性试验验证,参考品在–20℃条件下保存3个月、4℃条件下保存21 d内均可活菌数稳定;通过协作标定,统计出参考品活菌数的赋值范围为(8.5–12.1)×107CFU/支;保存期试验结果证实,参考品在–70℃以下保存一年内活菌数可维持稳定状态。链球菌病类活疫苗活菌计数参考品,不仅可以为链球菌病类活疫苗的活菌计数实验提供参照物,而且可以用于评价马丁琼脂培养基的质量,为兽用生物制品质量控制提供保障。

关键词：链球菌活菌计数参考品协作标定

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禽分枝杆菌对豚鼠的致病性分析

微生物学通报 2022年第12期49卷 5277-5286页

作者：辛凌翔徐磊靳继惠任小侠朱良全程君生李俊平王团结王楠中国兽医药品监察所北京100081

【背景】我国禽型结核菌素(avian tuberculin)的制造用菌株为CVCC 68201、CVCC 68202和CVCC 68203株,但目前仍未明确这3株菌的生物学特性及对豚鼠致病性的情况。【目的】探究禽分枝杆菌(Mycobacteriumavium)的生物学特性及对动物机体的... 详细信息

【背景】我国禽型结核菌素(avian tuberculin)的制造用菌株为CVCC 68201、CVCC 68202和CVCC 68203株,但目前仍未明确这3株菌的生物学特性及对豚鼠致病性的情况。【目的】探究禽分枝杆菌(Mycobacteriumavium)的生物学特性及对动物机体的致病性,为禽结核病和牛结核病的防控工作提供技术支撑。【方法】对3株禽分枝杆菌基因组进行鉴定分析及核酸相似度分析;用3株禽分枝杆菌分别感染豚鼠,观察感染后的临床症状、病理学变化、体重增重情况分析、皮内变态反应结果、脏器系数变化等,进而分析3株禽分枝杆菌对豚鼠的致病力。【结果】种型鉴定和进化分析结果表明,CVCC 68201、CVCC 68202和CVCC 68203均为禽分枝杆菌,基因组与Mycobacterium avium *** FDAARGOS_1608最为相近;在感染前期、中期、后期对3株禽分枝杆菌感染豚鼠的体重增重情况分析发现,感染禽分枝杆菌影响豚鼠增重,主要表现为生长迟缓,感染第5周时,CVCC 68201、CVCC 68202组豚鼠的平均体重明显轻于未感染组;皮内变态反应试验结果显示,感染CVCC68201组豚鼠的皮肤红肿面积明显大于其他2个感染组,CVCC68201可引起机体更为强烈的迟发型变态反应;3株禽分枝杆菌感染后,豚鼠脾脏和肺脏存在不同程度的肿大与出血,其中感染CVCC68201豚鼠的肺脏系数与未感染组相比差异显著(P性,可引发局部病变。本研究为禽分枝杆菌的制备和鉴定提供依据,也为牛结核病的鉴别诊断方法研究提供参考。

关键词：禽分枝杆菌禽结核菌素牛结核病豚鼠致病性