分光光度法与活菌计数法测定副鸡禽杆菌菌液浓度的相关性研究

作     者：佟仁冬 冯妍 张一帜 任小侠 刘燕 朱良全 郝力力 姚文生 TONG Ren-dong;FENG Yan;ZHANG Yi-zhi;REN Xiao-xia;LIU Yan;ZHU Liang-quan;HAO Li-li;YAO Wen-sheng

作者机构：中国兽医药品监察所(农业农村部兽药评审中心)北京100081 西南民族大学畜牧兽医学院成都610041 

出 版 物：《中国兽药杂志》 (Chinese Journal of Veterinary Drug)

年 卷 期：2024年第58卷第4期

页      面：34-42页

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家重点研发计划(2022YFF0711002) 中国兽医药品监察所-兽药行业公益性重点专项(GY202103,GY202104) 

主　　题：副鸡禽杆菌 菌液浓度 分光光度法 活菌计数法 

摘      要：为建立一种快速测定副鸡禽杆菌菌液浓度的方法,本研究选取副鸡禽杆菌血清A、B和C型代表性菌株(CVCC254株、CVCC257株和CVCC256株),培养制备菌液,分别在450、540、600、650 nm波长测定其吸光度值(OD值),同时测定活菌计数值。回归分析两组数据,获取回归方程及标准曲线,分析回归方程的测定系数(R^(2))和标准曲线的点线离散度,确定最适测定波长。再选取不同培养时间点(10、12、14、16、18、20 h)的菌液,在最适波长下测定其OD值并代入回归方程获取活菌数,同时采用活菌计数法获取活菌计数值,将两组数据使用SPSS 17.0软件进行统计分析,进一步验证分光光度法与活菌计数法测定菌液浓度的相关性。结果显示,3株菌液在600 nm波长测定的OD值与活菌计数值之间均呈最佳的线性关系,确定其菌液浓度最适测定波长均为600 nm,其回归方程分别为y=14.302x-0.1441(R^(2)=0.9962)、y=14.464x-0.2746(R^(2)=0.995)和y=14.681x-0.01326(R^(2)=0.9989),y为活菌计数值(×10^(8)CFU/mL),x为OD600值。3株培养至衰退期前的菌液在600 nm波长测定的OD值代入回归方程计算获得的活菌数值与其活菌计数值无显著差异(P0.05)。研究结果表明,衰退期前副鸡禽杆菌菌液的分光光度法与活菌计数法具有良好的相关性。因此,该分光光度法可用于快速测定衰退期前副鸡禽杆菌菌液浓度。