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Protective effects of Ginkgo biloba extract on 6-hydroxydopamine-induced apoptosis in PC12 cells

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Neural Regeneration Research 2011年第33期6卷 2565-2572页

作者： Jie Wang Yanbo Cheng Jiale Yin Qian LU xingshun xu Xiaoxing Yin Department of Pharmacy Xuzhou Medical College Xuzhou 221006 Jiangsu Province China Department of Neurology Affiliated Hospital of Xuzhou Medical College Xuzhou 221002 Jiangsu Province China

The present study analyzed the protective effects of Ginkgo biloba extract against 6-hydroxydopamine-induced PC12 cell apoptosis in a model of Parkinson＇s disease. The results showed that Ginkgo biloba extract had a potent cytoprotective action and inhibited apoptosis of PC12 cells induced by 6-hydroxydopamine. Ginkgo biloba extract decreased the ratio of Bax to Bcl-2 and markedly inhibited the activation of p53 and caspase-3. These experimental findings indicate that Ginkgo biloba extract may significantly reduce the effects of oxidative stress induced by 6-hydroxydopamine in PC12 cells and suppress cell apoptosis. The potential effects of Ginkgo biloba extract might be greater than those of levodopa in the treatment of Parkinson＇s disease.

关键词： Parkinson's disease Ginkgo biloba extract apoptosis oxidative stress PC12 cells neural regeneration

AHI1 participates in mood regulation by trancriptinally activating tyrosine hydroxylase expression through circadian clock pathway

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AHI1 participates in mood regulation by trancriptinally acti...

伴有同型半胱氨酸增高的老年癫痫患者维生素B补充治疗的临床价值

中国神经科学学会第十二届全国学术会议

作者： Dongkai Guo Shun Zhang xingshun xu Haigang Ren Guanghui Wang Laboratory of Molecular Neuropathology Jiangsu Key laboratory of Translational Research and Therapy for Neuropsychiatric disorders & Department of Pharmacology College of Pharmaceutical Sciences Soochow University Institute of Neuroscience Soochow University

Objective Abelson helper integration site 1（AHI1） gene is associated with several neuropsychiatric and brain developmental disorders such as schizophrenia, depression, autism and Joubert syndrome. AHI1 deficiency in mice leads to typical depressive behaviors. However, the mechanisms by which AHI1 regulates mental and behavioral processes are largely unknown. Methods Western blot and quantitative RT–PCR（q RT-PCR） were performed to examine the protein and m RNA levels. Immunohistochemistry and immunofluorescence was applied to examine the TH neuron activity and content in mice midbrains. Dual luciferease assay was used to examine the transcriptional activity. The interaction between AHI1 and RORα was identified by co-immunoprecipition assay. Depression-like behaviors were measured by tail suspension test（TST） and forced swim test（FST）. Results We found that down-regulation of tyrosine hydroxylase（TH） expression in Ahi1 knockout（KO） mouse midbrains is responsible for AHI1-deficiency-mediated mood and behavior disturbance. REV-ERBα, a TH transcriptional repressor, is up-regulated in Ahi1 KO mouse midbrains. Knockdown of Ahi1 decreases TH but increases REV-ERBα expressions, respectively. AHI1 interacts with RORα and represses RORα transcriptional activity to decrease BMAL1 expression, leading to a decrease of REV-ERBα, a downstream target of BMAL1. In BMAL1 deficient or REV-ERBα inhibitor SR8278-treated cells, the repression of TH expression by AHI1-deficiency is completely blocked. In addition, microinfusion of SR8278 into ventral midbrain（VMB） of Ahi1 KO mice dramatically improves their performance in depressive behaviors as well as increases TH expression in ventral tegmental area（VTA） and substantia nigra（SN）. Conclusion These findings provide a mechanistic explanation between AHI1-related behaviors and the circadian clock pathway, suggesting that the circadian clock pathway could be targeted as one of therapies in mood-related disorders.

关键词： AHI1 mood regulation circadian clock transcription

来源： cnki会议评论

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中华神经科杂志 2017年第4期50卷 250-254页

作者：邹蓉赵合庆徐兴顺苏州大学附属第二医院神经内科 215007

目的探讨维生素B补充治疗高同型半胱氨酸血症（HHcy）对老年癫痫患者血清同型半胱氨酸（Hcy）水平、癫痫发作频率以及抑郁症状、认知功能评分的影响。方法共纳入2013年1月至2015年7月就诊于苏州大学附属第二医院诊断明确的符合入组标准... 详细信息

目的探讨维生素B补充治疗高同型半胱氨酸血症（HHcy）对老年癫痫患者血清同型半胱氨酸（Hcy）水平、癫痫发作频率以及抑郁症状、认知功能评分的影响。方法共纳入2013年1月至2015年7月就诊于苏州大学附属第二医院诊断明确的符合入组标准的合并有HHcy的老年癫痫患者132例。接受维生素B治疗（方案为叶酸2.5 mg/d，维生素B6 10.0 mg/d，维生素B12 1.5 mg/d）者83例，设为治疗组；未接受维生素B治疗者49例，设为对照组。随访1年，监测血清Hcy、叶酸、维生素B12水平以及癫痫发作频率、MMSE和汉密尔顿抑郁量表（HDMA）评分等指标。根据Hcy浓度及是否接受叶酸和维生素B补充治疗，分为轻度HHcy组（Hcy 15.0～29.9 μmol/L）75例（其中治疗组46例，对照组29例）和中重度HHcy组（Hcy ≥30.0 μmol/L）57例（其中治疗组37例，对照组20例）。分析Hcy的影响因素，比较各治疗组与对照组血清Hcy、叶酸、维生素B12水平以及癫痫发作频率、MMSE和HDMA评分的差异。结果相关分析显示Hcy与年龄呈正相关（r＝0.269，P＝0.002），与叶酸水平呈负相关（r＝－0.222，P＝0.010），与吸烟（χ2＝7.363，P＝0.007）、高血压（χ2＝6.187，P＝0.013）、2种及以上抗癫痫药物联合治疗（χ2＝4.708，P＝0.030）有关。中重度HHcy组中治疗组与对照组比较，Hcy明显降低[（15.68±4.85）、（31.14±11.18） μmol/L，t＝5.890，P〈0.01]，叶酸[（9.08±3.33）、（5.87±2.91） ng/ml，t＝3.618，P＝0.001]及维生素B12[（556.39±276.76）、（419.71±164.53） pg/ml，t＝2.336，P＝0.023]、维生素B6[（22.94±5.59）、（21.09±4.87）μmol/L，t＝2.029，P＝0.047]明显增高，癫痫发作频率明显减少[（4.85±2.78）、（6.15±1.95）次/年，t＝2.028，P＝0.047]，MMSE评分明显增高[（26.89±1.94）、（25.75±2.20）分，t＝2.024，P＝0.048]，HDMA评分明显降低[（15.22±7.55）、（17.70±4.90）分，t＝2.862，P＝0.005]。轻度HHcy组中治疗组与对照组比较，癫痫发作频率、MMSE及HDMA评分差异无统计学意义（均P〉0.05）。结论老年癫痫患者作为HHcy的高发人群，定期监测Hcy是必要的。对合并中重度HHcy的老年癫痫患者给予维生素B补充治疗有利于控制癫痫发作，改善癫痫合并抑郁及认知功能障碍的症状。

关键词：癫痫半胱氨酸叶酸维生素B6 维生素B12

棕榈油对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

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徐州医学院学报 2010年第11期30卷 704-708页

作者：张庆涛耿德勤徐兴顺徐州医学院附属第三医院神经科江苏徐州221004 徐州医学院附属医院神经科江苏徐州221002

目的研究棕榈油(palm oil,PO)对大鼠局灶性脑缺血再灌注后梗死体积及细胞凋亡相关基因Bcl-2和Bax蛋白表达的影响,探讨棕榈油的脑缺血保护作用及机制。方法用线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤模型。将健康雄性SD大鼠随机分成4组:... 详细信息

目的研究棕榈油(palm oil,PO)对大鼠局灶性脑缺血再灌注后梗死体积及细胞凋亡相关基因Bcl-2和Bax蛋白表达的影响,探讨棕榈油的脑缺血保护作用及机制。方法用线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤模型。将健康雄性SD大鼠随机分成4组:空白对照组、假手术组、缺血再灌注组(IR)、PO处理组。空白对照组与假手术组每组12只大鼠,缺血再灌注组与PO处理组再分为再灌注2 h、6 h、12 h、24 h、72 h、7 d等6个亚组,每亚组12只大鼠。TTC染色观察脑缺血再灌注损伤后的损伤体积;SDS聚丙烯酰胺凝胶转移电泳(westernblotting,WB)检测Bcl-2、Bax的表达水平并观察PO的保护作用。结果①TTC染色:空白对照组与假手术组未见缺血失染区域,缺血再灌注组与棕榈油处理组缺血再灌注后2h均未见明显的缺血失染区,在缺血再灌注6 h、12 h、24 h、72 h、7 d各时间点,PO处理组梗死质量百分比与对应的IR组数值比较均有统计学差异(P<0.05),PO处理组较缺血再灌注组缺血梗死脑区质量百分比减少;②WB:缺血再灌注组及棕榈油组从再灌注6 h开始Bcl-2、Bax在半暗带区表达增强,随缺血时间延长,表达呈先升高后降低,Bcl-2于缺血12 h达高峰,Bax于缺血24 h达高峰。各时间点PO处理组与相应缺血组相比,Bcl-2的表达量显著增加(P<0.05),Bax的表达量显著减少(P<0.05)。结论①棕榈油可以减小大鼠局灶性脑缺血再灌注后的缺血受损范围;②棕榈油能够增加大鼠局灶性脑缺血再灌注后凋亡抑制基因Bcl-2表达作用,降低凋亡基因Bax表达作用,保护神经细胞。

关键词：大鼠脑缺血再灌注损伤棕榈油凋亡 Bcl-2 Bax

基于灰色聚类模型的航天发射产品物流方式优选

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物流科技 2023年第20期46卷 117-121页

作者：贺绍飞龙翔曹刚许兴顺酒泉卫星发射中心甘肃酒泉732750

针对航天发射产品物流运输方式选择问题,首先,基于航天发射任务实际构建了三级评估指标体系,并阐述了各指标含义;其次,给出了一种基于群决策层次分析法的指标赋权方法,包括构造判断矩阵、判断矩阵聚合、指标赋权和一致性检验;第三,给出... 详细信息

针对航天发射产品物流运输方式选择问题,首先,基于航天发射任务实际构建了三级评估指标体系,并阐述了各指标含义;其次,给出了一种基于群决策层次分析法的指标赋权方法,包括构造判断矩阵、判断矩阵聚合、指标赋权和一致性检验;第三,给出了一种基于灰色聚类模型的物流运输效能评估方法,包括确定评价灰类及其对应的白化权函数、构造评估矩阵和效能评估;最后,给出了具体算例,证明了相关模型和方法的可行性和有效性,可为航天发射产品物流运输方式选择提供参考和理论支撑。

关键词：航天发射物流方式层次分析法灰色聚类模型效能评估

RIP3在necroptosis信号通路中的胞内定位

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徐州医学院学报 2011年第5期31卷 297-299页

作者：陈巍巍张翠翠徐兴顺耿德勤徐州医学院2008级研究生江苏徐州221002 苏州大学第二附属医院神经内科江苏苏州215004 徐州医学院附属医院神经内科江苏徐州221002

目的研究necroptosis信号通路中受体相互作用蛋白3（RIP3）的胞内定位.方法 SD大鼠原代皮质神经元细胞培养12天,zVAD 20 μmol/L预处理30 min,TNFα 30 ng/ml处理不同时间,Western blot检测胞质、胞核中RIP3蛋白水平,结合免疫荧光观察R... 详细信息

目的研究necroptosis信号通路中受体相互作用蛋白3（RIP3）的胞内定位.方法 SD大鼠原代皮质神经元细胞培养12天,zVAD 20 μmol/L预处理30 min,TNFα 30 ng/ml处理不同时间,Western blot检测胞质、胞核中RIP3蛋白水平,结合免疫荧光观察RIP3的胞内定位.结果随着TNFα作用时间的延长,胞质、胞核中RIP3蛋白水平均呈上升趋势,胞质中RIP3蛋白水平在8 h达高峰,随后下降,胞核中RIP3蛋白水平在12 h达高峰,即在12 h出现核转位的高峰（P＜0.05）.结论正常细胞中RIP3存在于胞质,necroptosis时发生核转位.

关键词：受体相互作用蛋白3 necroptosis 原代皮质神经元

shRNA干扰蓝斑核去甲肾上腺素转运体(NET)表达对大鼠抑郁样行为的改善作用

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神经解剖学杂志 2017年第3期33卷 329-335页

作者：殷铭吕笑丽王碧馨李哲袁念惠李杜向东徐兴顺苏州大学附属广济医院苏州215008 苏州大学神经科学研究所苏州215123

目的:探讨利用慢病毒在蓝斑核(locus coeruleus,LC)敲除去甲肾上腺素转运体(norepinephrine transporter,NET)对大鼠抑郁样行为的影响。方法:构建NET-shRNA慢病毒载体及阴性对照序列,感染PC12细胞后通过Q-PCR和Western Blot方法测定NET ... 详细信息

目的:探讨利用慢病毒在蓝斑核(locus coeruleus,LC)敲除去甲肾上腺素转运体(norepinephrine transporter,NET)对大鼠抑郁样行为的影响。方法:构建NET-shRNA慢病毒载体及阴性对照序列,感染PC12细胞后通过Q-PCR和Western Blot方法测定NET mRNA和蛋白水平;建立慢性不可预见性温和应激大鼠抑郁症模型,双侧蓝斑核注射NET-shRNA;3周后采用强迫游泳实验、糖水偏好实验、旷场实验检测大鼠抑郁样行为;Western Blot检测大鼠NET水平;高效液相色谱法(HPLC)检测大鼠去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)水平。结果:Q-PCR和Western Blot检测结果显示:shRNA-1146沉默效率最高(P<0.01);与抑郁症模型组相比,蓝斑核注射NET-shRNA组大鼠强迫游泳不动时间减少、糖水偏好率增加、旷场实验得分增加(P<0.01),蓝斑核NET表达下降(P<0.01)、NE水平升高(P<0.05)。结论:NET-shRNA慢病毒注射蓝斑核能下调NET的表达,改善大鼠抑郁样行为,为抑郁症的基因治疗提供了实验依据。

关键词：抑郁症去甲肾上腺素转运体慢病毒载体蓝斑核基因治疗大鼠

HIF-1α在缺糖缺氧诱导的原代皮质神经元necroptosis中的表达

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徐州医学院学报 2011年第5期31卷 293-296页

作者：张翠翠陈巍巍徐兴顺耿德勤徐州医学院2008级研究生江苏徐州221002 苏州大学第二附属医院神经内科江苏苏州215004 徐州医学院附属医院神经内科江苏徐州221002

目的探讨低氧诱导因子-1α（hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α）是否参与缺糖缺氧诱导的原代皮质神经元necroptosis.方法原代皮质神经元培养14天,予caspase抑制剂Z-VAD-FMK（20 μmol/L）预保护30 min,缺糖缺氧2 h,再灌注0、2、6... 详细信息

目的探讨低氧诱导因子-1α（hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α）是否参与缺糖缺氧诱导的原代皮质神经元necroptosis.方法原代皮质神经元培养14天,予caspase抑制剂Z-VAD-FMK（20 μmol/L）预保护30 min,缺糖缺氧2 h,再灌注0、2、6、12、24、48 h,进行LDH测定;RT-PCR测HIF-1α RNA表达;Western blot检测总HIF-1α蛋白表达情况;分别提取细胞质和细胞核蛋白,Western blot分别检测胞质、胞核内HIF-1α蛋白表达情况.结果 caspase抑制剂Z-VAD-FMK预作用30 min、缺糖缺氧2 h、再灌注2 h后培养基中LDH增加（P＜0.05）,再灌注12 h达高峰;缺糖缺氧后HIF-1α RNA表达无变化（P＞0.05）;HIF-1α总蛋白表达增加（P＜0.05）,再灌注12 h达高峰;再灌注6 h时细胞质HIF-1α蛋白表达达高峰（P＜0.05）,随后降低;再灌注12 h时,细胞核HIF-1α蛋白表达达高峰（P＜0.05）,随后降低.结论 HIF-1α参与缺糖缺氧诱导的原代皮质神经元necroptosis.

关键词：低氧诱导因子-1α necroptosis 缺糖缺氧原代皮质神经元

Necrostatin-1对6-OHDA致PC12细胞氧化应激损伤的影响

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徐州医学院学报 2010年第8期30卷 491-494页

作者：周生奎王杰程言博徐兴顺耿德勤徐州医学院研究生学院 2007级江苏徐州221002 徐州医学院附属医院神经内科江苏徐州221002 徐州医学院药学院江苏徐州221004

目的研究Necrostatin-1(Nec-1)对帕金森病(Parkinson's disease,PD)细胞模型线粒体失能的影响,探讨Nec-1在帕金森病发病机制中的作用。方法经不同浓度Nec-1预处理的PC12细胞加入6-OHDA建立多巴胺能神经元损伤模型。用4-甲基偶氮唑蓝(MTT... 详细信息

目的研究Necrostatin-1(Nec-1)对帕金森病(Parkinson's disease,PD)细胞模型线粒体失能的影响,探讨Nec-1在帕金森病发病机制中的作用。方法经不同浓度Nec-1预处理的PC12细胞加入6-OHDA建立多巴胺能神经元损伤模型。用4-甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测PC12细胞活力,JC-1试剂盒检测线粒体膜电位,免疫印迹法检测Cathepsin B与Bcl-2蛋白表达。结果 100μmol/L的6-OHDA处理PC12细胞24h,细胞活力较正常对照组明显降低(P<0.05);与模型组比较,5、10、20、30、60μmol/L的Nec-1可明显减轻6-OHDA的毒性,90μmol/L的Nec-1可加重6-OHDA的毒性。Nec-1可阻抑线粒体膜电位下降。与正常对照组相比,模型组Cathepsin B表达明显增加而Bcl-2的表达显著降低(P<0.05)。与模型组相比,Nec-1与UTI可降低Cathepsin B表达并使Bcl-2的表达逐渐增加(P<0.05)。结论 Nec-1在一定的浓度范围内可提高PC12细胞存活力,通过稳定线粒体膜电位、抑制Cathepsin B的表达、上调Bcl-2的表达而发挥神经细胞保护作用。

关键词： Necrostatin-1 6-羟基多巴胺 PC12细胞帕金森病线粒体失能