shRNA干扰蓝斑核去甲肾上腺素转运体(NET)表达对大鼠抑郁样行为的改善作用

作     者：殷铭 吕笑丽 王碧馨 李哲 袁念 惠李 杜向东 徐兴顺 Yin Ming;Lv Xiaoli;Wang Bixin;Li Zhe;Yuan Nian;Hui Li;Du Xiangdong;Xu Xingshun

作者机构：苏州大学附属广济医院苏州215008 苏州大学神经科学研究所苏州215123 

出 版 物：《神经解剖学杂志》 (Chinese Journal of Neuroanatomy)

年 卷 期：2017年第33卷第3期

页      面：329-335页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100205[医学-精神病与精神卫生学] 10[医学] 

基　　金：苏州市科技计划项目(SYS201372) 江苏省自然科学基金面上项目(BK20151197) 苏州市重点病种诊疗专项(LCZX201316) 苏州市精神疾病临床医学中心(Szzx201509) 

主　　题：抑郁症 去甲肾上腺素转运体 慢病毒载体 蓝斑核 基因治疗 大鼠 

摘      要：目的:探讨利用慢病毒在蓝斑核(locus coeruleus,LC)敲除去甲肾上腺素转运体(norepinephrine transporter,NET)对大鼠抑郁样行为的影响。方法:构建NET-shRNA慢病毒载体及阴性对照序列,感染PC12细胞后通过Q-PCR和Western Blot方法测定NET mRNA和蛋白水平;建立慢性不可预见性温和应激大鼠抑郁症模型,双侧蓝斑核注射NET-shRNA;3周后采用强迫游泳实验、糖水偏好实验、旷场实验检测大鼠抑郁样行为;Western Blot检测大鼠NET水平;高效液相色谱法(HPLC)检测大鼠去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)水平。结果:Q-PCR和Western Blot检测结果显示:shRNA-1146沉默效率最高(P0.01);与抑郁症模型组相比,蓝斑核注射NET-shRNA组大鼠强迫游泳不动时间减少、糖水偏好率增加、旷场实验得分增加(P0.01),蓝斑核NET表达下降(P0.01)、NE水平升高(P0.05)。结论:NET-shRNA慢病毒注射蓝斑核能下调NET的表达,改善大鼠抑郁样行为,为抑郁症的基因治疗提供了实验依据。