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Echinatin inhibits tumor growth and synergizes with chemotherapeutic agents against human bladder cancer cells by activating p38 and suppressing Wnt/β-catenin pathways

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Genes & Diseases 2024年第2期11卷 1050-1065页

作者： Xiaoxuan Wang Lijuan luo Jingtao Xu Qiuping Lu Haichao Xia Yanran Huang Lulu Zhang Liping Xie Habu Jiwa Shiqiong Liang xiaoji luo Jinyong luo Key Laboratory of Diagnostic Medicine Designated By the Chinese Ministry of Education School of Laboratory MedicineChongqing Medical UniversityChongqing 400016China Department of Orthopedics The First Affiliated Hospital of Chongqing Medical UniversityChongqing 400042China

Bladder cancer (BC) is one of the most common malignant tumors in the urinary *** to the poor prognosis and high mortality rate of the disease,it is urgent to develop new drugs with high efficacy and low toxicity to treat *** (Ecn) is a bioactive natural flavonoid oflicorice that has attracted special attention for its promising anti-tumor ***,we explored the inhibitory effects of Echinatin on BC cells and probed the possible molecular *** found that Ecnin vitro inhibited the proliferation,migration,and invasion,arrested the cell cycle at the G2/M phase,and promoted apoptosis in BC ***,Ecn had no notable cytotoxicity towards human normal *** subsequently confirmed that Ecn restrained xenograft tumor growth and metastasis of BC cells in vivo .Mechanistically,Ecn activated the p38 signaling pathway but inactivated the Wnt/β-catenin signaling pathway,while over-expression of β-catenin and the p38 inhibitor both attenuated the inhibitory effects of Ecn on BC ***,Ecn combined with cisplatin (DDP) or gemcitabine (Gem) had synergistic inhibitory effects on BC *** summary,our results validate that Ecn inhibits the tumor growth of human BC cells via p38 and Wnt/β-catenin signaling *** meaningfully,our results suggest a potential strategy to enhance DDP- or Gem-induced inhibitory effects on BC cells by combining with Ecn.

关键词： Bladder cancer Combination chemotherapy Echinatin p38 Wnt/β-catenin

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Mitochondrial-Oriented Injectable Hydrogel Microspheres Maintain Homeostasis of Chondrocyte Metabolism to Promote Subcellular Therapy in Osteoarthritis

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Research 2024年第3期7卷 775-790页

作者： Li Chen Jianye Yang Zhengwei Cai Yanran Huang Pengcheng Xiao Hong Chen xiaoji luo Wei Huang Wenguo Cui Ning Hu Department of Orthopedics The First Affiliated Hospital of Chongqing Medical UniversityOrthopedic Laboratory of Chongqing Medical UniversityChongqing 400016China Department of Orthopaedics Shanghai Key Laboratory for Prevention and Treatment of Bone and Joint DiseasesShanghai Institute of Traumatology and OrthopaedicsRuijin HospitalShanghai Jiao Tong University School of Medicine197 Ruijin 2nd RoadShanghai 200025China.

Subcellular mitochondria serve as sensors for energy metabolism and redox balance, and the dynamic regulation of functional and dysfunctional mitochondria plays a crucial role in determining cells' fate. Selective removal of dysfunctional mitochondria at the subcellular level can provide chondrocytes with energy to prevent degeneration, thereby treating osteoarthritis. Herein, to achieve an ideal subcellular therapy, cartilage affinity peptide (WYRGRL)-decorated liposomes loaded with mitophagy activator (urolithin A) were integrated into hyaluronic acid methacrylate hydrogel microspheres through microfluidic technology, named HM@WY-Lip/UA, that could efficiently target chondrocytes and selectively remove subcellular dysfunctional mitochondria. As a result, this system demonstrated an advantage in mitochondria function restoration, reactive oxygen species scavenging, cell survival rescue, and chondrocyte homeostasis maintenance through increasing mitophagy. In a rat post-traumatic osteoarthritis model, the intra-articular injection of HM@WY-Lip/UA ameliorated cartilage matrix degradation, osteophyte formation, and subchondral bone sclerosis at 8 weeks. Overall, this study indicated that HM@WY-Lip/UA provided a protective effect on cartilage degeneration in an efficacious and clinically relevant manner, and a mitochondrial-oriented strategy has great potential in the subcellular therapy of osteoarthritis.

关键词： spheres remove thereby

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Has-miR-204-5p介导椎间盘退变和相关疼痛症状的发生:来自孟德尔随机化和生物信息学的证据

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重庆医科大学学报 2024年第8期49卷 1033-1038页

作者：李凝道赵润涵张骏唐大刚罗小辑重庆医科大学附属第一医院骨科重庆400016 重庆市中医院骨科重庆400020

目的:挖掘椎间盘退变(intervertebral disc degeneration,IDD)及其相关疼痛症状的新MicroRNA生物标志物并探索相关分子机制。方法:从已发表的文献和全基因组关联研究(genome-wide association studies,GWAS)Catlog数据库中获取MicroRNA、背部疼痛和坐骨神经痛的GWAS数据,从基因表达综合数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)数据库中下载IDD相关的MicroRNA和mRNA表达数据。利用孟德尔随机化和生物信息学分析挖掘关键MicroRNA,并基于GeneMANIA数据库探索其靶基因的生物学功能。结果:孟德尔随机化分析结果表明,has-miR-204-5p与背部疼痛(GCST90018797,OR=0.9761)和坐骨神经痛(GCST90044614,OR=0.8957)均具有明显的因果效应。同时,生物信息学分析结果显示,has-miR-204-5p在IDD组织中明显低表达,其3个靶基因Ⅲ型胶原蛋白α1链(collagen typeⅢalpha 1 chain,COL3A1),核糖体蛋白侧柄亚基P1(ribosomal protein lateral stalk subunit P1,RPLP1)和转录因子4(transcription factor 4,TCF4)在IDD组织中异常高表达。此外,生物学功能富集分析揭示,3个靶基因主要富集在胶原蛋白、核糖体和Wnt信号通路等与IDD密切相关的生物学功能上。结论:HasmiR-204-5p是一种可靠的IDD生物标志物,在IDD及其相关疼痛症状中发挥重要作用。

关键词：椎间盘退变孟德尔随机化生物信息学 has-miR-204-5p

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Alantolactone inhibits proliferation,metastasis and promotes apoptosis of human osteosarcoma cells by suppressing Wnt/β-catenin and MAPKs signaling pathways

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Genes & Diseases 2022年第2期9卷 466-478页

作者： Chunmei Yang Lulu Zhang Huakun Huang Xiaohui Yuan Ping Zhang Caihong Ye Mengqi Wei Yanran Huang xiaoji luo Jinyong luo School of Laboratory Medicine Chongqing Medical UniversityChongqing 400016PR China Department of Orthopedics The First Affiliated Hospital of Chongqing Medical UniversityChongqing 400042PR China

Although there are many therapeutic strategies such as surgery and chemotherapy,the prognosis of osteosarcoma(OS)is still far from being *** is urgent to develop more effective,tolerable and safe drugs for the treatment of *** the present study,we investigated the anti-OS activity of Alantolactone(ALT),a natural eucalyptone sesquiterpene lactone mainly exists in Inula helenium,and probed the possible mechanism *** demonstrated that ALT significantly inhibited cell proliferation of various human OS cell lines while had relative lower cytotoxicity against normal ***,we validated that ALT reduced migration,decreased invasion possibly through reversing epithelial mesenchymal transition(EMT)process and suppressing Matrix metalloproteinases(MMPs).Moreover,we confirmed that ALT promoted apoptosis and arrested cell cycle at G2/M phase of human OS cells in *** addition,we confirmed that ALT restrained tumor growth and metastasis of OS 143 cells in a xenograft model in ***,ALT inhibited the activity of Wnt/β-catenin and p38,ERK1/2 and JNK Mitogen Activated Protein Kinases(MAPKs)signal ***,the combination of ALT and Wnt/β-catenin inhibitor,as well as the combination of ALT and MAPKs inhibitors resulted in a synergistically effect on inhibiting the proliferation,migration and invasion of OS ***,our results validate the ALT may inhibit proliferation,metastasis and promotes apoptosis of human OS cells possibly through suppressing Wnt/β-Catenin and MAPKs signaling pathways.

关键词： Alantolactone ERK1/2 JNK Mitogen activated protein kinases Osteosarcoma p38 Wnt/β-catenin

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Corrigendum to ‘Alantolactone inhibits proliferation, metastasis and promotes apoptosis of human osteosarcoma cells by suppressing Wnt/β-catenin and MAPKs signaling pathways’ [Genes & Diseases 9 (2022) 466–478]

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Genes & Diseases 2023年第2期10卷 620-623页

作者： Chunmei Yang Lulu Zhang Huakun Huang Xiaohui Yuan Ping Zhang Caihong Ye Mengqi Wei Yanran Huang xiaoji luo Jinyong luo School of Laboratory Medicine Chongqing Medical UniversityChongqing 400016China Department of Orthopedics The First Affiliated Hospital of Chongqing Medical UniversityChongqing 400042China

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Shear-responsive boundary-lubricated hydrogels attenuate osteoarthritis

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Bioactive Materials 2022年第10期7卷 472-484页

作者： Yiting Lei Xingkuan Wang Junyi Liao Jieliang Shen Yuling Li Zhengwei Cai Ning Hu xiaoji luo Wenguo Cui Wei Huang Department of Orthopedics The First Affiliated Hospital of Chongqing Medical UniversityOrthopedic Laboratory of Chongqing Medical UniversityNo.1 Youyi RoadYuzhong DistrictChongqing400016PR China Department of Orthopaedics Affiliated Hospital of North Sichuan Medical CollegeNo.1 the South of Maoyuan RoadNanchongSichuan637000PR China Department of Orthopaedics Shanghai Key Laboratory for Prevention and Treatment of Bone and Joint DiseasesShanghai Institute of Traumatology and OrthopaedicsRuijin HospitalShanghai Jiao Tong University School of Medicine197 Ruijin 2nd RoadShanghai200025PR China

Lipid-based boundary layers formed on liposome-containing hydrogels can facilitate ***,these boundary layers can be damaged by shear,resulting in decreased ***,a shear-responsive boundary-lubricated drug-loaded hydrogel is created by incorporating celecoxib(CLX)-loaded liposomes within dynamic covalent bond-based hyaluronic acid(HA)hydrogels(CLX@Lipo@HA-gel).The dynamic cross-linked network enables the hydrogel to get restructured in response to shear,and the HA matrix allows the accumulation of internal liposome microreservoirs on the sliding surfaces,which results in the formation of boundary layers to provide stable ***,hydration shells formed surrounding the hydrogel can retard the degradation process,thus helping in sustaining ***,in vitro and in vivo experiments found that CLX@Lipo@HA-gels can maintain anabolic-catabolic balance,alleviate cartilage wear,and attenuate osteoarthritis progression by delivering CLX and shear-responsive boundary ***,CLX@Lipo@HA-gels can serve as shear-responsive boundary lubricants and drug-delivery vehicles to alleviate friction-related diseases like osteoarthritis.

关键词： Boundary lubrication Injectable hydrogels Shear-responsive Liposomes Osteoarthritis

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Hey1表达对BMP-9诱导下C3H10T1/2细胞的成骨分化及增殖影响

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中国修复重建外科杂志 2016年第3期30卷 279-285页

作者：王淼王南权正学罗小辑重庆医科大学附属第一医院骨科重庆400016

目的探讨Notch信号通路重要靶点Hey1表达水平改变对BMP-9诱导C3H10T1/2细胞成骨分化与增殖的影响。方法构建过表达Hey1慢病毒LV-Hey1、抑制Hey1表达慢病毒LV-sh Hey1,分别感染C3H10T1/2细胞干预Hey1表达水平,以LV-Blank(空质粒)感染C3H1... 详细信息

目的探讨Notch信号通路重要靶点Hey1表达水平改变对BMP-9诱导C3H10T1/2细胞成骨分化与增殖的影响。方法构建过表达Hey1慢病毒LV-Hey1、抑制Hey1表达慢病毒LV-sh Hey1,分别感染C3H10T1/2细胞干预Hey1表达水平,以LV-Blank(空质粒)感染C3H10T1/2细胞作为对照;以荧光显微镜对慢病毒感染效果、实时荧光定量PCR以及Western blot对Hey1表达水平进行验证,筛选不同Hey1表达水平的稳定细胞系。用含BMP-9的条件培养基诱导不同Hey1表达水平的C3H10T1/2细胞(分别为BMP-9+C3H10T1/2组、BMP-9+C3H10T1/2-Hey1组、BMP-9+C3H10T1/2-sh Hey1组),以正常培养基培养的细胞作为对照(C3H10T1/2组、C3H10T1/2-Blank组)。培养后48 h,实时荧光定量PCR及Western blot测定成骨分化相关转录因子Runx2、骨桥蛋白、骨钙素m RNA及蛋白表达水平;4、5、6、7 d行MTT检测及4、5、10 d行流式细胞仪测定细胞增殖能力;4、7 d时ELISA测定细胞ALP表达水平并行染色观察。结果成功建立不同Hey1表达水平稳定细胞系。成骨方面,各时间点与BMP-9+C3H10T1/2组比较,BMP-9诱导下Hey1过表达的BMP-9+C3H10T1/2-Hey1组细胞Runx2、骨桥蛋白、骨钙素m RNA及蛋白表达水平以及成骨分化标志物ALP含量均显著增加(P<0.05),抑制Hey1表达的BMP-9+C3H10T1/2-sh Hey1组细胞以上指标均显著降低(P<0.05)。对细胞增殖活力影响方面,与BMP-9+C3H10T1/2组比较,BMP-9+C3H10T1/2-Hey1组MTT检测吸光度(A)值及细胞G2+S期百分比均提高(P<0.05);而抑制Hey1表达BMP-9+C3H10T1/2-sh Hey1组以上指标均降低(P<0.05)。结论 Hey1表达是BMP-9诱导C3H10T1/2细胞成骨分化重要环节,同时影响细胞早期增殖。

关键词： Hey1 BMP-9 C3H10T1/2细胞成骨分化细胞增殖

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过表达NICD通过下调基因JunB的表达抑制BMP9诱导间充质干细胞C3H10T1/2成骨分化

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重庆医科大学学报 2018年第10期43卷 1286-1291页

作者：王南谭涛林端阳罗小辑重庆医科大学第一临床学院重庆400016 重庆医科大学附属第一医院骨科重庆400016

目的:研究Notch信号通路在骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)诱导小鼠间充质干细胞C3H10T1/2成骨分化过程中的作用及其机制。方法:将细胞分为5组:空白组(Blank,n=3),BMP9处理组(BMP9,n=3),空白质粒对照组(BMP9+Control,n=3),过表达Notch1胞内段质粒(Notch1 intracellular domain,NICD)处理组(BMP9+NICD,n=3),DAPT处理组(BMP+DAPT,n=3)。通过碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色和钙盐染色分别验证过表达NICD对成骨分化早晚期情况的影响。进一步采用定量逆转录PCR(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-RCR)和Western blot检测基因NICD、Hey1及成骨相关基因Smad-1/5/8、p-Smad-1/5/8、OPN、Runx2、OCN、JunB的表达。结果:早期ALP活性及染色结果显示,NICD组较Control组能显著抑制C3H10T1/2细胞成骨分化过程中ALP的形成[5 d:(33 167.66±2 018.45)vs.(146 451.00±14 889.67),P=0.000;7 d:(58 981.33±4 724.70)vs.(89 588.66±5 928.32),P=0.000],γ-分泌酶抑制剂(N-[N-(3,5-difluorophenacetyl)-L-alanyl]-S-phenylglycine t-butyl ester,DAPT)完全抑制Notch通路时得到相同的结果[5 d:(44 812.66±4 174.94)vs.(146 451.00±14 889.67),P=0.000;7 d:(64 622.93±4 724.70)vs.(89 588.66±5 928.32),P=0.000]。茜素红S染色结果显示,NCID抑制钙盐结节的形成,而DAPT阻断Notch通路明显促进钙盐结节形成。qRT-PCR结果表明,NCID组中NICD及靶基因Hey1的表达较Control组明显增加[(3.90±0.02)vs.(0.35±0.01),P=0.000;(19.79±0.01)vs.(11.80±0.02),P=0.000],Western blot得到相同结果[(1.32±0.01)vs.(0.19±0.01),P=0.000],且NICD明显抑制成骨分化相关基因JunB、Runx2、OCN、OPN等的表达[(0.10±0.01)vs.(0.53±0.01),P=0.000;(0.18±0.01)vs.(0.30±0.02),P=0.000;(0.36±0.01)vs.(0.62±0.02),P=0.000;(0.07±0.01)vs.(0.48±0.01),P=0.000],而转录因子Smad-1/5/8、p-Smad-1/5/8的表达不受影响[(0.74±0.02)vs.(0.73±0.03),P=0.000;(0.63±0.01)vs.(0.58±0.04),P=0.000],DAPT阻断Notch通路后上述相关基因的表达明显增加。结论:本实验结果首次证明,NICD激活Notch通路对BMP9诱导的C3H10T1/2细胞成骨分化的抑制作用可能是通过抑制JunB基因发挥作用,而非调控BMP9/Smad(bonemorphogenetic protein 9/drosophila mothers against decapentaplegic)信号通路。

关键词：骨形态发生蛋白9 Notch信号通路间充质干细胞成骨分化

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基因修饰BMSCs抑制增生性瘢痕的实验研究

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中国修复重建外科杂志 2008年第2期22卷 212-216页

作者：邱林金先庆 Paul A Kingston 罗小辑丁幸坡重庆医科大学儿童医院整形外科重庆400014 重庆医科大学儿童医院普外科重庆400014 英国曼彻斯特大学心血管中心重庆医科大学儿科学院外科研究室

目的通过将转染TGF-β3c2s2基因的兔BMSCs移植于兔耳瘢痕模型,观察转基因BMSCs对创面愈合后增生性瘢痕形成的影响。方法成年健康日本大耳白兔20只,体重1.7～2.5kg,雌雄不拘。取第3代兔BMSCs,经Ad-TGF-β3c2s2在感染复数150下转染,培养孵... 详细信息

目的通过将转染TGF-β3c2s2基因的兔BMSCs移植于兔耳瘢痕模型,观察转基因BMSCs对创面愈合后增生性瘢痕形成的影响。方法成年健康日本大耳白兔20只,体重1.7～2.5kg,雌雄不拘。取第3代兔BMSCs,经Ad-TGF-β3c2s2在感染复数150下转染,培养孵育24h后,调整细胞浓度为1×105/mL备用。将纯化、浓缩的Ad-TGF-β3c2s2颗粒,DMEM/F12(不含FBS)稀释为1×108pfu/mL备用。于20只日本大耳白兔双侧兔耳分别制备两个2cm×2cm大小的腹侧全层皮肤、软骨缺损创面。将每只兔的4个创面随机分为空白对照组(A组)、Ad-TGF-β3c2s2组(B组)、BMSCs组(C组)和BMSCs/Ad-TGF-β3c2s2组(D组),并以自身正常皮肤作为正常对照(E组)。将备好的细胞及病毒液分别按创面分组进行局部移植。于术后21、45、90d行大体观察、瘢痕硬度和厚度测定、HE染色和免疫组织化学检测。结果大体观察:A、B、C组上皮化后创面均逐渐形成不同程度的瘢痕,伤后45d瘢痕增生程度达高峰,明显高出皮肤表面,持续至90d,D组在观察期内均无明显高出周围皮肤的瘢痕形成。术后45d和90d,A、B、C组瘢痕厚度和硬度明显高于D组,且差异均有统计学意义(P<0.01),而B组低于A、C组,差异有统计学意义(P<0.01);D组愈合后创面厚度和硬度与正常皮肤接近。HE染色观察:A、C组伤后45d可见浅层组织结构排列紊乱,胶原纤维粗大,呈交错网织状排列;B组和D组结构与正常皮肤接近,但较E组胶原排列致密,表皮较A、C组薄;90d各组结构与45d相似。BrdU免疫组织化学观察,伤后21、45d,C、D组均能见到散在分布、胞核染色阳性的棕色细胞,A、B、E组均为阴性。结论创面局部移植人TGF-β3c2s2基因修饰的BMSCs,具有抑制创面愈合后增生性瘢痕的作用。

关键词： TGF-β3c2s2基因 BMSCs 细胞移植增生性瘢痕创面愈合兔

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前交叉韧带解剖研究进展及其对韧带重建技术的影响

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中国修复重建外科杂志 2018年第3期32卷 377-381页

作者：李飞龙罗小辑梁熙黄伟胡宁重庆医科大学附属第一医院骨科重庆400042

目的对前交叉韧带(anterior cruciate ligament,ACL)解剖研究进展以及对于ACL重建技术的影响进行总结。方法广泛查阅国内外有关ACL解剖和重建的研究文献,并进行总结分析。结果近年ACL的解剖和形态有了新认识,提出的扁平的、如带状(Ribbo... 详细信息

目的对前交叉韧带(anterior cruciate ligament,ACL)解剖研究进展以及对于ACL重建技术的影响进行总结。方法广泛查阅国内外有关ACL解剖和重建的研究文献,并进行总结分析。结果近年ACL的解剖和形态有了新认识,提出的扁平的、如带状(Ribbon-like)的ACL解剖理论逐渐被关注。目前研究认为相对于既往重建方式,"Ribbon-like"ACL解剖重建在理论上具有优越性,更符合解剖重建、等长重建。结论 "Ribbon-like"ACL解剖理论是对ACL解剖结构的不同认识,但存在争议,且缺少临床应用,需要进一步研究。

关键词：前交叉韧带韧带重建解剖研究

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