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中间体2-氯-4-氟-5-硝基苯甲酸的新合成方法

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世界农药 2024年第6期46卷 34-37,42页

作者：王勃杜晓华浙江工业大学化学工程学院杭州310014

探索中间体2-氯-4-氟-5-硝基苯甲酸的新合成方法。从4-氟苯胺出发,经过盐酸-双氧水体系氯化、重氮化、氰化、硝化-水解串联反应共4步得到2-氯-4-氟-5-硝基苯甲酸,纯度96.2%,总收率59.2%。新合成方法原材料易得、条件温和,具有工业化应... 详细信息

探索中间体2-氯-4-氟-5-硝基苯甲酸的新合成方法。从4-氟苯胺出发,经过盐酸-双氧水体系氯化、重氮化、氰化、硝化-水解串联反应共4步得到2-氯-4-氟-5-硝基苯甲酸,纯度96.2%,总收率59.2%。新合成方法原材料易得、条件温和,具有工业化应用前景。

关键词： 4-氟苯胺 2-氯-4-氟-5-硝基苯甲酸苯嘧磺草胺新合成方法

牦牛小脑不同区域神经营养素-4及其受体的表达特征与定位研究

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核农学报 2024年第5期38卷 852-860页

作者：刘珊珊杜晓华刘霞吴亚娟郑丽平甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 甘肃农业大学生命科学技术学院甘肃兰州730070

神经营养素-4(NT-4)及其神经营养性酪氨酸激酶受体2(NTRK2)在小脑神经元存活、生长以及功能方面发挥着重要作用。为探讨NT-4和NTRK2在牦牛高原低氧适应中的作用,本研究以高原牦牛(Bos grunniens)和平原黄牛(Bos taurus)小脑为研究对象,... 详细信息

神经营养素-4(NT-4)及其神经营养性酪氨酸激酶受体2(NTRK2)在小脑神经元存活、生长以及功能方面发挥着重要作用。为探讨NT-4和NTRK2在牦牛高原低氧适应中的作用,本研究以高原牦牛(Bos grunniens)和平原黄牛(Bos taurus)小脑为研究对象,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白免疫印迹技术(WB)、苏木精-伊红染色(HE)和免疫组织化学(IHC)对NT-4和NTRK2在牦牛与黄牛小脑不同区域中的表达分布进行分析。qRT-PCR和WB结果表明,NT-4基因和蛋白在牦牛小脑半球皮质中表达量最高,显著高于其他组织(P<0.05);NTRK2基因和蛋白在牦牛小脑蚓部皮质中表达量最高,显著高于其他组织(P<0.05)。与黄牛相比,牦牛NT-4蛋白在小脑各区域中的表达均显著高于黄牛(P<0.05);牦牛NTRK2蛋白在蚓部髓质和小脑半球髓质中的表达量低于黄牛或无差异,其余区域均显著高于黄牛(P<0.05)。IHC结果显示,NT-4和NTRK2蛋白阳性表达特征基本一致,皮质区主要分布于分子层的篮状细胞、浦肯野细胞层以及颗粒细胞层,而髓质区则散在分布于神经胶质细胞以及神经纤维中。由上述结果可知,NT-4和NTRK2在小脑各区域的表达差异可能与其参与脑组织生理功能以及适应高原低氧环境有关。在低氧环境下,NT-4和NTRK2通过上调激活相关通路以发挥内源性神经保护作用,进而保护脑组织免受低氧损伤。本研究结果可为探究牦牛脑组织低氧适应机制提供基础。

关键词：牦牛神经营养素-4 神经营养性酪氨酸激酶受体2 小脑

神经生长因子及其受体在高原牦牛与平原黄牛端脑中的比较分析

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核农学报 2024年第2期38卷 265-273页

作者：吴亚娟杜晓华刘霞郑丽平刘珊珊甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 甘肃农业大学生命科学技术学院甘肃兰州730070

为探究神经生长因子(NGF)及其高亲和力受体酪氨酸蛋白激酶A(TrkA)在高原牦牛(Bos grunniens)与平原黄牛(Bos taurus)端脑组织中表达与分布的差异,本研究采集不同海拔地区的成年牦牛与黄牛端脑不同组织(n=5),利用免疫组织化学技术(IHC)... 详细信息

为探究神经生长因子(NGF)及其高亲和力受体酪氨酸蛋白激酶A(TrkA)在高原牦牛(Bos grunniens)与平原黄牛(Bos taurus)端脑组织中表达与分布的差异,本研究采集不同海拔地区的成年牦牛与黄牛端脑不同组织(n=5),利用免疫组织化学技术(IHC)、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)以及蛋白免疫印迹技术(WB)对NGF和TrkA在牦牛与黄牛端脑各区中的定位特征及表达水平进行比较。IHC结果显示,两种因子在牦牛与黄牛端脑各区中的分布与定位特征基本一致,主要在神经元胞质、神经胶质细胞及血管内壁中表达,其蛋白免疫阳性反应强度整体表现为牦牛高于黄牛。qRT-PCR结果显示,牦牛的NGF基因表达量在额叶皮质、大脑白质及枕叶皮质中低于黄牛或无差异,在其余区域中显著高于黄牛(P<0.05);TrkA基因表达量仅在大脑白质中与黄牛无显著差异,其余区域中显著高于黄牛(P<0.05)。WB结果显示,牦牛的NGF蛋白表达量仅在大脑白质中低于黄牛,其余区域均显著高于黄牛(P<0.05);牦牛的TrkA蛋白表达量在额叶皮质、大脑白质及枕叶皮质中低于黄牛或无差异,其余区域中显著高于黄牛(P<0.05)。综上,两种因子在牦牛端脑部分组织表达上调可能与低氧刺激有关,推测二者在低氧条件下协同发挥内源性神经保护作用,以维持动物机体正常的生理活动。本研究结果为进一步探究NGF和TrkA在牦牛低氧适应性方面发挥作用提供了理论依据。

关键词：神经生长因子酪氨酸蛋白激酶A 牦牛端脑

猪δ冠状病毒与猪流行性腹泻病毒的受体结合区融合表达及免疫原性分析

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生物工程学报 2024年第7期40卷 2150-2161页

作者：仝力心芦延珍于瑞明张莉萍刘霞王永录杜晓华刘新生甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室甘肃兰州730046

为了研发出一种可同时预防猪德尔塔冠状病毒(porcine deltacoronavirus,PDCo V)和猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)两种病毒病的有效二联亚单位疫苗,本研究将PDCo V的受体结合域(receptor binding domain,RBD)与PEDV的RBD基因进行串联,构建至真核表达载体p CDNA3.1(+)中,利用哺乳动物细胞Expi CHO^(TM)表达系统表达纯化出PDCo V-RBD-PEDV-RBD(简写为pd RBD-pe RBD)融合蛋白,以3种不同剂量(10、20和30μg)免疫小鼠,利用ELISA和流式细胞术评估该融合蛋白诱导的体液免疫反应和细胞免疫反应,利用病毒微量中和试验测定免疫小鼠血清对PDCo V或PEDV的中和效价。结果表明,3个不同剂量组在加强免疫后均诱发了高水平的Ig G抗体,不同剂量组间抗体水平没有明显差异,说明10μg的免疫剂量即可达到较好免疫效果。流式细胞术检测结果显示,免疫组的CD3^(+)CD4^(+)T细胞比例显著升高,CD3^(+)CD8^(+)T细胞比例相对较低,这符合亚单位疫苗主导机体产生体液免疫反应的预期。同时,对血清中细胞因子白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)和干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)的含量进行了检测,结果表明该融合蛋白诱导了良好的体液免疫效果,同时还产生了一定的细胞免疫应答。中和试验结果表明,10μg免疫剂量所诱导的抗体即可在体外有效中和PDCo V和PEDV两种病毒,效价分别为1:179.25和1:141.21。上述研究结果表明,pd RBD-pe RBD融合蛋白10μg免疫剂量即可诱导高水平的体液免疫反应,诱导的抗体可同时中和PDCo V和PEDV两种病毒,说明pd RBD-pe RBD融合蛋白有希望成为一种能同时预防PDCo V和PEDV的有效二联亚单位疫苗。

关键词：猪德尔塔冠状病毒猪流行性腹泻病毒受体结构域亚单位疫苗

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双层探测器光谱CT定量参数评估局部进展期直肠癌新辅助放化疗治疗反应的价值

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中华放射学杂志 2024年第2期58卷 194-200页

作者：袁文静黄芷晴贾子琪张汉良卢健烨杜晓华温志波刘岘陈维翠广东省中医院广州中医药大学第二附属医院放射科广州510120 广东省中医院广州中医药大学第二附属医院病理科广州510120 南方医科大学珠江医院影像科广州510145

目的探讨双层探测器光谱CT定量参数评估局部进展期直肠癌(LARC)患者对新辅助放化疗(nCRT)治疗反应的价值。方法本研究为横断面研究, 回顾性收集2021年5月至2023年3月广东省中医院接受完整nCRT且经病理证实为直肠腺癌的52例LARC患者, 于n... 详细信息

目的探讨双层探测器光谱CT定量参数评估局部进展期直肠癌(LARC)患者对新辅助放化疗(nCRT)治疗反应的价值。方法本研究为横断面研究, 回顾性收集2021年5月至2023年3月广东省中医院接受完整nCRT且经病理证实为直肠腺癌的52例LARC患者, 于nCRT前、后分别行光谱CT平扫、动脉期(AP)及静脉期(VP)扫描。根据肿瘤退缩分级标准, 将患者分为反应良好组(n=20)及反应不良组(n=32)。测量nCRT前、后肿瘤平扫图像的有效原子序数(Zeff)、AP和VP碘浓度(IC)和40、100 keV虚拟单能量图的CT值, 计算nCRT前、后AP和VP标准化碘浓度值(NIC)、光谱曲线斜率(λHU)及上述参数治疗前后的变化率。采用独立样本t检验或Mann-WhitneyU检验比较2组患者各定量参数的差异, 采用受试者操作特征(ROC)曲线计算各参数评估肿瘤nCRT后反应的效能。选择曲线下面积(AUC)>0.75的参数采用二元logistic回归建立联合参数, 并评价其效能。结果反应良好组与反应不良组患者间nCRT前NICAP、λHUVP, nCRT后NICVP、λHUVP以及Zeff、NICAP、NICVP、λHUAP变化率差异有统计学意义(P均0.05)。ROC曲线结果显示, 上述8个参数评估肿瘤nCRT后反应的AUC分别为0.702、0.655、0.695、0.769、0.738、0.807、0.791和0.677。将AUC>0.75的3个参数(nCRT后λHUVP、NICAP变化率、NICVP变化率)组成联合参数, 其AUC值为0.869, 灵敏度为80.0%, 特异度为84.4%。结论光谱CT定量参数在评估LARC患者对nCRT治疗反应具有应用价值, 多参数联合可提高诊断效能。

关键词：直肠肿瘤体层摄影术,X线计算机新辅助放化疗治疗反应

猪德尔塔冠状病毒双脯氨酸突变S蛋白的表达及免疫原性评价

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微生物学报 2024年第8期64卷 2799-2812页

作者：文玉涵于瑞明张莉萍杜晓华潘丽王永录郭慧琛刘霞刘新生甘肃农业大学生命科学技术学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室甘肃兰州730046

【目的】猪德尔塔冠状病毒(porcine deltacoronavirus,PDCoV)是一种重要的猪肠道冠状病毒,给全球生猪养殖业带来了巨大的经济损失,截至目前,尚无可用的商品化疫苗。本研究选择宿主免疫反应主要诱因因子棘突(spike,S)蛋白,并将PDCoV S蛋... 详细信息

【目的】猪德尔塔冠状病毒(porcine deltacoronavirus,PDCoV)是一种重要的猪肠道冠状病毒,给全球生猪养殖业带来了巨大的经济损失,截至目前,尚无可用的商品化疫苗。本研究选择宿主免疫反应主要诱因因子棘突(spike,S)蛋白,并将PDCoV S蛋白七肽重复序列1(heptapeptide repeat-1,HR1)与中心螺旋之间的环中855和856位点均突变为双脯氨酸(E855P和V856P),然后利用ExpiCHO-S真核表达系统表达、纯化重组S蛋白和双脯氨酸突变S蛋白(S2P)并评价其免疫原性及免疫保护性,以初步研制一种免疫效果较好的PDCoV亚单位疫苗。【方法】利用间接酶联免疫吸附法检测免疫小鼠血清特异性抗体IgG水平;利用血清中和试验检测免疫小鼠血清中和抗体滴度;通过流式细胞术检测免疫小鼠T淋巴细胞增殖情况;通过细胞因子检测免疫小鼠干扰素(interferon,IFN)-γ、IFN-α、白细胞介素(interleukin,IL)-2和IL-4等细胞因子分泌情况;采用RT-qPCR检测攻毒后小鼠肠道组织PDCoV病毒载量;采用病理组织切片检测小鼠肠道有无病理损伤;利用免疫组织化学检测小鼠肠道组织PDCoV抗原分布情况。【结果】免疫原性结果显示,小鼠在肌肉注射S组和S2P组亚单位疫苗后能够产生较高水平的抗PDCoV特异性IgG抗体,免疫后42 d的小鼠血清均对PDCoV具有中和作用,其中,S2P组对LLC-PK细胞50%中和保护效价显著高于S组。此外,S组和S2P组显著地诱导小鼠CD_(4)^(+)T淋巴细胞增殖,并且S2P组高于S组,而S2P组能够诱导小鼠CD_(8)^(+)T淋巴细胞增殖,但S组与PBS组并无差异。同时,S组和S2P组诱导的IFN-γ、IFN-α、IL-2和IL-4等细胞因子水平均显著高于PBS组,但S组和S2P组并无差异。免疫保护性结果显示,PBS组肠组织中可检测到PDCoV病毒,肠组织出现病理损伤且可见大量PDCoV抗原,而S组和S2P组未检测到PDCoV病毒且未观察到肠组织损伤,二者之间无明显差异。【结论】S2P组较之S组能够诱导小鼠产生更高水平的抗PDCoV体液免疫应答,两组疫苗对小鼠均有一定的保护效果,本研究为后续PDCoV亚单位疫苗研发奠定坚实的基础。

关键词：猪德尔塔冠状病毒(porcine deltacoronavirus,PDCoV) S蛋白双脯氨酸突变免疫原性

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Separation and Purification of Glufosinate Through Combination of an Electrodialysis Membrane and a Macroporous Adsorption Resin

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Chemical Research in Chinese Universities 2019年第4期35卷 647-653页

作者： CUI Menglong du xiaohua Catalytic Hydrogenation Research Center Zhejiang Green Pesticide Collaborative Innovation CenterCollege of Chemical EngineeringZhejiang University of TechnologyHangzhou 310014P. R.China

Glufosinate is a nonselective organophosphorus herbicide with low toxicity and high efficiency that is widely used in forestry, agriculture and other industries. In the process of manufacturing glufosinate, large amounts of ammonium chloride and coloured organic impurities are generated. Because of its high solubility in water, separation of glufosinate from inorganic salts is extremely difficult. Hence, a co-separation method combining an electrodialysis membrane and a macroporous adsorption resin was developed to obtain glufosinate with higlier purity. For the electrodialysis process, a glufosinate reaction solution was placed in a dilute chamber and desalinated. The concentration of inorganic salts in the resultant glufosinate aqueous solution was only 0.99 g/L under the optimal conditions of an operating voltage and a volume ratio of 9 V and 1:1, respectively. For the macroporous resin adsorption/desorption process, the sample solution treated by electrodialysis was pumped into the resin-filled column, which was eluted to obtain the eluent when the adsorption reached equilibrium. Consequently, nearly all the coloured organic impurities were removed under the optimal conditions, in which the resin type, pH value, flow rate, glufosinate concentration, temperature, ratio of ethanol and volume of eluent were LX-300C,3,0.5 mL·cm^2·min^-1,20 mg/mL,25℃, 50% and 400 mL, respectively. After the electrodialysis and adsorption/desorption process, the purity of the glufosinate was increased to 95.14%, and its recovery rate was as high as 98%. The advantages of this process included its ease of operation, environmental friendliness and low cost, which provided strong potential for its use in industrial applications.

关键词： Electrodialysis membrane Glufosinate Macroporous adsorption resin Purification

Synthesis and Herbicidal Activity of Novel β-Methoxyacrylate Derivatives Containing a Substituted Phenylpyridine Moiety

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Chemical Research in Chinese Universities 2019年第6期35卷 1008-1011页

作者： CAO Yangyang CAI Zengfei ZHANG Wenliang du xiaohua Catalytic Hydrogenation Research Center Zhejiang Key Laboratory of Green Pesticides and Cleaner Production TechnologyZhejiang Green Pesticide Collaborative Innovation CenterZhejiang University of TechnologyHangzhou 310014P.R.China

In this paper,a series of newβ-methoxyacrylate derivatives containing a substituted phenylpyridine moiety was synthesized and *** structures of all compounds were confirmed by nuclear magnetic re-sonance(NMR)and high-resolution mass spectrometry(HRMS).Preliminary bioassays demonstrated that compound 8d showed more than 95%inhibition against Brassica juncea and Chenopodium serotinum at 37.5 g a.i./10^4 m^2,when compared with the positive control halauxifen-methyl at 150 g a.i./10^4 m^*** present work demonstrated that compound 8d exhibited the more promising herbicidal activity and may serve as a new herbicidal agent for herbicide.

关键词： β-Methoxyacrylate Phenylpyridine Herbicidal activity

AI for Supporting the Freedom of Drawing

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Machine Intelligence Research 2024年第1期21卷 63-88页

作者： xiaohua Sun Juexiao Qin College of Design and Innovation Tongji UniversityShanghai 200082China

Artificial intelligence(AI)has recently been developing rapidly in image processing and *** is not only starting to take over repetitive and tedious tasks but is also involved in creative *** is one of the areas with the greatest potential for collaboration between humans and *** is an important approach to express various information,but due to the lack of appropriate knowledge and skills,ordinary people without long-time training are unable to draw *** there have been various attempts at human-AI collaboration in drawing,it is difficult for researchers to consider the wide variety of specific problems and develop univer-sal methods due to the openness,improvisation,and individuality of *** this paper,we first analysed the contents of drawing and the general creation process in ***,we have described a mechanism for using AI to enable people to regain the freedom of drawing ***,we have developed a framework that describes methods for analysing specific problems and quickly finding solutions by building connections between the influencing factors in drawing,the demands of humans,and possible implementa-tion *** framework also reveals a broad scope of possibilities for applying AI to support people in drawing.

关键词： Intention understanding drawing support drawing art human-artificial intelligence(AI)collaboration