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重组水疱性口炎病毒的改造策略及在病毒学研究中的应用进展

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病毒学报 2023年第6期39卷 1747-1756页

作者：吴曦王佑春黄维金中国食品药品检定研究院生物制品检定所艾滋病性病病毒疫苗室北京102629 中国医学科学院医学生物学研究所昆明650118

水疱性口炎病毒(Vesicular stomatitis virus,VSV)是一种在家畜中流行,给畜牧业造成严重经济损失的病毒。然而,随着研究的深入,VSV不仅作为负链RNA病毒的代表种帮助阐明了负链RNA病毒的复制机制,并且随着通过cDNA克隆拯救VSV技术的建立,... 详细信息

水疱性口炎病毒(Vesicular stomatitis virus,VSV)是一种在家畜中流行,给畜牧业造成严重经济损失的病毒。然而,随着研究的深入,VSV不仅作为负链RNA病毒的代表种帮助阐明了负链RNA病毒的复制机制,并且随着通过cDNA克隆拯救VSV技术的建立,VSV成为了病毒学研究、疫苗研发及肿瘤治疗的有力工具。本文对VSV的基因组结构、增殖方式、重组VSV的构建技术以及重组VSV在基础研究和临床方面的应用进行了综述。

关键词：水疱性口炎病毒假病毒疫苗载体

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马尔堡病毒G蛋白相关抗体和疫苗的研究进展

中华微生物学和免疫学杂志 2017年第6期37卷 467-473页

作者：张黎李倩倩黄维金王佑春中国食品药品检定研究院艾滋病性病病毒疫苗室北京100050

马尔堡病毒（Marburg virus,MARV）是一种可引起致命性出血热的病毒.它与埃博拉病毒同属丝状病毒科.二者的病毒结构、感染机制及引起的临床症状极为相似.然而相对埃博拉病毒而言,对于马尔堡病毒的研究较少.本文将对马尔堡病毒的病毒结构... 详细信息

马尔堡病毒（Marburg virus,MARV）是一种可引起致命性出血热的病毒.它与埃博拉病毒同属丝状病毒科.二者的病毒结构、感染机制及引起的临床症状极为相似.然而相对埃博拉病毒而言,对于马尔堡病毒的研究较少.本文将对马尔堡病毒的病毒结构,特别是决定病毒侵染宿主的关键蛋白G蛋白（glycoprotein,GP）的结构、功能、针对G蛋白的保护性抗体和疫苗等最新研究进展进行综述.

关键词：马尔堡病毒 G蛋白结构保护性抗体疫苗

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流感病毒抗原性进化及对流感疫苗研发的启示

中华预防医学杂志 2021年第11期55卷 1339-1345页

作者：安艺萌周旭王佑春黄维金上海生物制品研究所有限责任公司 200051 中国食品药品检定研究院生物制品检定所艾滋室国家卫生健康委员会生物技术产品检定方法与标准化重点实验室国家药品监督管理局生物制品质量研究与评价重点实验室北京102629

流感病毒持续而广泛地影响全球人类健康,其广泛的动物宿主特性、高度变异的特点导致抗原不断漂移,易感人群更迭,引起全球流感流行反复发生,也影响着季节性流感疫苗的保护效果。本研究以多种亚型的甲型流感病毒为例,从抗原性漂移对抗原... 详细信息

流感病毒持续而广泛地影响全球人类健康,其广泛的动物宿主特性、高度变异的特点导致抗原不断漂移,易感人群更迭,引起全球流感流行反复发生,也影响着季节性流感疫苗的保护效果。本研究以多种亚型的甲型流感病毒为例,从抗原性漂移对抗原性的影响、季节性流感疫苗株与流行株的匹配度、广谱流感疫苗研发的思路等方面,对相关的研究进展作一综述,以加深对流感病毒抗原性进化的理解,为流感疫苗未来研发思路提供参考。

关键词：流感,人病毒抗原变异疫苗

建立我国HIV阳转血浆盘并评价HIV酶免血筛试剂窗口期

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中华微生物学和免疫学杂志 2016年第7期36卷 528-533页

作者：黄维金宋爱京许四宏王佑春中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

目的：建立我国HIV系列阳转血清盘并用其评价HIV酶免血筛诊断试剂的窗口期。方法收集HIV感染者的系列血清,利用Western blot确认试剂、HIV抗原定量检测试剂、核酸定量检测试剂等检测系列样品,RT-PCR的方法扩增HIV env序列并测序和分型,... 详细信息

目的：建立我国HIV系列阳转血清盘并用其评价HIV酶免血筛诊断试剂的窗口期。方法收集HIV感染者的系列血清,利用Western blot确认试剂、HIV抗原定量检测试剂、核酸定量检测试剂等检测系列样品,RT-PCR的方法扩增HIV env序列并测序和分型,以确认HIV感染。对国内外5种第四代和14种第三代酶免HIV血液筛查诊断试剂的检测窗口期进行评价。结果共收集确认8套HIV感染者的阳转系列血浆,AE亚型6套,B亚型1套,未分型1套,共含有36份样品。用HIV系列阳转血清盘评价发现四代抗原抗体联合检测试剂较三代抗体检测试剂具有更早的窗口期检测能力,前者评分9.4分,后者3.6分,差异具有统计学意义（t=8.547,P〈0.01）；部分国产四代试剂质量已经达到进口试剂的水平；核酸试剂的窗口期检测能力高于酶免试剂,在3套血清盘中至少提高2周以上；确认试剂的灵敏度低于血筛试剂的灵敏度；4/5四代试剂在检测感染早期样品时会出现检测信号值/界值（ S/CO）下降的情况,存在第二窗口期漏检风险。结论本研究建立了8套我国的HIV系列阳转血清盘,评价发现我国HIV血液筛查酶免诊断试剂窗口期检测能力存在差异。

关键词：人类免疫缺陷病毒诊断窗口期血液筛查

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SPF家兔尿液中戊型肝炎病毒传染性的研究

中华微生物学和免疫学杂志 2018年第7期38卷 488-493页

作者：赵晨燕马建吴佳静黄维金中国食品药品检定研究院艾滋病性病病毒疫苗室北京102629

目的研究家兔尿液中戊型肝炎病毒（HEV）的存在情况，评价尿液中排出的HEV是否具有传染性。方法使用兔型HEV毒株攻击SPF家兔，建立家兔HEV感染模型，采用实时荧光RT-PCR试剂和ELISA抗原、抗体检测试剂检测血清、粪便和尿液样品中的各病... 详细信息

目的研究家兔尿液中戊型肝炎病毒（HEV）的存在情况，评价尿液中排出的HEV是否具有传染性。方法使用兔型HEV毒株攻击SPF家兔，建立家兔HEV感染模型，采用实时荧光RT-PCR试剂和ELISA抗原、抗体检测试剂检测血清、粪便和尿液样品中的各病毒标志物和血清中的生化指标。到期解剖感染家兔，取肝脏和肾脏组织，进行组织病理和免疫组化检查。使用家兔阳性尿液攻击家兔，评价尿液的传染性。结果HEV抗原和核酸能够从感染家兔R1#的尿液、血清和粪便中持续检出，转氨酶也检测到异常，家兔呈现典型的急性感染的特点。尿液中HEV抗原与核酸的比值显著高于血清和粪便，尿液中虽然未检测到有异常的生化指标，但肾脏组织病理改变比较典型。将阳性尿液感染2只家兔，其中1只血清和粪便中能检出病毒核酸，并且分离该粪便中的病毒能再次感染家兔。结论家兔HEV感染能够导致肾脏损伤，并且感染后的尿液有传染性。尿液中的HEV抗原可以作为诊断HEV感染有意义的指标。

关键词： SPF家兔戊型肝炎病毒尿液实时荧光RT—PCR HEV抗原

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甲型流感病毒感染动物模型的研究进展

中华微生物学和免疫学杂志 2023年第9期43卷 727-732页

作者：王忆菲黄维金耿彦生赵晨燕中国食品药品检定研究院艾滋病性病病毒疫苗室国家卫生健康委员会生物技术产品检定方法与标准化重点实验室国家药品监督管理局生物制品质量研究与评价重点实验室北京102629 河北大学公共卫生学院预防医学系保定071000

流行性感冒(简称流感)在全球范围内引发了较高的发病率和死亡率,严重危害人类健康和生命,流感病毒的不断变异为流感的预防和治疗带来新的挑战。动物模型为全面认知流感病毒发病机制、传播机制、疫苗开发及治疗效果评估提供便利,不同研... 详细信息

流行性感冒(简称流感)在全球范围内引发了较高的发病率和死亡率,严重危害人类健康和生命,流感病毒的不断变异为流感的预防和治疗带来新的挑战。动物模型为全面认知流感病毒发病机制、传播机制、疫苗开发及治疗效果评估提供便利,不同研究中流感病毒动物感染模型的构建与使用存在差异,不同动物模型的应用也各具特点。本文综述了多种动物模型的构建及使用现状,总结了其在抗体、药物和疫苗效力评估方面的优势和局限性,为将来选择及优化动物模型提供参考。

关键词：甲型流感病毒动物模型优点和局限性感染疫苗

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甲型流感病毒H3N2抗原进化研究进展

中华微生物学和免疫学杂志 2023年第6期43卷 479-484页

作者：张梦怡李岚舒黄维金赵晨燕中国食品药品检定研究院艾滋病性病病毒疫苗室北京102629

流感病毒是引起人类呼吸道感染的常见病原体。在4种季节性流感毒株中,甲型流感病毒H3N2感染已成为季节性流感疾病和死亡的主要原因,严重影响公共卫生和社会经济。自1968年首次出现并造成大流行后,H3N2一直在人群中反复流行,不断通过抗... 详细信息

流感病毒是引起人类呼吸道感染的常见病原体。在4种季节性流感毒株中,甲型流感病毒H3N2感染已成为季节性流感疾病和死亡的主要原因,严重影响公共卫生和社会经济。自1968年首次出现并造成大流行后,H3N2一直在人群中反复流行,不断通过抗原漂移来逃避宿主免疫系统的攻击,从而导致低疫苗效力。本文从甲型流感病毒H3N2的抗原进化、抗原进化对疫苗株选择的影响及一些预测流感病毒进化的模型等方面进行分析和综述,为流感病毒抗原进化分析和未来疫苗研发等工作提供参考。

关键词：流感病毒 H3N2 疫苗株抗原性预测模型

16型人乳头瘤病毒（HPV16）中和表位及型内变异分析

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中华微生物学和免疫学杂志 2018年第8期38卷 623-628页

作者：宁婷婷聂建辉黄维金王佑春北京协和医学院 100730 中国食品药品检定研究院、艾滋病与性病病毒疫苗室北京102629

世界范围内,宫颈癌是妇女第二位高发肿瘤.高危型人乳头瘤病毒（human papilloma-virus,HPV）持续感染是引发宫颈癌的主要原因,在所有高危型HPV中,HPV16流行最广泛.HPV主要衣壳蛋白（major capsid protein,L1）可以自组装成病毒样颗粒（v... 详细信息

世界范围内,宫颈癌是妇女第二位高发肿瘤.高危型人乳头瘤病毒（human papilloma-virus,HPV）持续感染是引发宫颈癌的主要原因,在所有高危型HPV中,HPV16流行最广泛.HPV主要衣壳蛋白（major capsid protein,L1）可以自组装成病毒样颗粒（virus-like particles,VLPs）,其形态及抗原性与天然病毒类似,可以刺激机体产生高效价保护性中和抗体.中和表位是HPV VLPs疫苗的结构基础,疫苗的效力主要取决于中和表位的完整性.目前基于中和单抗的HPV16表位研究取得了极大进展.随着免疫压力的增加,HPV16的型内变异株越来越多.1204条HPV16 L1氨基酸序列构建的进化树可以分为4个进化分支.同时,将其与114K参考序列相比,共挑选出8个＂高频突变位点＂,6个＂特有突变位点＂和20个＂表位相关位点＂.HPV诱导的中和抗体绝大多数都是型特异性的,但同一型别内的HPV所诱导的中和抗体对型别内的所有L1变异株是否都能保护尚无定论.剖析HPV16型的抗原表位及型内变异情况对设计高效价、高覆盖率的预防性疫苗至关重要.

关键词：人乳头瘤病毒主要衣壳蛋白氨基酸替换中和表位变异株

Double lock of a potent human therapeutic monoclonal antibody against SARS-CoV-2

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National Science Review 2021年第3期8卷 29-41页

作者： Ling Zhu Yong-Qiang Deng Rong-Rong Zhang Zhen Cui Chun-Yun Sun Chang-Fa Fan Xiaorui Xing weijin huang Qi Chen Na-Na Zhang Qing Ye Tian-Shu Cao Nan Wang Lei Wang Lei Cao Huiyu Wang Desheng Kong Juan Ma Chunxia Luo Yanjing Zhang Jianhui Nie Yao Sun Zhe Lv Neil Shaw Qianqian Li Xiao-Feng Li Junjie Hu Liangzhi Xie Zihe Rao Youchun Wang Xiangxi Wang Cheng-Feng Qin CAS Key Laboratory of Infection and Immunity National Laboratory of MacromoleculesInstitute of BiophysicsChinese Academy of Sciences State Key Laboratory of Pathogen and Biosecurity Beijing Institute of Microbiology and EpidemiologyAcademy of Military Medical Sciences Beijing Engineering Research Center of Protein and Antibody Sinocelltech Ltd. Division of Animal Model Research Institute for Laboratory Animal ResourcesNational Institutes for Food and Drug Control(NIFDC) School of Basic Medical Sciences Southwest Medical University Division of HIV/AIDS and Sex-Transmitted Virus Vaccines Institute for Biological Product Control NIFDC Beijing Key Laboratory of Monoclonal Antibody Research and Development Sino Biological Inc. Cell Culture Engineering Center Chinese Academy of Medical Sciences &Peking Union Medical College Guangzhou Regenerative Medicine and Health Guangdong Laboratory

Receptor recognition and subsequent membrane fusion are essential for the establishment of successful infection by *** these steps can cure *** we have identified and characterized a potent human monoclonal antibody,HB27,that blocks SARS-CoV-2 attachment to its cellular receptor at sub-nM ***,HB27 can also prevent SARS-CoV-2 membrane ***,a single dose of HB27 conferred effective protection against SARS-CoV-2 in two established mouse *** macaques showed no obvious adverse events when administrated with10 times the effective dose of ***-EM studies on complex of SARS-CoV-2 trimeric S with HB27 Fab reveal that three Fab fragments work synergistically to occlude SARS-CoV-2 from binding to the ACE2 *** of the antibody also restrains any further conformational changes of the receptor binding domain,possibly interfering with progression from the prefusion to the postfusion *** results suggest that HB27 is a promising candidate for immuno-therapies against COVID-19.

关键词： SARS-CoV-2 COVID-19 in vivo protection preclinical safety evaluation human neutralizing antibody immuno-therapy cryo-EM structure