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TPX2基因沉默对膀胱癌耐药细胞株T24/DDP顺铂化疗敏感性的增强作用及其机制

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吉林大学学报（医学版） 2024年第2期50卷 346-354页

作者：张鹰蒋先训万朝辉南华大学衡阳医学院附属第二医院重症医学科湖南衡阳421001 南华大学衡阳医学院附属第二医院急诊科湖南衡阳421001

目的:探讨爪蟾驱动蛋白样蛋白2靶蛋白(TPX2)基因沉默对膀胱癌耐药细胞株T24/顺铂(DDP)的化疗敏感性的影响,并阐明其作用机制。方法:采用DDP浓度梯度刺激法建立DDP耐药细胞株T24/DDP,将细胞分为T24细胞组和T24/DDP细胞组。MTT法检测各组... 详细信息

目的:探讨爪蟾驱动蛋白样蛋白2靶蛋白(TPX2)基因沉默对膀胱癌耐药细胞株T24/顺铂(DDP)的化疗敏感性的影响,并阐明其作用机制。方法:采用DDP浓度梯度刺激法建立DDP耐药细胞株T24/DDP,将细胞分为T24细胞组和T24/DDP细胞组。MTT法检测各组细胞增殖活性,并根据半数抑制浓度(IC50)值计算耐药指数(RI);实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法和Westernblotting法检测细胞中TPX2mRNA及蛋白表达水平。通过小干扰RNA(siRNA)沉默T24/DDP细胞中TPX2基因表达,再将细胞分为空白对照组、阴性对照干扰(si-NC)组、TPX2沉默(si-TPX2)组、si-NC+DDP(2 mg·L^(-1) DDP)组和si-TPX2+DDP(2 mg·L^(-1) DDP)组。RT-qPCR法和Western blotting法检测转染后细胞中TPX2 mRNA及蛋白表达水平,MTT法检测各组细胞增殖活性,流式细胞术检测各组凋亡细胞率和细胞周期G2/M期百分率,Transwell小室实验检测各组迁移细胞数和侵袭细胞数,Western blotting法检测各组细胞中Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路相关蛋白β-catenin、P-糖蛋白(P-gp)、锌指蛋白转录因子1(Snail1)和Survivin蛋白表达水平。结果:成功建立膀胱癌DDP耐药细胞株T24/DDP,RI值为8.76。与T24细胞组比较,T24/DDP细胞组中TPX2 mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。与空白对照组和si-NC组比较,si-TPX2组T24/DDP细胞中TPX2mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.01),且DDP的IC50值明显降低(P<0.01)。与si-NC组比较,si-TPX2组T24/DDP细胞凋亡率和细胞周期G2/M期百分率明显升高(P<0.01),迁移细胞数和侵袭细胞数明显降低(P<0.01),T24/DDP细胞中β-catenin、P-gp、Snail1和Survivin蛋白表达水平明显降低(P<0.01);与si-NC+DDP组比较,si-TPX2+DDP组T24/DDP细胞凋亡率和细胞周期G2/M期百分率明显升高(P<0.01),迁移细胞数和侵袭细胞数明显降低(P<0.01),T24/DDP细胞中β-catenin、P-gp、Snail1和Survivin蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。结论:TPX2基因沉默通过抑制Wnt/β-catenin信号通路增强膀胱癌耐药细胞株T24/DDP对DDP的化疗敏感性。

关键词：爪蟾驱动蛋白样蛋白2靶蛋白膀胱肿瘤顺铂化疗敏感性 Wnt/β-catenin信号通路

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NDRG1过表达对去势抵抗性前列腺癌耐药细胞株C4-2/ENZA耐药性的影响及其机制

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吉林大学学报（医学版） 2024年第3期50卷 708-717页

作者：张鹰万朝辉蒋先训南华大学衡阳医学院附属第二医院重症医学科湖南衡阳421001 南华大学衡阳医学院附属第二医院急诊科湖南衡阳421001

目的:探讨N-myc下游调节基因1(NDRG1)对去势抵抗性前列腺癌(CRPC)恩杂鲁胺(ENZA)耐药的影响,并阐明其作用机制。方法:体外培养人CRPC C4-2细胞和ENZA耐药株C4-2/ENZA细胞,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测C4-2/ENZA细胞及其亲本C4-2... 详细信息

目的:探讨N-myc下游调节基因1(NDRG1)对去势抵抗性前列腺癌(CRPC)恩杂鲁胺(ENZA)耐药的影响,并阐明其作用机制。方法:体外培养人CRPC C4-2细胞和ENZA耐药株C4-2/ENZA细胞,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测C4-2/ENZA细胞及其亲本C4-2细胞中NDRG1 mRNA表达水平,Western blotting法检测C4-2/ENZA细胞及其亲本C4-2细胞中NDRG1、雄激素受体(AR)和前列腺特异性抗原(PSA)蛋白表达水平,以验证细胞转染效率。将C4-2/ENZA细胞分为空白组(正常培养不进行处理)、阴性对照慢病毒(Lv-NC)组(转染Lv-NC)、Lv-NDRG1组(转染Lv-NDRG1)、Lv-NC+ENZA组(转染Lv-NC后加入ENZA处理)、Lv-NDRG1+ENZA组(转染Lv-NDRG1后加入ENZA处理)、Lv-NDRG1+表皮生长因子(EGF)组(转染Lv-NDRG1后加入EGF处理)和Lv-NDRG1+EGF+ENZA组(转染Lv-NDRG1后加入EGF和ENZA处理)。采用噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞半数抑制浓度(IC_(50))、耐药指数(RI)和细胞增殖活性,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,RT-qPCR法检测各组细胞中NDRG1 mRNA表达水平,Western blotting法检测各组细胞中NDRG1、AR、第213位丝氨酸磷酸化雄激素受体(p-ARSer^(213))、第81位丝氨酸磷酸化雄激素受体(p-ARSer^(81))和PSA蛋白表达水平。结果:与C4-2细胞比较,C4-2/ENZA细胞中NDRG1 mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.01),AR和PSA蛋白表达水平明显升高(P<0.01),提示ENZA耐药株C4-2/ENZA中NDRG1低表达;与Lv-NC组比较,LvNDRG1组细胞中NDRG1 mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P<0.01),提示成功构建NDRG1基因过表达C4-2/ENZA耐药细胞株。MTT法,与C4-2细胞比较,C4-2/ENZA细胞IC_(50)明显升高(P<0.01),RI为17.78;与Lv-NC组比较,Lv-NDRG1组C4-2/ENZA细胞IC_(50)明显降低(P<0.01)。EGF处理24 h,与Lv-NC组比较,Lv-NC+EGF组C4-2/ENZA细胞IC_(50)明显升高(P<0.01);与Lv-NDRG1组比较,Lv-NDRG1+EGF组C4-2/ENZA细胞IC_(50)明显升高(P<0.01)。与ENZA处理前比较,不同浓度ENZA处理24 h,C4-2和C4-2/ENZA细胞增殖活性均逐渐降低(F=223.80,P<0.01;F=81.46,P<0.01)。ENZA处理24 h,与Lv-NC组比较,Lv-NDRG1组C4-2/ENZA细胞增殖活性明显降低(P<0.01)。EGF处理24 h,与Lv-NC组比较,Lv-NC+EGF组C4-2/ENZA细胞增殖活性明显升高(P<0.01),Lv-NDRG1+EGF组C4-2/ENZA细胞增殖活性明显降低(P<0.01)。选择10.000μmol·L^(-1) ENZA和干预24 h作为后续检测浓度及时间点。流式细胞术,ENZA处理24 h,与Lv-NC组比较,Lv-NDRG1组细胞凋亡率明显升高(P<0.01);与Lv-NC+ENZA组比较,Lv-NDRG1+ENZA组细胞凋亡率明显升高(P<0.01)。EGF处理24h,与Lv-NDRG1组比较,Lv-NDRG1+EGF组细胞凋亡率明显降低(P<0.01),Lv-NDRG1+ENZA组细胞凋亡率明显升高(P<0.01);与Lv-NDRG1+ENZA组比较,Lv-NDRG1+EGF+ENZA组细胞凋亡率明显降低(P<0.01)。Western blotting法,ENZA处理24 h,与Lv-NC组比较,Lv-NDRG1组细胞中AR和PSA蛋白表达水平及p-ARSer^(213)/AR和p-ARSer^(81)/AR比值均明显降低(P<0.05或P<0.01)。EGF处理24 h,与Lv-NC组比较,Lv-NC+EGF组细胞中AR和PSA蛋白表达水平及p-ARSer^(213)/AR和p-ARSer^(81)/AR比值均明显升高(P<0.05或P<0.01);与Lv-NDRG1组比较,Lv-NDRG1+EGF组细胞中AR和PSA蛋白表达水平及p-ARSer^(213)/AR和p-ARSer^(81)/AR比值均明显升高(P<0.01)。结论:NDRG1过表达可降低CRPC对ENZA的耐药性,其作用机制可能与抑制AR信号转导有关。

关键词：去势抵抗性前列腺癌 N-myc下游调节基因1 恩杂鲁胺耐药性雄激素受体

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中国影子银行与金融监管的博弈模型构建研究

数学的实践与认识 2024年第7期54卷 59-70页

作者：周春应骆婉琦南京林业大学经济管理学院江苏南京210037

在我国金融业分业监管的背景下,跨机构“大资管”的影子银行监管问题颇受关注,影子银行的产生与演化的过程也深刻反映了我国金融体系与监管体系的内在逻辑。以影子银行和金融监管两个子系统的内部博弈为起点,运用动态演化博弈模型,探究... 详细信息

在我国金融业分业监管的背景下,跨机构“大资管”的影子银行监管问题颇受关注,影子银行的产生与演化的过程也深刻反映了我国金融体系与监管体系的内在逻辑。以影子银行和金融监管两个子系统的内部博弈为起点,运用动态演化博弈模型,探究影子银行与金融监管的博弈过程及影响因素.研究结果表明:影子银行超额收益和违规惩罚的不对等、非银金融机构本源业务的能力不足、监管合作程度低,促使影子银行选择不断创新;降低监管合作成本、削弱监管搭便车的可能,均有助于提高金融监管合作.在研究结论的基础上,提出疏通利率传导渠道、优化金融体系结构、明晰金融监管权责、加大违规惩罚力度等政策建议。

关键词：影子银行金融监管演化博弈

基于符号表示的可度量shapelets提取的时序分类研究

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计算机科学 2024年第8期51卷 106-116页

作者：王礼勤万源罗颖武汉理工大学理学院武汉430070

在时序分类问题中,基于符号表示的shapelets提取方法具有良好的分类精度和分类效率,但对符号进行质量度量的过程,如计算TFIDF分数,耗时较长且计算量大,导致分类效率较低。此外,提取的shapelets候选数量仍然较多,判别力有待提高。针对这... 详细信息

在时序分类问题中,基于符号表示的shapelets提取方法具有良好的分类精度和分类效率,但对符号进行质量度量的过程,如计算TFIDF分数,耗时较长且计算量大,导致分类效率较低。此外,提取的shapelets候选数量仍然较多,判别力有待提高。针对这些问题,本文提出了一种基于符号表示的可度量shapelets提取方法,该方法包含时间序列数据预处理、确定shapelets候选集和学习shapelets 3个阶段,可以快速得到高质量shapelets。在数据预处理阶段,将时间序列转化为符号聚合近似(SAX)表示以降低原始时间序列的维度。在确定shapelets候选集阶段,利用Bloom过滤器过滤重复的SAX词,并将过滤后的SAX词存储在哈希表中进行质量度量。随后,对SAX词的相似性进行判别,基于相似性和覆盖度等概念确定最终的shapelets候选集。在学习shapelets阶段,采用logistic回归模型学得真正的shapelets用于时序分类。在32个数据集上进行了大量实验,实验结果表明,所提方法的平均分类精度和平均分类效率均排名第二。与现有的基于shapelets的时序分类方法相比,该方法可以在保证精度的同时提高分类效率,并且具有良好的可解释性。

关键词：时间序列分类 shapelet SAX表示 Bloom过滤器 logistic回归

苯乙酰胺衍生物的合成及其对棕榈酸诱导的胰岛细胞损伤的保护作用

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中国药理学通报 2024年第6期40卷 1130-1136页

作者：李爱云关丽苏琬真鲁洋洋张胜杰李伟泽焦向英山西医科大学生理学系细胞生理学教育部重点实验室山西太原030001 西安医学院药学院陕西西安710021

目的以不同取代的苯乙酸为原料设计合成一系列苯乙酰胺衍生物,并考察化合物对棕榈酸(palmitate acid,PA)诱导的胰岛细胞损伤的保护作用。方法培养Min6细胞,分为B空白对照组、PA处理组、PA+化合物组,采用CCK-8法检测细胞活性;通过Western... 详细信息

目的以不同取代的苯乙酸为原料设计合成一系列苯乙酰胺衍生物,并考察化合物对棕榈酸(palmitate acid,PA)诱导的胰岛细胞损伤的保护作用。方法培养Min6细胞,分为B空白对照组、PA处理组、PA+化合物组,采用CCK-8法检测细胞活性;通过Western blot观察细胞TXNIP、NLRP3的蛋白表达;MDA、SOD试剂盒检测MDA含量以及SOD活性;胰岛素试剂盒检测Min6细胞胰岛素的分泌量。结果共设计合成10个苯乙酰胺衍生物,结构经1H NMR、ESI-MS确证;药理活性研究表明,大多数化合物对胰岛细胞有保护作用,化合物LY-6和LY-8相较PA模型组(细胞活力为61.4%)保护作用较强,其中LY-6细胞活力最高,达到104.9%;与PA组相比,LY-6和LY-8组TXNIP和NLRP3蛋白表达降低,MDA含量减少,SOD活性增加,胰岛素分泌量增加。结论LY-6和LY-8可通过抑制TXNIP的表达,减少对NLRP3炎性小体的激活,减少MDA的产生、增加SOD的活性,最终减少胰岛β细胞的凋亡,增加胰岛素的分泌量。故化合物LY-6可以作为潜在的抗糖尿病新化学实体。

关键词：糖尿病硫氧还蛋白相互作用蛋白苯乙酰胺衍生物氧化应激 NLRP3炎症小体胰岛细胞保护

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基于对抗策略类别特定的多样性时间序列shapelets提取

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计算机科学 2024年第5期51卷 35-44页

作者：罗颖万源王礼勤武汉理工大学理学院武汉430070

在时间序列分类任务中,通过提取时间序列的shapelets进行分类的方法因分类准确率高且具有良好的可解释性而受到广泛关注。针对现有方法学习到的shapelets是所有类共享,可以区分大多数类但不能准确地区分某一类和其他类,以及使用对抗策... 详细信息

在时间序列分类任务中,通过提取时间序列的shapelets进行分类的方法因分类准确率高且具有良好的可解释性而受到广泛关注。针对现有方法学习到的shapelets是所有类共享,可以区分大多数类但不能准确地区分某一类和其他类,以及使用对抗策略的模型生成的shapelets存在多样性不足等问题,提出了一种基于对抗策略类别特定的多样性时间序列shapelets提取方法。该方法将类别信息嵌入时间序列,采用多生成器模块对抗地生成多个有差别的类别特定shapelets,再通过施加差异约束来提高shapelets的多样性,最后使用shapelet转换得到的特征对时间序列进行分类。在36个时间序列数据集上与5种基于shapelets的算法和11种先进的分类算法进行实验对比,实验结果表明,所提方法分别在36个数据集中的26个和20个数据集上取得了最优结果,且均取得了最高的平均秩,平均分类准确率相比其他方法最少提高了2.4%,最多提高了17.8%。消融性分析以及可视化分析验证了多样性和类别特定的思路在时间序列分类上的有效性。

关键词：时间序列 shapelets 类别特定多样性对抗网络

黄芪当归汤联合莫沙比利治疗功能性便秘的疗效及对血清胃肠激素水平的影响

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现代生物医学进展 2018年第2期18卷 321-325页

作者：彭随风时昭红石拓万莹杨健武汉市第一医院消化内科湖北武汉430022

目的:研究黄芪当归汤联合莫沙比利治疗功能性便秘的临床疗效及对血清胃肠激素水平的影响。方法:选择2015年3月至2016年5月我院接受治疗的功能型便秘患者86例。按照随机数字表法分为观察组与对照组,各43例。对照组患者给予莫沙比利治疗,... 详细信息

目的:研究黄芪当归汤联合莫沙比利治疗功能性便秘的临床疗效及对血清胃肠激素水平的影响。方法:选择2015年3月至2016年5月我院接受治疗的功能型便秘患者86例。按照随机数字表法分为观察组与对照组,各43例。对照组患者给予莫沙比利治疗,观察组同时加用黄芪当归汤治疗,对比两组临床疗效、不良反应;检测患者治疗前后血清胃动素(MTL)、P物质(SP)水平;采用SF-36生活质量量表对患者治疗后的生活质量进行评价。结果:观察组治疗总有效率为95.35%(41/43),显著高于对照组的81.40%(35/43),差异有统计学意义(P0.05)。治疗前两组血清胃肠激素水平对比无显著差异,治疗后两组MTL均降低,而SP均上升,且治疗后观察组MTL水平显著低于对照组,SP水平显著高于对照组(均P<0.05)。治疗后观察组患者饮食、精神、睡眠以及心理四个维度的生活质量评分均显著高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:黄芪当归汤联合莫沙比利治疗功能性便秘具有显著的临床疗效,能有效改善患者血清胃肠激素水平,提高患者生活质量,且安全可靠,值得推广应用。

关键词：黄芪当归汤莫沙比利功能性便秘疗效胃肠激素

孕产妇Rh表型分布特征及相容性输血的可行性探讨

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中国实验血液学杂志 2024年第3期32卷 868-874页

作者：杨桂林张涛李春莉张宏鹏吴盈盈李胜蓝万块杨赟平重庆医科大学附属妇女儿童医院重庆市妇幼保健院输血科重庆401147

目的:分析重庆地区孕产妇Rh表型分布特征,探讨Rh表型在孕产妇中的临床意义及实行Rh表型相容性输血的可行性。方法:采用微柱凝胶法对65161例孕产妇进行ABO血型和Rh表型检测,以同期48122例男性为对照,通过χ^(2)检验对数据进行比较分析。... 详细信息

目的:分析重庆地区孕产妇Rh表型分布特征,探讨Rh表型在孕产妇中的临床意义及实行Rh表型相容性输血的可行性。方法:采用微柱凝胶法对65161例孕产妇进行ABO血型和Rh表型检测,以同期48122例男性为对照,通过χ^(2)检验对数据进行比较分析。结果:113283例样本中,RhD+112870例(99.64%),以CCDee(48.39%)和Cc DEe(32.88%)为主要表型,并检出重庆地区首例Rh缺失型D--表型;Rh D-413例(0.36%),以ccdee(52.78%)和Ccdee(33.41%)为主要表型;RhD+组与Rh D-组的Rh表型分布差异有统计学意义(Pe>C>c>E,与男性相比差异无统计学意义(P>0.05);孕产妇Rh表型分布与男性相比差异无统计学意义(P>0.05);不同ABO血型的孕产妇间Rh表型分布差异无统计学意义(P>0.05)。在孕产妇中,正常妊娠人群、有不良流产史人群、采用人类辅助生殖技术人群和不孕症患者人群间Rh表型分布无明显差异(P>0.05),4个孕产妇人群与本地区综合性三甲医院住院患者和献血者相比,Rh表型分布差异无统计学意义(P>0.05)。RhD阳性孕产妇中,CcDEe表型找到相容性血液的概率为100%,CCDee、CcDee和CCDEe表型找到相容血液的概率为45%-60%,ccDEE、ccDEe、CcDEE表型找到相容血液的概率为5%-10%,其余表型的相容概率均低于0.5%;提供CCDee和ccDEE两个表型的血液即可满足99%以上患者7种Rh表型相容性输血需求。结论:应对孕产妇进行Rh表型检测,对需要输血的孕产妇推行Rh表型相同或相容性输血是切实可行的输血举措。

关键词：孕产妇 Rh表型 Rh缺失型D-- Rh血型相容性输血

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OBE理念指导软件项目实践课程教学方法

高等工程教育研究 2024年第3期 92-97页

作者：万邦睿李生林钱鹰重庆邮电大学软件工程学院

针对软件项目实践课程学生难以深入参与项目、软件技能存续性较弱的问题,融合OBE教育理念,提出了一种基于模仿模式和跨越模式的软件项目实践课程教学方法,并以信息管理系统项目为例,详细阐述了教学方法的案例库项目建设要求、模仿模式... 详细信息

针对软件项目实践课程学生难以深入参与项目、软件技能存续性较弱的问题,融合OBE教育理念,提出了一种基于模仿模式和跨越模式的软件项目实践课程教学方法,并以信息管理系统项目为例,详细阐述了教学方法的案例库项目建设要求、模仿模式和跨越模式实施要素,为软件项目实践课程中学生更深入的学习参与和更持久的技能应用提供了可供借鉴的解决思路。

关键词： OBE 软件项目实践模仿模式跨越模式