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Efficient scar-free knock-ins of several kilobases in plants by engineered CRISPR-Cas endonucleases

Molecular Plant 2024年第5期17卷 824-837页

作者： tom schreiber Anja Prange Petra Schafer Thomas Iwen Ramona Grutzner Sylvestre Marillonnet Aurelie Lepage Marie Javelle Wyatt Paul Alain Tissier Department of Cell and Metabolic Biology Leibniz Institute of Plant BiochemistryWeinberg 306120 Halle(Saale)Germany Limagrain Centre de RechercheRoute d’EnnezatCS 9012663720 ChappesFrance

In plants and mammals,non-homologous end-joining is the dominant pathway to repair DNA doublestrand breaks,making it challenging to generate knock-in *** this study,we identified two groups of exonucleases from the herpes virus and the bacteriophage T7 families that conferred an up to 38-fold increase in homology-directed repair frequencies when fused to Cas9/Cas12a in a tobacco mosaic virus-based transient assay in Nicotiana *** achieved precise and scar-free insertion of several kilobases of DNA both in transient and stable transformation *** Arabidopsis thaliana,fusion of Cas9 to a herpes virus family exonuclease led to 10-fold higher frequencies of knock-ins in the first generation of *** addition,we demonstrated stable and heritable knock-ins in wheat in 1%of the primary *** together,our results open perspectives for the routine production of heritable knock-in and gene replacement events in plants.

关键词： homology-directed repair knockin gene replacement CRISPR-Cas 50 exonuclease plants

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Genome-wide association study detects novel risk locus psoriasis

Genome-wide association study detects novel risk locus psori...

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中华医学会第16次全国皮肤性病学术年会

作者： Stephan Weidinger Eva Buchert David Ellinghaus Philip E.Stuart Rajan P.Nair Sophie Debrus John V.Raelson Manfred Kunz Proton Rahman Dafna Gladman Christian Gieger H.Erich Wichmann tom H.Karlsen Dieter Kabelitz Goncalo R.Abecasis James T.Elder Stefan schreiber Michael Weichenthal Andre Franke Institute of Clinical Molecular Biology Christian-Albrechts-University24105 KielGermany Department of Dermatology and Allergy Technische Universitt Mnchen80802 MunichGermany Department of Dermatology University of MichiganAnn ArborMI 48109USA Christian-Albrechts-University 24105 KielGermany

Psoriasis is a complex polygenic disease characterized by epidermal proliferation,altered keratinocyte differentiation and chronic *** recently new insights into the genetic architecture of psoriasis were obtained,many susceptibility loci remain to be *** here present a genome-wide association analysis of 2,339,118 single nucleotide polymorphisms in 472 psoriasis patients and 1146

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