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胫骨高位截骨术治疗单纯内侧间室膝骨关节炎术后炎性细胞因子水平变化研究

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中国修复重建外科杂志 2017年第4期31卷 422-426页

作者：白玉明张海森刘畅靳胜利苏柯刘颖吕志昌沧州市中心医院骨二科河北沧州061001 沧州市人民医院手术室河北沧州061001 献县人民医院骨科河北献县062250

目的探讨胫骨高位截骨术(hight tibial.osteotomy,HTO)治疗单纯内侧间室膝骨关节炎(osteoarthritis,OA)后患者血浆和关节滑液中Il.1β、Il.6、Il.17水平变化。方法以2011年1月-2014年6月因单纯内侧间室膝关节OA行HTO治疗的26例患者作为... 详细信息

目的探讨胫骨高位截骨术(hight tibial.osteotomy,HTO)治疗单纯内侧间室膝骨关节炎(osteoarthritis,OA)后患者血浆和关节滑液中Il.1β、Il.6、Il.17水平变化。方法以2011年1月-2014年6月因单纯内侧间室膝关节OA行HTO治疗的26例患者作为研究对象(试验组),以30例膝关节正常的自愿者作为正常对照(对照组)。两组研究对象性别、年龄、体质量指数比较差异均无统计学意义(P>0.05)。试验组术后复查X线片,记录截骨愈合时间,测量股胫角,评估下肢力线;采用膝关节学会评分系统(KSS)评价膝关节功能,疼痛视觉模拟评分(VAS)评价膝关节疼痛程度。术前及术后6、12、18个月抽取肘部静脉血以及患侧膝关节滑液,采用El.SA检测试剂盒测量血浆及关节滑液Il.1β、Il.6、Il.17含量,对照组抽取肘部静脉血进行相应检测并比较。结果试验组患者术后切口均Ⅰ期愈合。术后均获随访,随访时间18~24个月,平均21个月。X线片复查示,截骨端均达骨性愈合,愈合时间9~14周,平均11.5周。截骨端愈合后测量股胫角为165~170°,平均167.5°;下肢力线矫正满意。术后各时间点VAS评分均较术前显著降低,KSS评分较术前显著增加,比较差异有统计学意义(P0.05)。与对照组比较,试验组术前血浆及关节滑液Il.1β、Il.6、Il.17含量均增高。差异均有统计学意义(Pl.1β、Il.6、Il.17含量均逐渐下降,但比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HTO可显著改善单纯内侧间室膝OA患者疼痛症状和关节功能,并在一定程度上降低患者体内Il.1β、Il.6、Il.17含量,但尚未恢复至正常水平。

关键词：胫骨高位截骨术骨关节炎膝关节 Il.1β Il.6 Il.17

滇红玫瑰精油超临界CO_(2)萃取工艺、挥发性成分及抗氧化活性研究

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食品与机械 2023年第3期39卷 175-182页

作者：刘劲芸常健蒋卓芳徐重军陈婉吴恒云南中烟新材料科技有限公司云南昆明650106

目的:综合利用云产滇红玫瑰花资源,提高产品附加值。方法:以玫瑰花精油得率为判别指标,通过单因素试验和响应面试验优化超临界CO_(2)萃取玫瑰花精油的提取工艺;通过气相色谱—质谱技术分析不同精油的成分及相对含量,并评价不同玫瑰精油... 详细信息

目的:综合利用云产滇红玫瑰花资源,提高产品附加值。方法:以玫瑰花精油得率为判别指标,通过单因素试验和响应面试验优化超临界CO_(2)萃取玫瑰花精油的提取工艺;通过气相色谱—质谱技术分析不同精油的成分及相对含量,并评价不同玫瑰精油的抗氧化活性。结果:超临界CO_(2)萃取玫瑰花精油的最佳工艺参数为:玫瑰花粉末颗粒40目,萃取压力25.5 MPa、萃取温度45.5℃、萃取时间123 min,CO_(2)流量20 l.h,该工艺条件下玫瑰花精油得率为1.185%;不同产地滇红玫瑰精油中共鉴定出74种挥发性成分,安宁产的滇红玫瑰花精油挥发性物质总量最高;不同产地滇红玫瑰花精油均具有较好的自由基清除能力,但不同产地的抗氧化能力存在明显差异。结论:超临界CO_(2)萃取的滇红玫瑰花精油品质较好,可作为一种天然抗氧化剂应用。

关键词：玫瑰花精油超临界CO_(2)萃取挥发性成分气相色谱—质谱抗氧化

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黄粉虫抗菌肽的分离纯化及生物活性研究

现代食品科技 2016年第1期32卷 116-121页

作者：张建新孙长江西北农林科技大学食品科学与工程学院陕西杨凌712100

本研究以黄粉虫为试材,采用碱性蛋白酶酶解黄粉虫蛋白制备获得了抗菌肽,并对其进行分离纯化,比较了不同组分及纯化后抗菌肽的抑菌活性、热稳定性及分子量。结果表明:大孔吸附树脂对蛋白酶酶解液动态吸附并梯度洗脱后得到5个组分,抑菌试... 详细信息

本研究以黄粉虫为试材,采用碱性蛋白酶酶解黄粉虫蛋白制备获得了抗菌肽,并对其进行分离纯化,比较了不同组分及纯化后抗菌肽的抑菌活性、热稳定性及分子量。结果表明:大孔吸附树脂对蛋白酶酶解液动态吸附并梯度洗脱后得到5个组分,抑菌试验表明无水乙醇洗脱组分的抑菌活性最强。采用制备型HPl.对无水乙醇洗脱组分进一步纯化,得到两个组分(H-1,H-2),其中组分H-2对大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌均表现出较强的抑菌活性,且其最小抑菌浓度(MIC)为0.512 mg/m l.热稳定性试验表明,H-2具有较好的热稳定性,121℃加热20 min仍能保持较高活性。液质联用(l.-MS)结果表明,H-2的分子量为756.82u。本研究为黄粉虫抗菌肽的高效分离和纯化提供了科学依据,为黄粉虫抗菌肽在食品防腐中的应用提供了基础数据。

关键词：黄粉虫抗菌肽分离纯化生物活性

5-氮胞苷诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化中的作用

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中国组织工程研究 2016年第50期20卷 7469-7474页

作者：贾秀丽李昌平达州职业技术学院四川省达州市635000 西南医科大学附属医院四川省泸州市646000

背景:骨髓间充质干细胞在体外经5-氮胞苷诱导后可分化为心肌样细胞这一研究成果使细胞移植治疗心脏疾病成为可能。目的:探讨不同浓度5-氮胞苷在大鼠骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化中的诱导作用。方法:取第3代骨髓间充质干细胞,分别采用... 详细信息

背景:骨髓间充质干细胞在体外经5-氮胞苷诱导后可分化为心肌样细胞这一研究成果使细胞移植治疗心脏疾病成为可能。目的:探讨不同浓度5-氮胞苷在大鼠骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化中的诱导作用。方法:取第3代骨髓间充质干细胞,分别采用含0,5,10,20μmol.l.5-氮胞苷的DMEM培养液孵育24 h,去除诱导培养液,用含体积分数为5%胎牛血清的l.-DMEM培养28 d,采用免疫细胞化学方法检测心肌肌钙蛋白I表达。结果与结论:(1)第3代骨髓间充质干细胞经5-氮胞苷诱导24 h后出现细胞死亡现象。5,10μmol.l.5-氮胞苷组细胞死亡相对较少,20μmol.l.5-氮胞苷组细胞死亡较多;(2)5μmol.l.5-氮胞苷组肌钙蛋白Ⅰ染色阳性率显著低于10μmol.l.5-氮胞苷组和20μmol.l.5-氮胞苷组(Pl.l.20μmol.l.5-氮胞苷组肌钙蛋白Ⅰ阳性率差异无显著性意义(P>0.05);(3)结果表明,5-氮胞苷可以在体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化,且10μmol.l.5-氮胞苷诱导效果较好。

关键词：干细胞骨髓干细胞缺血性心脏病 5-氮胞苷骨髓间充质干细胞心肌细胞心肌肌钙蛋白I

吡柔比星通过Pl.ε-Bcl.2通路抑制膀胱癌细胞增殖

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第二军医大学学报 2014年第7期35卷 708-713页

作者：欧俐苹杜红飞吕长坤宋学东范砚茹罗春丽重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室重庆市重点实验室重庆400016

目的探讨吡柔比星对膀胱癌细胞增殖的影响及其作用机制。方法膀胱癌细胞T24和BIU-87分别用0.4、0.8、1.6、3.2mg/l.吡柔比星处理24、48、72h,用四甲基偶氮唑盐(MTT)检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡率,qRT-PCR、RT-PCR检测磷脂酶C... 详细信息

目的探讨吡柔比星对膀胱癌细胞增殖的影响及其作用机制。方法膀胱癌细胞T24和BIU-87分别用0.4、0.8、1.6、3.2mg/l.吡柔比星处理24、48、72h,用四甲基偶氮唑盐(MTT)检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡率,qRT-PCR、RT-PCR检测磷脂酶Cε(Pl.ε)mRNA及凋亡调控基因Bcl.2mRNA的表达,蛋白质印迹法检测Pl.ε蛋白的表达。将膀胱癌细胞分为空白组、吡柔比星处理组、Ad-shPl.ε处理组、吡柔比星联合Pl.ε干扰腺病毒载体(Ad-shPl.ε)处理组,检测并比较各组细胞增殖和Bcl.2蛋白的表达量。结果在膀胱癌细胞T24、BIU-87中,吡柔比星对细胞的抑制率呈浓度、时间依赖性,即随着药物浓度增加、处理时间延长,细胞抑制率升高;吡柔比星促进T24和BIU-87细胞凋亡,并且抑制Pl.ε和Bcl.2表达。吡柔比星处理组、Ad-shPl.ε处理组、Ad-shPl.ε联合吡柔比星处理组均能抑制细胞增殖和Bcl.2表达,且Ad-shPl.ε联合吡柔比星处理组的抑制作用高于吡柔比星处理组,差异有统计学意义(Pl.ε癌基因及下游Bcl.2基因的表达有关。

关键词：吡柔比星磷脂酶Cε Bcl.2 膀胱肿瘤细胞增殖

西安城市河流浮游植物群落结构及其与环境因子的关系

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水生生物学报 2023年第4期47卷 543-555页

作者：孙来康杨涛万旭昊严雪溶胡长通郑奕文陕西师范大学地理科学与旅游学院西安710119 陕西省污染物暴露与生态环境健康国际联合研究中心西安710062

为探究西安市城市河流浮游植物群落结构特征及其与环境因子的关系,分别于2020年10月和2021年6月对灞河、浐河、沣河及黑河共计24个采样点进行了浮游植物群落组成、细胞密度和生物量的调查研究,并利用冗余分析(RDA)研究环境因子对浮游植... 详细信息

为探究西安市城市河流浮游植物群落结构特征及其与环境因子的关系,分别于2020年10月和2021年6月对灞河、浐河、沣河及黑河共计24个采样点进行了浮游植物群落组成、细胞密度和生物量的调查研究,并利用冗余分析(RDA)研究环境因子对浮游植物群落结构的影响。调查结果显示,枯水期共鉴定出浮游植物6门115种,主要包括蓝藻门(11.30%)、硅藻门(54.78%)及绿藻门(26.96%),浮游植物细胞密度均值为(3.36±3.50)×10^(6)cel.s/l.生物量均值为(1.79±3.59)mg/l.丰水期共鉴定出浮游植物7门168种,主要包括蓝藻门(7.74%)、硅藻门(51.79%)及绿藻门(29.76%),浮游植物细胞密度均值为(9.17±9.73)×10^(6)cel.s/l.生物量均值为(6.54±11.57)mg/l.与枯水期相比,丰水期在物种数量、细胞密度和生物量都大于枯水期。聚类分析结果表明,西安城市河流大部分采样点之间浮游植物群落结构及水环境状况具有相似性,而人类活动可能是导致其余点位具有空间差异性的主要原因。冗余分析(RNA)结果表明影响西安市城市河流浮游植物群落结构分布的主要环境因子有温度(Temp)、氨氮(NH_(3)-N)、pH、溶解氧(DO)、河流宽度(Wide)及叶绿素(CHl.。综合环境因子、生物多样性指数、浮游植物群落结构及优势种得出4支水系中黑河水质最好,灞河、沣河水质一般,浐河水质较差。

关键词：浮游植物群落结构环境因子冗余分析

瓦氏雅罗鱼Commd9基因的克隆及其在碱度胁迫下的表达分析

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农业生物技术学报 2022年第9期30卷 1771-1782页

作者：罗亮常玉梅孙博张立民陈炯梁利群宁波大学海洋学院/生物化学与分子生物学实验室中国水产科学研究院黑龙江水产研究所/黑龙江省特殊生境鱼类种质特性与抗逆育种重点实验室

铜转运Murr1结构域(copper metabol.sm Murr1 domain, COMMD)蛋白家族在生物体中广泛存在，参与机体核因子κB (nucl.ar factor-κB, NF-κB)活性调节、钠转运、铜代谢以及缺氧的适应性调节等生物学过程。为研究Commd9在碱度胁迫下的作... 详细信息

铜转运Murr1结构域(copper metabol.sm Murr1 domain, COMMD)蛋白家族在生物体中广泛存在，参与机体核因子κB (nucl.ar factor-κB, NF-κB)活性调节、钠转运、铜代谢以及缺氧的适应性调节等生物学过程。为研究Commd9在碱度胁迫下的作用，本研究采用c DNA末端快速扩增(rapid-ampl.fication of cDNA ends, RACE)技术，首次对具有耐高碱特性的瓦氏雅罗鱼(l.uciscus wal.ckii) Commd9基因cDNA全长进行了克隆，命名为l.Commd9基因(GenBank No. MT013199)。该序列全长为938 bp,5’和3’非编码区分别为5和339 bp，开放阅读框为594 bp，编码蛋白含197个氨基酸，预测分子量为21.79 k D，理论等电点为5.63。系统发育分析显示，瓦氏雅罗鱼COMMD9氨基酸序列与鲤科鱼类的相似性较高，其中与鱇浪白鱼(Anabaril.us grahami)相似性高达93.37%。qPCR发现，l.Commd9基因在各组织中均有分布，在肝和肾组织中表达量显著高于其他组织(Pl.Commd9基因在碱水种群瓦氏雅罗鱼肝组织中的表达量极显著下调(Pl.Commd9基因在瓦氏雅罗鱼高碱适应过程中可能起到了关键作用，这将为后续鱼类耐高碱机制研究提供参考。

关键词：瓦氏雅罗鱼铜转运Murr1结构域9 (Commd9)基因基因表达碱度胁迫

防治枸杞蓟马的植物源药剂筛选及混用增效制剂研发

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农药 2016年第2期55卷 99-103,107页

作者：刘畅王芳张蓉宁夏农林科学院植物保护研究所银川750002

[目的]针对宁夏枸杞蓟马危害严重而又缺乏安全可靠的环保型农药这一重大问题,筛选出防治枸杞蓟马的植物源药剂,并进行混用增效制剂的研究。[方法]植物源单体对花蓟马的毒力测定采用浸叶药膜法;根据共毒因子法和等效线法确定配方;制剂加... 详细信息

[目的]针对宁夏枸杞蓟马危害严重而又缺乏安全可靠的环保型农药这一重大问题,筛选出防治枸杞蓟马的植物源药剂,并进行混用增效制剂的研究。[方法]植物源单体对花蓟马的毒力测定采用浸叶药膜法;根据共毒因子法和等效线法确定配方;制剂加工采用常规方法;田间药效试验参照国家标准进行,其中施药方法采用常量喷雾法。[结果]苦参碱和烟碱混用具有明显的增效作用,在有效成分含量为2∶1时,其共毒系数达166.21。结合对溶剂、乳化剂等助剂的筛选,研制出7.5%苦参碱·烟碱乳油,配方为苦参碱5.0%、烟碱2.5%、溶剂83.8%、乳化剂8.7%。质量检测结果表明该制剂各项指标均达到商品农药的要求。大田药效试验表明,该制剂在质量浓度为5 g/l.,常量喷雾,药后7 d对枸杞花蓟马的防效仍为84.57%。[结论]苦参碱和烟碱混用,具有显著的杀蓟马活性和增效作用,具有进一步开发潜力。

关键词：花蓟马植物源杀虫剂增效作用苦参碱烟碱

甜菜夜蛾肽聚糖识别蛋白基因SePGRP-SA的克隆及功能鉴定

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昆虫学报 2022年第4期65卷 417-426页

作者：李亚子赵丹郭晓昌吴涵刘兆瑞郭巍河北农业大学植物保护学院河北保定071001 中国农业科学院研究生院北京100081

【目的】本研究旨在阐明甜菜夜蛾Spodoptera exigua幼虫体内肽聚糖识别蛋白(peptidogl.can recognition protein,PGRP)在响应苏云金芽胞杆菌Bacil.us thuringiensis(Bt)感染过程中的功能。【方法】利用PCR方法扩增甜菜夜蛾幼虫肽聚糖识... 详细信息

【目的】本研究旨在阐明甜菜夜蛾Spodoptera exigua幼虫体内肽聚糖识别蛋白(peptidogl.can recognition protein,PGRP)在响应苏云金芽胞杆菌Bacil.us thuringiensis(Bt)感染过程中的功能。【方法】利用PCR方法扩增甜菜夜蛾幼虫肽聚糖识别蛋白基因SePGRP-SA全长cDNA;采用qRT-PCR分析SePGRP-SA在甜菜夜蛾不同发育阶段(卵、1-5龄幼虫、预蛹和蛹)及4龄幼虫不同组织(中肠、马氏管、围食膜、脂肪体、血淋巴和表皮)中的表达。通过RNAi技术沉默SePGRP-SA基因72 h后,qRT-PCR检测SePGRP-SA沉默效率及甜菜夜蛾4龄幼虫中肠抗菌肽相关基因(Ceropin,Attacin和Defensin)和细菌载量的变化。RNAi沉默SePGRP-SA 24 h后,以苏云金芽胞杆菌菌株Bt-GS57饲喂甜菜夜蛾4龄幼虫0,24,48,72,96和120 h,计算幼虫校正死亡率;饲喂甜菜夜蛾4龄幼虫Bt-GS57后0,24,48和72 h,利用qRT-PCR检测中肠SePGRP-SA,Ceropin,Attacin和Defensin的相对表达量。【结果】克隆获得甜菜夜蛾SePGRP-SA全长DNA(GenBank登录号:MW265930),开放阅读框长576 bp,编码191个氨基酸,其编码蛋白的预测分子量为21.59 kD。序列分析结果表明,SePGRP-SA具有典型的PGRP和Ami2保守结构域,信号肽为19个氨基酸,为分泌型蛋白;系统进化分析发现,SePGRP-SA与斜纹夜蛾Spodoptera l.tura的Sl.GRP亲缘关系最近,氨基酸序列一致性达91.1%。发育表达谱结果表明SePGRP-SA在甜菜夜蛾4和5龄幼虫、预蛹和蛹中高表达;组织表达谱结果表明,SePGRP-SA在4龄幼虫各组织中均表达,其中以血淋巴中表达量最高。与注射dsEGFP(对照)相比,注射dsSePGRP-SA的甜菜夜蛾4龄幼虫在72 h时中肠SePGRP-SA基因表达量下调了95.26%,Cecropin,Attacin和Defensin表达量显著下调,中肠细菌载量显著升高。注射dsEGFP和dsSePGRP-SA的甜菜夜蛾4龄幼虫饲喂Bt-GS57,72 h时幼虫校正死亡率分别为50.00%和73.33%,表明幼虫对Bt-GS57的敏感性明显增加。甜菜夜蛾4龄幼虫取食Bt-GS57后,中肠SePGRP-SA,Cecropin,Attacin和Defensin表达量在48 h均显著增加,72 h时降低。【结论】Bt侵染能够引起甜菜夜蛾SePGRP-SA基因激活抗菌肽相关基因Cecropin,Attacin和Defensin的表达。

关键词：甜菜夜蛾免疫调控肽聚糖识别蛋白基因克隆 RNAi