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焊接电流对AZ91d镁合金焊接接头组织和性能的影响

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兵器材料科学与工程 2020年第1期43卷 101-104页

作者：刘蒙恩刘刚张力重南阳理工学院机械与汽车工程学院

采用TIG焊对AZ91d镁合金进行对接焊试验。通过光学显微镜(Om)、拉伸机(Tm)和显微硬度测试仪研究焊接电流对试样焊缝显微组织和性能的影响。结果表明:当焊接速度为0.003 5 m/s、焊接电压为15 V,随着焊接电流的增大,焊后试样抗拉强度和伸... 详细信息

采用TIG焊对AZ91d镁合金进行对接焊试验。通过光学显微镜(Om)、拉伸机(Tm)和显微硬度测试仪研究焊接电流对试样焊缝显微组织和性能的影响。结果表明:当焊接速度为0.003 5 m/s、焊接电压为15 V,随着焊接电流的增大,焊后试样抗拉强度和伸长率增加;当焊接电流为95 A,焊后试样的抗拉强度达到最大值,为236 mPa,焊后试样强度为母材的93.1%,伸长率最大值为13.5%,提高了95.7%。

关键词： AZ91d镁合金 TIG焊对接

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维生素E和多奈哌齐治疗轻度认知功能障碍

世界核心医学期刊文摘（神经病学分册） 2005年第10期1卷 5-6页

作者： petersen R.C. Thomas R.G. Grundman m. 郭俊 Alzheimer’ s disease Research Center Mayo Clinic College of Medicine 200 First St. SW R ochester MN 55905 United States Dr.

BACKGROUNd: mild cognitive impairment is a transitional state between the cog nitive changes of normal aging and early Alzheimer’ s disease. mETHOds: In a do uble- blind study, we evaluated subjects with the amnestic subtype of mild cogn itive impairment. subjects were randomly assigned to receive 2000 IU of vitamin E daily, 10 mg of donepezil daily, or placebo for three years. The primary outco me was clinically possible or probable Alzheimer’ s disease; secondary outcomes were cognition and function. REsULTs: A total of 769 subjects were enrolled, an d possible or probable Alzheimer’ s disease developed in 212. The overall rate of progression from mild cognitive impairment to Alzheimer’ s disease was 16 pe rcent per year. As compared with the placebo group, there were no significant di fferences in the probability of progression to Alzheimer’ s disease in the vita min E group (hazard ratio, 1.02; 95 percent confidence interval, 0.74 to 1.41; P =0.91) or the donepezil group (hazard ratio, 0.80; 95 percent confidence interva l, 0.57 to 1.13; P=0.42) during the three years of treatment. Prespecified analy ses of the treatment effects at 6- month intervals showed that as compared with the placebo group, the donepezil group had a reduced likelihood of progression to Alzheimer’ s disease during the first 12 months of the study (P=0.04), a fin ding supported by the secondary outcome measures. Among carriers of one or more apolipoprotein E e 4 alleles, the benefit of donepezil was evident throughout th e three- year follow- up. There were no significant differences in the rate of progression to Alzheimer’ s disease between the vitamin E and placebo groups a t any point, either among all patients or among apolipoprotein E e 4 carriers. C ONCLUsIONs: Vitamin E had no benefit in patients with mild cognitive impairment. Although donepezil therapy was associated with a lower rate of progression to A lzheimer’ s disease during the first 12 months of treatment, the rate of progr

关键词：多奈哌齐阿尔茨海默病认知功能进展率安慰剂载脂蛋白双盲研究携带者老化性随机分配

PCVd制备Ti_(1-x)Al_xN硬质薄膜的结构与硬度

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金属学报 2004年第6期40卷 669-672页

作者：马胜利徐健介万奇徐可为 m.G.J.Veprek-Heijman s.Veprek 西安交通大学金属材料强度国家重点实验室 Institute for Chemistry of Inorganic materials Technical University Munich Lichtenbergst.4D-85747 Garching Munich Germany 西北工业大学凝固技术国家重点实验室

用直流等离子体增强化学气相沉积(PCVd)方法获得了Ti_(1-x)Al_xN硬质薄膜;考察了Al含量x及高温退火对薄膜微观结构转变过程及其硬度的影响.结果表明,制备的Ti_(1-x)Al_xN薄膜由3—10nm晶粒组成.随Al含量x增加,薄膜硬度升高,x超过0.83时... 详细信息

用直流等离子体增强化学气相沉积(PCVd)方法获得了Ti_(1-x)Al_xN硬质薄膜;考察了Al含量x及高温退火对薄膜微观结构转变过程及其硬度的影响.结果表明,制备的Ti_(1-x)Al_xN薄膜由3—10nm晶粒组成.随Al含量x增加,薄膜硬度升高,x超过0.83时,硬度开始急剧下降;结构分析证实x小于0.83,Ti_(1-x)Al_xN薄膜是固溶强化;x=0.83,薄膜中出现六方氨化铝相(h—AlN).热稳定性实验表明,Ti_(1-x)Al_xN薄膜的纳米结构和硬度在N_2环境下可以维持到900℃.

关键词： (Ti,A1)N硬质薄膜微观结构硬度热稳定性

气动搅拌法生产浙江玫瑰醋及其对产品风味的影响（英文）

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食品科学 2019年第18期40卷 161-172页

作者：方冠宇吴光忠蒋予箭浙江工商大学食品与生物工程学院浙江杭州310018 绍兴至味食品有限公司浙江绍兴312000

采用气动搅拌的生产方式对发酵液进行搅拌,并对搅拌频率进行探索,结果如下:通过析因试验分析得出了气动搅拌最佳气流速为0.73m3/min,通气时间为53s。过低的搅拌频率会影响醋酸菌的物料交换,过高的搅拌频率会对发酵液表面菌膜破坏,影响... 详细信息

采用气动搅拌的生产方式对发酵液进行搅拌,并对搅拌频率进行探索,结果如下:通过析因试验分析得出了气动搅拌最佳气流速为0.73m3/min,通气时间为53s。过低的搅拌频率会影响醋酸菌的物料交换,过高的搅拌频率会对发酵液表面菌膜破坏,影响醋酸菌生长,两种情况都会降低玫瑰醋的发酵速度和得率。对发酵完成的玫瑰醋进行有机酸和挥发性成分测定,发现气动搅拌法生产的玫瑰醋中挥发性成分和有机酸含量相对传统玫瑰醋都有提高。采用气动搅拌法生产浙江玫瑰醋,并且搅拌频率分别为每5d和7d搅拌一次生产的玫瑰醋中挥发性成分含量从传统的5505.83mg/L分别增加到6344.59mg/L和6062.63mg/L。对挥发性成分进行主成分分析,用气动搅拌法生产的玫瑰醋单独聚为一类,与传统玫瑰醋和自吸式发酵米醋有显著差异。

关键词：玫瑰醋机械化气动搅拌风味物质感官评定

Effect of Cobalt doping on the microstructure and Tensile Properties of Lead Free solder Joint subjected to Electromigration

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Journal of materials science & Technology 2016年第11期32卷 1129-1136页

作者： m.Nasir Bashir A.s.m.A.Haseeb Abu Zayed mohammad saliqur Rahman m.A.Fazal department of mechanical Engineering University of Malaya

Rapid Cu diffusion is one of the main causes of electromigration（Em） failure in lead-free solder *** this study, an effort has been made to investigate the detrimental effects of Em on microstructure and mechanical performance of solder joint by introducing Co nanoparticles（NP） doped flux at the interface between sAC305 solder and copper substrate. Em tests were conducted on un-doped sAC305 and Co-doped sAC305 solder joints for different time intervals, with the maximum duration of 1128 h. A dC current was applied to the both types of solder joints to achieve a current density of 1 × 104A/cm2. Em tests were performed in an oil bath maintained at a constant temperature of 80 °C. It is found that Codoped flux significantly reduced the formation of cracks and voids at the cathode interface. Co atoms entered into the lattice of Cu6sn5 leading to the formation of（Cu, Co）6sn5. This thermodynamically stabilized the interfacial intermetallic（ImC） layers both at the anode and cathode sides and suppressed the change in their thickness. The average anodic growth rate of（Cu, Co）6sn5 interfacial ImC in the doped sample was about one order of magnitude lower compared with that of Cu6sn5 in the un-doped ***-NP also improved the tensile strength considerably before and after Em. The report suggests that the reliability of solder joint during Em can be improved by using Co-NP doped flux.

关键词： Electromigration damages Tensile strength Intermetallic compounds Nanoparticles Reliability

PEGdA两亲性薄膜及干细胞治疗兔大泡性角膜病变的实验研究

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PEGDA两亲性薄膜及干细胞治疗兔大泡性角膜病变的实验研究

作者：方逸凡中国人民解放军医学院

学位级别：硕士

研究背景角膜内皮细胞(corneal endothelial cell,CEC)是位于角膜后弹力层上的六边形单层细胞,通过泵和屏障功能维持角膜正常的水合作用,进而维持角膜透明度和发挥正常视觉功能。人角膜内皮细胞不可再生,各种原因导致的角膜内皮的数量... 详细信息

研究背景角膜内皮细胞(corneal endothelial cell,CEC)是位于角膜后弹力层上的六边形单层细胞,通过泵和屏障功能维持角膜正常的水合作用,进而维持角膜透明度和发挥正常视觉功能。人角膜内皮细胞不可再生,各种原因导致的角膜内皮的数量下降和功能异常会导致角膜水肿甚至视力下降,临床上称为大泡性角膜病变。角膜内皮移植是治疗大泡性角膜病变的唯一有效方式,但移植手术对手术技术要求较高,加之角膜内皮植片供体来源有限导致该手术难以大量开展。生物材料支架联合多能干细胞诱导分化是构建组织工程角膜内皮的核心目标,但目前缺乏合适的替代材料及高效的诱导方案成为制约角膜内皮疾病的关键科学问题。目的本研究旨在构建角膜内皮替代疗法治疗大泡性角膜病变,利用改良保留后弹力层的兔大泡性角膜病变模型,探究兔原代角膜内皮细胞及人胚胎干细胞诱导分化的角膜内皮样细胞前房注射治疗的有效性,绘制种子细胞的命运转归图谱;构建聚乙二醇(二醇)丙烯酸酯(PEGdA)两亲性薄膜,通过类内皮移植手术使其整合于角膜后部形成物理屏障,探究其治疗大泡性角膜病变的有效性。方法1.自主设计角膜内皮刮除器械,只刮除角膜内皮的同时保留后弹力层,构建改良式兔大泡性角膜病变模型;前房注射体外扩增的兔原代角膜内皮,通过裂隙灯照相、前节OCT评估及HE染色评估动物模型稳定性及原代角膜内皮细胞的治疗效果;2.定向诱导分化人H9胚胎干细胞为角膜内皮样细胞,前房注射治疗兔大泡性角膜病变,通过前节照相及裂隙灯观察其治疗效果,借助慢病毒转染荧光素酶报告基因,结合小动物活体成像及共聚焦显微镜动态观察种子细胞体内功能及命运转归;3.利用医用高分子材料聚乙二醇(二醇)丙烯酸酯(PEGdA)和甲基丙烯酸羟乙酯(HEmA)交联构建PEGdA两亲性薄膜,并通过聚乙烯吡咯烷酮(PVP)PVP使其一侧具有亲水属性,从而利于贴合于角膜后部;通过光镊及接触角测定其弹性及亲水性;通过Live/dead实验评价其生物相容性;将其移植到兔大泡性角膜病变模型内,通过裂隙灯照相,前节OCT,活体共聚焦显微镜,三维眼前节分析仪Pentacam评估其治疗效果及位置变化;进一步通过HE及PAs染色、扫描电镜观察其对角膜显微结构及超微结构的影响;最后通过眼压测量及房水炎症因子评估其体内的生物安全性。结果1.首先,我们得到了损伤可控、符合眼部解剖学特征和人体工效学的内皮刮除器械,借助该器械成功构建改良式兔大泡性角膜病变模型,台盼蓝染色示刮除范围均匀完整,HE及茜素红染色提示后弹力层贴合良好,角膜内皮被完全去除,刮除时间大幅缩短;获得功能良好原代角膜内皮种子细胞,于前房注射后第1d、4d、14d两组角膜厚度无统计学差异;注射原代内皮细胞(CEC组)在第7天时可达到临床治愈(角膜厚度m),各组角膜厚度间差异有统计学意义(Pd后组织学观察CEC组角膜各层结构完整,基质纤维排列更为紧密,六边形内皮细胞形态规则;2.利用模拟发育生物学过程诱导胚胎干细胞至角膜内皮样细胞,前房注射后Es-CEC组与CON组角膜恢复透明速度大致相同,具有一定的内皮细胞功能,小动物活体成像结果提示该种子细胞在兔体内存活可达49d以上;3.利用不同比例的预混液我们得到了不同厚度的具有透明性的透明可折叠PEGdA两亲性薄膜,PVP处理后接触角显著减小,亲水特性增加;体外Live/dead结果显示类似于普通细胞培养板培养条件;移植入兔大泡性角膜病变动物模型体内可以牢固贴合于角膜后弹力层,4-7d时即可使水肿角膜恢复至正常厚度且透明;HE及PAs染色提示其角膜基质排列致密,炎症反应较轻;sEm结果显示薄膜与角膜贴合良好,周边内皮细胞功能正常但迁移至薄膜表面生长;眼压及房水炎症因子提示其植入后眼压短期升高,长期处于稳定正常状态;房水中炎症因子IL-1β,TNF-α,s ICAm与sham组相比无统计学差异,提示材料具有良好的生物安全性。结论本研究首先成功构建了改良式保留后弹力层的兔大泡性角膜病变动物模型;发现前房注射兔原代角膜内皮细胞的治疗兔大泡性角膜病变有效;进而验证人胚胎干细胞诱导分化的角膜内皮样细胞对大泡性角膜病变有一定治疗效果,种子细胞可在动物眼内稳定存活并增殖49d;最后成功构建两亲性PEGdA膜,可以牢固贴合于角膜后表面,作为物理屏障替代角膜内皮,治疗兔大泡性角膜病变效果确切。

关键词：大泡性角膜病变角膜内皮细胞胚胎干细胞高分子薄膜移植

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徽州地区传统村落室外风环境研究

徽州地区传统村落室外风环境研究

作者：方焕焕中国矿业大学

学位级别：硕士

本文对徽州地区传统村落室外风环境进行研究,围绕以下四个关键问题开展:问题一,徽州地区传统村落室外风环境的现状如何;问题二,如何评价徽州地区传统村落室外风环境;问题三,用什么方法研究传统村落室外风环境;问题四,传统村落建筑形态... 详细信息

本文对徽州地区传统村落室外风环境进行研究,围绕以下四个关键问题开展:问题一,徽州地区传统村落室外风环境的现状如何;问题二,如何评价徽州地区传统村落室外风环境;问题三,用什么方法研究传统村落室外风环境;问题四,传统村落建筑形态及布局对室外风环境有怎样的影响。通过实地调研和问卷调查研究了问题一,选取西递村、俞源村和豸峰村,经sPss软件分析,问卷信度系数分别为0.86、0.83,效度值分别为78.4、81.5,本调查问卷信度效度较好。西递村79%的被访者认为夏季室外自然通风良好(实测18个测点平均风速范围是0.24m/s-1.50m/s);豸峰村76%的居民认为夏季自然通风效果较差(实测10个测点平均风速范围是0.24m/s-0.68m/s)。通过文献资料研究回答问题二:以国内外现有风环境评价标准为基础,选择适用于徽州地区传统村落的室外风环境评价标准。夏季,室外人行高度(1.5m)处风速应在0.6m/s-5m/s之间,风速放大系数应小于2,避免滞风区和风涡旋出现;冬季,室外人行高度处风速应小于5m/s,风速放大系数应小于2,避免滞风区和风涡旋出现。通过实测与模拟的方法研究问题三:PHOENICs软件模拟结果普遍大于实测结果,但在相同的室外风环境条件下,所得各测点风速大小规律性基本吻合。这说明采用软件模拟的方法是可靠的。通过PHOENICs软件模拟研究问题四:采用控制变量的方法,从五个方面探讨徽州地区传统村落建筑形态及布局对室外风环境的影响,村落巷道宽度、建筑天井形态、天井尺度比例、建筑门的开启以及植物绿化布局。得出以下结论:(1)传统村落主要街巷宽度在4m左右风环境最佳,次要巷道宽度在2-3m满足风环境评价标准;(2)四种天井形态中“回”型平面形态天井内的风环境最佳;(3)在模拟天井宽高比d/H值为0.2-0.6中:“凹”型平面d/H值等于0.3时天井内风环境最佳;“回”型平面d/H值等于0.4时天井内风环境最佳。(4)“回”型平面建筑天井(宽高d/H值比为0.4时)在长宽比W/L值在1-1.5范围内天井风环境最佳。(5)民居门的开启对天井风环境影响极大。(6)研究乔木数目(20-120株)和乔木群相对村落位置(40-100m)时发现当乔木数量为80株时,建筑组团内部和周围风环境最佳;当乔木群距离村落为60m和100m时,乔木群具有最佳的防风效果。传统村落以保护为主,改造余地较小,本文一方面定量的研究了徽州传统村落室外风环境情况,另外,对改善其他村落外部空间风环境,具有一定的指导意义。本文有图46幅,表格41个,参考文献66篇

关键词：徽州地区传统村落室外风环境

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蚜虫不同分类阶元间遗传分化的RAPd研究

蚜虫不同分类阶元间遗传分化的RAPD研究

作者：张素方河南农业大学

学位级别：硕士

蚜虫是一类刺吸式口器的小型昆虫，孤雌生殖、世代周期极短、繁殖率高，这使得蚜虫种群增长迅速。蚜虫寄主广泛，多数农作物都是它们的寄主，其猖獗危害能给农作物造成巨大的经济损失，因此，研究蚜虫的种群分化对了解其系统进化和适应... 详细信息

蚜虫是一类刺吸式口器的小型昆虫，孤雌生殖、世代周期极短、繁殖率高，这使得蚜虫种群增长迅速。蚜虫寄主广泛，多数农作物都是它们的寄主，其猖獗危害能给农作物造成巨大的经济损失，因此，研究蚜虫的种群分化对了解其系统进化和适应机制有重要的意义。尽管RAPd(randomly amplified polymorphic dNA，随机扩增多态性)技术已经成功的用于检测蚜虫种及种群的dNA多态性，但将RAPd用于定量地分析蚜虫不同分类阶元的分化程度是非常必要的。本文利用RAPd分子标记技术，对从20种引物中筛选出的7种引物的扩增结果采用多态位点率(Polynum)、基因多样度(Genediv)、相似性指数(sI)和遗传距离(d)等4种遗传多样陛指标分析了蚜虫不同分类阶元的遗传多样性。对蚜虫不同分类阶元间的遗传多样性研究发现，用Genediv、sI、d三个指标分析表明：科间的差异最大，亚科、属、种间次之，种内种群间的差异最小。用Polynum和Genediv两个指标对桃蚜(myzus persicae)各蚜型内的遗传多样性研究发现，卵的遗传多样性最大，性蚜的次之，孤雌生殖蚜最小;用Genediv、sI和d三个指标表征遗传多样性，发现：卵与性蚜、孤雌生殖蚜之间的差异最大，与孤雌生殖蚜的差异大于与性蚜的差异;干母、干雌和迁移蚜的遗传关系很近。用d和sI这两个遗传多样性指标进行聚类分析，结果表明：无论用7种引物的sI，还是d，都能成功地将蚜虫的科、亚科、属、种完全分开。根据sI和d的计算结果和聚类结果，蚜虫不同科间(毛蚜科 C他…内咖dae和蚜科帅i峡）的幻和d分别为0．257肚0．0234和 0．5663切．0689，亚科问（长管蚜亚科maCrsiPhinae和蚜亚科A砷m咖呵为 0．324肚0．0089和0．458610．021叱，属间（长管蚜属 sdobm、瘤蹦 m沁地、二叉蚜属sob 允赚蚜属排叼汕切mum和蹦APh幻。0．385壮0．05纠和 0．3816i0．0375，问（缢管蚜属的玉米蚜R mae厌址m 与禾谷缢管蚜 R pad O－），蚜属的大豆蚜 *** matsmura、豆蚜***咖 Koch和棉蚜A．g眯叨的大 q为 0．495肚0．0775和 0．2975切．0627，同种的不同种积获草谷网蚜s mis蛐i fo］’allaslll的绿色型与红色型，棉蚜的绿色型与黄色型）间为0．8033土0．0481和 o．0433土0．O二22 拥究为在dNA水平妍究蚜虫分化和种的鉴定，尤簸近缘种的鉴定，跳了一种可雕鉴的方法～

关键词：蚜总科 RAPd 多态位点率基因多样度相似性指数遗传距离聚类分析

半理性设计和定向进化提高异丁香酚单加氧酶活性的研究

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半理性设计和定向进化提高异丁香酚单加氧酶活性的研究

作者：方徽雁深圳大学

学位级别：硕士

香草醛作为世界第三大食用香料,广泛应用于食品、医药、化妆品、烟草等领域。天然香草醛可从香草豆荚中提取得到,但产量少,且价格昂贵。通过微生物或酶法转化获得的香草醛属于天然香草醛,并且生产成本低,是最具有发展前景的替代方法之... 详细信息

香草醛作为世界第三大食用香料,广泛应用于食品、医药、化妆品、烟草等领域。天然香草醛可从香草豆荚中提取得到,但产量少,且价格昂贵。通过微生物或酶法转化获得的香草醛属于天然香草醛,并且生产成本低,是最具有发展前景的替代方法之一。异丁香酚单加氧酶（IEm）是催化前体物质异丁香酚转化为香草醛的唯一关键酶,但现有的异丁香酚单加氧酶由于受到产物抑制而导致酶活不高,因此采用生物催化法催化转化生产香草醛的难题主要是如何高效制备异丁香酚单加氧酶。目前定向进化对酶进行改造是有效提高酶活的方法,但定向进化需要合适的高通量筛选方法以及合理的突变文库,研究通过对高通量筛选的初筛法（TBA）以及复筛法（HPLC）进行系统的优化,得到一个较合理的筛选方法,在此基础上建立IEm的随机突变文库并筛选得到酶活提高23%的突变菌V50d。同时通过半理性设计对IEm进行定点突变改造,得到酶活提高35%的突变菌T52P。此外,初步对新型固定化材料Ca-alginate/PAAm固定*** BL21（dE3）pET21a-IEm细胞的方法进行探究,主要研究内容如下:本研究基于96深孔板的硫代巴比妥酸（TBA）法,探究TBA的检测限、TBA法与香草醛浓度的关系以及无水乙醇对TBA法的影响、底物异丁香酚对TBA检测香草醛的干扰程度等方面进行探究,引入无水乙醇改善检测体系,优化后的TBA法测检测体系为66.7%盐酸溶液为:1%硫代巴比妥酸溶液:无水乙醇:待测样品=100μL:40μL:100μL:10μL。优化后的检测体系标准偏差为4.1%,符合高通量筛选要求。其次高通量筛选时底物异丁香酚加入量为10-4-10-5 mol/L时会对TBA法的检测干扰程度小,过高的浓度容易生成沉淀。此外优化得到HPLC复筛法的最优检测条件为梯度洗脱程序2（0 min:100%甲醇/0.1%冰醋酸=35/65;7 min:100%甲醇/0.1%冰醋酸=80/20;13 min:100%甲醇/0.1%冰醋酸=35/65）。研究采用cepPCR与megawhop PCR相结合的方法构建得到异丁香酚单加氧酶基因突变体文库,使用cepPCR将IEm基因序列划分为大小为500 bp左右的三个片段,分别进行随机突变,随后根据megawhop PCR构建得到一系列突变菌株。cepPCR突变体系中加入0.5 m的锰离子为宜,以此浓度造成的随机突变位点约为1-3个,符合高通量筛选的文库要求。通过筛选,本部分得到8个相对转化能力与原始菌株IEm差异较大的突变菌株,测序得到该8株菌株分别为F41d、V50d、F98T、V159G/d312H、G186G、K242、A348Q、d361P。其中正向突变菌株为V50d、F98T、G186G、K242E,分别相对IEm活性增加23%、13%、9%、15%。综合使用基于序列保守性分析和基于结构吉布斯自由能变分析的方法,设计24个突变位点,成功克隆出相应的IEm-mutant,对突变菌株进行酶活检测并与原始IEm菌株比对,结果表明约有50%的突变体的活性高于IEm,其中IEm-T52P突变体的活性最高,在上述转化体系下,当使用突变体IEm-T52P催化时得到的香草醛浓度为0.63 g/L,相对于IEm（约0.46 g/L）提高了35%,另外突变体IEm-W279F/F281Q,IEm-s122N,IEm-F216N均有小幅度的活性改善,香草醛产率分别增加到0.5 g/L,0.54 g/L,0.51 g/L。研究结果也表明其他突变体有不同程度的降低活性的副作用。采用Ca-alginate/PAAm结合三价铝离子对细胞进行了初步的固定化条件的摸索,分别对细胞浸泡浓度、细胞浸泡时间、甘油浸泡时长、铝离子交联浓度和交联时间五个固定化步骤进行了优化,初步得到最佳固定化细胞条件为:200 rpm条件下将凝胶置于32g/L的细胞中浸泡10 h,pH 10.5甘氨酸-氢氧化钠缓冲液洗去表面多余细胞后,于100%甘油中浸泡1 h,采用0.01 m的AlCl3溶液交联90 min,再使用甘氨酸-氢氧化钠溶液清洗除去凝胶表面多余的AlCl3溶液得到固定化细胞。

关键词：定向进化半理性设计异丁香酚单加氧酶香草醛细胞固定化