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槲皮素调控Nrf2/ho-1信号通路抗氧化应激的机制研究

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江西中医药大学学报 2023年第6期35卷 78-82,88页

作者：余良昆李勇钟发明龙世杰熊朋朋刘欣徐王兵江西中医药大学研究生院南昌330004 江西中医药大学附属医院脊柱一科南昌330006

目的:研究氧化应激状态下槲皮素对MC3T3-E1细胞的保护作用及分子机制。方法:使用200μmol/L过氧化氢干预细胞,构建氧化应激损伤模型。细胞增殖实验检测槲皮素对MC3T3-E1细胞增殖的影响;MDA、SOD试剂盒检测细胞中MDA、SOD含量;ALP染色、... 详细信息

目的:研究氧化应激状态下槲皮素对MC3T3-E1细胞的保护作用及分子机制。方法:使用200μmol/L过氧化氢干预细胞,构建氧化应激损伤模型。细胞增殖实验检测槲皮素对MC3T3-E1细胞增殖的影响;MDA、SOD试剂盒检测细胞中MDA、SOD含量;ALP染色、ARS染色检测槲皮素对MC3T3-E1细胞成骨分化的影响;qRT-PCR、Western blot检测细胞内Runx2、Osterix、Bax、Bcl-2、Caspase3、Nrf2、ho-1等基因和蛋白的表达情况。结果:CCK-8实验结果显示,槲皮素能够改善过氧化氢对MC3T3-E1细胞增殖抑制的影响(Pho-1、Osterix、Runx2和Bcl-2的表达,降低了Bax、Caspase3的蛋白表达(Pho-1信号通路减轻过氧化氢诱导的氧化应激损伤,挽救MC3T3-E1细胞的增殖和成骨分化能力。

关键词：骨质疏松槲皮素氧化应激 Nrf2/ho-1

褪黑素调控Nrf2/ARE信号通路延缓髓核间充质干细胞退变的实验研究

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中华全科医学 2022年第11期20卷 1831-1835,1851页

作者：李才许盼盼胡捷朱坤叶雨辰张亚伟张长春蚌埠医学院第一附属医院骨科安徽蚌埠233004 蚌埠医学院安徽省组织移植重点实验室安徽蚌埠233030

目的探讨褪黑素对氧化应激条件下的大鼠髓核间充质干细胞(NPMSCs)的影响及调节机制。方法使用差速贴壁法获取大鼠NPMSCs。显微镜下观察细胞状态,鉴定第三代细胞三系分化潜能和细胞表面免疫标志物;采用CCK-8法检测不同浓度过氧化氢和褪... 详细信息

目的探讨褪黑素对氧化应激条件下的大鼠髓核间充质干细胞(NPMSCs)的影响及调节机制。方法使用差速贴壁法获取大鼠NPMSCs。显微镜下观察细胞状态,鉴定第三代细胞三系分化潜能和细胞表面免疫标志物;采用CCK-8法检测不同浓度过氧化氢和褪黑素诱导对大鼠NPMSCs活力的影响确定最佳浓度和实验分组;免疫荧光和流式细胞学技术检测NPMSCs活性氧水平;免疫印迹分析外基质标志蛋白(Ⅱ型胶原、糖胺聚糖)和通路核心蛋白(Nrf2、ho-1)表达情况。结果褪黑素在氧化应激下保护了NPMSCs的活性,且1μmol/L浓度保护效应最为明显(0.717±0.018,t=7.102,P<0.01)。褪黑素可抑制NPMSCs在H_(2)O_(2)诱导后的活性氧水平(阳性率70.0%vs.32.7%)。此外,褪黑素还能显著提高Nrf2/ARE信号通路中关键蛋白核因子E2相关因子(1.925±0.024,t=13.150,P<0.01)和血红素氧合酶-1(1.605±0.019,t=12.940,P<0.01)的活性,改善NPMSCs的功能。褪黑素治疗后,细胞基质蛋白Ⅱ型胶原(0.850±0.010,t=25.200,P<0.01)和糖胺聚糖(0.335±0.013,t=10.640,P<0.01)表达增加。结论褪黑素通过调控Nrf2/ARE信号通路可以影响NPMSCs退变的生物学特性。

关键词：椎间盘退变褪黑素氧化应激髓核间充质干细胞活性氧

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大竹蛏5个野生群体遗传多样性的微卫星分析

中国水产科学 2015年第4期22卷 740-748页

作者：张志伟陈爱华张志勇陆勤勤张朝晖姚国兴蔡永祥吴杨平曹奕张雨江苏省海洋水产研究所

运用微卫星标记对大竹蛏(Solen grandis)辽宁丹东(DD)、河北秦皇岛(QHD)、山东日照(RZ)、江苏吕四(LS)和广西北海(BH)近海5个不同地理野生群体共计150个样品进行了遗传多样性分析。结果表明:14个位点多态信息含量范围为0.696~0.853,均... 详细信息

运用微卫星标记对大竹蛏(Solen grandis)辽宁丹东(DD)、河北秦皇岛(QHD)、山东日照(RZ)、江苏吕四(LS)和广西北海(BH)近海5个不同地理野生群体共计150个样品进行了遗传多样性分析。结果表明:14个位点多态信息含量范围为0.696~0.853,均呈现高度多态性,每个位点检测到的等位基因数8~22个,共检测到199个等位基因,平均等位基因数为14.2,等位基因丰富度为11.05,5个群体的期望杂合度分别为0.769(DD),0.791(QHD),0.826(RZ),0.815(LS),0.785(BH),观察杂合度分别为0.837(DD),0.812(QHD),0.875(RZ),0.809(LS),0.858(BH),表明各群体处于较高的遗传多样性水平。Hardy-Weinberg平衡检验显示,仅有Sg16位点在丹东群体显著偏离平衡,其余位点在5个群体均正常,表明各群体遗传较稳定,处于平衡状态。5个群体间的遗传距离在0.141 2~0.340 9,DD和QHD的遗传距离最小,DD和BH的遗传距离最大;基于Da遗传距离构建的UPGMA聚类树显示,距离相邻的DD、QHD渤海湾群体聚为一支,RZ、LS黄海群体聚为另一支,最后与南海群体BH聚在一起,聚类结果与地理位置密切联系,基于贝叶斯遗传聚类得到了相同的结果。分析群体间的Fst值可知,两两群体间的Fst值在0.039 1~0.094 7,群体间产生了中等程度的遗传分化,并且达到了极显著水平(P=0.000 1)。由此可见,中国沿海各地理群体野生大竹蛏种质遗传多样性较为丰富,但不同群体间存在显著的遗传分化,故各增殖放流海区应当加强对放流苗种及繁殖亲本的种质检测,防止异地繁养等人为因素对大竹蛏各野生种群遗传结构造成破坏。

关键词：大竹蛏微卫星野生群体遗传多样性

参莲提取物通过调控Nrf2/Keap1信号通路减轻TNF-α诱导的ECV304损伤

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中国中药杂志 2021年第13期46卷 3402-3409页

作者：王春淼李玉洁李晶晶臧远龙崔羲和宋敏杨庆陈颖李琦蔡维艳翁小刚王娅杰朱晓新中国中医科学院中药研究所北京100700

探讨参莲提取物对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的血管内皮细胞(ECV304)损伤的干预作用及可能的作用机制。以TNF-α诱导ECV304细胞损伤模型,噻唑蓝(MTT)法检测细胞生存活力;采用流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)水平;生化法和酶联免疫吸附... 详细信息

探讨参莲提取物对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的血管内皮细胞(ECV304)损伤的干预作用及可能的作用机制。以TNF-α诱导ECV304细胞损伤模型,噻唑蓝(MTT)法检测细胞生存活力;采用流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)水平;生化法和酶联免疫吸附(ELISA)法检测细胞上清液中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)和白细胞介素-1β(IL-1β)含量;通过Western blot法检测Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)、核因子E2相关因子2(Nrf2)、醌氧化还原酶(NQO1)、血红素加氧酶1(ho-1)、半胱天冬酶3(caspase-3)、半胱天冬酶9(caspase-9)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达水平。结果显示,与对照组相比,50μg·L^(-1)的TNF-α能够导致ECV304细胞活力显著下降(Pho-1、Bcl-2蛋白表达(P<0.01或P<0.05)。提示参莲提取物可能通过调控Nrf2/Keap1信号通路降低TNF-α诱导的ECV304细胞氧化应激损伤,减少炎症反应和细胞凋亡。

关键词：参莲提取物血管内皮细胞氧化应激炎症反应细胞凋亡

肌源性雌二醇在C_(2)C_(12)成肌细胞氧化损伤中的预防作用

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中国细胞生物学学报 2023年第9期45卷 1341-1350页

作者：胡怡尹丹阳田旭于芳芳李涛李婷婷田向阳史仍飞上海体育大学运动健康学院上海200438

该文探讨低雌激素培养环境下,机械牵张对小鼠C_(2)C_(12)成肌细胞内源性雌二醇(estradiol,E_(2))生成的影响及潜在的抗氧化作用。研究以小鼠C_(2)C_(12)成肌细胞为对象,分为对照组、牵张组(15%,0.5 Hz,6 h)、H_(2)O_(2)组(400μmol/L,4... 详细信息

该文探讨低雌激素培养环境下,机械牵张对小鼠C_(2)C_(12)成肌细胞内源性雌二醇(estradiol,E_(2))生成的影响及潜在的抗氧化作用。研究以小鼠C_(2)C_(12)成肌细胞为对象,分为对照组、牵张组(15%,0.5 Hz,6 h)、H_(2)O_(2)组(400μmol/L,4 h)、牵张+H_(2)O_(2)组和芳香化酶抑制剂(200μg/mL,24 h)+牵张+H_(2)O_(2)组。所有组别均使用活性炭吸附后的FBS和无酚红的DMEM高糖培养基建立低雌激素培养环境;CCK8法检测细胞活力;Elisa法检测胞内E_(2)水平;WST-1法测定SOD活性;钼酸铵法测定CAT活性;比色法测定GSH-Px活性;TBA法测定MDA生成情况;Western blot检测细胞内Akt/Nrf2/ho-1蛋白表达情况。结果显示,牵张组较对照组芳香化酶活性及蛋白表达水平上升,细胞内E_(2)生成增加(Pho-1蛋白表达水平下调(Pho-1蛋白表达水平上调(Pho-1蛋白表达下调(Pho-1蛋白表达,对细胞氧化损伤有一定保护作用。

关键词：芳香化酶雌二醇抗氧化作用机械牵张 C_(2)C_(12)成肌细胞

芦丁通过激活NRF2/ho-1通路抑制AngⅡ诱导的血管平滑肌细胞表型转化和炎症反应

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现代生物医学进展 2023年第22期23卷 4201-4206页

作者：谢孝平沈小艳李博文刘天宇王志维武汉大学人民医院心血管外科湖北武汉430060

目的:探讨芦丁(Rutin)对血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的小鼠主动脉血管平滑肌细胞表型转化和炎症反应的影响及机制。方法:采用AngⅡ处理小鼠主动脉平滑肌细胞构建表型转化和炎症反应模型。将对数生长期的小鼠主动脉血管平滑... 详细信息

目的:探讨芦丁(Rutin)对血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的小鼠主动脉血管平滑肌细胞表型转化和炎症反应的影响及机制。方法:采用AngⅡ处理小鼠主动脉平滑肌细胞构建表型转化和炎症反应模型。将对数生长期的小鼠主动脉血管平滑肌细胞分为以下4组:正常对照组(Control组),Rutin组(100μM),AngⅡ组(1μM),Rutin+AngⅡ组(100μM,1μM)。采用细胞增殖实验(Cell Counting Kit-8,CCK8)检测芦丁对小鼠主动脉平滑肌细胞活力的影响,采用蛋白免疫印迹实验检测α平滑肌肌动蛋白(α-Smooth muscle actin,α-SMA)、平滑肌蛋白22α(Smooth muscle protein 22-alpha,SM22α)、骨桥蛋白(Osteopontin,OPN)、基质金属蛋白酶2(Matrix metalloproteinase 2,MMP2)、基质金属蛋白酶9(Matrix metalloproteinase 9,MMP9)、白细胞介素6(Interleukin 6,IL6)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)、核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor2,Nrf2)、血红素氧合酶-1(Heme oxygenase-1,ho-1)、核因子活化B细胞κ轻链增强子(nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells,NF-κB)的蛋白表达和磷酸化水平,采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞上清中TNF-α和IL6细胞因子水平,采用荧光显微镜和流式细胞术检测小鼠主动脉血管平滑肌细胞活性氧水平。结果:与对照组相比,AngⅡ组收缩型标志物α-SMA和SM22α表达水平降低、合成型标志物OPN表达水平升高,炎症相关因子MMP2、MMP9、IL6和TNF-α表达水平升高,NRF2和ho-1表达水平降低,NRF2及NF-κB的磷酸化增加。此外,相较于AngⅡ组,Rutin+AngⅡ组收缩型标志物α-SMA和SM22α表达水平升高、合成型标志物OPN表达水平降低,炎症相关因子MMP2、MMP9、IL6和TNF-α表达水平降低,NRF2和ho-1表达水平升高,NRF2及NF-κB的磷酸化水平降低。结论:芦丁可以抑制AngⅡ诱导的小鼠主动脉血管平滑肌细胞表型转化和炎症反应,可能与其激活NRF2/ho-1通路和抑制活性氧的产生有关。

关键词：芦丁血管平滑肌细胞表型转化炎症反应氧化应激

创伤性颞下颌关节强直与异位骨化发病机制相似性的实验研究

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中国口腔颌面外科杂志 2023年第5期21卷 461-466页

作者：陈云亮满城李晓宇伍靖魏柳琼李文龙深圳市龙华区人民医院口腔科广东深圳518000 遵义医科大学附属口腔医院口腔颌面外科贵州遵义563000

目的:研究异位骨化与创伤性颞下颌关节强直发病机制是否具有相似性,为拓展后者的防治提供新思路。方法:选取确诊为肘、髋、膝关节区异位骨化和创伤性颞下颌关节强直的病例各30例,对术中截取的关节区及周边区骨质标本收集保存,分别作为... 详细信息

目的:研究异位骨化与创伤性颞下颌关节强直发病机制是否具有相似性,为拓展后者的防治提供新思路。方法:选取确诊为肘、髋、膝关节区异位骨化和创伤性颞下颌关节强直的病例各30例,对术中截取的关节区及周边区骨质标本收集保存,分别作为实验组A(A组)和实验组B(B组);另取5个正常完整喙突作为对照组(C组)。H-E染色观察3组标本的组织学结构形态,免疫组织化学法观察标本中BMP-2、BMP-4、CD34阳性表达差异,利用影像资料比较A、B 2组的影像学特征。采用SPSS 17.0软件包对数据进行统计学分析。结果:A组和B组的组织学结构及影像学特点基本一致。免疫组织化学显示,A组和B组的BMP-2、BMP-4、CD34阳性表达均显著强于C组(P<0.05)。结论:创伤性颞下颌关节强直与异位骨化发病机制具有相似性。

关键词：异位骨化创伤性颞下颌关节强直发病机制

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番鸭随机扩增多态性DNA及遗传多样性研究

甘肃农业大学学报 2006年第3期41卷 16-21页

作者：苏瑛刘楚吾叶昌辉刘丽黄毓青张锦蔡笛扬甘肃农业大学甘肃兰州730070 广东海洋大学广东湛江524088 湛江坡头区畜牧局广东湛江524047

利用随机扩增多态DNA(RAPD)技术分析番鸭的遗传多样性,20个引物共扩增出164条带,分子量约在200 ～2 000 bp之间,番鸭20个个体间遗传距离为0．4572～0．0177,群体内个体间遗传相似度(F)为0．9823～0．5428,遗传多样性指效(ho)平均为0．1... 详细信息

利用随机扩增多态DNA(RAPD)技术分析番鸭的遗传多样性,20个引物共扩增出164条带,分子量约在200 ～2 000 bp之间,番鸭20个个体间遗传距离为0．4572～0．0177,群体内个体间遗传相似度(F)为0．9823～0．5428,遗传多样性指效(ho)平均为0．1639．结果表明番鸭DNA的同源性高,品种的纯度保持较好．

关键词：番鸭 RAPD 遗传结构遗传多样性

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复杂性先天性心脏病的介入治疗

中华儿科杂志 2004年第11期42卷 813-816页

作者：周爱卿王荣发高伟余志庆李奋黄美蓉上海第二医科大学附属新华医院上海儿童医学中心 200127

目的　探讨先天性心脏病 (简称先心病 )介入治疗在复杂性先心病中的应用。方法应用Rashkind球囊导管对 5 9例复杂性先心病患儿行球囊房隔造口术 (BAS) ;对 2例右室发育不良综合征患儿进行静态球囊房隔扩张造口术 ;对 1例在大动脉转位术... 详细信息

目的　探讨先天性心脏病 (简称先心病 )介入治疗在复杂性先心病中的应用。方法应用Rashkind球囊导管对 5 9例复杂性先心病患儿行球囊房隔造口术 (BAS) ;对 2例右室发育不良综合征患儿进行静态球囊房隔扩张造口术 ;对 1例在大动脉转位术后出现肺动脉吻合口狭窄的完全性大动脉转位 (TGA)的患儿 ,采用球囊扩张导管进行扩张 ;对 15例法洛四联症 (TOF)患儿进行经皮球囊肺动脉瓣成形术 (PBPV)、球囊血管成形术 ;对 18例合并主动脉至肺动脉侧支血管的患儿以及 5例B T分流术的患儿在外科根治术前采用弹簧圈进行侧支血管和分流管道的堵塞术 ;对 1例Fontan手术后的先心病患儿采用Amplatzer房间隔缺损 (简称房缺 )堵塞装置进行窗孔堵塞术。结果4 6例TGA患儿BAS后动脉血氧饱和度 (SaO2 )由 0 5 7± 0 17上升至 0 76± 0 13(t =14 5 8,P <0 0 1) ,左右心房压差 2mmHg(1mmHg =0 133kPa) ,术后房缺 5～ 2 0mm ;10例肺动脉闭锁伴室间隔完整的患儿BAS后SaO2 变化不大 (t =1 5 7,P 0 0 5 ) ,左右心房压差 2mmHg ;TOF患儿经PBPV及球囊血管成形术后SaO2 平均上升 15 % ,肺动脉瓣狭窄解除 ;18例主动脉至肺动脉侧支血管堵塞术 ,14例效果良好被完全堵塞 ;5例B T分流管道堵塞术 ,全部封堵成功 ;1例Fontan手术后窗孔?

关键词：患儿先心病堵塞术术后介入治疗肺动脉造口术复杂性合并 BAS