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博落回提取物猪耐受性评价及其抗结肠炎机制

湖南农业大学学报（自然科学版） 2022年第3期48卷 326-334页

作者：刘梦婷吴聪明彭旋曾建国中兽药湖南省重点实验室湖南长沙410128 湖南农业大学动物医学院湖南长沙410128 中国农业大学动物医学院北京100193 国家兽药残留基准实验室北京100193 湖南美可达生物资源股份有限公司湖南长沙410331

将健康的50头长大白杂交猪均分为5组,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别按每千克饲料添加博落回散30、150、300、600mg混饲给药,相当于推荐临床剂量的1、5、10、20倍,对照组(CK)饲料中不添加博落回散,连续饲喂60d,研究不同剂量博落回散对猪的生... 详细信息

将健康的50头长大白杂交猪均分为5组,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别按每千克饲料添加博落回散30、150、300、600mg混饲给药,相当于推荐临床剂量的1、5、10、20倍,对照组(CK)饲料中不添加博落回散,连续饲喂60d,研究不同剂量博落回散对猪的生长性能、血液学指标、血清生化指标及组织病理学的影响,基于网络药理学探讨博落回提取物(MCE)抗结肠炎的潜在机制。结果表明,与CK相比,饲料中添加30mg/kg的博落回散可显著提高试验猪的平均日增质量,显著降低料肉比,其他所用剂量的博落回散对试验猪的生长性能均无显著影响;饲料中添加30~600 mg/kg的博落回散的试验猪血液学和血清生化指标均无显著变化,且各脏器组织未见异常病理性损害。可见,饲料中添加30~600 mg/kg博落回散连续饲喂60 d,试验猪具有较好的耐受性。通过SwissTargetPrediction、Genecards、STRING等工具和数据库初步揭示了MCE可能是通过作用于ESR1、BCL2L1、MTOR、MCL1、PTGS2、MAPK8、MMP9、MAPK1、ERBB2和PIK3CA等靶点,并通过ErbB和TNF等信号途径发挥抗炎作用的。

关键词：猪结肠炎博落回散博落回提取物血根碱白屈菜红碱耐受性生长性能血液学指标血清生化指标组织病理学网络药理学

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博落回叶肉组织原生质体的分离条件筛选

分子植物育种 2020年第10期18卷 3341-3347页

作者：汪鹏黄鹏刘薇曾建国饶力群湖南农业大学湖南省中兽药重点实验室长沙410128 湖南农业大学生物科学技术学院长沙410128 湖南农业大学动物科学技术学院长沙410128

博落回(Macleaya cordata)是一种罂粟科博落回属的多年生草本植物,其体内的血根碱(sanguinarine,SAN)具有抗炎、调控肠道菌群和促进动物生长的作用,因此长期以此作为饲用抗生素的天然源替代品在全世界70个国家和地区广泛销售。随着全世... 详细信息

博落回(Macleaya cordata)是一种罂粟科博落回属的多年生草本植物,其体内的血根碱(sanguinarine,SAN)具有抗炎、调控肠道菌群和促进动物生长的作用,因此长期以此作为饲用抗生素的天然源替代品在全世界70个国家和地区广泛销售。随着全世界越来越多的国家限用甚至禁止饲用抗生素,博落回资源的需求逐年增加。因此,通过育种等方法来提高博落回中血根碱的含量具有十分重要的意义。而利用原生质体技术进行品种改良是一个快速高效的方法,其中制备原生质体是第一步。本研究以博落回无菌苗叶片为材料,进行了原生质体分离和纯化。在一定条件下,通过比较不同的酶解渗透压、温度、时间和pH值,得到最适甘露醇浓度为0.6 mol/L,最适温度为30℃,最适时间为6 h,最适酶液pH值为5.8,在该条件下的产量可达到6.03×10^5个/mL,活力为87.3%。该研究为未来博落回的种质资源创新提供了前期研究依据。

关键词：博落回(Macleaya cordata) 叶肉组织原生质体

基于网络药理学分析蒲公英抗氧化功能的物质基础与作用机制

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畜牧兽医学报 2023年第5期54卷 2170-2185页

作者：杨子辉董朕伍蕙岚谭斌曾建国湖南农业大学中兽药湖南省重点实验室长沙410128 湖南农业大学动物医学院长沙410128 湖南农业大学园艺学院长沙410128

本研究旨在基于网络药理学研究蒲公英抗氧化功能的物质基础和潜在作用机制,并对以蒲公英为原料开发功能性植物提取物饲料添加剂提供指导。通过HERB本草组鉴数据库、TCMSP数据库和SwissTargetPrediction网页工具筛选蒲公英中的活性成分... 详细信息

本研究旨在基于网络药理学研究蒲公英抗氧化功能的物质基础和潜在作用机制,并对以蒲公英为原料开发功能性植物提取物饲料添加剂提供指导。通过HERB本草组鉴数据库、TCMSP数据库和SwissTargetPrediction网页工具筛选蒲公英中的活性成分以及潜在作用靶点,使用SwissADME工具计算活性成分的理化性质,从GeneCards数据库中获得与抗氧化相关的目的基因,使用Cytoscape和STRING数据库构建化合物-靶点-功能、化合物-靶点-通路可视化网络和蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,通过DAVID数据库进行基因本体论(GO)、京都基因和基因组百科全书(KEGG)途径富集分析,通过ABTS法和FRAP法对蒲公英不同提取组分进行了体外抗氧化活性测定。结果显示:筛选到活性成分28个、化合物预测靶点296个、抗氧化靶点1371个和交集靶点135个。理化性质计算显示,活性成分中大部分为水溶性。蛋白质互作分析表明,JUN、VEGFA、SRC、HSP90AA1和MMP9等20个关键蛋白可能在抗氧化功能中发挥关键作用。GO和KEGG富集分析表明,抗氧化功能可能与血管内皮生长因子通路、TNF信号通路、MAPK信号通路、IL-17信号通路和雌激素信号通路有关。体外抗氧化测定结果显示,蒲公英水提组分具有更高的抗氧化活性。综上表明,蒲公英中的水溶性活性成分是其抗氧化功能的主要物质基础,为进一步开发抗氧化功能的蒲公英植物提取物饲料添加剂提供理论支持。

关键词：蒲公英网络药理学抗氧化物质基础植物提取物饲料添加剂

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肉鸡对博落回散的耐受性评价

黑龙江畜牧兽医 2022年第21期 115-121,141页

作者：刘梦婷吴聪明彭旋曾建国湖南农业大学动物医学院/中兽药湖南省重点实验室长沙410128 中国农业大学动物医学院/国家兽药残留基准实验室北京100193 湖南美可达生物资源股份有限公司长沙410331

为了评价肉鸡对博落回散的耐受性,确定肉鸡耐受的剂量范围,试验将200只1日龄健康艾维茵肉鸡随机分为5组,每个组5个重复,每个重复8只。20,100,200,300 mg/kg组分别在每千克日粮中添加相应剂量的博落回散(相当于推荐临床剂量的1,5,10,15... 详细信息

为了评价肉鸡对博落回散的耐受性,确定肉鸡耐受的剂量范围,试验将200只1日龄健康艾维茵肉鸡随机分为5组,每个组5个重复,每个重复8只。20,100,200,300 mg/kg组分别在每千克日粮中添加相应剂量的博落回散(相当于推荐临床剂量的1,5,10,15倍),对照组日粮中不添加任何药物,连续饲喂试验肉鸡49 d,考察博落回散对肉鸡生长性能、血常规和血液生化指标、脏器指数和组织病理学的影响。结果表明:试验期各组肉鸡精神和食欲无异常,未出现发病和死亡现象。1~49日龄,与对照组相比,20 mg/kg组日采食量显著提高(P0.05)。100,200 mg/kg组的日增重、料重比与对照组差异不显著(P>0.05);100 mg/kg组49日龄的淋巴细胞比例显著高于对照组(P<0.05);200 mg/kg组21日龄的浆细胞比例显著低于对照组(P<0.05),肝脏指数极显著高于对照组(P<0.01)。300 mg/kg组1~49日龄日增重、日采食量极显著低于对照组(P<0.01),料重比极显著高于对照组(P<0.01),21日龄的浆细胞比例显著低于对照组(P<0.05),49日龄总胆红素含量显著高于对照组(P<0.05),肝脏指数和脾脏指数极显著高于对照组(P<0.01)。200 mg/kg组有一只鸡肝脏轻度肿胀,色泽浅黄。300 mg/kg组肝脏轻度肿胀,呈黄色,肝细胞肿胀,脂肪变性,胞浆内有空泡;脾脏红髓轻度淤血。说明在肉鸡日粮中添加20 mg/kg博落回散(推荐给药剂量)安全性高,并可促进肉鸡生长,连续49 d添加100~200 mg/kg博落回散(5~10倍给药剂量),肉鸡表现出较好的耐受性,连续49 d添加300 mg/kg博落回散(15倍给药剂量)对肉鸡的肝脏产生了一定的损伤。

关键词：肉鸡博落回散耐受性血常规血液生化指标料重比

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博落回抗生素敏感度筛选与植物表达载体构建

分子植物育种 2018年第4期16卷 1133-1137页

作者：徐敏夏丽琼黄鹏唐其曾建国刘薇湖南农业大学园艺园林学院长沙410128 湖南农业大学兽用中药资源与中兽药创制国家地方联合工程研究中心长沙410128 湖南中医药大学药学院长沙410128

采用不同浓度抗生素对博落回组培苗叶片外植体处理,并对比不同浓度的卡那霉素、潮霉素、头孢和特美汀的筛选效果。结果表明,卡那霉素比潮霉素更适合用于博落回外植体的筛选,其最适宜浓度为40 mg/m L。特美汀比头孢更适合用于农杆菌的抑... 详细信息

采用不同浓度抗生素对博落回组培苗叶片外植体处理,并对比不同浓度的卡那霉素、潮霉素、头孢和特美汀的筛选效果。结果表明,卡那霉素比潮霉素更适合用于博落回外植体的筛选,其最适宜浓度为40 mg/m L。特美汀比头孢更适合用于农杆菌的抑制,其最适宜浓度为400 mg/m L。除此以外,还利用In-Fusion技术将线性载体与博落回BBE基因片段连接,测序结果与预期序列一致,表明成功构建了p CAMBIAD-BBE植物表达载体。该工作为优化博落回遗传转化体系和构建过表达博落回植株提供研究依据。

关键词：博落回抗生素载体构建

苄基异喹啉类生物碱生物合成与代谢工程研究进展

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基因组学与应用生物学 2016年第8期35卷 2194-2200页

作者：刘金凤黄鹏卿志星柳亦松唐其曾建国湖南农业大学园艺园林学院长沙410128 湖南农业大学兽用中药资源与中兽药创制国家地方联合工程研究中心长沙410128 湖南中医药大学药学院长沙410128 湖南农业大学动物医学院长沙410128

苄基异喹啉类生物碱(benzylisoquinoline alkaloids,BIAs)是一类具有重要研究及药用价值的次生代谢产物,目前该类生物碱主要来自于植物。但是BIAs在植物中的含量低、且大部分含有BIAs的植物具有生长周期长、受环境影响大、采集困难和难... 详细信息

苄基异喹啉类生物碱(benzylisoquinoline alkaloids,BIAs)是一类具有重要研究及药用价值的次生代谢产物,目前该类生物碱主要来自于植物。但是BIAs在植物中的含量低、且大部分含有BIAs的植物具有生长周期长、受环境影响大、采集困难和难以大规模种植等问题。为解决这些问题,许多研究人员致力于解析BIAs生物合成途径并利用植物与微生物代谢工程技术提高BIAs的含量与开辟新药源。本研究将从BIAs类型与生物合成途径以及微生物与植物代谢工程几个方面对BIAs的生物合成与代谢工程研究进展进行综述,有利于BIAs的深入研究。

关键词：苄基异喹啉类生物碱生物合成代谢工程

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补骨脂提取物的体外抑菌活性研究

中国药房 2016年第31期27卷 4382-4384页

作者：王秀云徐丽陆赢曾建国深圳市南山区蛇口人民医院药剂科广东深圳518067 深圳市第二人民医院中心实验室广东深圳518035 湖南农业大学国家中药材(湖南)技术中心长沙410128 湖南省中药提取工程研究中心长沙410301

目的:研究补骨脂提取物对9种可能引起细菌性腹泻的病原菌的体外抑菌活性。方法:采用药敏滤纸片法、试管稀释法测定补骨脂提取物(含60%补骨脂酚)对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、鸡白痢沙门氏菌、猪霍乱沙门氏菌、多杀性巴氏杆菌、猪链球菌... 详细信息

目的:研究补骨脂提取物对9种可能引起细菌性腹泻的病原菌的体外抑菌活性。方法:采用药敏滤纸片法、试管稀释法测定补骨脂提取物(含60%补骨脂酚)对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、鸡白痢沙门氏菌、猪霍乱沙门氏菌、多杀性巴氏杆菌、猪链球菌、单增李斯特菌、副伤寒沙门氏菌、蜡样芽孢杆菌等病原菌的敏感度、最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果:体外抑菌试验中补骨脂提取物对蜡样芽孢杆菌、单增李斯特菌、多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌有较强的抑菌作用,均为中度敏感,其MIC分别为3.9、25、50、125、250μg/ml,MBC分别为7.8、50、100、125、500μg/ml;对副伤寒沙门氏菌无任何抑制作用;对其他菌株的MIC、MBC均大于1 000μg/ml。结论:含60%补骨脂酚的补骨脂提取物对多种细菌性腹泻病原菌具有体外抑菌活性,补骨脂酚在其中可能发挥了主要作用。

关键词：补骨脂提取物细菌性腹泻补骨脂酚体外抑菌最低抑菌浓度最低杀菌浓度

博落回去甲乌药碱合成酶基因的克隆及表达分析

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分子植物育种 2017年第2期15卷 454-459页

作者：黄鹏刘金凤卿志星柳亦松唐其曾建国湖南农业大学园艺园林学院长沙410128 湖南农业大学兽用中药资源与中兽药创制国家地方联合工程研究中心长沙410128 湖南中医药大学药学院长沙410208 湖南农业大学动物医学院长沙410128

苄基异喹啉类生物碱(BIAs)是一类具有重要研究及药用价值的次生代谢产物,目前该类生物碱主要来自于植物。去甲乌药碱合成酶(NCS)参与BIAs的合成过程并发挥重要作用。为研究该基因在博落回BIAs合成过程中的作用,通过将其他物种的NCS基因... 详细信息

苄基异喹啉类生物碱(BIAs)是一类具有重要研究及药用价值的次生代谢产物,目前该类生物碱主要来自于植物。去甲乌药碱合成酶(NCS)参与BIAs的合成过程并发挥重要作用。为研究该基因在博落回BIAs合成过程中的作用,通过将其他物种的NCS基因序列在博落回转录组数据库中进行比对筛选到1个博落回NCS候选基因并对该序列进行生物信息学分析。经过克隆该序列中ORF区并用荧光定量PCR发现该基因的组织特异性表达规律与BIAs代谢含量相符。该研究对下一步分析该基因功能、阐明博落回NCS基因的合成机制和分子育种以及代谢工程开发新药源等方面具有重要意义。

关键词：博落回去甲乌药碱合成酶实时定量表达

基于生源合成途径代谢产物质证黄花菜中含秋水仙碱

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湖南农业大学学报（自然科学版） 2017年第5期43卷 485-489页

作者：刘秀斌汤敏娜黄嘉璐曾建国湖南农业大学园艺园林学院湖南长沙410128 湖南省植物功能成分利用协同创新中心湖南长沙410128 湖南农业大学食品科学技术学院湖南长沙410128

基于已解析的秋水仙中秋水仙碱生源合成途径,采用高效液相色谱-四级杆/飞行时间质谱联用(HPLC-Q/TOF MS)方法,检测黄花菜和秋水仙样本中秋水仙碱生源合成途径中的中间代谢产物(以下简称中间代谢物)。结果从黄花菜样本中未检出中间代谢... 详细信息

基于已解析的秋水仙中秋水仙碱生源合成途径,采用高效液相色谱-四级杆/飞行时间质谱联用(HPLC-Q/TOF MS)方法,检测黄花菜和秋水仙样本中秋水仙碱生源合成途径中的中间代谢产物(以下简称中间代谢物)。结果从黄花菜样本中未检出中间代谢物和终产物秋水仙碱,而在秋水仙样本中均能检出中间代谢物和秋水仙碱,其中的中间代谢物秋水仙胺(Cp5)、去乙酰基秋水仙碱(Cp6)和终产物秋水仙碱(Cp7)已进一步经对照品确证,因此认为食用黄花菜中不存在秋水仙碱的生源合成途径,也不含秋水仙碱。

关键词：黄花菜秋水仙碱生源合成途径中间代谢产物