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As_2O_3/TRAIL诱导的骨髓增生异常综合征原始细胞系MDS-L的生物学变化

中华血液学杂志 2004年第10期25卷 605-609页

作者：李晓浦权沈炜明 K Tohyama hj deeg 上海交通大学附属第六人民医院血液科 200233 交通大学附属第六人民医院药剂科 Department of elinical Pathology and Laboratory Medicine Kawasaki Medical School Clinical Reseasch Division Fred Hutchinson Carcer Research CenterUniversity of Washingto

目的　观察骨髓增生异常综合征 (MDS)髓系原始细胞系MDS L经不同剂量和不同时间的三氧化二砷 (As2 O3 )和肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (TRAIL)处理后的生物学变化。方法　体外培养的MDS L细胞经 9种不同浓度的药物及药物组合 (As2 O3 ... 详细信息

目的　观察骨髓增生异常综合征 (MDS)髓系原始细胞系MDS L经不同剂量和不同时间的三氧化二砷 (As2 O3 )和肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (TRAIL)处理后的生物学变化。方法　体外培养的MDS L细胞经 9种不同浓度的药物及药物组合 (As2 O3 :1,2 ,5mmol/L ;TRAIL :10 0 ,30 0 ,5 0 0 μg/L ,As2 O3 1mmol/L +TRAIL 10 0 μg/L ;As2 O3 2mmol/L +TRAIL 30 0 μg/L ;As2 O3 5mmol/L +TRAIL 5 0 0 μg/L)处理 ,在 2 4 ,4 8和 72h后收获细胞。对未经药物处理的细胞和药物处理后收获的细胞均进行流式细胞仪检测细胞凋亡 ;药物处理 2 4h后的细胞再经体外培养 18d后作形态学观察 ,同时以流式细胞仪检测CD34+ 细胞变化 ,检测药物的促分化作用 ;RT PCR检测P15 ink4b mRNA表达 ;甲基化特异性PCR(MethylationspecificPCR ,Msp)检测P15 ink4bDNA甲基化状态 ;DAB免疫酶标检测P15 ink4b蛋白水平表达。结果　不同的药物组合均可诱导细胞发生凋亡 ,药物处理 4 8h凋亡达高峰 (约 2 5 % ) ,72h时仍有约9%的细胞凋亡。药物处理 (尤其是As2 O3 +TRAIL)导致细胞明显的形态学分化 ,而TRAIL能显著降低CD34+ 细胞比率。未经处理的MDS L细胞基本不表达P15 ink4b,并伴有明显的DNA甲基化。药物处理后P15 ink4b表达增强。

关键词： As2O3 TRAIL MDS 表达原始细胞骨髓增生异常综合征诱导 DNA甲基化生物学分化

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临床血液学杂志 2006年第2期19卷 73-75页

作者：李晓应韶旭石军常春康沈炜明浦权 Tohyama Kaoru hj deeg 交通大学附属第六人民医院血液科上海200233 交通大学附属第六人民医院药剂科 Depart ment of Clinical Pathology and Laboratory Medicine Kawasaki Medical SchoolClinical Research Division Fred Hutchinson Cancer Research Center University of Washington

目的:观察骨髓增生异常综合征(MDS)髓系原始细胞系MDS-L及髓系白血病细胞系ML1经不同剂量和不同时间的三氧化二砷(As2O3)和肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)处理后的抑癌基因P15ink4b变化。并研究DNA甲基化转移酶DNMT1在P15ink4b变... 详细信息

目的:观察骨髓增生异常综合征(MDS)髓系原始细胞系MDS-L及髓系白血病细胞系ML1经不同剂量和不同时间的三氧化二砷(As2O3)和肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)处理后的抑癌基因P15ink4b变化。并研究DNA甲基化转移酶DNMT1在P15ink4b变化中的可能作用。方法:体外培养的MDS-L和ML1细胞经9种不同浓度的药物处理(As2O31 mmol/L;2 mmol/L;5 mmol/L;TRAIL 100μg/L;300μg/L;500μg/L;As2O31 mmol/L加Trail 100μg/L;As2O32 mmol/L加TRAIL 300μg/L;As2O35 mmol/L加TRAIL 500μg/L),在24 h、48 h和72 h后收获细胞。未经药物处理的细胞和药物处理后收获的细胞均提取总RNA,经半定量RT-PCR检测P15ink4bmRNA表达。对MDS-L细胞还同时检测DNMT1表达;正常人和5例MDS病例的P15ink4b和DNMT1检测作为对照。结果:未经处理的MDS-L和ML1细胞基本不表达P15ink4b,药物处理后P15ink4b表达增强;药物诱导MDS-L细胞表达P15ink4b的作用强于ML1细胞;未经处理的MDS-L和ML1细胞高表达DNMT1,药物处理24 h后DNMT1不同程度下降,但DNMT1表达状况与P15ink4b表达增强不显示相关性。结论:As2O3和(或)TRAIL处理能促进髓系恶性细胞抑癌基因P15ink4b表达,但并非主要通过抑制DNMT1功能而起作用。

关键词：骨髓增生异常综合征砷剂肿瘤坏死因子 P15 DNMT1

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