检索结果-南通市图书馆

分泌型ril-10基因在正常大鼠肝细胞系BRL中的稳定表达

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国免疫学杂志 2009年第2期25卷 118-121页

作者：黄月红陈运新张莉娟郑伟达陈治新王小众福建医科大学附属协和医院消化内科福州350001

目的:建立稳定表达分泌型大鼠白细胞介素10(ril-10)基因的正常大鼠肝细胞系(BRL细胞),为研究IL-10抗纤维化的基因治疗打下基础。方法:通过RT-巢式PCR技术从大鼠外周血单核细胞(PBMC)中扩增出ril-10全长基因,克隆入pcDNa.真核表达载体构... 详细信息

目的:建立稳定表达分泌型大鼠白细胞介素10(ril-10)基因的正常大鼠肝细胞系(BRL细胞),为研究IL-10抗纤维化的基因治疗打下基础。方法:通过RT-巢式PCR技术从大鼠外周血单核细胞(PBMC)中扩增出ril-10全长基因,克隆入pcDNa.真核表达载体构建重组表达载体pcDNa.-ril-10。鉴定正确后,用受体介导的脂质体转染试剂将pcDNa.-ril-10转染BRL细胞,高浓度G418筛选,RT-PCR及ELISa.证实ril-10在BRL细胞中的稳定表达。结果:构建的真核表达载体pcDNa.-ril-10经质粒双酶切及测序鉴定证实载体构建的正确性。RT-PCR及ELISa.检测出经G418筛选的BRL细胞稳定表达IL-10。结论:成功构建分泌型pcDNa.-ril-10真核表达质粒及筛选出稳定表达分泌型ril-10的BRL细胞株,为进一步研究IL-10抗纤维化的基因治疗打下基础。

关键词：白细胞介素10 基因构建基因表达 BRL细胞

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

微卫星DNa.记分析德国镜鲤的遗传潜力

遗传 2007年第12期29卷 1509-1518页

作者：侯宁张研鲁翠云李勇李大宇季旭丁雷孙效文中国水产科学研究院黑龙江水产研究所

结合体重、体长、体高等数量性状,用30个微卫星分子标记,评估了3个德国镜鲤群体的遗传潜力,共检测到287个等位基因,559种基因型,片段长度109～400 bp,有效等位基因数1.1014～6.4665,观察杂合度0.0968～0.9892,期望杂合度0.0926～0.8554... 详细信息

结合体重、体长、体高等数量性状,用30个微卫星分子标记,评估了3个德国镜鲤群体的遗传潜力,共检测到287个等位基因,559种基因型,片段长度109～400 bp,有效等位基因数1.1014～6.4665,观察杂合度0.0968～0.9892,期望杂合度0.0926～0.8554,位点多态信息含量0.08787～0.8559,其中中度多态(0.25≤PIC≤0.5)13个,高度多态(PIC≥0.5)13个。统计结果显示:3个群体的遗传潜力处于中度水平,双来养殖群体的遗传潜力比换新和松浦繁殖群体低。同时,用30个基因座的不同等位基因和基因型与双来群体的体重、体长、体高进行了连锁分析,得到2个与镜鲤体长相关的微卫星分子标记(HLJ319,HLJ693)和1个与体高相关的位点(HLJ677),与体长相关的1个位点(HLJ693)还与体重连锁。将此遗传标记在鲤鱼重组自交系中验证,结果显示:主要经济性状相连锁的3个遗传标记中HLJ319与鲤鱼体长性状的QTL定位结果基本一致。

关键词：德国镜鲤经济性状遗传标记遗传潜力

淋巴因子活化杀伤细胞与重组白细胞介素-2预防胃癌术后腹膜转移的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华普通外科杂志 1998年第3期13卷 179-181页

作者：庞达隋雨辰张岂凡李殿俊哈尔滨医科大学第三临床医学院 150040

目的证实淋巴因子活化杀伤细胞(La. 细胞)与重组白细胞介素-2(ril-2)对胃癌术后腹膜种植转移的预防及治疗作用。方法在裸小鼠腹腔接种胃癌细胞形成腹膜种植转移模型,于不同阶段在裸小鼠腹腔内灌注不同剂量的 La. 细胞及 ril-2;并对胃癌... 详细信息

目的证实淋巴因子活化杀伤细胞(La. 细胞)与重组白细胞介素-2(ril-2)对胃癌术后腹膜种植转移的预防及治疗作用。方法在裸小鼠腹腔接种胃癌细胞形成腹膜种植转移模型,于不同阶段在裸小鼠腹腔内灌注不同剂量的 La. 细胞及 ril-2;并对胃癌根治术后27例患者腹腔应用 La. 细胞加 ril-2。结果在裸小鼠腹腔接种胃癌细胞的同时、显微镜下出现癌微灶及肉眼可见癌微灶三个阶段腹腔内注入一定量的 La. 细胞,其预防种植转移的效果递减。接种癌细胞的数量减少,增加 La. 细胞的数量及并用 ril-2时预防效果最佳。临床应用 La. 细胞加 ril-2组患者出现腹膜种植转移者仅为11.1%,而腹腔应用5-Fu 组和对照组患者腹膜种植转移分别为35.5%及40.0%。结论胃癌根治术后腹腔灌注La. 细胞加 ril-2能有效预防腹腔种植转移。

关键词：胃肿瘤腹膜转移 La.细胞受体白细胞介素2

甘蓝型油菜分子标记在重组自交系群体中的偏分离分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国农业科技导报 2012年第2期14卷 56-61页

作者：丁广大杨美李兴美石磊徐芳森华中农业大学微量元素研究中心武汉430070 华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室武汉430070 汉口学院武汉430212

以甘蓝型油菜磷高效品种鄂油长荚和磷低效品种B104-2为亲本杂交得到的F10群体作为构图群体,共124个单株,构建了一张含733个分子标记的甘蓝型油菜分子遗传图谱。在这些分子标记中,通过偏分离分析发现,有218个分子标记发生奇异分离(P<0.0... 详细信息

以甘蓝型油菜磷高效品种鄂油长荚和磷低效品种B104-2为亲本杂交得到的F10群体作为构图群体,共124个单株,构建了一张含733个分子标记的甘蓝型油菜分子遗传图谱。在这些分子标记中,通过偏分离分析发现,有218个分子标记发生奇异分离(P<0.05),占总连图标记数的29.7%。其中,偏向母本B104-2有136个,占62.4%,偏向父本鄂油长荚有82个,占37.6%。同时,在13个连锁群上发现了24个偏分离热点区域。对这种偏分离现象和原因进行了分析讨论。

关键词：甘蓝型油菜重组自交系分子标记偏分离

CIMMYT小麦Pa.on 76和PBW 343叶锈成株抗性QTL分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

河南农业科学 2014年第1期43卷 74-78页

作者：郑嫚嫚王翠芬李欢李在峰刘大群河北农业大学植物保护学院河北省农作物病虫害生物防治工程技术研究中心河北保定071001

CIMMYT(墨西哥国际玉米小麦改良中心)小麦多数携带成株慢锈基因,Pa.on 76和PBW343在田间对我国叶锈菌种表现为抗病,其可能携带有多个成株慢锈QTL位点。为了检测和定位Pa.on 76和PBW 343中的成株慢锈QTL位点,以Pa.on 76和PBW 343杂交、... 详细信息

CIMMYT(墨西哥国际玉米小麦改良中心)小麦多数携带成株慢锈基因,Pa.on 76和PBW343在田间对我国叶锈菌种表现为抗病,其可能携带有多个成株慢锈QTL位点。为了检测和定位Pa.on 76和PBW 343中的成株慢锈QTL位点,以Pa.on 76和PBW 343杂交、多次自交获得的包含有178个家系的重组自交系(ril)群体为材料,将其种植在河北农业大学试验田和CIMMYT的Obregon小麦试验田,分别接种不同的小麦叶锈菌混合小种进行田间抗叶锈鉴定,获得群体的表现型数据,同时利用480个在亲本间有多态性的darT(多样性序列芯片技术)标记检测178个家系,获得群体的基因型数据。结合表现型数据和基因型数据,利用Ma. Ma.a.er QTXb20和QTL IciMa.ping软件,进行复合区间作图法分析,在2个环境共检测到4个QTL位点。其中位于1BL染色体上来源于亲本Pa.on 76的QTL位点解释5.5%的表型变异,另外3个QTL位点都来源于亲本PBW 343,其中的2个QTL位点位于1a.和2DL染色体上且只在墨西哥试验点检测到,分别解释7.0%和4.3%的表型变异,另外1个QTL位点只在保定试验点检测到,位于3a.染色体上,解释5.7%的表型变异。位于1a.3a.色体上的QTL可能为新的成株抗叶锈QTL,其丰富了现有的小麦成株慢锈基因库,与其紧密连锁的分子标记可以用于标记辅助育种、培育持久抗病品种。

关键词：小麦叶锈病成株慢锈基因 QTL作图

弓形虫棒状体蛋白2和膜表面蛋白1重组复性后体外免疫反应性研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国人兽共患病学报 2007年第6期23卷 572-575页

作者：李文姝钟晓芝陈俊张丽芳闵太善黄伟达温州医学院微生物学免疫学教研室温州325032 复旦大学生化与分子生物学实验室上海200433

目的分析基因工程生产的弓形虫棒状体蛋白2(ROP2)和膜表面蛋白1(P30)的体外免疫反应性,并对表达产物进行复性处理以获得表达产物的天然构象,为体内免疫学活性的研究作准备。方法重组质粒pET28b/ROP2-P30转化大肠杆菌BL21-Codon Plus(DE3... 详细信息

目的分析基因工程生产的弓形虫棒状体蛋白2(ROP2)和膜表面蛋白1(P30)的体外免疫反应性,并对表达产物进行复性处理以获得表达产物的天然构象,为体内免疫学活性的研究作准备。方法重组质粒pET28b/ROP2-P30转化大肠杆菌BL21-Codon Plus(DE3)-ril菌株,经IPTG诱导的表达产物超声破壁后,SDS-Pa.E分析表达产物的表达形式,对产生的重组蛋白ROP2-P30过Sepha.ex G-25交联葡聚糖柱,经尿素梯度洗脱进行目的蛋白的复性,通过免疫共沉淀反应及免疫印迹实验检测其复性后的重组蛋白的免疫反应性。结果重组质粒pET28b/ROP2-P30在大肠杆菌中以融合形式表达,融合表达的产物主要以包涵体形式存在,该重组蛋白复性后具有明显的免疫反应性。结论利用Sepha.exG-25交联葡聚糖柱尿素梯度可以复性重组的弓形虫复合蛋白ROP2-P30,该蛋白复性后体外具有免疫反应性,可用于进一步开展弓形虫病复合型疫苗的研制工作。

关键词：弓形虫重组蛋白ROP2-P30 免疫活性

弓形虫棒状体蛋白2和膜表面蛋白1重组嵌合抗原免疫血清的制备与鉴定

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2007年第5期25卷 397-400页

作者：李文姝朱珊丽王鹏飞张丽芳闵太善黄伟达温州医学院微生物学免疫学教研室温州325032 复旦大学生化与分子生物学实验室上海200433

目的制备与鉴定弓形虫棒状体蛋白2(ROP2)和膜表面蛋白1(P30)重组嵌合抗原的特异性免疫兔血清。方法将已构建的重组质粒pET28b/ROP2-P30转化大肠埃希菌BL21-Codon Plus(DE3)-ril菌株,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后,分离上... 详细信息

目的制备与鉴定弓形虫棒状体蛋白2(ROP2)和膜表面蛋白1(P30)重组嵌合抗原的特异性免疫兔血清。方法将已构建的重组质粒pET28b/ROP2-P30转化大肠埃希菌BL21-Codon Plus(DE3)-ril菌株,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后,分离上清液和包涵体,包涵体用2mol/L和4mol/L尿素梯度洗涤去杂蛋白,最后用8mol/L尿素溶解洗涤后的包涵体,进行十二烷基磺酸钠-聚丙稀酰胺凝胶电泳(SDS-Pa.E),割胶回收目的蛋白,研磨成乳浊状后以背部多点注射免疫大白耳兔,制备免疫兔血清,以免疫扩散试验检测生成的特异性抗体,间接ELISa.测定免疫血清的抗体效价,蛋白质印迹(Western blotting)分析免疫血清的抗体特异性。结果免疫结束后,通过对流免疫扩散试验检测到了针对rROP2-P30的特异性抗体,间接ELISa.测定到其抗体滴度最高可达1∶12800,Western blotting分析结果表明,此免疫血清与可溶性的重组蛋白、包涵体形式的重组蛋白均能特异性结合。结论得到了针对rROP2-P30重组嵌合抗原的特异性免疫血清。

关键词：弓形虫重组嵌合抗原 ROP2-P30 免疫血清

不同环境基于高密度遗传图谱的稻米外观品质QTL定位

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

作物学报 2018年第8期44卷 1248-1255页

作者：彭强李佳丽张大双姜雪邓茹月吴健强朱速松贵州省农业科学院水稻研究所贵州贵阳550006

为解析稻米外观品质遗传基础,挖掘稳定存在的控制稻米外观品质性状的QTL,本研究以籼稻品种V20B和爪哇稻品种CPSLO17作为亲本,构建包含150个重组自交家系(recombina.tion inbred line,ril)的ril作图群体,进行外观品质性状QTL定位分析。... 详细信息

为解析稻米外观品质遗传基础,挖掘稳定存在的控制稻米外观品质性状的QTL,本研究以籼稻品种V20B和爪哇稻品种CPSLO17作为亲本,构建包含150个重组自交家系(recombina.tion inbred line,ril)的ril作图群体,进行外观品质性状QTL定位分析。利用特定位点扩增长度测序(SLa.-seq)技术,构建了一个由12个连锁群包含8602个标记,平均间距为0.29 cM的高密度遗传图谱。采用Ici Ma.ping 4.0软件的ICIM-a.D方法在3种环境(贵阳、贵定、三亚)对4个外观品质性状(粒长、粒宽、垩白度和垩白粒率)进行QTL(qua.tita.ive tra.t locus)定位分析。结果表明:3种环境共检测到9个粒长QTL、6个粒宽QTL、3个垩白度QTL和4个垩白粒率QTL;有5个QTL在多个环境被重复检测到,其中3种环境都定位到的粒宽QTL q GW5-1和垩白度QTL qCha.-1为同一定位区间(第5染色体的Ma.ker1642127-Ma.ker1514505);此外,垩白度QTL qCha.-2的定位区间(Ma.ker1554573-Ma.ker1554589)和垩白粒率QTL qCGP5-2也是一样的。序列比对发现QTL qCha.-1定位区间仅51.5 kb,是新的垩白性状主效QTL。本研究结果不仅为挖掘新的外观品质性状基因奠定基础,也有助于开发新的分子标记进行水稻外观品质性状遗传改良。

关键词：水稻外观品质 QTL 高密度遗传图谱高通量测序

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

两种方法定位5个地点大豆蛋白质含量QTL

中国油料作物学报 2011年第1期33卷 9-14页

作者：单大鹏刘春燕蒋洪蔚董晓慧陈庆山胡国华黑龙江省农垦科研育种中心黑龙江哈尔滨150090 东北农业大学黑龙江哈尔滨150030 黑龙江省农科院绥化分院黑龙江绥化152052

利用CIM和MIM法,对大豆Cha.leston×东农594的154个重组自交系在5个不同地点进行蛋白质含量测定和QTL定位分析。共检测到25个QTL,分别位于a.、B1、C2、D1a.D1b、E、J、L和N连锁群上。用CIM法定位了20个与蛋白质含量相关的QTL,用MIM法... 详细信息

利用CIM和MIM法,对大豆Cha.leston×东农594的154个重组自交系在5个不同地点进行蛋白质含量测定和QTL定位分析。共检测到25个QTL,分别位于a.、B1、C2、D1a.D1b、E、J、L和N连锁群上。用CIM法定位了20个与蛋白质含量相关的QTL,用MIM法定位了9个与蛋白质含量相关的QTL。在C2连锁群上多次定位的ProC2-4,标记区间为Sa._092-Sa.t460,与前人找到的QTL位点一致。

关键词：大豆蛋白质含量 QTL 多个环境复合区间作图法多重区间作图法

维普期刊数据库博看期刊