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Flow cytometric analysis of DNA content for four commercially important crabs in China

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Acta Oceanologica Sinica 2016年第6期35卷 7-11页

作者： LIU Lei CUI zhaoxia SONG Chengwen LIU yuan HUI Min WANG Chunlin School of Marine Sciences Ningbo University Institute of Oceanology Chinese Academy of Sciences

The genome size（C-value） of an organism is referring to the DNA content of its non-replicated haploid chromosome complement,generally deduced from measuring somatic diploid *** presented genome size（C-value） data obtained by flow cytometry for four commercially important crabs（Portunus trituberculatus,Charybdis japonica,Scylla paramamosain,and Eriocheir sinensis） common in the coast of *** domesticus（2C=2.5 pg） was used as the internal *** results showed that the C-value for ***,***,***,and *** were（2.31±0.01） pg,（2.33±0.03） pg,（1.64±0.02） pg,and（2.29±0.03） pg,*** C-value of ***,*** and *** were reported for the first *** data represented by the four species indicated that they had lower DNA contents than average DNA values in crustaceans（（4.99±0.48） pg）,and three of the four values were very similar if not *** results provide useful data for future studies in the fields of biodiversity,species conservation,and phylogeny of these commercial *** will also be helpful in instructing the hybridization breeding program and estimating the cost of the whole genome sequencing project.

关键词： genome size flow cytometry crabs Portunidae Grapsidae

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一种可溶性微晶抗皱眼贴的安全及功效评价

香料香精化妆品 2024年第1期 147-152页

作者：朱媛媛刘芬黄远舒晓红李朝霞上海悦肤达生物科技有限公司上海201203 四川大学华西医院四川成都610041

运用光干断层扫描技术(OCT)观察可溶性微晶抗皱眼贴在眼下40 min左右完全溶解,同时敷贴2 h后的角质层形态和血流的结果中未见明显的损伤痕迹。在人体安全及功效测试中,试验组在使用4周、12周及停用4周后,皮肤皱纹显著减轻,皮肤弹性显著... 详细信息

运用光干断层扫描技术(OCT)观察可溶性微晶抗皱眼贴在眼下40 min左右完全溶解,同时敷贴2 h后的角质层形态和血流的结果中未见明显的损伤痕迹。在人体安全及功效测试中,试验组在使用4周、12周及停用4周后,皮肤皱纹显著减轻,皮肤弹性显著升高。试验组皱纹参数R_(max)的数据结果仅在使用12周显著优于对照组,其余皱纹参数及皮肤弹性的数据结果都显著优于对照组。2组受试者均未出现任何皮肤不良反应。测试的可溶性微晶抗皱眼贴在改善皱纹、提升皮肤弹性方面具有优势性的效果,同时相对也是安全的。

关键词：可溶性微晶贴机械损伤透明质酸眼下皱纹皮肤弹性

芍药苷通过调控PI3K/AKT/mTOR信号通路对盐敏感性高血压大鼠血压和血管内皮功能的影响

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中西医结合心脑血管病杂志 2024年第8期22卷 1403-1408,1432页

作者：周朝霞张骥赵媛王肖潇吕欢欢陕西省人民医院西安710068

目的:探讨芍药苷对盐敏感性高血压(SSH)大鼠血压和血管内皮功能的影响及其相关作用机制。方法:将50只Dahl盐敏感大鼠随机分为正常对照组(Control组)、高盐组(SSH组)、芍药苷组(PF组)、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物... 详细信息

目的:探讨芍药苷对盐敏感性高血压(SSH)大鼠血压和血管内皮功能的影响及其相关作用机制。方法:将50只Dahl盐敏感大鼠随机分为正常对照组(Control组)、高盐组(SSH组)、芍药苷组(PF组)、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路激活剂组(740Y-P组)、芍药苷+740Y-P组(PF+740Y-P组),每组10只。各组大鼠进行4周给药干预。采用动物无创血压仪测量大鼠尾动脉收缩压、舒张压;酶联免疫吸附法(ELISA)测定大鼠血清内皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)、血栓素B2(TXB2)水平;苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠主动脉病理变化;免疫组织化学染色检测大鼠主动脉组织中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达;蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测大鼠主动脉组织中PI3K/AKT/mTOR信号通路蛋白表达。结果:与Control组比较,SSH组和740Y-P组大鼠主动脉血管内皮不完整,部分血管内皮脱落,且内膜明显增厚、外膜有大量沉积物;PF组大鼠主动脉血管病理损伤较SSH组明显减轻;PF+740Y-P组大鼠主动脉血管病理损伤较740Y-P组明显减轻,但较PF组明显加重。与Control组比较,SSH组大鼠收缩压、舒张压、血清ET-1、TXB2水平均升高,血清NO水平降低(P<0.05);主动脉组织中eNOS表达水平降低,磷酸化(p)-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR比值均升高(P<0.05)。与SSH组比较,PF组大鼠收缩压、舒张压、血清ET-1、TXB2水平均降低,血清NO水平升高(P<0.05);主动脉组织中eNOS表达水平升高,p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR比值均降低(P<0.05)。与PF组比较,PF+740Y-P组大鼠收缩压、舒张压、血清ET-1、TXB2水平均升高,血清NO水平降低(P<0.05);主动脉组织中eNOS表达水平降低,p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR比值均升高(P<0.05)。与740Y-P组比较,PF+740Y-P组大鼠收缩压、舒张压、血清ET-1、TXB2水平均降低,血清NO水平升高(P<0.05);主动脉组织中eNOS表达水平升高,p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR比值均降低(P<0.05)。结论:芍药苷可以有效降低SSH大鼠血压,并改善大鼠血管内皮功能,其作用机制可能与抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路激活有关。

关键词：盐敏感性高血压芍药苷血压血管内皮功能磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路实验研究

氯吡苯脲对台农1号芒果果实糖分及相关酶活性的影响

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山西农业科学 2024年第5期52卷 124-129页

作者：袁辉林郭利军郭彬肖朝霞刘金霞海南省农民科技教育培训中心海南海口571100 海南省农业科学院热带果树研究所海南海口571100

为明确喷施不同质量浓度氯吡苯脲(CPPU)对芒果果实糖分代谢和相关酶活性的影响,探索CPPU对芒果蔗糖代谢的影响机制,以台农1号芒果植株为材料,分别于谢花后7、14 d喷施64 mg/L和256 mg/L的CPPU,以喷施清水为对照(CK),于成熟后测定果实淀... 详细信息

为明确喷施不同质量浓度氯吡苯脲(CPPU)对芒果果实糖分代谢和相关酶活性的影响,探索CPPU对芒果蔗糖代谢的影响机制,以台农1号芒果植株为材料,分别于谢花后7、14 d喷施64 mg/L和256 mg/L的CPPU,以喷施清水为对照(CK),于成熟后测定果实淀粉、蔗糖、葡萄糖和果糖含量以及酸性转化酶(AI)、蔗糖磷酸合成酶(SPS)和腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(AGP)、结合态淀粉合成酶(GBSS)、淀粉分支酶(SBE)、可溶性淀粉合成酶(SSS)、总淀粉酶的活性,并分析果实糖组分与酶活性的相关性。结果表明,与CK相比,64 mg/L的CPPU处理对芒果果实的蔗糖、果糖和葡萄糖含量无显著影响;而256 mg/LCPPU处理则显著降低果糖和蔗糖含量,并显著提高淀粉含量。2个CPPU处理均显著提高芒果AGP的活性,同时降低SPS和AI的活性,并且256 mg/L的CPPU处理达到显著水平。果实糖组分与酶活性相关分析显示,淀粉含量与AGP活性呈正相关,蔗糖和果糖含量与SPS活性呈显著正相关,且蔗糖和果糖含量间呈极显著正相关;高质量浓度256 mg/L的CPPU处理降低果实糖组分含量的机理可能是通过降低SPS活性、降低蔗糖含量,同时通过提高AGP活性、增加果实淀粉含量,从而延缓果实淀粉向糖分转化进程。

关键词：台农1号芒果 CPPU 淀粉糖分代谢酶活性

禽腺病毒血清2型分离鉴定及感染SPF鸡发病模型建立

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广东农业科学 2023年第7期50卷 146-155,F0002页

作者：胡鑫宇孙敏华曾庆航谢梓民袁朝霞廖明仲恺农业工程学院动物科技学院广东广州510225 广东省农业科学院动物卫生研究所/广东省畜禽疫病防治研究重点实验室/农业农村部禽流感等家禽重大疾病防控重点实验室广东广州510640

【目的】建立禽腺病毒血清2型(FAdV-2)的发病模型,为评价FAdV-2的免疫原性和疫苗有效性提供参考。【方法】对疑似禽腺病毒感染的样品进行分离鉴定,对分离株Fiber基因和Hexon基因序列进行遗传演化分析,使用DNAStar和MEGA7.0软件对分离株... 详细信息

【目的】建立禽腺病毒血清2型(FAdV-2)的发病模型,为评价FAdV-2的免疫原性和疫苗有效性提供参考。【方法】对疑似禽腺病毒感染的样品进行分离鉴定,对分离株Fiber基因和Hexon基因序列进行遗传演化分析,使用DNAStar和MEGA7.0软件对分离株和其他FAdV代表株进行核苷酸和氨基酸同源性比较。在确定分离到的病毒为FAdV-2后,通过动物实验分析分离株在不同感染途径和不同感染剂量下对6周龄SPF鸡的致病性,筛选出建立FAdV-2血清型发病模型的最佳感染方式和最佳感染剂量。【结果】从发病鸡组织样品中成功分离得到1株FAdV-2血清型毒株,命名为KM株。遗传演化分析表明,KM株和GX01株同属于禽腺病毒Ⅰ群D种中的FAdV-2血清型;同源性分析结果显示,KM株和GX01株的Fiber基因和Hexon基因核苷酸序列同源性分别为98.9%和99.3%,推导出氨基酸同源性分别为98.9%和98.8%。KM株静脉注射感染途径的致病性高于肌肉注射,试验鸡出现明显的心包积液-肝炎综合征;KM株发病模型的感染途径为静脉注射,感染剂量为108.0 TCID50,感染后鸡群死亡率为50%,剖检病死鸡可见明显的病理变化,鸡群感染后1 d泄殖腔排毒阳性。【结论】首次验证了FAdV-2能引发心包积液-肝炎综合征,建立了FAdV-2感染SPF鸡的发病模型,可为药物研发和疫苗评价提供一定参考,将有效预防和减少FAdV-2传播。

关键词：禽腺病毒动物模型分离鉴定禽腺病毒血清2型(FAd V-2) 致病性心包积液-肝炎综合征

广东地区H9N2亚型禽流感病毒HA和NA基因生物学特征分析

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广东农业科学 2023年第5期50卷 103-111页

作者：曾庆航刘杨孙敏华胡鑫宇谢梓民张敏霞袁朝霞廖明仲恺农业工程学院动物科技学院广东广州510225 广东省农业科学院动物卫生研究所/广东省畜禽疫病防治研究重点实验室/农业农村部禽流感等家禽重大疾病防控重点实验室广东广州510640

【目的】监测广东地区H9N2亚型禽流感病毒(Avian Influenza Virus,AIV)的遗传变异和分子进化趋势,为我国H9N2亚型AIV的防控提供参考。【方法】对2022年广东地区3株H9N2亚型AIV的HA和NA基因进行扩增、克隆、测序,使用DNAStar、PhyloSuit... 详细信息

【目的】监测广东地区H9N2亚型禽流感病毒(Avian Influenza Virus,AIV)的遗传变异和分子进化趋势,为我国H9N2亚型AIV的防控提供参考。【方法】对2022年广东地区3株H9N2亚型AIV的HA和NA基因进行扩增、克隆、测序,使用DNAStar、PhyloSuite软件进行序列拼接和比对,再运用MEGA、Megalign、NetNGlyc 1.0Server等软件,对其核苷酸和氨基酸序列进行遗传进化、核苷酸同源性分析,以及受体结合、蛋白活性、耐药性和糖基化等关键位点分析。【结果】系统发育树和核苷酸同源性分析结果显示,3株分离株的HA和NA基因分别属于h9.***.2.5分支和1分支,与早期毒株的核苷酸同源性分别为81.6%~91.7%和88.2%~91.2%,分别命名为h9.***.2.5c分支和1.2分支;核苷酸和氨基酸序列分析发现,HA裂解位点为PSRSSR↓GLF,受体结合位点产生I155T、H183N、A190T/V、T212I、Q226L、Q227M突变,糖基化位点产生218N非糖基化和新增313N糖基化突变;NA茎部缺失187~195位9个核苷酸(ACAGAGATA),导致缺失63~65位3个氨基酸(TEI);NA红细胞结合位点产生K/E/S368N、D369N突变,与NA蛋白活性,耐药性的相关位点E119、D151、R152、R224、E276、R292、R371均未发生突变。【结论】2022年广东地区分离的3株H9N2亚型AIV已经进化成新的亚群,部分突变可能增强了对哺乳动物的适应性,且其抗原性发生改变,但尚未获得对奥司他韦和扎那米韦等抗流感病毒药物的耐药性。

关键词： H9N2 禽流感 HA基因 NA基因遗传进化生物学特征

Modeling CADASIL vascular pathologies with patient-derived induced pluripotent stem cells

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Protein & Cell 2019年第4期10卷 249-271页

作者： Chen Ling Zunpeng Liu Moshi Song Weiqi Zhang Si Wang Xiaoqian Liu Shuai Ma Shuhui Sun Lina Fu Qun Chu Juan Carlos Izpisua Belmonte zhaoxia Wang Jing Qu Yun yuan Guang-Hui Liu Advanced Innovation Center for Human Brain Protection National Clinical Research Center for Geriatric DisordersXuanwu Hospital Capital Medical UniversityBeijing 100053China Beijing Institute for Brain Disorders Capital Medical UniversityBeijing 100069China Department of Neurology Peking University First HospitalBeijing 100034China National Laboratory of Biomacromolecules CAS Center for Excellenee in BiomacromoleculesInstitute of BiophysicsChinese Academy of SciencesBeijing 100101China State Key Laboratory of Stem Cell and Reproductive Biology Institute of ZoologyChinese Academy of SciencesBeijing 100101China State Key Laboratory of Membrane Biology Institute of ZoologyChinese Academy of SciencesBeijing 100101China University of Chinese Academy of Sciences Beijing 100049China Gene Expression Laboratory Salk Institute for Biological Studies10010 North Torrey Pines RoadLa JollaCA 92037USA Institute for Stem cell and Regeneration CASBeijing 100101China Key Laboratory of Regenerative Medicine of Ministry of Education Institute of Aging and Regenerative MedicineJinan UniversityGuangzhou 510632China

Cerebral autosomal dominant arteriopathy with subcortical infarcts and leukoencephalopathy(CADASIL)is a rare hereditary cerebrovascular disease caused by a NOTCH3 ***,the underlying cellular and molecular mechanisms remain ***,we generated non-integrative induced pluripotent stem cells(iPSCs)from fibroblasts of a CADASIL patient harboring a heterozygous NOTCH3 mutation(c.3226C>T,p.R1076C).Vascular smooth muscle cells(VSMCs)differentiated from CADASIL-specific iPSCs showed gene expression changes associated with disease phenotypes,including activation of the NOTCH and NF-kB signaling pathway,cytoskeleton disorganization,and excessive cell *** comparison,these abnormalities were not observed in vascular endothelial cells(VECs)derived from the patients ***,the abnormal upregulation of NF-kB target genes in CADASIL VSMCs was diminished by a NOTCH pathway inhibitor,providing a potential therapeutic strategy for ***,using this iPSCbased disease model,our study identified clues for studying the pathogenic mechanisms of CADASIL and developing treatment strategies for this disease.

关键词： CADASIL iPSC NOTCH NF-kB vascular smooth muscle

常染色体显性遗传脑动脉病伴皮质下梗死及白质脑病

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中华神经科杂志 2021年第7期54卷 705-711页

作者：王朝霞袁云北京大学第一医院神经内科 100034

常染色体显性遗传脑动脉病伴皮质下梗死及白质脑病(CADASIL)是由NOTCH3基因突变导致的遗传性脑小血管病。主要临床表现为在疾病不同阶段出现偏头痛、缺血性脑卒中、进行性认知功能障碍、精神心理异常等,头颅磁共振成像可见多发腔隙性脑... 详细信息

常染色体显性遗传脑动脉病伴皮质下梗死及白质脑病(CADASIL)是由NOTCH3基因突变导致的遗传性脑小血管病。主要临床表现为在疾病不同阶段出现偏头痛、缺血性脑卒中、进行性认知功能障碍、精神心理异常等,头颅磁共振成像可见多发腔隙性脑梗死、脑白质T2高信号及脑微出血。CADASIL的诊断“金标准”是病理检查发现微小动脉平滑肌细胞表面出现嗜锇性颗粒物质和(或)基因检查发现NOTCH3基因致病变异。本文重点介绍CADASIL的发病机制、临床表现、辅助检查、诊断和鉴别诊断以及疾病管理。

关键词：常染色体显性遗传脑动脉病伴皮质下梗死及白质脑病 NOTCH3基因脑小血管病

CRISPR/Cas9-mediated targeted gene correction in amyotrophic lateral sclerosis patient iPSCs

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Protein & Cell 2017年第5期8卷 365-378页

作者： Lixia Wang Fei Yi Lina Fu Jiping Yang Si Wang zhaoxia Wang Keiichiro Suzuki Liang Sun Xiuling Xu Yang Yu Jie Qiao Juan Carlos Izpisua Belmonte Ze Yang Yun yuan Jing Qu Guang-Hui Liu National Laboratory of Biomacromolecules CAS Center for Excellence in Biomacromolecules Institute of Biophysics Chinese Academy of Sciences Beijing 100101 China State Key Laboratory of Stem Cell and Reproductive Biology Institute of Zoology Chinese Academy of Sciences Beijing 100101 China University of Chinese Academy of Sciences Beijing 100049 China Department of Molecular and Cellular Physiology Stanford University School of Medicine Stanford CA 94305 USA Department of Neurology Peking University First Hospital Beijing 100034 China Gene Expression Laboratory Salk Institute for Biological Studies 10010 North Torrey Pines Road La Jolla CA 92037 USA Universidad Catolica San Antonio de Murcia (UCAM) Campus de los Jeronimos N 135 Guadalupe 30107 Murcia Spain Department of Gynecology and Obstetrics Peking University Third Hospital Beijing 100191 China Beijing Hospital of the Ministry of Health Beijing 100730 China Key Laboratory of Regenerative Medicine of Ministry of Education Institute of Aging and Regenerative Medicine Jinan University Guangzhou 510632 China Beijing Institute for Brain Disorders Capital Medical University Beijing 100069 China

Amyotrophic lateral sclerosis （ALS） is a complex neu- rodegenerative disease with cellular and molecular mechanisms yet to be fully described. Mutations in a number of genes including SOD1 and FUS are associated with familial ALS. Here we report the generation of induced pluripotent stem cells （iPSCs） from fibroblasts of familial ALS patients bearing SOD1＋1A27~c and FUS＋/GISe6A mutations, respectively. We further gener- ated gene corrected ALS iPSCs using CRISPR/Cas9 system. Genome-wide RNA sequencing （RNA-seq） analysis of motor neurons derived from SOD1＋~A272c and corrected iPSCs revealed 899 aberrant transcripts. Our work may shed light on discovery of early biomarkers and pathways dysregulated in ALS, as well as provide a basis for novel therapeutic strategies to treat ALS.

关键词： ALS CRISPR/Cas9 gene correction,iPSC disease modeling