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造血干细胞移植治疗重型先天性中性粒细胞缺乏症的临床研究

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中国小儿血液与肿瘤杂志 2013年第6期18卷 250-254页

作者：吴南海栾佐唐湘凤王凯鲍亮杜宏中国人民解放军海军总医院儿科北京100048

目的探讨造血干细胞移植对重型先天性中性粒细胞缺乏症(SCN)的治疗效果。方法 1例2岁7个月SCN患儿,经粒细胞集落刺激因子(G-CSF)治疗7个月无效后行HLA不全相合无关脐血移植,预处理采用BU/CY+Flud方案[马利兰(BU)1.2 mg/kg·次,每6 h一次... 详细信息

目的探讨造血干细胞移植对重型先天性中性粒细胞缺乏症(SCN)的治疗效果。方法 1例2岁7个月SCN患儿,经粒细胞集落刺激因子(G-CSF)治疗7个月无效后行HLA不全相合无关脐血移植,预处理采用BU/CY+Flud方案[马利兰(BU)1.2 mg/kg·次,每6 h一次,连用4 d;环磷酰胺(CY)60 mg/(kg·d),连用2 d;氟达拉滨(Flud)30 mg/(m2·d),连用4 d。输入脐血有核细胞11.24×107/kg,CD34+细胞6.41×105/kg。移植物抗宿主病(GVHD)的预防采用抗胸腺球蛋白+环胞菌素A+吗替麦考酚酯。移植后应用G-CSF加速造血重建。结果 +17 d粒细胞植入,+21 d血小板植入,+20 d取患儿骨髓经STR基因位点检测证实为完全供者型嵌合状态,此后嵌合稳定。+24 d出现Ⅱ度GVHD;无肝静脉闭塞病、间质性肺炎、出血性膀胱炎等并发症,未出现慢性GVHD。随访14个月,前囟闭合,身高增加3 cm,复查颅骨及膝关节X线片,骨质疏松明显好转,免疫球蛋白及补体正常,T细胞、B细胞亚群及NK细胞基本正常。结论本例为我国首例采用造血干细胞移植治疗SCN成功,为今后SCN的治疗积累了初步的经验。

关键词：造血干细胞移植脐血中性粒细胞缺乏症,先天性,重型

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人神经干细胞异种移植示踪检测分析

中华检验医学杂志 2006年第3期29卷 254-257页

作者：尹国才栾佐胡晓红屈素青张晓鸥卜笑松钱阳明海军总医院儿科北京100037

目的摸索人胎脑神经干细胞(hNSC)在动物移植研究中理想的示踪检测方法,探讨hNSC移植后的命运,为新生儿缺氧缺血性脑损伤的干细胞治疗提供依据。方法用添加表皮生长因子+碱性成纤维细胞生长因子+白血病抑制因子的N2培养基从流产的人胚胎... 详细信息

目的摸索人胎脑神经干细胞(hNSC)在动物移植研究中理想的示踪检测方法,探讨hNSC移植后的命运,为新生儿缺氧缺血性脑损伤的干细胞治疗提供依据。方法用添加表皮生长因子+碱性成纤维细胞生长因子+白血病抑制因子的N2培养基从流产的人胚胎前脑组织培养出神经干细胞球,通过免疫荧光技术检测神经干细胞巢蛋白(Nestin)抗原标志和细胞分化潜能以鉴定其干细胞属性。取体外培养6d的神经干细胞集落,进行PKH26标记后培养和分化示踪。将培养14d的神经球移植到缺氧缺血性脑病的新生鼠侧脑室,12只鼠分为PKH26标记示踪组(4只)、免疫反应检测组(4只)和对照组(4只),于移植后第4、7、14天杀鼠取脑,全脑切片,行抗人细胞核抗体(抗hNuc)和抗人神经丝抗体(AntihNF)的特异性免疫反应检测及PKH26的荧光观察。结果体外培养获得典型人胎脑神经干细胞球。PKH26能高效标记神经干细胞,标记的阳性率>95%,标记分子可伴随干细胞增殖、迁移和分化,但不进入细胞突起,仅位于胞体。AntihNuc免疫荧光检测和PKH26示踪结果显示:植入脑室的hNSC,4d即可迁移到嗅球、额叶皮层内侧中央前区、海马、枕叶皮层等部位的颗粒层内,小脑蒲氏细胞层有单层标记细胞排列,中脑区域也有广泛的标记细胞分布,损伤灶区有明显多的移植细胞分布。抗hNF检测结果显示:在大脑皮层的颗粒层有阳性反应细胞,彼此间有连接发生。结论可用PKH26对体外培养获得的hNSC进行标记示踪。AntihNuc可用于检测移植细胞在受体鼠脑内的分布,抗hNF可用于检测移植细胞的成神经元分化及神经元间发生的连接。hNSC经脑室途径移植缺氧缺血性损伤的新生大鼠脑,可快速迁移到全脑多处远距离部位,并构建神经元连接,损伤灶区对移植细胞有牵引作用。

关键词：人胎脑神经干细胞异种移植

活性因子对大鼠创伤性脑损伤后内源性神经干细胞增殖和分化的影响

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中华创伤杂志 2016年第9期32卷 843-847页

作者：任登鹏李晓红涂悦孙洪涛王景景王丽娜陈翀栾佐张赛天津医科大学研究生院 300070 武警后勤学院附属医院脑科医院脑创伤与神经疾病研究所海军总医院儿科

目的探讨活性因子对大鼠创伤性脑损伤（TBI）后海马齿状回颗粒下区神经干细胞（NSCs）增殖和分化的影响。方法将SD大鼠按随机数字表法分为假手术组（只暴露硬脑膜，不接受液压冲击）、活性因子组（假手术大鼠给予活性因子治疗）、TBI组... 详细信息

目的探讨活性因子对大鼠创伤性脑损伤（TBI）后海马齿状回颗粒下区神经干细胞（NSCs）增殖和分化的影响。方法将SD大鼠按随机数字表法分为假手术组（只暴露硬脑膜，不接受液压冲击）、活性因子组（假手术大鼠给予活性因子治疗）、TBI组[采用液压冲击仪（2．5atm）建立大鼠单侧重型TBI模型]和TBI＋活性因子组（TBI后即刻对侧脑室穿刺并注射活性因子治疗），每组10只大鼠。TBI后7d，40g／L多聚甲醛灌流取材切片或断头取损伤侧海马匀浆，采用免疫荧光染色法检测海马齿状回颗粒下区溴化脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）和神经元核抗原（NeuN）的表达，选用连续5张切片进行阳性细胞计数，采用Westernblot检测海马区核转录因子-KB（NF—KB）p65蛋白的表达量。结果与假手术组比较，TBI组伤后7d海马齿状回颗粒下区BrdU＋和NeuN＋细胞数显著增加（P〈0．05）。与TBI组比较，TBI＋活性因子组BrdU＋和NeuN＋细胞明显增加[（207．7±22．5）：（115．9±13．3）]（P〈0．05）。而假手术组和活性因子组BrdU＋和NeuN＋细胞数差异无统计学意义（P〉0．05）。与假手术组比较，TBI组伤后7d海马区NF—KBp65表达增强，而TBI＋活性因子组减弱[（0．81±0．09）：（1．46±0．13）]（P〈0．05），但假手术组和活性因子组海马区NF—KBp65表达无明显变化。结论活性因子可促进大鼠TBI后海马齿状回颗粒下区神经干细胞的增殖和神经元分化，可能与激发神经元生成及降低TBI后海马区NF—KBp65的表达有关。

关键词：颅脑创伤神经干细胞活性因子

神经干细胞治疗甲基丙二酸血症继发脑损伤4例临床观察

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转化医学杂志 2014年第4期3卷 212-215页

作者：杨辉屈素清刘卫鹏杜侃杨印祥栾佐海军总医院儿科北京100048

目的观察神经干细胞治疗甲基丙二酸血症继发脑损伤儿童的临床疗效。方法 2008年4月—2010年10月在我院治疗的甲基丙二酸血症继发脑损伤儿童4例,所有患儿均在磁共振头皮定位下行侧脑室穿刺神经干细胞移植。移植后1个月对患儿综合评估,并... 详细信息

目的观察神经干细胞治疗甲基丙二酸血症继发脑损伤儿童的临床疗效。方法 2008年4月—2010年10月在我院治疗的甲基丙二酸血症继发脑损伤儿童4例,所有患儿均在磁共振头皮定位下行侧脑室穿刺神经干细胞移植。移植后1个月对患儿综合评估,并随访至移植后6个月,对患儿行Gesell发育量表评估。结果 4例中,3例在移植后1个月内出现大运动、精细动作、视听反应及智力反应等方面的进步;跟踪随访至移植后6个月,3例均持续出现不同程度进步。细胞治疗均未出现不可逆不良事件。结论神经干细胞治疗安全可靠,能在短时间改善甲基丙二酸血症继发脑损伤患儿的运动和智力表现,并能持续至移植后6个月。在维持基础对因治疗的前提下,为甲基丙二酸血症继发脑损伤患儿提供了新的治疗方法,但远期疗效有待进一步随访观察。

关键词：甲基丙二酸血症脑损伤细胞移植神经干细胞

儿童造血干细胞移植后中枢神经系统并发症的临床分析

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中国小儿血液与肿瘤杂志 2014年第4期19卷 192-196页

作者：杨辉栾佐唐湘凤吴南海章波屈素清北京海军总医院儿科 100048

目的探讨儿童造血干细胞移植(HSCT)后中枢神经系统(CNS)并发症的发病情况、病因、临床特点、高危因素及预后,提高CNS并发症的诊断和治疗水平,改善患儿的生存质量。方法回顾性分析113例行HSCT治疗的患儿发生癫痫、高血压脑病、可逆性后... 详细信息

目的探讨儿童造血干细胞移植(HSCT)后中枢神经系统(CNS)并发症的发病情况、病因、临床特点、高危因素及预后,提高CNS并发症的诊断和治疗水平,改善患儿的生存质量。方法回顾性分析113例行HSCT治疗的患儿发生癫痫、高血压脑病、可逆性后部白质脑病综合征和移植相关的血栓性微血管病等HSCT后CNS并发症的诱因、发病特点及预后。结果 113例行HSCT治疗患儿中共7例(6.2%)发生了CNS并发症,其中1例死亡。7例患儿中,6例为HLA不全相合,1例患儿为HLA全相合。7例患儿在预处理时均应用ATG。结论 VHLA配型不全相合可能是HSCT后发生CNS并发症的高危因素。早期发现、早期诊断并积极治疗CNS并发症,可降低其病死率及后遗症的发生,有效改善患儿的生存质量。

关键词：造血干细胞移植儿童中枢神经系统并发症

供冷轧低碳钢氧化铁皮形成因素分析及控制措施

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金属世界 2024年第5期 68-73页

作者：左远鸿栾崧琳由宇鞍钢集团本钢板材股份有限公司热连轧厂辽宁本溪117000

供冷轧低碳类产品表面氧化铁皮缺陷是热轧生产过程中常见且重要的问题之一,也是困扰热轧工序的第一大质量难题。本文对供冷轧低碳类产品氧化铁皮成因进行深入探讨,结合本钢2300热轧机组实际情况,通过优化轧制温度、高压水除鳞压力、水... 详细信息

供冷轧低碳类产品表面氧化铁皮缺陷是热轧生产过程中常见且重要的问题之一,也是困扰热轧工序的第一大质量难题。本文对供冷轧低碳类产品氧化铁皮成因进行深入探讨,结合本钢2300热轧机组实际情况,通过优化轧制温度、高压水除鳞压力、水嘴布置、冷轧拉矫延伸率等一系列关键参数,有效降低了供冷轧低碳钢表面氧化铁皮缺陷的发生概率。

关键词：氧化铁皮高压水除鳞轧制温度热轧机组拉矫延伸率低碳钢冷轧热轧生产过程

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人神经干细胞移植治疗重度新生儿缺氧缺血性脑病一例

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中华儿科杂志 2005年第8期43卷 580-583页

作者：栾佐尹国才胡晓红屈素清吴南海严凤清钱阳明金慧玉龚晓军解放军海军总医院儿科北京100037

目的探讨人神经干细胞移植方法治疗重度新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)的可行性。方法一例出生75天的重度HIE后遗症患儿,智力运动发育严重滞后,肌张力异常,磁共振图像显示脑实质多发软化灶和萎缩。取孕11周人胚胎前脑细胞,经体外培养扩增为... 详细信息

目的探讨人神经干细胞移植方法治疗重度新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)的可行性。方法一例出生75天的重度HIE后遗症患儿,智力运动发育严重滞后,肌张力异常,磁共振图像显示脑实质多发软化灶和萎缩。取孕11周人胚胎前脑细胞,经体外培养扩增为人神经干细胞(neuralstemcells,NSCS),并经患儿脑室穿刺注入。结果移植28天后患儿不仅肌张力显著改善,智力运动发育迅速追赶、接近正常同龄水平。PET显示顶颞叶放射性增加,细胞代谢明显增强,提示植入的细胞存活。结论本例人胚胎来源NSCS移植治疗重度新生儿HIE后遗症,近期临床疗效显著,远期疗效有待进一步观察。

关键词：婴儿,新生缺氧缺血,脑干细胞移植重度新生儿缺氧缺血性脑病神经干细胞移植治疗人神经干细胞肌张力异常体外培养扩增新生儿HIE 运动发育

脂肪干细胞旁分泌提取物对新生大鼠脑白质损伤的影响

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中国新生儿科杂志 2017年第2期32卷 144-149页

作者：黄超杨印祥汪兆艳王倩陈敬国栾佐海军总医院儿科北京100048 中山大学附属中山市人民医院新生儿科中山大学

目的探讨脂肪干细胞旁分泌提取物对新生大鼠脑白质损伤的影响,比较小脑延髓池注射途径与颈总静脉注射途径的疗效.方法选择3日龄新生SD大鼠73只制作早产儿脑白质损伤模型,建模后24 h将大鼠随机分为实验组46只和对照组27只.实验组再随... 详细信息

目的探讨脂肪干细胞旁分泌提取物对新生大鼠脑白质损伤的影响,比较小脑延髓池注射途径与颈总静脉注射途径的疗效.方法选择3日龄新生SD大鼠73只制作早产儿脑白质损伤模型,建模后24 h将大鼠随机分为实验组46只和对照组27只.实验组再随机分为脑室组和静脉组各23只,分别从小脑延髓池和颈总静脉注射脂肪干细胞旁分泌提取物;对照组再随机分为脑室对照组15只和静脉对照组12只,分别从小脑延髓池和颈总静脉注射等量生理盐水.注射ld后脑室组和静脉组各随机选择3只大鼠行脑组织冰冻切片生物素荧光染色观察提取物分布;3d后脑室组、静脉组和脑室对照组各随机选择3只大鼠行苏木精-伊红（HE）染色观察脑组织病理形态改变,7d后4个亚组各随机选择7只大鼠检测髓鞘碱性蛋白（MBP）表达;28 d后剩余大鼠行神经行为学实验（2个对照组合并分析）.实验过程中如有大鼠死亡,补足各组大鼠只数.结果建模后24 h内无大鼠死亡,分组后的实验过程中实验组死亡3只,对照组死亡4只,均予以补充.实验组两种注射途径下均可见脂肪干细胞旁分泌提取物迁移至脑部病灶区域,且小脑延髓池注射途径脂肪干细胞旁分泌提取物入脑数量多于颈总静脉注射途径.HE染色结果显示,脑室对照组脑白质区域细胞损伤严重,发生大范围梗死,可见微小梗死灶;实验组损伤较轻,其中脑室组较静脉组胼胝体结构更完整.脑室组和静脉组MBP半定量评分分别低于脑室对照组和静脉对照组[（0.7±0.3）分比（3.4±0.4）分,（1.7±0.3）分比（3.3±0.3）分],脑室组低于静脉组,差异有统计学意义（P＜0.05）.脑室组和静脉组悬吊实验和旷场实验评分均高于对照组[（2.9±0.2）分、（1.9±0.2）分比（1.3±0.1）分,（11.6±1.1）分、（10.4±1.1）分比（9.0±1.3）分],脑室组高于静脉组,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论脂肪干细胞旁分泌提取物能显著改善脑白质损伤早期和远期预后,且小脑延髓池注射途径优于颈总静脉注射途径.

关键词：脂肪因子类干细胞脑白质损伤大鼠

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幼年粒单细胞白血病造血干细胞移植疗效初探

中国小儿血液与肿瘤杂志 2010年第3期15卷 108-111页

作者：吴南海栾佐唐湘凤徐世侠龚小军王凯海军总医院儿科北京100048

目的探讨造血干细胞移植治疗幼年粒单细胞白血病(JMML)的疗效。方法 5例JMML患儿接受无关供者脐血造血干细胞移植治疗。预处理均采用Bu/Cy+Mel+ATG方案:马利兰(0.8～1.0)mg/kg,每6小时1次共用16次(-8d～-5d);环磷酰胺60mg/(kg·d)用2d(-... 详细信息

目的探讨造血干细胞移植治疗幼年粒单细胞白血病(JMML)的疗效。方法 5例JMML患儿接受无关供者脐血造血干细胞移植治疗。预处理均采用Bu/Cy+Mel+ATG方案:马利兰(0.8～1.0)mg/kg,每6小时1次共用16次(-8d～-5d);环磷酰胺60mg/(kg·d)用2d(-4～-3d);马法兰140mg/m2用1次(-2d):抗胸腺细胞球蛋白2.5mg/(kg·d)连用4d(-4～-1d)。GVHD预防采用CsA+MP±MMF。结果 5例成功植入,3例复发,1例复发后死于卡氏肺囊虫肺炎,1例死于CMV感染相关间质性肺炎,1例长期无病存活。结论 5例JMML移植初步治疗结果不满意,移植失败主要原因为白血病复发。为减少复发,今后需进一步改进移植方法 ,包括选择其他供体、改进GVHD预防方案。

关键词：幼年粒单细胞白血病移植脐带血