检索结果-南通市图书馆

Journal of Ocean University of China 2021年第1期20卷 181-188页

作者： GU Xiaoqian GUI Yuanyuan LI Jiang ZHANG Xuelei zilda dewi seswita MNR Key Laboratory for Science&Technology of Marine Ecosystems First Institute of OceanographyMinistry of Natural ResourcesQingdao 266061China College of Environmental Engineering Qingdao UniversityQingdao 266061China Research Center for Marine and Fisheries Product Processing and Biotechnology Agency for Marine and Fisheries Research and DevelopmentMinistry of Marine and Fisheries AffairsJakarta 40115Indonesia

A novel lipase gene(lip4346)encoding a primary translation product with 176 amino acids was screened from the genome fine mapping of the macroalgae-associated bacterial strain Microbulbifer *** were collected from the coast of the Halmahera Island of *** lip4346 gene was cloned and heterologously expressed in Escherichia *** purified recombinant Lip4346 protein had a molecular mass of 19 k Da,a single band on sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis(SDS-PAGE),and a maximum enzyme activity of 31.2 U m *** optimal temperature and pH for the lipase activity of Lip4346 were 70℃and 10.0,***4346 was tolerant with a number of organic solvents and detergents,and was active toward triacylglycerols and p-nitrophenyl esters with short-and medium-chain *** unique characteristics of Lip4346 indicate that it is a promising nonaqueous biocatalyst for industrial applications.

关键词： Microbulbifer lipase alkali-tolerant high temperature-tolerant

印尼热泉中产嗜热碱性蛋白酶菌株筛选及酶学性质研究

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海洋科学进展 2012年第2期30卷 244-251页

作者：王帅林学政黄晓航郑立 zilda dewi seswita 国家海洋局第一海洋研究所海洋生物活性物质重点实验室山东青岛266061 印度尼西亚海洋与渔业研究局海洋生物技术与水产品加工研究中心雅加达999006

采用MSM寡营养培养基从印度尼西亚Pantai cermin,Kalianda和Banyuwedang三个地区的热泉水样、泥样以及沉积物样品中分离获得细菌菌株,通过检测蛋白酶产生透明圈和福林酚蛋白酶活性测定相结合的方法,从中筛选出1株产嗜热蛋白酶的菌株PBI... 详细信息

采用MSM寡营养培养基从印度尼西亚Pantai cermin,Kalianda和Banyuwedang三个地区的热泉水样、泥样以及沉积物样品中分离获得细菌菌株,通过检测蛋白酶产生透明圈和福林酚蛋白酶活性测定相结合的方法,从中筛选出1株产嗜热蛋白酶的菌株PBI,该菌株经初步鉴定为短杆菌属(Brevibacillus),并对其酶学性质进行了研究。结果表明,菌株PBI产蛋白酶的最适酶活温度为60℃,最适pH值为8.0～9.0,具有较好的热稳定性和pH稳定性,60℃时酶的半衰期为30min,70℃条件下20min仍保持46.1%的酶活,该酶在pH值为5.0～9.0范围的缓冲液中酶活相对稳定。其产嗜热蛋白酶的酶活力最高可达到60.53U/mL,在100℃条件下仍能保留26.37%的相对酶活。Fe2+,Fe3+,Cu2+和Zn2+对嗜热蛋白酶活性具有明显的抑制作用。该嗜热蛋白酶对EDTA敏感,苯甲基磺酰氟(PMSF)、亮抑酶肽(Leupeptin)、苄眯(Benzamidine)和胃蛋白酶抑制剂(Pepstain A)对该嗜热蛋白酶都有一定的抑制作用,说明其酶活性受到丝氨酸、半胱氨酸残基的影响。结果表明,该菌株是1株具有进一步改造利用价值的产蛋白酶菌株。

关键词：热泉嗜热细菌嗜热蛋白酶鉴定

印尼3个地区热泉中可培养细菌的分子鉴定与系统发育分析

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海洋科学进展 2011年第3期29卷 355-363页

作者：王帅林学政黄晓航 zilda dewi seswita CHASANAH Ekowati 国家海洋局第一海洋研究所海洋生物活性物质重点实验室山东青岛266061 印度尼西亚海洋与渔业研究局海洋生物技术与水产品加工研究中心雅加达印度尼西亚999006

采用MSM寡营养培养基从印度尼西亚Pantai cermin,Kalianda和Banyu wedang地区的热泉水样、泥样以及沉积物中根据菌落的形态学特征共分离获得69株细菌,通过菌株的16S rDNA的限制性片段长度多态性(PCRRFLP)分析、序列比对和生理生化分析,... 详细信息

采用MSM寡营养培养基从印度尼西亚Pantai cermin,Kalianda和Banyu wedang地区的热泉水样、泥样以及沉积物中根据菌落的形态学特征共分离获得69株细菌,通过菌株的16S rDNA的限制性片段长度多态性(PCRRFLP)分析、序列比对和生理生化分析,对其进行鉴定并构建系统发育树。结果表明,分离获得的69株细菌菌株分别属于8种基因型(Ⅰ～Ⅷ),其中1类(基因型I)属于短芽孢杆菌属(Brevibacillus),约占20.28%;1类(基因型Ⅷ)属于地芽孢杆菌属(Geobacillus),约占14.49%;其余6类(基因型Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ,Ⅴ,Ⅵ,Ⅶ)均属于芽孢杆菌属(Bacillus),约占总菌株数量的65.22%,为优势菌群。分离获得的8类细菌均为革兰氏阳性兼性好氧菌,接触酶、氧化酶反应均呈阳性,吲哚反应都呈阴性。产酶实验表明,分离到的菌株在中性pH值,37～70℃范围内能够分泌多种耐热的水解酶类,4种基因型(Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ)的菌株分泌蛋白酶,5种基因型(Ⅳ,Ⅴ,Ⅵ,Ⅶ,Ⅷ)的菌株分泌水解脂肪酶,1种基因型(Ⅳ)的菌株分泌淀粉酶,并且发现其中1种基因型(Ⅳ)的芽孢杆菌可同时产生3种水解酶类。利用限制性内切酶AluI对16S rDNA进行的RFLP技术分析结果表明,利用该技术能够对嗜热细菌的16SrDNA多样性进行有效的分析,经凝胶电泳图谱将菌种鉴定到属的水平,揭示了印尼热泉生态系统中蕴藏着丰富的嗜热菌菌种资源。

关键词：热泉嗜热细菌嗜热酶细菌多样性限制性片段长度多态性(RFLP)

Screening and Characterization of the Alkaline Protease Isolated from PLI-1, a Strain of Brevibacillus sp. Collected from Indonesia's Hot Springs

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Journal of Ocean University of China 2012年第2期11卷 213-218页

作者： WANG Shuai LIN Xuezheng HUANG Xiaohang ZHENG Li dewi seswita zilda The Key Laboratory of Marine Bioactive Substances The First Institute of OceanographySOAQingdao 266061P R.China Research Center for Marine and Fishery Product Processing and Biotechnology JakartaIndonesia

A total of 69 strains of thermophilic bacteria were isolated from water, soil and sediment samples from three Indonesia's hot spring areas (Pantai cermin, Kalianda and Banyu wedang) by using Minimal Synthetic Medium (MSM). The extreme thermophile Brevibacillus sp. PLI-1 was found to produce extracellular thermophilic alkaline protease with optimal activity at 70℃ and pH 8.0-9.0. The molecular weight of the protease was estimated to be around 56 kD by SDS-PAGE. The maximum activity of the protease was 26.54 U mL-1. The protease activity did not decrease after 30 min and still retained more than 70% of relative activity after 60 min at 70℃ and pH 8.0. The ion Mg2+ was found to promote protease activity at both low and high concentrations, whereas Cu2+ and Zn2+ could almost completely inhibit the activity. Divalent cation chelator EDTA inhibited the enzyme activity by 55.06% ± 0.27%, while the inhibition caused by PMSF, Leupeptin, Pepstain A and Benzamidine were 66.78% ± 3.25%, 52.37% ± 0.25%, 62.47% ± 2.96% and 50.99% ± 0.24%, respectively. Based on these observations, the enzyme activity was conspicuously sensitive to the serine and cysteine protease inhibitors. All these results indicated that the protease isolated from the strain PLI-1 was a thermophilic protease and had a high-temperature stability and a pH stability.

关键词： hot spring thermophilic bacterium thermophilic protease identification

印度尼西亚卡利安达岛近岸热泉微生物和氢酶基因的多样性

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海洋学报 2016年第6期38卷 119-129页

作者：何培青 dewi seswita zilda 李江张学雷崔菁菁白亚之 Gintung Patantis Ekowati Chasanah 国家海洋局第一海洋研究所海洋生态研究中心山东青岛266061 海洋与渔业局海洋与渔业研究与发展司海洋和渔业产品加工和生物技术研究中心印度尼西亚雅加达40115 国家海洋局第一海洋研究所海洋沉积与环境地质国家海洋局重点实验室山东青岛266061

研究对2011年7月采自印度尼西亚卡利安达岛近岸热泉的样品,进行了细菌和古菌16SrRNA基因和细菌氢酶基因克隆文库的构建、序列测定和多样性分析。结果表明:热泉系统的细菌和古菌由16个门组成,Proteobacteria为热液流体和沉积物的优势类群... 详细信息

研究对2011年7月采自印度尼西亚卡利安达岛近岸热泉的样品,进行了细菌和古菌16SrRNA基因和细菌氢酶基因克隆文库的构建、序列测定和多样性分析。结果表明:热泉系统的细菌和古菌由16个门组成,Proteobacteria为热液流体和沉积物的优势类群,丰度分别为59.5%和73.3%,Cyanobacteria为菌苔的优势类群(丰度,56.5%);具有氨氧化作用的Crenarchaeota为古菌的优势类群。热泉系统中,70%以上的种类与海洋细菌的亲缘关系最近,说明该系统具有海洋特性;约20%的种类与陆地热泉中嗜热或中等嗜热细菌的亲缘关系最近,这些种类可能来源于高温地层内部,并参与了铁氧化还原、氢氧化、硫氧化和硝酸还原等过程。热泉系统中,NAD(P)-关联的双向NiFe-氢酶基因和FeFe-氢酶基因的组成分布也受到温度和盐度分布变化的影响。研究为揭示浅海热液系统提供理论参考。

关键词：印度尼西亚卡利安达岛近岸热泉 16SrRNA 氢酶基因

印度尼西亚Padang Cermin热泉古菌多样性分析

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海洋科学进展 2012年第4期30卷 534-540页

作者：沈继红宋维志林学政王帅 dewi seswita zilda 国家海洋局第一海洋研究所山东青岛266061 国家海洋局海洋生物活性物质重点实验室山东青岛266061 印度尼西亚海洋与渔业研究局海洋生物技术与水产品加工研究中心雅加达999006

通过印度尼西亚苏门答腊岛Padang Cermin热泉环境基因组DNA构建古菌16SrRNA基因文库,并利用PCR-RFLP技术对其古菌多样性和系统发育分析进行了研究。根据限制性内切酶AluⅠ和MspⅠ的特征性酶切图谱,将62个阳性克隆归类为14个分类操作单位... 详细信息

通过印度尼西亚苏门答腊岛Padang Cermin热泉环境基因组DNA构建古菌16SrRNA基因文库,并利用PCR-RFLP技术对其古菌多样性和系统发育分析进行了研究。根据限制性内切酶AluⅠ和MspⅠ的特征性酶切图谱,将62个阳性克隆归类为14个分类操作单位(operational taxonomic unit,OTU),文库的覆盖度达90.32%。克隆文库的优势类群为OTU2和OTU1,分别占克隆文库的27.42%和20.96%。从每个OUT中选取一个代表性克隆进行16SrRNA基因的序列测定与系统发育分析,结果表明,测定的Padang Cermin热泉中的古菌均属于泉古菌门,包括热变形菌目(Thermoproteales)、硫还原球菌目(Desulfurococcales)、杂色泉古菌(miscellaneous crenar-chaeotic group,MCG)和未培养泉古菌(uncultured Crenarchaeota,UC),该热泉代表性克隆与GenBank数据库已有16SrRNA序列的相似性为91.9%～97.8%,而且与其相似性最高的序列均来自未培养的古菌克隆,由结果可见,Padang Cermin热泉古菌群落与已报道的其他热泉古菌群落的相似性较低,表明该热泉可能具有某些独特的特征,存在着特殊的古菌生态类群。

关键词：热泉古菌多样性系统发育分析