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霍乱弧菌中调控aphB的基因筛选及其功能

微生物学报 2012年第2期52卷 256-261页

作者：陈海丽朱召芹钟增涛朱军阚飙上海市公共卫生临床中心生物安全部上海201508 南京农业大学生命科学学院南京210095 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所北京102206

【目的】筛选霍乱弧菌C6706-中调控LysR家族蛋白AphB表达的基因。【方法】将霍乱弧菌埃尔托型菌株C6706-aphB启动子区克隆到2个报告质粒pBBRLux和pKP302上,并将其导入霍乱弧菌C6706-中,以此作为出发菌株。利用出发菌株与转座子pSC123接... 详细信息

【目的】筛选霍乱弧菌C6706-中调控LysR家族蛋白AphB表达的基因。【方法】将霍乱弧菌埃尔托型菌株C6706-aphB启动子区克隆到2个报告质粒pBBRLux和pKP302上,并将其导入霍乱弧菌C6706-中,以此作为出发菌株。利用出发菌株与转座子pSC123接合构建LZV630-302转座子随机突变文库,通过测定化学发光强度检测aphB启动子的表达水平,筛选aphB表达受影响的突变株。利用随机PCR方法检测转座子插入位点,并测序比对分析基因。【结果】从7个转座子库中(共约4万个突变株)得到能影响aphB表达(均导致下降)的2株突变株T1和T2。测序比对发现T1中转座子插入在vc1585读码框内,T2中转座子插入在距vc1602基因末端7 bp处。【结论】获得aphB表达改变的突变株,基因vc1585和vc1602可能直接或间接影响aphB表达,为进一步研究aphB表达调控影响因素奠定了基础。

关键词：霍乱弧菌 aphB 基因调控

甘磷酸胆碱对霍乱弧菌转录调控因子AphB活性的影响

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中华微生物学和免疫学杂志 2016年第2期36卷 124-125页

作者：苏萌杜娈英王卉钟增涛高妍夏承德医学院基础医学院病原生物学教研室067000 承德医学院蚕业研究所 067000 南京农业大学生命科学院农业微生物研究室 210095

霍乱（Cholera）是一种急性、烈性的腹泻性疾病，霍乱弧菌（Vibriocholerae）为该病的病原体。霍乱弧菌对毒力基因进行调控依赖于复杂的调控系统，ToxR是该系统中重要的调控因子，系统中还需要重要的膜蛋白TcpP的参与。

关键词：转录调控因子霍乱弧菌磷酸胆碱活性调控系统腹泻性疾病毒力基因病原体

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根瘤菌与群体感应

生态学杂志 2005年第5期24卷 547-550页

作者：郑会明钟增涛陈一楠朱军南京农业大学生命科学学院微生物学系农业部农业环境微生物生物工程重点开放实验室南京210095

细菌在高细胞密度下可以产生群体感应信号分子,调控细菌相关基因的表达,这种信号分子被称为自体诱导物。酰基高丝氨酸内酯类化合物(acyl HSLs)是在根瘤菌中广泛存在的一类自体诱导物,该群体感应系统与根瘤菌和植物的共生作用密切相关。... 详细信息

细菌在高细胞密度下可以产生群体感应信号分子,调控细菌相关基因的表达,这种信号分子被称为自体诱导物。酰基高丝氨酸内酯类化合物(acyl HSLs)是在根瘤菌中广泛存在的一类自体诱导物,该群体感应系统与根瘤菌和植物的共生作用密切相关。本文概述了AHLs介导的群体感应系统的组成及调控机制和不同根瘤菌中群体感应调节对根瘤菌生理行为及共生固氮的影响。

关键词：根瘤菌群体感应 AHLs 结瘤固氮

中华根瘤菌Sinorhizobium sp.1128自体诱导物合成酶基因的克隆及对生理功能的影响

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微生物学报 2008年第10期48卷 1314-1318页

作者：曲媛杨梦华郑会明钟增涛朱军南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

【目的】从中华根瘤菌Sinorhizobium sp.1128中克隆自体诱导物合成酶基因,从而研究该基因在Sinorhizobium sp.1128群体感应系统中的作用。【方法】利用基因序列同源性比对以及分子克隆的方法,从中华根瘤菌Sinorhizobium sp.1128中克隆... 详细信息

【目的】从中华根瘤菌Sinorhizobium sp.1128中克隆自体诱导物合成酶基因,从而研究该基因在Sinorhizobium sp.1128群体感应系统中的作用。【方法】利用基因序列同源性比对以及分子克隆的方法,从中华根瘤菌Sinorhizobium sp.1128中克隆自体诱导物合成酶基因;利用大肠杆菌异源表达、C18反相薄层层析(TLC)的方法研究该基因的特性;通过中间片段融合的方法缺失该基因,并通过结瘤实验研究该基因对Sinorhizobium sp.1128生理功能的影响。【结果】以草木樨中华根瘤菌Sinorhizobium medicae WSM419自体诱导物合成酶基因Smed_1560序列设计引物,通过PCR扩增在Sinorhizobium sp.1128中寻找到一新的自体诱导物合成基因,命名为traI2。该基因在大肠杆菌Escherichia coli DH5α中表达后能产生两种自体诱导物分子。在Sinorhizobium sp.1128中将该基因缺失,自体诱导物活性下降;回复突变后,自体诱导物活性得到恢复,结瘤实验结果表明该基因能影响根瘤菌的结瘤效率。【结论】中华根瘤菌Sinorhizobium sp.1128群体感应系统是一个复杂的交互系统,它对结瘤的生理功能具有一定的影响。

关键词： Sinorhizobium sp.1128 群体感应自体诱导物合成酶

中华苜蓿根瘤菌受种子分泌物诱导的基因筛选和分析

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土壤学报 2011年第1期48卷 217-220页

作者：张江王彦涛郑会明钟增涛朱军南京农业大学生命科学学院南京210095

土壤中的根瘤菌与宿主植物的共生结瘤过程中，豆科植物可以通过分泌氨基酸，有机酸，糖类，有机酚及其他的次级代谢产物的种类及丰度来影响根圈范围内微生物的群体种类及数量。豆科植物可以通过分泌趋化性物质如糖蛋白等协助根瘤菌吸附... 详细信息

土壤中的根瘤菌与宿主植物的共生结瘤过程中，豆科植物可以通过分泌氨基酸，有机酸，糖类，有机酚及其他的次级代谢产物的种类及丰度来影响根圈范围内微生物的群体种类及数量。豆科植物可以通过分泌趋化性物质如糖蛋白等协助根瘤菌吸附在合适的侵染位点，从而增加自身被感染的机率。植物还可以分泌抗菌类物质对根系微生物进行筛选，如在Mirabilis jalapa的种子分泌物中分离到一种抗菌肽物质，该物质对根系中的真菌有广谱的杀菌作用，同时对一些革兰氏阳性菌具有抗性，但是对革兰氏阴性菌则没有明显的抑制活性。

关键词： Sinorhizobium sp.1128 紫花苜蓿种子分泌物刀豆氨酸

毛萼田菁茎瘤菌被种子浸提物诱导表达基因的筛选及其功能

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微生物学报 2009年第9期49卷 1171-1175页

作者：蔡文通蔡韬张江郑会明钟增涛朱军南京农业大学生命科学学院南京210095

【目的】选择毛萼田菁茎瘤菌ORS571为研究对象,筛选毛萼田菁茎瘤菌在菌植互作早期被宿主植物种子浸提物诱导表达的基因。【方法】采用新颖的基于抗性的活体表达筛选技术,以种子浸提物为诱导物,筛选获得能够稳定被种子浸提物诱导的突变... 详细信息

【目的】选择毛萼田菁茎瘤菌ORS571为研究对象,筛选毛萼田菁茎瘤菌在菌植互作早期被宿主植物种子浸提物诱导表达的基因。【方法】采用新颖的基于抗性的活体表达筛选技术,以种子浸提物为诱导物,筛选获得能够稳定被种子浸提物诱导的突变株。通过中间片断融合报告基因的方法研究信号分子对相关基因的诱导情况。【结果】随机引物PCR产物测序及网上BLAST结果表明,被诱导表达的基因为LysE家族的成员。而且,对另外3个属根瘤菌中lysE基因的研究发现,它们都可以被相应的宿主植物种子浸提物诱导表达。此外,这四株根瘤菌的lysE突变株都表现对刀豆氨酸极为敏感。本文首次报道了lysE家族在根瘤菌中的生理功能。【结论】我们推测:LysE家族蛋白可能广泛存在于根瘤菌中,并在根瘤菌与宿主植物的早期相互作用中发挥重要作用。

关键词：毛萼田菁茎瘤菌 LysE家族刀豆氨酸种子浸提物

百脉根根瘤菌自体诱导物合成酶基因mrlI2的初步研究

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土壤学报 2010年第1期47卷 182-186页

作者：孙克京杨梦华郑会明钟增涛朱军南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

许多细菌均能产生一类叫做自体诱导物的信号分子,用于感知自身密度的变化,从而调控其生理行为,这种现象称为群体感应.越来越多的研究表明,在根瘤菌中普遍存在着群体感应调控系统,并且它可能在根瘤菌与豆科植物共生结瘤固氮过程中起着重... 详细信息

许多细菌均能产生一类叫做自体诱导物的信号分子,用于感知自身密度的变化,从而调控其生理行为,这种现象称为群体感应.越来越多的研究表明,在根瘤菌中普遍存在着群体感应调控系统,并且它可能在根瘤菌与豆科植物共生结瘤固氮过程中起着重要作用.

关键词：百脉根根瘤菌群体感应自体诱导物合成酶

茶树-绿豆/大豆间作对茶园土壤和茶叶品质的影响

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南京农业大学学报 2022年第3期45卷 511-520页

作者：段玉邢弘擎刘国栋王婷刘乐峰朱旭君钟增涛房婉萍南京农业大学茶叶科学研究所江苏南京210095 南京农业大学生命科学学院江苏南京210095

[目的]本文旨在研究茶园间作绿豆和大豆对茶园土壤环境的影响,促进茶叶产业可持续发展,以优化茶园土壤环境、增加茶叶产量、提高茶叶品质。[方法]间作试验设置为茶树-不接种根瘤菌绿豆(T1)、茶树-接种根瘤菌绿豆(T2)、茶树-不接种根瘤... 详细信息

[目的]本文旨在研究茶园间作绿豆和大豆对茶园土壤环境的影响,促进茶叶产业可持续发展,以优化茶园土壤环境、增加茶叶产量、提高茶叶品质。[方法]间作试验设置为茶树-不接种根瘤菌绿豆(T1)、茶树-接种根瘤菌绿豆(T2)、茶树-不接种根瘤菌大豆(T3)、茶树-接种根瘤菌大豆(T4)4个处理,以单作茶树为对照(CK),探究不同间作模式对茶园土壤pH值、土壤养分及茶叶理化指标的影响及土壤指标与茶叶品质之间的关系。[结果]在茶树-豆科作物的间作模式下,豆科作物生长至盛花期(Ⅰ),茶园土壤pH值及土壤酶活性显著增加,除土壤速效磷外,其他土壤养分均显著高于单作茶园,其中土壤速效氮含量在T2处理和T4处理分别比CK增加136.63%和97.87%;除土壤有机质外,间作同一种豆科作物,接种根瘤菌豆科作物的茶园土壤全氮、速效氮、速效磷、速效钾含量均高于未接种根瘤菌豆科作物的茶园,尤其是土壤速效氮和速效磷的含量。间作的豆科作物在盛花期翻压后一个月(Ⅱ),茶园土壤pH值和土壤养分均显著高于单作茶园,且接种根瘤菌豆科作物的处理显著高于未接种根瘤菌的处理,其中在T4处理最高。茶树与豆科作物间作显著影响茶树鲜叶理化成分的代谢,尤其是间作接种根瘤菌豆科作物,间作的茶树鲜叶氨基酸和可溶性糖含量在第Ⅰ时期,T2和T4处理分别比CK增加102.67%、54.37%和180.79%、160.23%,在第Ⅱ时期T2和T4处理分别比CK提高72.29%、41.80%和45.37%、3.17%,且茶树鲜叶的水浸出物在T2和T4处理显著增加,而茶树鲜叶的茶多酚含量在T2和T4处理显著降低。[结论]在茶园间作不同豆科作物均能缓解土壤酸化,显著增加土壤养分,显著增加茶树鲜叶的氨基酸和可溶性糖含量,尤其是茶树-绿豆间作模式的增氮效果更显著。

关键词：茶树豆科作物间作模式土壤养分茶叶理化成分

紫云英-小麦混作体系中氮素转移对小麦生长的促进作用

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土壤学报 2006年第6期43卷 1043-1046页

作者：杜寒春郑会明周晶曹慧沈标娄无忌钟增涛南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

关于根瘤菌与非豆科植物关系的研究近年来已取得了一定的进展.已有的研究表明,在自然条件下,根瘤菌能够在水稻及一些非豆科植物的根圈定殖及固氮,具有植物根圈促生(PGPR)作用,能促进植物根系有效地吸收土壤中的水分和养分,从而促进植物... 详细信息

关于根瘤菌与非豆科植物关系的研究近年来已取得了一定的进展.已有的研究表明,在自然条件下,根瘤菌能够在水稻及一些非豆科植物的根圈定殖及固氮,具有植物根圈促生(PGPR)作用,能促进植物根系有效地吸收土壤中的水分和养分,从而促进植物的生长发育,同时对植物体其他生命活动进行调控.还可以提高植物的抗逆性,减轻或抑制有害的根际微生物,从而间接促进植物生长.

关键词：中慢生华癸根瘤菌 nodD基因缺失菌株小麦氮素 PGPR