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MOPCS: next-generation nucleic acid molecular biosensor

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National Science Review 2022年第9期9卷 139-141页

作者： Quan Liu Shang Chen Li Wang Zhaojun Duan Fuquan Xie Guojun Zhao yunde hou Dixian Luo Laboratory Medicine Center Huazhong University of Science and Technology Union Shenzhen Hospital(Nanshan Hospital) Guangdong Key Laboratory for Biomedical Measurements and Ultrasound Imaging School of Biomedical Engineering Shenzhen University Health Science Center National Institute for Viral Disease Control and Prevention China Center for Disease Control and Prevention Department of Laboratory Medicine Shenzhen Children's Hospital The Sixth Affiliated Hospital of Guangzhou Medical University Qingyuan City People's Hospital

Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2) has had a huge impact on the world, causing millions of deaths and a serious blow to the global economy. SARS-CoV-2 can aack most body tissues with devastating consequences [1].e current global SARS-CoV-2 outbreak has exposed our shortcomings in the prevention and control of infectious diseases,

关键词：

Genomic organization of EDSV strain AA-2

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Chinese Science Bulletin 1998年第7期43卷 594-597页

作者： Liyu Zeng Qi Jin Jinggang Zhang Maoxiang Li Hong Li Lei Zhu Zhen Yin yunde hou Chinese Acad Prevent Med Inst Virol State Key Lab Mol Virol & Genet Engn Beijing 100052 Peoples R China Inst Mil Vet Med Changchun 130062 Peoples R China

The genomic organization of egg drop syndrome virus strain AA-2 isolated in China is reported here. The genome was found to be 32 838 bp in length, approximately 2 kb shorter than those of the human subgenus C adenoviruses. Analysis of open reading frames indicated that the genes for major viral structural proteins (55 K, Penton base, pⅦ, pⅩ, pⅥ, Hexon, 100 K, pⅧ and Fiber), as well as EP, DNA polymerase and ⅣaⅡ are present in the expected locations in the genome. EDSV possesses no identifiable E3 and E4 regions and most proteins encoded by E3 and E4 regions of other adenoviruses genome were not presented in EDSV.

关键词： EDS-76 genomic organization sequence analysis.

A novel method for purification of recombinant adeno-associated virus vectors on a large scale

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Chinese Science Bulletin 2001年第6期46卷 485-489页

作者： WU Xiaobing DONG Xiaoyan WU Zhijian CAO Hui NIU Dongbin QU Jianguo WANG Hong hou yunde State Key Laboratory for Molecular Virology and Genetic Engineering Beijing 100052China Laboratory of Morphology Institute of VirologyChinese Academy of Preventive MedicineBeijing 100052China

A novel method for recombinant adeno-associ-ated virus (rAAV) purification on large scale is described. The method involves three steps, including chloroform treatment, PEG/NaCl precipitation and chloroform extraction. The whole procedure can be performed in four hours. Using this purification method, we can reproducibly obtain, from 4 × 109 of proviral cells cultured in roller bottles, purified rAAV-GFP stocks with titers of around 5×1013 particles/mL and purity greater than 95%. The infectious titers of the vector stocks were up to 2×1012 TU/mL, thus particle-to-infectivity rate was about 25. Under an electronic microscope, most rAAV particles appeared full and a few were in intermediate form. Empty particles were rarely seen. The purified rAAV-GFP stocks have been successfully used in in vitro and in vivo transfection experiments. Therefore, this new method offers a simple, rapid and cost-effective way for large-scale rAAV purification.

关键词： recombinant adeno-associated virus chloroform purifi- cation.

重视重组人干扰素α1b的创新研究和儿科临床应用

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中华实用儿科临床杂志 2018年第18期33卷 1361-1365页

作者：侯云德张国成中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206 中国武警后勤学院医学院儿童医院天津300163

重组人干扰素α1b（IFNα1b）作为中国第一个基因工程Ⅰ类新药，具有独特的生物学意义及临床价值。特别是在儿科领域，IFNα1b用于小儿病毒性肺炎、病毒性肝炎、毛细支气管炎、疱疹性咽峡炎、手足口病和某些肿瘤的治疗，均显示了确切的... 详细信息

重组人干扰素α1b（IFNα1b）作为中国第一个基因工程Ⅰ类新药，具有独特的生物学意义及临床价值。特别是在儿科领域，IFNα1b用于小儿病毒性肺炎、病毒性肝炎、毛细支气管炎、疱疹性咽峡炎、手足口病和某些肿瘤的治疗，均显示了确切的疗效和良好的安全性，近期在病毒相关的喘息性疾病、流感等重大传染病防治领域展现了更大的应用前景，为促进我国儿童健康发挥了重要作用。现就IFNα1b的基因和分子特点、新型递送方式及儿童应用的前沿研究成果进行阐述和讨论。

关键词：干扰素α1b 儿童病毒雾化吸入喘息流感

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21世纪的医学病毒学研究趋向

医学研究通讯 2002年第10期31卷 2-5页

作者：侯云德病毒基因工程国家重点实验室

目前,分子病毒学是病毒学的主流分支学科,分子病毒学向两个方向发展,一是着重在理论方面,采用现代分子生物学技术阐明病毒及病毒感染的本质;另一方面是着重在应用,也就是病毒基因工程.两者相互依存,相互促进,其主要内容和重要性可以概... 详细信息

目前,分子病毒学是病毒学的主流分支学科,分子病毒学向两个方向发展,一是着重在理论方面,采用现代分子生物学技术阐明病毒及病毒感染的本质;另一方面是着重在应用,也就是病毒基因工程.两者相互依存,相互促进,其主要内容和重要性可以概括如下:

关键词： 21世纪医学病毒学病毒基因工程病毒蛋白质工程抗病毒多肽物质

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分子伴侣基因的克隆及表达

中华实验和临床病毒学杂志 1995年第2期9卷 107-110页

作者：马学军侯云德中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法从大肠杆菌染色体ＤＮＡ中扩增得到２０００ｂｐ的ＤＮＡ片段（含ＧｒｏＥＳ和ＧｒｏＥＬ），并克隆到ＰＧＥＭ３ｚｆ（＋）载体中，经限制性图谱分析和部分ＤＮＡ序列测定，证实２０００ｂｐ的ＰＣＲ产物... 详细信息

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法从大肠杆菌染色体ＤＮＡ中扩增得到２０００ｂｐ的ＤＮＡ片段（含ＧｒｏＥＳ和ＧｒｏＥＬ），并克隆到ＰＧＥＭ３ｚｆ（＋）载体中，经限制性图谱分析和部分ＤＮＡ序列测定，证实２０００ｂｐ的ＰＣＲ产物为ＧｒｏＥ基因全部编码序列。将ＰＣＲ产物构建在ＰＬＰＲ启动子控制下的ｐＢＶ２２０表达质粒中，转入大肠杆菌ＤＨ５α，经４２℃热诱导，获得ＧｒｏＥ基因的表达产物，在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ上出现分子量约６００００（ＧｒｏＥＬ）及１５０００的蛋白带（ＧｒｏＥＳ），经密度扫描分析，前者约占细菌总蛋白的３０％，后者占２８％。经鉴定ＧｒｏＥＳ和ＧｒｏＥＬ基因表达产物在细胞内形成可溶性蛋白。

关键词：分子伴侣基因表达基因工程基因克隆

痘苗病毒天坛株基因组病毒生长因子基因结构的研究

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中华实验和临床病毒学杂志 1997年第2期11卷 104-106页

作者：金奇黄静杨天兵陈南海侯云德北京病毒基因工程国家重点实验室 100052

克隆了位于我国痘苗病毒天坛株基因组左端的病毒生长因子（ＶＧＦ）基因并对其编码多肽的结构特点进行了分析。结果表明，由天坛株ＶＧＦ基因所推导的氨基酸序列具有典型的上皮生长因子（ＥＧＦ）超家族成员的特征序列和结构特点，在核... 详细信息

克隆了位于我国痘苗病毒天坛株基因组左端的病毒生长因子（ＶＧＦ）基因并对其编码多肽的结构特点进行了分析。结果表明，由天坛株ＶＧＦ基因所推导的氨基酸序列具有典型的上皮生长因子（ＥＧＦ）超家族成员的特征序列和结构特点，在核苷酸及氨基酸水平上天坛株ＶＧＦ与其他正痘病毒ＶＧＦ的同源性在８５％～９５％之间，氨基酸残基的缺失和插入等变异主要集中出现在多肽的信号肽和穿膜区，推测对功能的影响不大。此外，我们发现由天坛株基因组右末端的开放读码框架（ＯＲＦ）ＴＢ２２Ｌ推导的氨基酸序列与天坛株ＶＧＦ多肽第６７位至１４０位完全相同，提示ＯＲＦＴＢ２２Ｌ可能是天坛株基因组第二个ＶＧＦ基因的变异产物。

关键词：痘苗病毒病毒基因病毒生长因子

黄芪对基因工程人α2b型干扰素抗鼻病毒14型的协同作用

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中华实验和临床病毒学杂志 1996年第1期10卷 77-80页

作者：张丽兰吴德华侯云德中国预防医华科学院病毒学研究所北京100052 深圳英特龙生物技术有限公司

以鼻病毒14型(RV14)为模型,采用黄芪针剂液和高纯度的基因工程人α2b 型干扰素,在3种人二倍体细胞培养上研究黄芪对干扰素抗鼻病毒的协同作用。结果表明,0.3%的黄芪针剂液对重组人α2b 型干扰素确有抗鼻病毒14型的协用作用,可以提高干... 详细信息

以鼻病毒14型(RV14)为模型,采用黄芪针剂液和高纯度的基因工程人α2b 型干扰素,在3种人二倍体细胞培养上研究黄芪对干扰素抗鼻病毒的协同作用。结果表明,0.3%的黄芪针剂液对重组人α2b 型干扰素确有抗鼻病毒14型的协用作用,可以提高干扰素抗鼻病毒感染的能力达1倍以上;如采用10万单位干扰素与黄芪联合应用可以产生24万单位干扰素治疗感冒的效果。同时证明,0.3%的低浓度黄芪本身对 RV14并无明显的直接灭活作用。经与滤泡性口腔炎病毒(VSV)对比试验,证明RV14对重组人α2b 型干扰素的抗病毒作用是很敏感的。

关键词：黄芪鼻病毒干扰素药理

基因工程产品的N末端均一性及其中残留的痕量杂质蛋白的分析

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生物工程学报 1991年第2期7卷 108-113页

作者：金冬雁张智清周圆侯云德中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室

利用Edman降解法,辅之以邻苯二甲醛阻断等技术,在蛋白/多肽测序仪-PTH氨基酸分析仪上微量自动测定了在大肠杆菌系统获得高效表达的重组人γ干扰素、α 2干扰素和白细胞介素-2等多种基因工程产品的N末端氨基酸序列。根据氨基酸色谱分析... 详细信息

利用Edman降解法,辅之以邻苯二甲醛阻断等技术,在蛋白/多肽测序仪-PTH氨基酸分析仪上微量自动测定了在大肠杆菌系统获得高效表达的重组人γ干扰素、α 2干扰素和白细胞介素-2等多种基因工程产品的N末端氨基酸序列。根据氨基酸色谱分析的原始资料,对上述蛋白质样品的N末端均一性进行了细致分析。在此基础上,借助序列库检索比较等计算机方法检定了这些样品中可能残留的痕量杂质蛋白,并对分析痕量残留蛋白的一般方法进行了讨论。分析结果表明重组人γ干扰素N末端均一;而α 2干扰素和白细胞介素-2的N末端不均一,其中主要含大致等量的N末端带有蛋氨酸与不带蛋氨酸的两种分子,仅在个别送检样品中发现痕量N末端丢失一个氨基酸的分子。通过在序列库中检索所测出的一段八肽疑似序列,推断在一批送检样品中含有痕量的卵清溶菌酶,经进一步纯化样品并测序后得以证实。本文结果为进一步优化和确定有关产品的生产流程并建立产品质量控制的标准提供了重要依据。

关键词：基因工程产品 N端均一性杂质蛋白