分子伴侣基因的克隆及表达

作     者：马学军 侯云德 

作者机构：中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室 

出 版 物：《中华实验和临床病毒学杂志》 (Chinese Journal of Experimental and Clinical Virology)

年 卷 期：1995年第9卷第2期

页      面：107-110页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

主　　题：分子伴侣 基因表达 基因工程 基因克隆 

摘      要：用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法从大肠杆菌染色体ＤＮＡ中扩增得到２０００ｂｐ的ＤＮＡ片段（含ＧｒｏＥＳ和ＧｒｏＥＬ），并克隆到ＰＧＥＭ３ｚｆ（＋）载体中，经限制性图谱分析和部分ＤＮＡ序列测定，证实２０００ｂｐ的ＰＣＲ产物为ＧｒｏＥ基因全部编码序列。将ＰＣＲ产物构建在ＰＬＰＲ启动子控制下的ｐＢＶ２２０表达质粒中，转入大肠杆菌ＤＨ５α，经４２℃热诱导，获得ＧｒｏＥ基因的表达产物，在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ上出现分子量约６００００（ＧｒｏＥＬ）及１５０００的蛋白带（ＧｒｏＥＳ），经密度扫描分析，前者约占细菌总蛋白的３０％，后者占２８％。经鉴定ＧｒｏＥＳ和ＧｒｏＥＬ基因表达产物在细胞内形成可溶性蛋白。