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Neural Regeneration Research 2012年第28期7卷 2182-2187页

作者： Mina Huang Zhanpeng Guo Kun Liu Xifan Mei Shiqiang Fang Jinhao Zeng Yansong Wang yajiang yuan Department of Nursing College Liaoning Medical College Jinzhou 121000 Liaoning Province China Department of Orthopedics FirstAffiliated Hospital of Liaoning Medical College Jinzhou 121000 Liaoning Province China

Muscle-derived stem cells were isolated from the skeletal muscle of Sprague-Dawley neonatal rats aged 3 days old. Cells at passage 5 were incubated in Dulbecco＇s modified Eagle＇s medium supplemented with 10% （v/v） fetal bovine serum, 20 IJg/L nerve growth factor, 20 pg/L basic fibroblast growth factor and 1% （v/v） penicillin for 6 days. Cells presented with long processes, similar to nerve cells. Connections were formed between cell processes. Immunocytochemical staining with neuron specific enolase verified that cells differentiated into neuron-like cells. Immunofluorescence cytochemistry and western blot results revealed that the expression of protein hairy enhancer of split-1 was significantly reduced. These results indicate that low expression of protein hairy enhancer of split-1 participates in the differentiation of muscle-derived stem cells into neuron-like cells.

关键词： muscle-derived stem cells neuron-like cells protein hairy enhancer of split-l proliferation neuronspecific enolase neural regeneration

Negative effects of Notch1 on the differentiation of muscle-derived stem cells into neuronal-like cells

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Neural Regeneration Research 2011年第31期6卷 2414-2418页

作者： Xifan Mei Chang Liu Zhanpeng Guo yajiang yuan Shiqiang Fang Yansong Wang Yue Guo Jinhao Zeng Department of Orthopedics First Affiliated Hospital of Liaoning Medical University Jinzhou 121000 Liaoning Province China Department of Endocrinology First Affiliated Hospital of Liaoning Medical University Jinzhou 121000 Liaoning Province China

We cultured rat muscle-derived stem cells in medium containing nerve growth factor and basic fi-broblast growth factor to induce neuronal-like cell *** staining and reverse transcription-PCR showed that the differentiated muscle-derived stem cells exhibited processes similar to those of neuronal-like cells and neuron-specific enolase expression,but Notch1 mRNA and protein expression was ***-regulation of Notch1 expression may facilitate neuronal-like cell differentiation from muscle-derived stem cells.

关键词： muscle-derived stem cells neuronal-like cells Notch signal pathway Notch1 differentiation neural regeneration

Green tea polyphenols protect spinal cord neurons against hydrogen peroxide-induced oxidative stress

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Neural Regeneration Research 2014年第14期9卷 1379-1385页

作者： Jianbo Zhao Shiqiang Fang yajiang yuan Zhanpeng Guo Jinhao Zeng Yue Guo Peifu Tang Xifan Mei Vertebral Column Ward Department of OrthopedicsFirst Affiliated Hospital of Liaoning Medical University Department of Orthopedics General Hospital of People’s Liberation Army

Green tea polyphenols are strong antioxidants and can reduce free radical damage. To investigate their neuroprotective potential, we induced oxidative damage in spinal cord neurons using hydrogen peroxide, and applied different concentrations （50-200μg,/mL） of green tea polyphenol to the cell medium for 24 hours. Measurements of superoxide dismutase activity, malondialdehyde content, and expression of apoptosis-related genes and proteins revealed that green tea polyphenol effectively alleviated oxidative stress. Our results indicate that green tea polyphenols play a protective role in spinal cord neurons under oxidative stress.

关键词： nerve regeneration spinal cord injury nerve cells green tea polyphenols spinal cordneurons oxidative stress apoptosis malondialdehyde superoxide dismutase rats NSFC grant neural regeneration

Gold nanoclusters conjugated berberine reduce inflammation and alleviate neuronal apoptosis by mediating M2 polarization for spinal cord injury repair

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Regenerative Biomaterials 2022年第1期9卷 247-259页

作者： Zipeng Zhou Dan Li Xiangyi Fan yajiang yuan Hongyu Wang Dahao Wang Xifan Mei Department of The First Clinical College Liaoning University of Traditional Chinese MedicineNo.79Chongshan East RoadHuanggu DistrictShenyang CityLiaoning Province 110847P.R.China Department of Orthopedics First Affiliated Hospital of Jinzhou Medical UniversityJinzhouChina Department of Basic Science Jinzhou Medical UniversityJinzhouChina Department of Otolaryngology-Head and Neck Surgery First Affiliated Hospital of Jinzhou Medical UniversityJinzhouChina Jinzhou Medical University No.40Section 3Songpo RoadLinghe District Jinzhou CityLiaoning Province 121001P.R.China

Spinal cord injury(SCI)leads to nerve cell apoptosis and loss of motor ***,excessive activation of the M1 phenotype macrophages/microglia is found to be the main reason for the poor prognosis of SCI,but the selective activation phenotype(M2)macrophages/microglia facilitates the recovery of ***,we used gold nanoclusters loaded berberine(BRB-AuNCs)to reduce inflammation by inhibiting the activation of M1 phenotype macrophages/microglia,which simultaneously inhibited neuronal apoptosis after *** vitro and in vivo experiments showed that BRB-AuNCs reduced M1 protein marker CD86,increased M2 protein marker CD206,reduced inflammation and apoptotic cytokines(IL-1β,IL-6,TNF-α,Cleaved Caspase-3 and Bax).These results indicate that BRB-AuNCs have excellent anti-inflammatory and anti-apoptotic effects by inducing the polarization of macrophages/microglia from M1 phenotype to M2 ***,the motor functions of SCI rats were significantly improved after treatment with *** work not only provides a new way for the treatment of SCI but also broadens BRB utilization strategies.

关键词： gold nanoclusters berberine macrophages/microglia spinal cord injury

软骨细胞培养液诱导肌源性干细胞转化为软骨样细胞

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解剖学杂志 2009年第4期32卷 451-454页

作者：袁亚江梅晰凡辽宁医学院附属第一医院骨科锦州121000

目的：体外定向诱导大鼠肌源性干细胞（MDSCs）向软骨细胞转化，并对诱导细胞进行鉴定。方法：用差速贴壁的方法对SD大鼠MDSCs进行分离和培养。同时将软骨细胞进行体外培养，收集软骨细胞培养液作为MDSCs诱导液。将MDSCs进行诱导分化，9... 详细信息

目的：体外定向诱导大鼠肌源性干细胞（MDSCs）向软骨细胞转化，并对诱导细胞进行鉴定。方法：用差速贴壁的方法对SD大鼠MDSCs进行分离和培养。同时将软骨细胞进行体外培养，收集软骨细胞培养液作为MDSCs诱导液。将MDSCs进行诱导分化，9d后取出标本，行甲苯胺蓝染色检测软骨基质的分泌，免疫组织化学检测软骨特异性Ⅱ型胶原表达。RT-PCR检测Ⅱ型胶原和aggrecan mRNA表达。结果：5d后镜下见细胞形态由梭形向多边多角形转化。9d后诱导组甲苯胺蓝染色阳性，Ⅱ型胶原免疫组织化学检测阳性，RT-PCR检测Ⅱ型胶原和aggrecan mRNA呈阳性表达。结论：软骨细胞培养液可诱导MDSC向软骨细胞转化。

关键词：肌源性干细胞软骨细胞细胞分化

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SD大鼠成骨细胞培养方法的改良

解剖学杂志 2015年第2期38卷 162-164,194页

作者：高蔚然袁亚江房师强梅晰凡辽宁医学院附属一院骨科

目的：建立大鼠成骨细胞的分离、培养方法,并进行改良.方法：分别应用酶消化法、传统的植块法和采用胶原酶消化结合骨片贴附法进行成骨细胞原代培养,通过细胞形态学、Von Kossa钙结节染色和免疫印迹对细胞纯度进行鉴定,通过生长曲线对3... 详细信息

目的：建立大鼠成骨细胞的分离、培养方法,并进行改良.方法：分别应用酶消化法、传统的植块法和采用胶原酶消化结合骨片贴附法进行成骨细胞原代培养,通过细胞形态学、Von Kossa钙结节染色和免疫印迹对细胞纯度进行鉴定,通过生长曲线对3种方法取得的原代细胞生长情况进行比较.结果：3种培养方式均可获得高纯度成骨细胞,应用胶原酶消化结合骨片贴附法可以长期获得具有稳定生物学特征的成骨细胞.结论：胶原酶消化结合骨片贴附法可以较长期获得高纯度成骨细胞.

关键词：成骨细胞原代培养胶原酶消化法骨片贴附法

Detla1基因在肌源性干细胞分化为神经样细胞过程中的表达

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解剖学杂志 2011年第5期34卷 641-643页

作者：郭占鹏梅晰凡袁亚江张赫李全双辽宁医学院附属第一医院骨科锦州121001

目的：研究Detla1基因在大鼠肌源性干细胞体外诱导分化为神经样细胞过程中的表达。方法：大鼠乳鼠骨骼肌体外培养增殖,分为对照组完全培养基培养，实验组加入诱导剂培养。通过RT-PCR、免疫荧光和免疫印迹法观察Detla1基因在诱导组和对... 详细信息

目的：研究Detla1基因在大鼠肌源性干细胞体外诱导分化为神经样细胞过程中的表达。方法：大鼠乳鼠骨骼肌体外培养增殖,分为对照组完全培养基培养，实验组加入诱导剂培养。通过RT-PCR、免疫荧光和免疫印迹法观察Detla1基因在诱导组和对照组的表达差异。结果：对照组Detla1基因表达强阳性，实验组基本不表达。结论：大鼠肌源性干细胞分化为神经样细胞过程中Detla1基因表达减低。

关键词： Detla1基因肌源性干细胞神经样细胞

MDT模式下CBL教学法在肝癌临床教学中的应用

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继续医学教育 2017年第10期31卷 41-42页

作者：高蔚然王季堃袁亚江锦州医科大学附属第一医院肿瘤科辽宁锦州121000 锦州医科大学附属第一医院骨科辽宁锦州121000

目的探讨MDT模式下CBL教学法在肝癌临床教学中的应用。方法选取锦州医科大学临床医学专业学生共60人,随机按班级分为对照组(传统教学LBL组)30人和实验组(CBL联合MDT组)30人,分别按照各组教学方式进行肝癌临床实习教学,比较两组教学效果... 详细信息

目的探讨MDT模式下CBL教学法在肝癌临床教学中的应用。方法选取锦州医科大学临床医学专业学生共60人,随机按班级分为对照组(传统教学LBL组)30人和实验组(CBL联合MDT组)30人,分别按照各组教学方式进行肝癌临床实习教学,比较两组教学效果及教学的满意度。结果 (1)实验组与对照组的理论成绩相比较差异无统计学意义(P>0.05),但实验组对病例分析的成绩要高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);(2)调查问卷分析结果显示:实验组学生的满意度相比对照组高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 MDT模式下CBL教学法在肝癌临床教学中教学效果好,满意度高。

关键词：多学科综合治疗 CBL教学法肝癌临床教学

大鼠肌源性干细胞分化为神经样细胞过程中Hes1蛋白的表达差异

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神经解剖学杂志 2010年第6期26卷 652-656页

作者：张赫梅晰凡郭占鹏李全双袁亚江刘世琼辽宁医学院附属第一医院骨科锦州121000

目的:研究Hes1蛋白在大鼠肌源性干细胞(MDSCs)体外诱导分化为神经样细胞过程中的表达差异。方法:大鼠乳鼠骨骼肌消化后体外培养增殖,第5代传代后细胞分为两组:对照组完全培养基培养,实验组加入诱导剂培养。6d后观察两组细胞的形态变化,... 详细信息

目的:研究Hes1蛋白在大鼠肌源性干细胞(MDSCs)体外诱导分化为神经样细胞过程中的表达差异。方法:大鼠乳鼠骨骼肌消化后体外培养增殖,第5代传代后细胞分为两组:对照组完全培养基培养,实验组加入诱导剂培养。6d后观察两组细胞的形态变化,并进行神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)免疫细胞化学鉴定。然后通过免疫荧光和Western Blot技术观察Hes1蛋白的表达差异。结果:实验组细胞呈NSE染色阳性,对照组基本不表达;免疫荧光和Western Blot结果显示,与对照组比较,实验组Hes1蛋白表达较强(P<0.05)。结论:在体外,大鼠肌源性干细胞分化为神经样细胞过程中Hes1蛋白表达降低。

关键词：肌源性干细胞神经样细胞 Hes1蛋白大鼠

SD大鼠肋软骨细胞的原代培养和去分化现象的观察

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辽宁医学院学报 2009年第5期30卷 396-399,478页

作者：袁亚江梅晰凡高蔚然张赫辽宁医学院附属第一医院骨科辽宁医学院附属第一医院肿瘤科辽宁锦州121001

目的建立大鼠肋软骨细胞(RCC)分离、培养的方法,探讨其传代过程中细胞外基质及其形态的变化。方法采用胰酶和Ⅱ型胶原酶两步消化法结合机械吹打获得分散的单个RCC,观察单层培养的不同代数RCC的细胞形态变化;采用免疫细胞化学方法检测不... 详细信息

目的建立大鼠肋软骨细胞(RCC)分离、培养的方法,探讨其传代过程中细胞外基质及其形态的变化。方法采用胰酶和Ⅱ型胶原酶两步消化法结合机械吹打获得分散的单个RCC,观察单层培养的不同代数RCC的细胞形态变化;采用免疫细胞化学方法检测不同代数RCC蛋白多糖和Ⅱ型胶原的表达。结果大鼠肋软骨经两步消化后,可获得高纯度的软骨细胞,经免疫组化及甲苯胺蓝染色呈阳性结果,同时观察到RCC在传代过程中细胞发生了去分化现象。结论软骨细胞可以通过传代培养获得扩增,但仅限于四代以内细胞。

关键词：大鼠软骨细胞单层培养去分化