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First description of increased resistance in carbapenem-susceptible Klebsiella pneumoniae with imipenem treatment driven by outer membrane remodelling in China

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First description of increased resistance in carbapenem-susc...

2019年浙江省医学会医学微生物与免疫学分会学术大会

作者： Xuebin Tian xiangkuo zheng Yajie Zhao Renchi Fang Jiahui Li Chong Wang Haiyang Liu Tieli Zhou Jianming Cao School of Laboratory Medicine and Life Sciences Wenzhou Medical University Department of Clinical Laboratory The First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical University

目的探讨同一患者在治疗过程中连续分离的肺炎克雷伯菌碳青霉烯耐药性的演变及其机制。方法药敏试验检测同一住院病人不同时期肺炎克雷伯菌分离株FK-2624,FK-2723和FK-2820的耐药性;改良的Hodge试验进行碳青霉烯酶表型的确认;采用聚合... 详细信息

目的探讨同一患者在治疗过程中连续分离的肺炎克雷伯菌碳青霉烯耐药性的演变及其机制。方法药敏试验检测同一住院病人不同时期肺炎克雷伯菌分离株FK-2624,FK-2723和FK-2820的耐药性;改良的Hodge试验进行碳青霉烯酶表型的确认;采用聚合酶链式反应(PCR)检测菌株耐药基因和毒力因子的携带情况;通过脉冲场凝胶电泳(MLST)和多位点序列分型(MLST)检测菌株克隆相关性;采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测细菌外膜蛋白完整性;通过实时荧光定量PCR分析外膜蛋白编码基因ompk35和ompk36的表达量。结果药敏试验表明FK-2624对所有试验药物敏感,FK-2723对头孢菌素类,氨基糖苷类和喹诺酮类药物均具有耐药性,除了上述药物,FK-2820对碳青霉烯也具备耐药性;FK-2820改良的Hodge试验为阴性;PCR结果显示FK-2723和FK-2820均携带blaSHV,blaDHA,qnrB,qnrD,qnrS,aac(6’)-Ib-cr,和fosA5,除此之外,FK-2820还携带blaCTX-M-14和rmtC,但是不产碳青霉烯酶;FK-2624携带毒力因子K57,mrkD和entB;FK-2723和FK-2820均携带K57,kfu,rmpA和mrkD;PFGE和MLST表明三株菌具有高度相似性且均属于ST 660型;SDS-PAGE显示FK-2820缺失OmpK36蛋白;RT-PCR表明FK-2820的ompk36的较质控菌株ATCC 13883相对表达量降低10.75倍。结论 14天的亚胺培南治疗,导致肺炎克雷伯菌外膜蛋白OmpK36缺失,进而对碳青霉烯耐药。

关键词：肺炎克雷伯菌外膜蛋白亚胺培南治疗,碳青霉烯耐药

Emergence of a multi-drug resistant ST 27 Escherichia coli coharboring blaNDM-1,mcr-1 and fosA3 from a patient in China

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2019年浙江省检验医学学术大会

作者： Xuebin Tian Renchi Fang Qing Wu xiangkuo zheng Yajie Zhao Guofeng Dong Chong Wang Tieli Zhou Jianming Cao School of Laboratory Medicine and Life Sciences Wenzhou Medical University Department of Clinical Laboratory The First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical University

Objective:Here,we report an Escherichia coli strain isolated from an inpatient that co-harbored bla,mcr-1 and ***:Antimicrobial susceptibility testing,polymerase chain reaction,multi-locus sequence typing,conjugation experiment and Southern blot hybridization were performed on this *** locations of bla,mcr-1,fosA3 and other resistance genes were identified as ***:The isolate was obtained from wound;it showed multi-drug resistance but susceptible to *** was typed as sequence type *** isolate possessed bla,mcr-1,fosA3,bla,bla,aac (6’)-Ib-cr and *** addition,mutations Ser83Leu and Asp87Asn in gyrA,Ser80Ile in parC were *** bla,fosA3 and sul1 were co-located on～100-kb Z-plasmid,whereas the mcr-1,bla and bla were found on the～60-kb IncFIB ***:This is the first reported of bla,mcr-1 and fosA3 co-harboring in *** isolate is of great concern for us because the dissemination of the resistance plasmids means that common infections with such strains may soon be untreatable.

关键词： Escherichia coli blaNDM-1 mcr-1 fosA3 Southern blot

Evaluation and Modification of the Rapid Polymyxin NP Test for Detection of Colistin-resistant Acinetobacter baumannii

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2018年浙江省检验医学学术年会

作者： Renchi fang Xuebin Tian Lijiang Chen xiangkuo zheng Chong Wang Guofeng Dong Haiyang Liu Jianming Cao Tieli Zhou The First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical University School of Medical Lab Science Wenzhou Medical University

Emergence of polymyxin resistance in Acinetobacter baumannii is growing into a non-negligible challenge to clinical *** conventional methods of antimicrobial susceptibility test,including E-test and disk diffusion,are not reliable due to the unsatisfactory diffusion of polymyxin in agar while the reference method,broth microdilution method,is time-consuming and requires careful operation.

关键词：

Clinical,Microbiological and Molecular Epidemiological Characteristics of Klebsiella pneumoniae-causing Pyogenic Liver Abscess in Southeastern China

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Clinical,Microbiological and Molecular Epidemiological Chara...

2019年浙江省检验医学学术大会

作者： Siqin Zhang Xiucai Zhang Qing Wu xiangkuo zheng Guofeng Dong Renchi Fang Yizhi Zhang Jianming Cao Tieli Zhou The First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical University School of Laboratory Medicine and Life Science Wenzhou Medical University

Background: Klebsiella pneumoniae-causing pyogenic liver abscess(KP-PLA) is emerging as a global lifethreatening disease. However, far too little attention has been paid to systematically elucidate the characteristics...

关键词：

First description of increased resistance in carbapenem-susceptible Klebsiella pneumoniae with imipenem treatment driven by outer membrane remodelling in China

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First description of increased resistance in carbapenem-susc...

2019年浙江省检验医学学术大会

作者： Xuebin Tian Qiongdan Wang xiangkuo zheng Yajie Zhao Renchi Fang Jiahui Li Chong Wang Haiyang Liu Tieli Zhou Jianming Cao School of Laboratory Medicine and Life Sciences Wenzhou Medical University Department of Clinical Laboratory The First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical University

Carbapenem was considered as the last resort to combat multidrug-resistant K. pneumoniae, but the emergence of carbapenem-resistant K. pneumoniae posed threats again. Although there are numerous studies regarding porin alteration in association with the production of ESBLs and/or AmpC β-lactamase, a systematic research about the treatment-emergence of porins in antibiotic resistance does not exist yet. Here, we reported three strains(FK-2624, FK-2723 and FK-2820) isolated from one patient before and after imipenem treatment during hospitalization. The aim of this study was to investigate the underlying mechanism and evolution of treatment-emergent carbapenem-resistance. Antibiotic susceptibility testing indicated that FK-2624 was susceptible to almost antimicrobials but fosfomycin;FK-2723 and FK-2820 were multidrug-resistant(MDR), after imipenem therapy, and FK-2820 was evolved to carbapenem-resistant. FK-2624 harbored resistance genes blaSHV, oqxA and fosA5 by PCR and sequencing, in addition, FK-2723 and FK-2820 harbored blaDHA, qnrB, aac(6’)-Ib. Virulence factors K57, ybtA, mrkD, entB and iroN were detected simultaneously in all of three strains. Expect the evidence of sequence type(ST) all belong to ST660, Whole-Genome Sequencing(WGS) and molecular epidemiology showed that strain similarity among them was up to 98%. Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis(SDS-PAGE) results showed that isolate FK-2820 lacked Ompk36 as there was a premature stop codon of the outer membrane porin encoding gene ompk36 confirmed by sequencing. Real-time RT-PCR revealed that the expression of ompK36 in FK-2820 decreased 10.75 times the control isolate ATCC 13883. We speculated that the alteration of outer membrane porins due to the 14-day use of imipenem clinically led to the carbapenems-resistance of FK-2820.

关键词： Klebsiella pneumoniae outer membrane porin imipenem treatment carbapenem resistance Whole-Genome Sequencing

体外联合用药对黏菌素异质性耐药鲍曼不动杆菌的抗菌活性研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2018年第8期38卷 593-598页

作者：张思琴卢鸿曹建明徐春泉张晓亚郑相阔董郭枫周铁丽温州医科大学附属第一医院医学检验中心 325000 长治医学院附属和平医院检验科 046000 温州医科大学检验医学院、生命科学学院 325000

目的评价黏菌素分别与美罗培南、左氧氟沙星和磷霉素联用对黏菌素异质性耐药鲍曼不动杆菌的体外抗菌活性.方法收集2014—2015年温州医科大学附属第一医院临床分离的576株鲍曼不动杆菌,采用微量肉汤稀释法检测黏菌素对鲍曼不动杆菌最... 详细信息

目的评价黏菌素分别与美罗培南、左氧氟沙星和磷霉素联用对黏菌素异质性耐药鲍曼不动杆菌的体外抗菌活性.方法收集2014—2015年温州医科大学附属第一医院临床分离的576株鲍曼不动杆菌,采用微量肉汤稀释法检测黏菌素对鲍曼不动杆菌最小抑菌浓度（MIC）,并采用菌谱分析法（PAPs）筛选黏菌素异质性耐药鲍曼不动杆菌.通过棋盘法设计和微量肉汤稀释法检测黏菌素分别与美罗培南、左氧氟沙星和磷霉素联用及各自单用时对黏菌素异质性耐药鲍曼不动杆菌的MIC值,并通过计算部分抑菌浓度指数（FICI）评价联合抑菌效果.结果通过微量肉汤稀释法检测的576株鲍曼不动杆菌中,未获得黏菌素耐药菌株.通过PAPs筛选共获得9株黏菌素异质性耐药鲍曼不动杆菌,黏菌素与美罗培南、左氧氟沙星和磷霉素联用后对异质性耐药菌株的MIC值较单用时均降低.其中,与美罗培南联用后对黏菌素异质性耐药鲍曼不动杆菌的联合抗菌活性表现为协同作用的占55.6％,相加作用占33.3％,无关作用占11.1％,不存在拮抗作用;与左氧氟沙星联用后对黏菌素异质性耐药鲍曼不动杆菌的联合抗菌活性表现为协同作用的占55.6％,相加作用占22.2％,无关作用占22.2％,不存在拮抗作用;与磷霉素联用后对黏菌素异质性耐药鲍曼不动杆菌的联合抗菌活性表现为协同作用的占77.8％,相加作用占22.2％,不存在无关和拮抗作用.结论黏菌素与美罗培南、左氧氟沙星或磷霉素联用对黏菌素异质性耐药鲍曼不动杆菌的体外抗菌活性主要表现为协同和相加作用,与美罗培南或左氧氟沙星联用的抗菌活性较少表现为无关作用,均无拮抗作用.

关键词：黏菌素异质性耐药鲍曼不动杆菌联合用药

临床常见分离菌对葡萄糖酸氯己定的耐药性及感染患者的临床特征

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中华传染病杂志 2021年第9期39卷 519-523页

作者：石士艺郑相阔张晓亚曾未良喻凯航叶建中周铁丽温州医科大学附属第一医院医学检验中心浙江省325000 临沂市人民医院泌尿外科男科实验室山东省276003

目的探究临床常见分离菌对葡萄糖酸氯己定(chlorhexidine gluconate,CHG)的耐药性,以及感染患者的临床特征。方法收集2018年1月至5月温州医科大学附属第一医院临床常见分离菌共1000株,其中大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、金... 详细信息

目的探究临床常见分离菌对葡萄糖酸氯己定(chlorhexidine gluconate,CHG)的耐药性,以及感染患者的临床特征。方法收集2018年1月至5月温州医科大学附属第一医院临床常见分离菌共1000株,其中大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、肠球菌属细菌各200株。采用琼脂稀释法测定CHG对1000株分离菌的最低抑菌浓度,并分析分离菌对CHG的耐药性与感染患者临床特征之间的相关性。统计学方法采用χ^(2)检验或Fisher确切概率法。结果1000株临床分离菌中,共检出57株CHG耐药菌株,主要分离自痰液标本,占49.1%(28/57);多来源于重症监护病房,占38.6%(22/57)。铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、肠球菌属、金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌对CHG的耐药率分别为16.0%(32/200)、7.0%(14/200)、3.0%(6/200)、1.5%(3/200)和1.0%(2/200)。CHG耐药铜绿假单胞菌对头孢他啶、环丙沙星、左氧氟沙星和庆大霉素的耐药率[53.1%(17/32)、78.1%(25/32)、65.6%(21/32)、50.0%(16/32)]分别高于CHG敏感铜绿假单胞菌[25.0%(8/32)、25.0%(8/32)、21.9%(7/32)、15.6%(5/32)],差异均有统计学意义(χ^(2)=5.317、18.080、12.444、8.576,均P<0.05)。感染CHG耐药菌组患者的住院病死率为22.8%(13/57),高于感染CHG敏感菌组患者的7.0%(4/57),差异有统计学意义(Fisher确切概率法,P=0.018);感染CHG耐药菌组患者的CHG接触史和抗菌药物治疗史占比分别为61.4%(35/57)和70.2%(40/57),分别高于感染CHG敏感菌组的17.5%(10/57)和47.4%(27/57),差异均有统计学意义(χ^(2)=22.947、6.118,均P<0.05);感染CHG耐药菌组多重耐药菌株占比为54.4%(31/57),高于感染CHG敏感菌组的35.1%(20/57),差异有统计学意义(χ^(2)=4.293,P=0.039)。结论CHG耐药菌株具有更高的抗菌药物耐药性。与感染CHG敏感菌患者相比,感染CHG耐药菌患者的住院病死率更高,其重要危险因素是CHG接触史和抗菌药物治疗史。

关键词：葡萄糖酸氯己定临床分离菌耐药性临床特征

氨苄西林分别联合庆大霉素和头孢哌酮对磷霉素耐药肠球菌的体外抗菌作用

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中华微生物学和免疫学杂志 2018年第10期38卷 731-731页

作者：张晓亚毕文姿周翠张艺之董郭枫林婕张思琴郑相阔周铁丽温州医科大学检验医学院生命科学学院 325000 浙江大学医学院附属第四医院检验科义乌322000 温州医科大学附属第一医院医学检验中心 325000

肠球菌是引起患者尿路感染、腹腔脓肿、盆腔感染等常见院内感染的重要机会性致病菌。近年来，随着肠球菌感染率的不断升高和抗菌药物耐药性的不断增加．急需寻求应对肠球菌感染的策略。磷霉素作为近年来重新应用于临床的抗菌药物，在临... 详细信息

肠球菌是引起患者尿路感染、腹腔脓肿、盆腔感染等常见院内感染的重要机会性致病菌。近年来，随着肠球菌感染率的不断升高和抗菌药物耐药性的不断增加．急需寻求应对肠球菌感染的策略。磷霉素作为近年来重新应用于临床的抗菌药物，在临床上发挥了较好的抗菌作用。但随着应用的增加，磷霉素耐药肠球菌也随即出现，为临床抗感染治疗带来极大困扰。

关键词：抗菌药物耐药性肠球菌感染磷霉素头孢哌酮庆大霉素氨苄西林临床抗感染治疗体外

快速多黏菌素NP法在肠杆菌科和鲍曼不动杆菌多黏菌素耐药性检测中的应用评价

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浙江医学 2020年第20期42卷 2161-2165,I0003页

作者：方人驰田学斌陈栎江赵雅洁郑相阔王冲董郭枫刘海洋曹建明周铁丽温州医科大学附属第一医院医学检验中心 325000 温州医科大学检验医学院生命科学学院

目的评价快速多黏菌素NP法检测肠杆菌科(大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌)多黏菌素耐药性的性能,并初步探究其在鲍曼不动杆菌多黏菌素耐药性检测中的应用价值。方法收集2010年至2019年温州医科大学附属第一医院临床分离多黏菌素耐药株42株,其... 详细信息

目的评价快速多黏菌素NP法检测肠杆菌科(大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌)多黏菌素耐药性的性能,并初步探究其在鲍曼不动杆菌多黏菌素耐药性检测中的应用价值。方法收集2010年至2019年温州医科大学附属第一医院临床分离多黏菌素耐药株42株,其中大肠埃希菌14株、肺炎克雷伯菌20株、鲍曼不动杆菌8株;同期多黏菌素敏感株120株,其中大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌各50株、鲍曼不动杆菌20株。采用微量肉汤稀释法确认多黏菌素E最低抑菌浓度(MIC),同时使用快速多黏菌素NP试剂(含1%葡萄糖)检测肠杆菌科细菌对多黏菌素E的耐药性,并评价分别含1%、2%、4%葡萄糖浓度的快速多黏菌素NP试剂对检测鲍曼不动杆菌多黏菌素E耐药性的效果。结果以微量肉汤稀释法检测结果为标准,快速多黏菌素NP法检测肠杆菌科细菌多黏菌素E耐药性的灵敏度、特异度和准确率分别为100%(34/34)、99%(99/100)和99.3%(133/134);采用4%葡萄糖浓度的快速多黏菌素NP试剂,培养至16 h时对鲍曼不动杆菌多黏菌素耐药性检测的灵敏度、特异度和准确率也可达到100%(8/8)、90%(18/20)和92.9%(26/28)。结论快速多黏菌素NP法具有快速、简便、准确的优点,在肠杆菌科细菌的多黏菌素耐药性检测方面具有良好的应用价值,经改良后也可应用于鲍曼不动杆菌的多黏菌素耐药性检测,为当前临床快速可靠检测病原菌对多黏菌素耐药性提供了新的策略。

关键词：药敏试验多黏菌素肠杆菌科鲍曼不动杆菌耐药性