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亚低温对脂多糖诱导急性肺损伤小鼠巨噬细胞极化的影响

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中华危重病急救医学 2024年第5期36卷 514-519页

作者：张碧霞蒋良艳黄立创胡军涛汤展宏广西医科大学第一附属医院重症医学科南宁530021

目的探讨亚低温对脂多糖(LPS)诱导急性肺损伤(ALI)小鼠巨噬细胞极化的影响,从而阐明其对肺损伤的作用。方法将18只雄性C57BL/6小鼠按照随机数字表法分成假手术组(Sham组)、ALI常温模型组(NT组)和ALI亚低温治疗组(HT组),每组6只。采用经... 详细信息

目的探讨亚低温对脂多糖(LPS)诱导急性肺损伤(ALI)小鼠巨噬细胞极化的影响,从而阐明其对肺损伤的作用。方法将18只雄性C57BL/6小鼠按照随机数字表法分成假手术组(Sham组)、ALI常温模型组(NT组)和ALI亚低温治疗组(HT组),每组6只。采用经气管滴注LPS的方法制备小鼠ALI模型,术后1 h给予温度控制,其中NT组将小鼠肛温控制在36~38℃,HT组将小鼠肛温控制在32~34℃,两组需要维持目标肛温6 h,控温6 h后缓慢复温到36~38℃。Sham组则经气管滴入等量生理盐水,不予温度控制。制模后24 h留取血清并处死小鼠取肺组织,光镜下观察肺组织病理学改变并进行半定量肺损伤评分;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中白细胞介素(IL-1β、IL-10)含量;采用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测肺组织巨噬细胞极化相关指标CD86、IL-6、CD206和精氨酸酶1(Arg1)的mRNA表达;采用蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测M1型巨噬细胞指标诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和M2型巨噬细胞指标Arg1的蛋白表达。结果与Sham组相比,NT组肺组织充血、水肿明显,肺间隔明显增厚,炎症细胞浸润,肺损伤评分显著升高;血清IL-1β水平显著升高,IL-10水平升高但差异无统计学意义;肺组织CD86 mRNA、IL-6 mRNA和iNOS蛋白表达明显升高,CD206 mRNA表达明显降低,Arg1 mRNA和蛋白表达降低但差异无统计学意义。与NT组相比,HT组肺组织病理损伤明显减轻,肺损伤评分明显降低(分:4.78±0.96比8.56±1.98,Png/L:13.52±1.95比27.18±3.87,Png/L:42.59±15.79比14.62±4.47,P<0.01);肺组织中IL-6 mRNA表达水平明显降低(2^(-ΔΔCt):3.37±0.92比10.04±0.91,P<0.05),M1型巨噬细胞指标CD86 mRNA和iNOS蛋白表达明显降低〔CD86 mRNA(2^(-ΔΔCt)):0.52±0.16比1.95±0.33,iNOS蛋白(iNOS/β-actin):0.57±0.19比1.11±0.27,均P<0.05〕,M2型巨噬细胞指标CD206 mRNA、Arg1 mRNA和Arg1蛋白表达明显升高〔CD206 mRNA(2^(-ΔΔCt)):3.99±0.17比0.34±0.17,Arg1 mRNA(2^(-ΔΔCt)):2.33±0.73比0.94±0.23,Arg1蛋白(Arg1/β-actin):0.96±0.09比0.31±0.11,均P<0.05〕。结论亚低温可减轻ALI小鼠的炎症反应,保护肺组织,这可能与其抑制M1型巨噬细胞和促进M2型巨噬细胞的极化有关。

关键词：亚低温急性肺损伤巨噬细胞极化炎症

圈养母幼林麝粪便免疫球蛋白和皮质醇的变化特征

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动物学杂志 2024年第1期59卷 67-80页

作者：王毅花刘冬平胡德夫中国林业科学研究院森林生态环境与自然保护研究所国家林业和草原局森林保护学重点实验室北京100091 北京林业大学北京100083

了解母体林麝(Moschusberezovskii)产后及幼体林麝断奶前后的免疫力和应激水平变化特征,可为特殊时期母体及幼体林麝的有效保护与饲养管理提供理论依据。该研究于2010年4至9月,采集哺乳期母体和幼体林麝的粪便样品,通过酶联免疫法对粪... 详细信息

了解母体林麝(Moschusberezovskii)产后及幼体林麝断奶前后的免疫力和应激水平变化特征,可为特殊时期母体及幼体林麝的有效保护与饲养管理提供理论依据。该研究于2010年4至9月,采集哺乳期母体和幼体林麝的粪便样品,通过酶联免疫法对粪便提取液中免疫球蛋白(IgG、IgM和s IgA)以及皮质醇含量进行测定。利用SPSS 22.0对不同阶段母体和幼体林麝粪便样品中的免疫球蛋白和皮质醇水平进行单因素方差分析(one way-ANOVA)及多重比较。母体林麝粪便中IgG、IgM和s IgA的含量测定结果表明,粪便中IgG与IgM含量在分娩后的初期阶段处于较高水平,随着时间推移含量逐渐减少并保持基本稳定,且IgG与IgM表现出类似的变化趋势;s IgA含量在分娩后持续上升,一直持续到第14周后基本保持稳定。幼体林麝粪便中IgG、IgM和s IgA含量测定结果表明,免疫球蛋白表现出明显的变化规律,IgG和IgM含量在断奶(第11周龄左右)后明显下降,s IgA含量在断奶后有所下降,但变化不显著;在第16周龄左右,IgG和IgM含量再次升高,并随着时间的推移趋于稳定,s IgA则无显著变化。母体林麝皮质醇的数据结果表明,其产后的6周内,皮质醇处于较高水平,在第11周左右(断奶期)皮质醇水平有小幅度的升高。幼体林麝皮质醇的数据显示,其在出生后的第11周龄左右(断奶期)皮质醇含量同样呈现出与母体林麝类似的升高趋势,表明断奶这一行为对母体以及幼体林麝均造成一定的生理压力。综上,母体林麝产后的6周内是管护工作的敏感期,幼体林麝成长的第9~15周龄是其存活关键期。

关键词：林麝粪便免疫球蛋白皮质醇

Development and validation of a rapid UPLC/MS method for the simultaneous determination of I3C, DIM, and related metabolites and its application to pharmacokinetics studies

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Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences 2016年第7期25卷 477-488页

作者： Yury Gomez hu Wang Ah-ng Tony Kong Graduate Program in Pharmaceutical Science Ernest Mario School of Pharmacy Rutgers The State University of New Jersey Department of Pharmaceutics Ernest Mario School of Pharmacy Rutgers The State University of New Jersey

Indole-3-carbinol(I3C) and diindolylmethane(DIM) are naturally derived dietary phytochemicals with promising anti-cancer properties that have been demonstrated both in vitro and in vivo. Using reversed-phase ultra-performance liquid chromatography(UPLC) coupled with mass spectrometry(MS), a rapid, specific, and high throughput method was developed and validated for the quantification and identification of I3 C, DIM, and other I3 C metabolites in plasma. Samples containing I3 C or DIM and the internal standard 4-methoxy indole(IS) were extracted using a liquid-liquid extraction technique. The mean recovery was 96.21% for I3 C and 108.5% for DIM. Separation was achieved using a Waters Acquity UPLC HSS T3, 1.8 μm, 2.1 mm×150 mm column and acetonitrile–water gradient elution. The flow rate was 0.3 m L/min and the run time was 9 min. The limits of detection and quantification for I3 C and DIM were 15 ng/m L and 25 ng/m L, respectively. Calibration curves for I3 C and DIM were linear(r2>0.99) over a concentration range of 0.025–20 μg/m L. Precision, accuracy, and stability analysis fulfilled the CDER guidelines criteria. The method was successfully applied to the determination of the pharmacokinetic parameters of I3 C or DIM after oral, intravenous, or intraperitoneal administration to Sprague Dawley rats. The method described here is superior over existing analytical methods for I3 C and its metabolites in terms of sensitivity, speed, and separation.

关键词： UPLC/MS Indole-3-Carbinol Diindolylmethane Pharmacokinetics Single-dose administration Sprague-Dawley Rats

脑卒中吞咽障碍患者营养状况的影响因素及间歇经口食管管饲的应用效果分析

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当代医学 2024年第3期30卷 60-63页

作者：陈梦丽胡敏南昌大学第二附属医院神经内科江西南昌330006

目的探讨脑卒中吞咽障碍患者营养状况的影响因素及间歇经口食管管饲(IOE)的应用效果。方法选取2020年1月至2022年1月于南昌大学第二附属医院接受治疗的113例脑卒中吞咽障碍合并营养不良患者作为研究对象,依据患者入院后1个月体质量的丢... 详细信息

目的探讨脑卒中吞咽障碍患者营养状况的影响因素及间歇经口食管管饲(IOE)的应用效果。方法选取2020年1月至2022年1月于南昌大学第二附属医院接受治疗的113例脑卒中吞咽障碍合并营养不良患者作为研究对象,依据患者入院后1个月体质量的丢失情况分为中度营养不良组(中度组,n=63)与重度营养不良组(重度组,n=50),比较两组临床资料,并采用多因素Logistics回归分析探讨营养不良的影响因素。另依据营养支持方法的不同分为鼻饲组(ng组,n=57)与间歇经口食管管饲组(IOE组,n=56),比较管饲前后两组营养状况。结果重度组高血压、感染、脑出血占比高于中度组,洼田饮水分级4级与5级总占比高于中度组,心理状态抑郁自评量表(SDS)评分高于中度组,差异有统计学意义(Png组血红蛋白(Hb)、白蛋白(ALB)及总蛋白(TP)水平比较差异无统计学意义;营养支持后,IOE组Hb、ALB、TP水平均高于ng组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论高血压、合并脑出血、洼田饮水试验分级5级及SDS评分高是脑卒中吞咽障碍患者发生重度营养不良的独立危险因素,采用IOE的营养支持方式可更有效改善患者营养不良状况。

关键词：脑卒中吞咽障碍营养状况影响因素间歇经口食管管饲

手术治疗的坏死性小肠结肠炎早产儿并发脑损伤的危险因素分析

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中华小儿外科杂志 2024年第7期45卷 613-618页

作者：徐豆豆殷小利胡佩佩许马利李巍松王杨安徽医科大学第一附属医院儿科合肥230022

目的探讨手术治疗的坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis,NEC)早产儿并发脑损伤的危险因素。方法回顾性分析2016年1月至2022年12月安徽医科大学第一附属医院手术治疗的55例NEC早产儿临床资料,所有患儿中位发病日龄为16(12,25)d... 详细信息

目的探讨手术治疗的坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis,NEC)早产儿并发脑损伤的危险因素。方法回顾性分析2016年1月至2022年12月安徽医科大学第一附属医院手术治疗的55例NEC早产儿临床资料,所有患儿中位发病日龄为16(12,25)d;修正Bell分期为ⅡB期17例(30.9%,17/55),Ⅲ期38例(69.1%,38/55)。依据患儿纠正胎龄近足月时的磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)评分作为脑损伤的判断指标,将患儿分为MRI+组(发生脑损伤,30例)和MRI-组(未发生脑损伤,25例)。比较两组患儿术前围生期情况、临床特征、实验室检查结果、临床合并症和手术情况等。采用多因素logistic回归分析探讨手术治疗的NEC早产儿发生脑损伤的危险因素。结果MRI+组肠穿孔的发生率(66.7%,20/30)高于MRI-组(36.0%,9/25),差异有统计学意义(P=0.032)。MRI+组发病时血红蛋白水平低于MRI-组[(108.9±17.5)g/L比(129.3±24.2)g/L,P=0.001],降钙素原(procalcitonin,PCT)水平高于MRI-组[18.6(0.4,34.0)ng/ml比1.5(0.8,3.0)ng/ml,P=0.029]。MRI+组病变肠管以多病灶型或广泛病变型为主(60.0%,18/30),MRI-组以局灶型病变居多(72.0%,18/25),差异有统计学意义(P=0.018)。多因素logistic回归分析显示,发病时PCT(OR=1.108,95%CI:1.012~1.214)是手术治疗的NEC早产儿发生脑损伤的独立危险因素,血红蛋白(OR=0.955,95%CI:0.918~0.994)是保护因素。结论发病时PCT是手术治疗的NEC早产儿发生脑损伤的独立危险因素,血红蛋白是保护因素,动态监测PCT和血红蛋白水平有助于评估手术治疗NEC早产儿的神经发育结局。

关键词：小肠结肠炎,坏死性早产儿脑损伤外科手术危险因素

百令胶囊联合复方异丙托溴铵治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者的临床研究

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中国临床药理学杂志 2024年第3期40卷 317-320页

作者：石琛高瑜刘红艳姬文兰胡萍陕西省结核病防治院、陕西省第五人民医院内四科陕西西安710100 陕西省结核病防治院、陕西省第五人民医院内五科陕西西安710100

目的观察百令胶囊联合吸入用复方异丙托溴铵溶液治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者的临床疗效和安全性。方法将AECOPD患者随机分为对照组和试验组。对照组给予雾化吸入复方异丙托溴铵每次2.5 mL,每天3次;试验组在对照组治... 详细信息

目的观察百令胶囊联合吸入用复方异丙托溴铵溶液治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者的临床疗效和安全性。方法将AECOPD患者随机分为对照组和试验组。对照组给予雾化吸入复方异丙托溴铵每次2.5 mL,每天3次;试验组在对照组治疗的基础上,给予百令胶囊每次2.5 g,每天3次,口服。2组患者均治疗2周。比较2组患者的临床疗效、用力肺活量(FVC)、动脉血氧分压(PO_(2))及血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)、可溶性髓系细胞触发受体-1(sTREM-1)水平,以及药物不良反应的发生情况。结果试验组和对照组均入组49例,均无患者脱落。治疗后,试验组和对照组的总有效率分别为95.92%(47例/49例)和83.67%(41例/49例),在统计学上差异有统计学意义(Png·L^(-1),sICAM-1分别为(327.52±31.19)和(420.20±38.88)μg·L^(-1),sTREM-1分别为(31.14±3.22)和(38.85±5.29)ng·L^(-1),在统计学上差异均有统计学意义(均P0.05)。结论百令胶囊联合吸入用复方异丙托溴铵溶液治疗AECOPD患者的临床疗效优于单用复方异丙托溴铵,且不增加药物不良反应的发生率。

关键词：百令胶囊吸入用复方异丙托溴铵溶液慢性阻塞性肺疾病急性加重期临床疗效安全性评价

抗癌胚抗原(CEA)纳米抗体的筛选鉴定及双纳米抗体夹心ELISA检测CEA

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中国生物工程杂志 2024年第2期44卷 48-58页

作者：王新婷胡倩倩娄楚杨天宁李江伟新疆大学生命科学与技术学院新疆生物资源基因工程重点实验室乌鲁木齐830046

目的:筛选能与癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)高亲和力结合的纳米抗体(nanobodies,Nbs),用于今后开发CEA的快速检测方法。方法:使用人CEA蛋白免疫双峰驼,以淋巴细胞cDNA为模板,采用巢式PCR扩增重链抗体可变区(VHH)基因,连接到p... 详细信息

目的:筛选能与癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)高亲和力结合的纳米抗体(nanobodies,Nbs),用于今后开发CEA的快速检测方法。方法:使用人CEA蛋白免疫双峰驼,以淋巴细胞cDNA为模板,采用巢式PCR扩增重链抗体可变区(VHH)基因,连接到pMECS载体,电转化TG1大肠杆菌,构建VHH cDNA文库。经辅助噬菌体M13K07感染后生成噬菌体展示文库,采用ELISA固相亲和淘洗方法,富集与CEA结合的VHH克隆,通过胞间质可溶性ELISA(PE-ELISA)筛选与CEA高结合的纳米抗体,并在WK6中进行IPTG诱导表达和亲和纯化。ELISA检测纳米抗体与CEA的结合特异性,竞争ELISA筛选配对纳米抗体构建夹心ELISA。结果:构建获得了库容为2.8×10^(8) cfu的VHH文库,菌液PCR表明VHH插入约为100%,随机挑取第2~3轮淘洗富集的90个克隆进行PE-ELISA检测,结果45个克隆为阳性,序列分析表明,它们编码7个纳米抗体序列。在WK6中,这些纳米抗体以可溶形式表达,经Ni亲和层析获得了纯度接近90%的重组纳米抗体。间接ELISA显示7株纳米抗体均特异结合CEA,其中2株纳米抗体3G2和3F4与CEA具有较高亲和力且呈浓度依赖,即使在高浓度(5μg/mL)下也不与无关蛋白溶菌酶结合,表现出较高特异性。竞争ELISA结果显示,3G2和3F4在结合CEA中没有竞争作用,表明3G2和3F4结合在CEA的不同表位。将3F4作为捕获抗体,3G2作为检测抗体,建立了双纳米抗体夹心ELISA方法(2Nbs-ELISA法),其对溶液中CEA的检测限(limit of detection,LOD)为1.8 ng/mL。结论:采用获得的两株CEA特异纳米抗体建立了夹心ELISA检测方法,对CEA的检测具有更高敏感性和特异性。

关键词： CEA 纳米抗体噬菌体展示表位归类双纳米抗体夹心ELISA

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橘园绿肥种植对土壤氨氧化微生物的影响

农业环境科学学报 2024年第1期43卷 122-132页

作者：魏振康王雪伍玉鹏胡荣桂姜炎彬华中农业大学资源与环境学院武汉430070

本研究以当阳凤凰山长期定位施肥柑橘试验基地为平台,进行了自然生草(ng)、人工种植光叶苕子(LP)以及光叶苕子混播于自然生草(NL)等三种绿肥处理,通过植物群落调查、土壤理化性质测定,以及qPCR和Illumina Miseq高通量测序的方法,阐明橘... 详细信息

本研究以当阳凤凰山长期定位施肥柑橘试验基地为平台,进行了自然生草(ng)、人工种植光叶苕子(LP)以及光叶苕子混播于自然生草(NL)等三种绿肥处理,通过植物群落调查、土壤理化性质测定,以及qPCR和Illumina Miseq高通量测序的方法,阐明橘园土壤氨氧化微生物AOA和AOB的功能基因丰度和群落结构对不同绿肥种植处理的响应特征,并探讨植物群落和土壤理化因子对它们的影响。研究结果表明:相比于ng,人工种植绿肥(LP和NL)对AOA和AOB数量的影响不一,LP降低了AOA和AOB的amoA基因拷贝数,NL降低了AOA-amoA但增加了AOB-amoA基因拷贝数;LP和NL中AOA的Ace指数和Chao指数显著高于ng,LP中AOB的Shannon指数显著高于ng,三个处理的β多样性差异显著;三种绿肥种植处理下AOA共获得119个OTU,优势门和属分别是泉古菌门和norank—Crenarchaeota,其中norank—Crenarchaeota在ng中的相对丰度显著高于LP和NL;AOB共获得142个OTU,优势门和属分别是变形菌门和亚硝化螺菌属,其中亚硝化螺菌属的相对丰度在不同处理中有显著差异,其LP中最高,为45.87%;Mantel检验和冗余-层次分割分析结果表明,氨氧化微生物的丰度、多样性和组成受到绿肥种植后的植物因子(如群落高度、盖度、多样性、地上生物量和地下生物量、根系碳氮含量等)和土壤因子(如pH、土壤含水量、总碳、总氮、铵态氮、硝态氮和速效磷含量等)的共同影响。该研究说明在橘园种植绿肥可改变地上植物群落特征和土壤理化性质,从而使土壤中氨氧化微生物的数量和群落结构发生变化,其中光叶苕子混播于自然生草的生草模式可明显增加土壤氨氧化微生物量,促进土壤的硝化作用和改善果园生态环境,因此,实际应用中可优先考虑此模式。

关键词：氨氧化微生物绿肥功能基因群落组成丰度

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水相法制备石墨烯及其性能研究

炭素技术 2024年第3期43卷 67-70页

作者：代伟喻唯胡芳勇刘艳兰伟重庆科技大学化学化工学院重庆401331 重庆涂镀佳科技有限公司重庆401331 重庆科技大学冶金与材料工程学院重庆401331

以纯水为溶剂,以十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)为助剂采用液相剥离法超声剥离制备石墨烯,研究在不同超声时间下石墨烯的剥离情况。采用X射线衍射(XRD)、拉曼光谱(Raman)等手段对石墨烯进行形貌及结构分析,利用特征Raman图谱计算出各强度... 详细信息

以纯水为溶剂,以十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)为助剂采用液相剥离法超声剥离制备石墨烯,研究在不同超声时间下石墨烯的剥离情况。采用X射线衍射(XRD)、拉曼光谱(Raman)等手段对石墨烯进行形貌及结构分析,利用特征Raman图谱计算出各强度比及层数。其中I_(D)/I_(D)′小于3.5,说明缺陷小;I_(2D)/I_(G)小于0.55,即层数小于7。随着超声时间加长,剥离出来的石墨烯层数减少。此次研究为绿色环保制备石墨烯提供借鉴。

关键词：石墨烯液相剥离超声环保