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Hupo powder promotes autophagy of menstrual blood-derived stem cells from patients with endometriosis

Journal of Traditional Chinese Medical Sciences 2023年第2期10卷 179-185页

作者： Yuejian Zhang Changxiang Li Conglu Sui Xiuping Zhang Ya'nan Guo Tiantian He taoxiu lin Xiaona Ma The Third School of Clinical Medicine Beijing University of Chinese MedicineBeijing100029China School of Traditional Chinese Medicine Beijing University of Chinese MedicineBeijing102488China Department of Gynecology Beijing University of Chinese Medicine Third Affiliated HospitalBeijing100029China

Objective:To explore the effect of Hupo powder(HP)on autophagy in menstrual blood-derived stem cells(MenSCs)with endometriosis(EMT).Methods:EMT MenSCs(E-MenSCs)and healthy MenSCs(H-MenSCs)were isolated from the menstrual blood of patients with EMT and healthy female participants,*** identified their stem cells’characteristics via adipogenic and osteogenic *** male SpragueeDawley rats received 0.9% NaCl and HP-dispensing granules by gastric irrigation to prepare blank serum and medicated serum,*** used serum concentrations of 5%,10%,and 20%,each at administered times of 12,24,and 48 h to select the best *** cells were divided into three groups:blank serum of the control group,blank serum of the model group,and medicated serum of the HP group.H-MenSCs were used in the control group,while E-MenSCs were used in the model and HP *** analyzed cell viability using a cell counting kit-8 assay,observed cell morphology,evaluated the amounts of auto-phagosomes and autolysosomes by transmission electron microscopy,and detected the protein expression of autophagy markers(LC3-II and Beclin1)by Western ***:E-MenSCs and H-MenSCs became long fusiform with a diffuse radial pattern,forming lipid droplets and calcium nodules after adipogenic and osteogenic *** then used the best conditiond 20% serum and 48 hdfor the subsequent *** contrast to the model group,the HP group exhibited lower cell viability(=0.007),larger amounts of autophagosomes and autolysosomes(Plin1(P=0.021 and P=0.019,respectively).Conclusion:Hupo powder can promote autophagy in E-MenSCs,which might be one of the mechanisms underlying its therapeutic effects.

关键词： Hupo powder Endometriosis Menstrual blood-derived stem cells Autophagy Beclin1 LC3-II

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最佳中药含药血清浓度的筛选方法研究现状

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中国实验方剂学杂志 2023年第2期29卷 195-202页

作者：林陶秀张文娟张悦健孙新慧霍超越何甜甜马小娜北京中医药大学第三附属医院北京100029

基于血清药理学为理论基础的体外细胞实验是研究中药药效机制的一种常见的研究方式,实验过程中筛选中药含药血清最佳干预浓度是整个实验的关键步骤。中药含药血清若稀释太过,或浓度太大,均可能导致出现假阴性或假阳性结果,最佳中药含药... 详细信息

基于血清药理学为理论基础的体外细胞实验是研究中药药效机制的一种常见的研究方式,实验过程中筛选中药含药血清最佳干预浓度是整个实验的关键步骤。中药含药血清若稀释太过,或浓度太大,均可能导致出现假阴性或假阳性结果,最佳中药含药血清体积分数也可以减少后续实验分组数量,减少操作失误,因此筛选最佳干预血清体积分数对于研究中药药效机制的体外细胞实验具有重要意义。但筛选方法目前尚无统一的标准,查阅近20年国内外文献,从中药灌胃剂量、采血时间、血清稀释程度3个方面进行整理及分析,进而总结出最佳含药血清体积分数的筛选方法,为中药药效机理研究提供指导方向。筛选方法主要有“同剂量灌胃,同采血时间,不同体积分数”“不同剂量灌胃,同采血时间,同体积分数”“同剂量灌胃,不同采血时间,同体积分数”“不同剂量灌胃,不同采血时间,不同体积分数”“血清冻干粉干预法”“血清模拟西药体积分数梯度法”“纯血清干预法”。前2种筛选方法是目前相关实验研究较为常用的方式,以上筛选方法各有利弊,研究者应该根据实验的具体需求及实际情况进行合理选择。

关键词：细胞实验含药血清中药血清药理学体积分数

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滋水清肝理冲饮治疗围绝经期综合征肝郁肾虚证的临床研究

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北京中医药大学学报 2022年第10期45卷 1060-1065页

作者：霍超越刘雁峰林陶秀张悦健孙新慧和翔宇何甜甜张文娟马小娜北京中医药大学第三附属医院北京100029 北京中医药大学北京中医药大学东直门医院

目的观察滋水清肝理冲饮对围绝经期综合征(PMS)肝郁肾虚证患者的临床疗效。方法收集2019年7月—2022年1月就诊于北京中医药大学第三附属医院PMS肝郁肾虚证患者共60例,按照随机数字表法分为滋水清肝理冲饮组30例和对照组30例。滋水清肝... 详细信息

目的观察滋水清肝理冲饮对围绝经期综合征(PMS)肝郁肾虚证患者的临床疗效。方法收集2019年7月—2022年1月就诊于北京中医药大学第三附属医院PMS肝郁肾虚证患者共60例,按照随机数字表法分为滋水清肝理冲饮组30例和对照组30例。滋水清肝理冲饮组给予滋水清肝理冲饮颗粒剂,对照组不加干预,滋水清肝理冲饮组共治疗3个月。3个月后评估比较两组患者的围绝经期症状评分(改良Kupperman评分)、血清性激素水平和世界卫生组织生存质量简表(QOL-BREF)及不良反应。结果滋水清肝理冲饮组的总有效率为90%,明显高于对照组(P<0.05)。两组均无明显不良反应事件。滋水清肝理冲饮组改良Kupperman评分、卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH)较治疗前明显降低,雌二醇(E)和QOL-BREF生理、心理、环境及自评分数较治疗前均明显升高(P<0.05);对照组改良Kupperman评分、FSH明显升高,QOL-BREF心理、社会、环境评分均降低(P<0.05)。与对照组比较,滋水清肝理冲饮组治疗后改良Kupperman评分、血清性激素水平和生活质量指标均明显改善(P<0.05)。结论滋水清肝理冲饮能够改善围绝经期女性的潮热汗出、失眠、情绪激动、抑郁、疲乏等典型症状,同时能改善性激素水平与生活质量,具有治疗PMS肝郁肾虚证的作用,且安全性高。

关键词：滋水清肝理冲饮围绝经期综合征肝郁肾虚证改良Kupperman评分血清性激素生活质量卵巢功能

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基于CXCL12/CXCR4轴探讨琥珀散含药血清促进子宫内膜异位症患者经血源间充质干细胞自噬活性的作用机制

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药物评价研究 2023年第7期46卷 1424-1430页

作者：张悦健林陶秀何甜甜李长香马小娜北京中医药大学第三临床医学院北京100029 北京中医药大学中医学院北京100029 北京中医药大学第三附属医院北京100029

目的基于CXCL12/CXCR4轴探讨琥珀散对子宫内膜异位症(EMT)经血源间充质干细胞(MenSCs)自噬活性的调控作用。方法从EMT患者和健康女性志愿者的月经血中分离提取EMT MenSCs(E-MenSCs)和正常MenSCs(HMenSCs)。采用12只7周龄雄性SD大鼠制... 详细信息

目的基于CXCL12/CXCR4轴探讨琥珀散对子宫内膜异位症(EMT)经血源间充质干细胞(MenSCs)自噬活性的调控作用。方法从EMT患者和健康女性志愿者的月经血中分离提取EMT MenSCs(E-MenSCs)和正常MenSCs(HMenSCs)。采用12只7周龄雄性SD大鼠制备空白血清和含药血清(ig给予大鼠琥珀散9.9 g·kg^(-1),临床等效剂量)。将细胞分为3组:对照组(H-MenSCs)、模型组(E-MenSCs)和琥珀散组(E-MenSCs),对照组和模型组使用20%空白血清干预,琥珀散组使用20%含药血清干预,均干预48 h。分别采用CCK-8法、透射电镜、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blotting法检测3组细胞的细胞活力、自噬体和自噬溶酶体表达、CXCL12和CXCR4的mRNA水平和CXCL12/CXCR4及自噬标志分子(Beclin1和LC3Ⅱ)的蛋白表达量。结果与对照组比较,模型组的细胞活力、CXCL12和CXCR4的mRNA和蛋白表达水平均显著提高(Plin1和LC3Ⅱ的蛋白表达均显著降低(Plin1和LC3Ⅱ的蛋白表达均显著上调(P<0.05、0.01、0.001)。结论琥珀散含药血清能够上调E-MenSCs自噬活性,其作用机制可能与其抑制CXCL12/CXCR4轴有关。

关键词：琥珀散子宫内膜异位症经血源间充质干细胞 CXCL12/CXCR4轴自噬含药血清

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琥珀散通过LncRNA MALAT1/miR-142-3p促进自噬缩小子宫内膜异位症裸鼠异位病灶的机制

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中华中医药杂志 2023年第9期38卷 4142-4147页

作者：张悦健林陶秀何甜甜霍超越高路益杨思晨杨梦萍罗伯茨宋泽马小娜北京中医药大学第三临床医学院北京100029 北京中医药大学第三附属医院北京100029

目的:观察琥珀散对子宫内膜异位症(EMT)裸鼠异位病灶的干预作用,并从LncRNA MALAT1/miR-142-3p介导自噬研究其作用机制。方法:将30只7周龄雌性免疫缺陷小鼠随机分为模型组、琥珀散组(29 g/kg)与地诺孕素组(0.001 g/kg),每组10只。从5例... 详细信息

目的:观察琥珀散对子宫内膜异位症(EMT)裸鼠异位病灶的干预作用,并从LncRNA MALAT1/miR-142-3p介导自噬研究其作用机制。方法:将30只7周龄雌性免疫缺陷小鼠随机分为模型组、琥珀散组(29 g/kg)与地诺孕素组(0.001 g/kg),每组10只。从5例寒凝血瘀型EMT患者月经血中提取经血源间充质干细胞(MenSCs)以制备人MenSCs植入式EMT裸鼠模型。采用HE染色法及人类白细胞抗原α(HLAA)免疫荧光法评价模型。造模成功后连续给药21 d。实时荧光定量PCR和免疫印迹法测定各组异位病灶组织中LncRNA MALAT1、miR-142-3p及自噬标志分子(Beclin1和LC3Ⅱ)的表达情况。结果:造模后,3组注射区均有囊泡样组织形成,病理切片见子宫内膜腺体和间质,免疫荧光示HLAA阳性,系造模成功。与模型组比较,琥珀散组异位病灶体积显著缩小(Plin1的RNA水平、Beclin1和LC3Ⅱ蛋白水平均显著升高(Plin1进而增强异位内膜自噬。

关键词：子宫内膜异位症琥珀散竞争性内源RNA LncRNA MALAT1 miR-142-3p 自噬经血源间充质干细胞异位病灶机制

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中药汤剂联合米非司酮治疗子宫内膜异位症疗效及安全性的网状Meta分析

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药物流行病学杂志 2022年第8期31卷 507-516页

作者：林陶秀张文娟孙新慧郭亚楠马小娜北京中医药大学第三附属医院北京100029

目的:采用贝叶斯网状Meta分析方法评价不同中药汤剂联合米非司酮治疗子宫内膜异位症(EMT)的疗效及安全性。方法:计算机检索CNKI、WanFang Data、VIP、SinoMed、PubMed、EMbase数据库,搜集不同中药汤剂联合米非司酮治疗EMT的随机对照试验... 详细信息

目的:采用贝叶斯网状Meta分析方法评价不同中药汤剂联合米非司酮治疗子宫内膜异位症(EMT)的疗效及安全性。方法:计算机检索CNKI、WanFang Data、VIP、SinoMed、PubMed、EMbase数据库,搜集不同中药汤剂联合米非司酮治疗EMT的随机对照试验(RCT),检索时限均从建库至2021年6月30日。由两名研究者独立筛选文献、提取资料并评价纳入研究的偏倚风险后,采用RevMan 5.3软件进行传统Meta分析,通过R 3.6.1软件进行网状Meta分析。结果:共纳入52个RCT,涉及6种干预措施,包括4833例患者。传统Meta分析结果显示,中药汤剂联合米非司酮组在疗效及安全性上均优于单用米非司酮组;网状Meta分析结果显示,5种中药治疗方式联合米非司酮的临床总有效率均优于单用米非司酮,且排序概率以益气活血法联合米非司酮为最优,妊娠率的排序概率以补肾活血法联合米非司酮为最优,减小异位囊肿、降低血清CA125水平及复发率的排序概率以活血化瘀法联合米非司酮为最优,减少不良反应的排序概率以理气活血法联合米非司酮为最优。结论:对于EMT患者,米非司酮联合中药汤剂的治疗效果明显优于单用米非司酮;在疗效及安全性方面,治疗EMT以理气活血法联合米非司酮为最优。但受纳入文献的质量及数量限制,该结论仍需大量的高质量文献进一步验证。

关键词：中药汤剂米非司酮子宫内膜异位症网状Meta 随机对照试验

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从心、肝、肾论治子宫内膜异位症伴焦虑、抑郁

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中国中医药信息杂志 2023年第5期30卷 5-9页

作者：何甜甜霍超越林陶秀张文娟张悦健马小娜北京中医药大学北京100029 北京中医药大学第三附属医院北京100029

子宫内膜异位症(EMs)常伴随焦虑、抑郁等异常情绪,同时,焦虑、抑郁等精神心理异常可能与EMs发生、发展有关,二者相互影响。EMs患者长期处于负面情绪可加重痛经、月经不调等症状,影响治疗效果,并给患者造成极大的身心负担,严重降低生活... 详细信息

子宫内膜异位症(EMs)常伴随焦虑、抑郁等异常情绪,同时,焦虑、抑郁等精神心理异常可能与EMs发生、发展有关,二者相互影响。EMs患者长期处于负面情绪可加重痛经、月经不调等症状,影响治疗效果,并给患者造成极大的身心负担,严重降低生活质量。本文从中医理论出发,结合女性生理特点及该病症状,基于中医心、肝、肾功能异常与EMs伴焦虑、抑郁的关系,重点阐述从心、肝、肾论治EMs伴焦虑、抑郁的思路和方法。

关键词：子宫内膜异位症焦虑抑郁疏肝行气补肾温阳宁心安神

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基于网络药理学研究琥珀散治疗子宫内膜异位症的作用机制

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中国药师 2020年第12期23卷 2356-2365页

作者：孙新慧张秀平郭亚楠林陶秀张文娟舒珂马小娜北京中医药大学第三附属医院北京100029 北京中医药大学

目的:应用网络药理学研究琥珀散治疗子宫内膜异位症的作用靶点、活性成分、信号通路等,从而探讨琥珀散治疗子宫内膜异位症的作用机制。方法:应用中药系统药理学分析平台(TCMSP)数据库及文献检索对琥珀散中10味中药主要化学成分进行筛选... 详细信息

目的:应用网络药理学研究琥珀散治疗子宫内膜异位症的作用靶点、活性成分、信号通路等,从而探讨琥珀散治疗子宫内膜异位症的作用机制。方法:应用中药系统药理学分析平台(TCMSP)数据库及文献检索对琥珀散中10味中药主要化学成分进行筛选。采用Pubchem、HIT、SwissTargetPrediction、SEA数据库,对筛选出的化合物进行靶点预测。用DisGeNET、Drugbank、TTD、GSE6364、GSE7305数据库,对子宫内膜异位症进行靶点预测。将药物靶点与疾病靶点进行交集,筛选得到疾病-药物成分共同靶蛋白。运用STRING平台构建蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络模型;用Cytoscape 3.7.2软件分别绘制中药-成分网络、成分-靶点网络,进一步筛选核心网络,进行拓扑分析;利用生物信息注释数据库(DAVID)进行基因本体(GO)功能注释富集分析与京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析;利用Cytoscape软件构建琥珀散"有效成分-药物靶点-疾病靶点-信号通路"拓扑网络,确认可能的关键靶点和主要通路。结果:从琥珀散中筛选出190个化合物成分,与子宫内膜异位症关联最强的11个核心靶点;同时筛选出与琥珀散关键成分相关的主要信号通路7条;在此基础上构建了琥珀散的成分-靶点、成分-子宫内膜异位症靶点及相关信号通路的共同表达网络,发现琥珀散可能通过抗黏附、侵袭、种植等多靶点、多途径发挥对子宫内膜异位症的治疗作用。结论:从多角度探索了琥珀散治疗子宫内膜异位症的作用机制,揭示了琥珀散的药理作用,为其后续的实验研究及临床疗效指标的筛选提供了方向。

关键词：琥珀散子宫内膜异位症网络药理学作用机制

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基于“凡血证总以祛瘀为要”探讨琥珀散治疗子宫内膜异位症痛经的临床应用思路

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现代中医临床 2022年第5期29卷 31-34页

作者：林陶秀张文娟郭亚楠孙新慧霍超越何甜甜马小娜北京中医药大学第三附属医院北京100029

子宫内膜异位症(EMT)是好发于育龄期妇女的常见激素依赖性疾病。痛经是EMT的典型临床表现之一,归属于“血证”范畴。基于“凡血证总以祛瘀为要”理论,结合EMT痛经的病因病机,指出EMT痛经的治疗当以活血化瘀、温阳止痛为主。琥珀散有活... 详细信息

子宫内膜异位症(EMT)是好发于育龄期妇女的常见激素依赖性疾病。痛经是EMT的典型临床表现之一,归属于“血证”范畴。基于“凡血证总以祛瘀为要”理论,结合EMT痛经的病因病机,指出EMT痛经的治疗当以活血化瘀、温阳止痛为主。琥珀散有活血化瘀、温阳止痛之效,治疗寒瘀导致的妇科疾病有明显疗效,结合临床医案加以阐析。

关键词：琥珀散子宫内膜异位症痛经血证祛瘀

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子宫内膜异位症患者与健康女性的经血源间充质干细胞自噬功能比较研究

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药物评价研究 2023年第7期46卷 1417-1423页

作者：张悦健林陶秀何甜甜杨思晨李长香睢丛璐郭亚楠马小娜北京中医药大学第三临床医学院北京100029 北京中医药大学中医学院北京100029 北京中医药大学第三附属医院北京100029

目的比较子宫内膜异位症(EMT)患者与健康女性的经血源间充质干细胞(MenSCs)的自噬功能。方法分别从EMT患者及健康女性的月经血中提取EMT MenSCs(E-MenSCs)和正常MenSCs(H-MenSCs),并借助成脂、成骨诱导分化鉴定其干细胞属性。通过CCK-8... 详细信息

目的比较子宫内膜异位症(EMT)患者与健康女性的经血源间充质干细胞(MenSCs)的自噬功能。方法分别从EMT患者及健康女性的月经血中提取EMT MenSCs(E-MenSCs)和正常MenSCs(H-MenSCs),并借助成脂、成骨诱导分化鉴定其干细胞属性。通过CCK-8法比较E-MenSCs和H-MenSCs在12、24、48、72、96、120 h时刻于波长450 nm的吸光度(A)值,并绘制细胞增殖曲线,比较2组细胞的细胞活力;运用透射电镜观察E-MenSCs与H-MenSCs的细胞形态,检测比较其中自噬体和自噬溶酶体的数量;采用Western blotting法检测E-MenSCs和H-MenSCs中自噬标志物微管相关蛋白轻链3-II(LC3-II)和Beclin1的蛋白表达。结果E-MenSCs和H-MenSCs均为长梭形,呈辐射状扩散,且经成脂、成骨诱导分化后均有脂滴、钙结节形成。与H-MenSCs比较,E-MenSCs在72、96、120 h的细胞活力均显著升高(Plin1蛋白表达量也显著降低(P<0.05)。结论与H-MenSCs比较,E-MenSCs的自噬功能减弱,这可能是EMT发病进展的潜在机制。

关键词：子宫内膜异位症经血源间充质干细胞自噬自噬体自噬溶酶体 Beclin1 LC3-Ⅱ

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