检索结果-南通市图书馆

柑桔SRAP和ISSR分子标记技术体系的建立与优化

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分子植物育种 2008年第1期6卷 170-176页

作者：吴鑫雷天刚何永睿刘小丰许兰珍彭爱红陈善春西南大学园艺园林学院西南大学柑桔研究所重庆400712 国家柑桔品种改良中心重庆400712 西南大学柑桔研究所

通过对PCR反应程序、反应体系(DNA模板量、PCR反应体积、Mg2+浓度、dNTP浓度、Taq酶用量、引物量)、电泳检测方法的系统优化,建立了柑桔SRAP-PCR和ISSR-PCR体系;以此进行大规模引物筛选,从而建立了柑桔SRAP和ISSR分子标记技术体系。SRAP... 详细信息

通过对PCR反应程序、反应体系(DNA模板量、PCR反应体积、Mg2+浓度、dNTP浓度、Taq酶用量、引物量)、电泳检测方法的系统优化,建立了柑桔SRAP-PCR和ISSR-PCR体系;以此进行大规模引物筛选,从而建立了柑桔SRAP和ISSR分子标记技术体系。SRAP-PCR:25μL体系,模板DNA25ng,Tris-HCl10mmol/L,KCl50mmol/L,Mg2+1.2mmol/L,dNTP120μmol/L,Taq酶1.5U,引物0.4μmol/L,反应程序为94℃预变性5min,35个循环(94℃30s,47℃1min,72℃1min),72℃延伸10min;ISSR-PCR:25μL体系,模板DNA25ng,Tris-HCl10mmol/L,KCl50mmol/L,Mg2+1.6mmol/L,dNTP200μmol/L,Taq酶1U,引物0.8μmol/L。筛选出稳定性好、多态性高的24对SRAP引物和13条ISSR引物。

关键词：柑桔 SRAP ISSR 建立优化

柑橘R2R3-MYB类转录因子CitMYB20的克隆与表达分析

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分子植物育种 2019年第10期17卷 3199-3207页

作者：范海芳彭蕴张庆雯何永睿邹修平李强彭爱红许兰珍雷天刚陈善春姚利晓西南大学柑桔研究所中国农业科学院柑桔研究所国家柑桔品种改良中心

为解析柑橘R2R3-MYB转录因子家族成员CitMYB20基因的分子生物学特征及受柑橘黄龙病病菌和溃疡病病菌的诱导表达情况。本研究同源克隆了不同柑橘品种中CitMYB20基因的开放阅读框序列,利用生物信息学方法预测其生物学功能并分析比较该基... 详细信息

为解析柑橘R2R3-MYB转录因子家族成员CitMYB20基因的分子生物学特征及受柑橘黄龙病病菌和溃疡病病菌的诱导表达情况。本研究同源克隆了不同柑橘品种中CitMYB20基因的开放阅读框序列,利用生物信息学方法预测其生物学功能并分析比较该基因在不同品种间的序列差异。在洋葱表皮细胞中瞬时表达观察CitMYB20的亚细胞定位。利用qRT-PCR技术分析黄龙病病菌胁迫和溃疡病病菌胁迫时CitMYB20的表达量变化。研究结果显示柑橘CitMYB20基因在晚锦橙、酸柚、纽荷尔脐橙和四季橘中的相似度达到99.01%,高度保守。晚锦橙中该基因含有3个外显子和2个内含子,其开放阅读框为804 bp,编码267个氨基酸残基。CitMYB20蛋白的N端高度保守,具有两个R结构域,属于典型的R2R3类型的MYB转录因子家族的成员。洋葱表皮细胞亚细胞定位分析结果表明该基因定位于细胞核中。CitMYB20基因受黄龙病病菌胁迫时,在黄龙病敏感品种晚锦橙和耐性品种酸柚中均显著上调表达,其中在耐病品种酸柚中上调表达24倍,在感病品种晚锦橙中上调表达34倍;而在溃疡病病菌胁迫时,CitMYB20基因仅在溃疡病抗性品种四季橘中显著差异表达,感病后上调表达3倍。推测该基因对黄龙病和溃疡病的应答差异可能是因为不同的调控机制造成的,构建CitMYB20基因过表达载体拟对不同病原的应答情况进行深入研究。

关键词：柑橘 R2R3-MYB转录因子亚细胞定位黄龙病溃疡病

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利用SSR标记鉴定柚和杂柑品种

分子植物育种 2007年第5期5卷 720-724页

作者：雷天刚何永睿吴鑫刘小丰许兰珍彭爱红陈善春中国农业科学院柑桔研究所重庆400712 西南大学柑桔研究所重庆400712

采用SSR技术,从105对柑桔SSR引物中,筛选出10对在柑桔大类品种间多态性位点丰富、带型清晰、重复性好的SSR引物。利用其中5对SSR引物对5个柚和7个杂柑品种DNA进行PCR分析,共扩增出35条谱带,其中27条谱带呈现多态性,引物多态性带纹比例均... 详细信息

采用SSR技术,从105对柑桔SSR引物中,筛选出10对在柑桔大类品种间多态性位点丰富、带型清晰、重复性好的SSR引物。利用其中5对SSR引物对5个柚和7个杂柑品种DNA进行PCR分析,共扩增出35条谱带,其中27条谱带呈现多态性,引物多态性带纹比例均在60%以上。扩增片断的大小集中在100bp～500bp之间。分别针对柚和杂柑品种筛选出两个高效的引物组合(SSR17、SSR15、SSR16、SSR12与SSR17、SSR18、SSR16),利用这两组引物成功构建出了我国主推的5个柚和7个杂柑品种的特征指纹图谱。并应用指纹图谱自动识别软件Gel2.0对各品种指纹图谱进行识别,建立了相应品种的指纹模式图谱库。

关键词：柚杂柑 SSR 品种鉴定指纹图谱

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柚类种质资源表型多样性分析及综合评价

分子植物育种 2020年第2期18卷 650-664页

作者：胡安华窦万福祁静静雷天刚陈善春邹修平彭爱红许兰珍姚利晓何永睿李强西南大学柑桔研究所中国农业科学院柑桔研究所国家柑桔工程技术研究中心

为了建立合理的柚类分类系统并为柚类育种提供参考,本研究以82份柚类种质资源为试材,采用变异系数、Shannon-Weaver多样性指数、方差、相关性、主成分、聚类、回归分析等对其26个表型性状进行多样性分析、差异分析及综合评价。结果表明:... 详细信息

为了建立合理的柚类分类系统并为柚类育种提供参考,本研究以82份柚类种质资源为试材,采用变异系数、Shannon-Weaver多样性指数、方差、相关性、主成分、聚类、回归分析等对其26个表型性状进行多样性分析、差异分析及综合评价。结果表明:这82个品种的26个性状的变异系数为0.26%。其中翼叶面积和果心面积变异较大,其他性状遗传特性较稳定;单果重、果横径、果形指数、果皮厚、囊瓣数、种子数、果心长和宽、叶片长和宽、叶片面积、花瓣宽、花柄长等性状等级分布均匀,翼叶面积、花瓣数、雄蕊长分级较少且分布不均;来源于中国大陆以外品种的果皮厚、叶柄长、翼叶长,明显优于长江流域和珠江流域来源的材料,但雌蕊长则相反;选育品种的叶片长、宽和面积显著大于遗传材料和地方品种;82个品种可聚为大翼叶大果型、大翼叶小果型,小翼叶大果型,小翼叶小果型4个类群;前7个主成分累计贡献率75.57%,包含了柚类表型性状的大部分信息;26个性状F平均值0.45,其中早暹柚得分最高为0.69,红肉琯溪蜜柚最低为0.24;囊瓣数、种子数等12个性状与F值极显著相关;回归方程筛选出单果重、囊瓣数等19个性状。本研究说明柚类种质资源具有较高的表型多样性,筛选出的19个性状可作为柚类综合评价指标,为柚类育种提供科学依据。

关键词：柚表型多样性综合评价

根癌农杆菌介导甲型肝炎病毒(HAV)衣壳蛋白融合基因转化柑桔成年材料的研究

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分子植物育种 2009年第1期7卷 51-55页

作者：彭爱红彭祝春何永睿许兰珍雷天刚刘小丰姚利晓陈善春中国农业科学院柑桔研究所重庆400712 国家柑桔品种改良中心重庆400712 国家柑桔工程技术研究中心重庆400712

本研究以柑桔优良品种不知火(shinanui)为试料,通过携带质粒pBI121-A的根癌农杆菌转化成年树腋芽,获得转甲型肝炎病毒(HAV)衣壳蛋白融合基因不知火植株。研究结果表明,锦橙试管砧木培养15d时不知火成年树腋芽的嫁接成活率最高,达到90%;... 详细信息

本研究以柑桔优良品种不知火(shinanui)为试料,通过携带质粒pBI121-A的根癌农杆菌转化成年树腋芽,获得转甲型肝炎病毒(HAV)衣壳蛋白融合基因不知火植株。研究结果表明,锦橙试管砧木培养15d时不知火成年树腋芽的嫁接成活率最高,达到90%;不知火不同成熟度的枝条应采用不同的消毒时间,木质化的枝条消毒时间要长些,半木质化的枝条消毒时间要短些。对获得的拟转化植株进行PCR分析以及对PCR阳性植株进行测序,结果表明HAV衣壳蛋白融合基因已整合到不知火的基因组中。

关键词：柑桔根癌农杆菌甲型肝炎病毒衣壳蛋白融合基因转化

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柑桔栽培品种高效基因转化新技术研究

热带作物学报 2000年第2期21卷 37-41页

作者：洪勇何永睿陈善春唐益雄张进仁贾士荣中国农业科学院柑桔研究所重庆400712 中国农业科学院生物技术中心北京100081

采用试管实生苗去芽创伤－农杆菌感染法，将人工合成的抗菌肽基因转入柑桔栽培品种，利用后期筛选和Ｐｅｒａｆｉｌｍ包缠法，提高了转化效率。拟转化植株的叶圆片抗Ｋａｎ能力分析结果表明，锦橙、新会橙和沙田袖的转化效率分别达到４... 详细信息

采用试管实生苗去芽创伤－农杆菌感染法，将人工合成的抗菌肽基因转入柑桔栽培品种，利用后期筛选和Ｐｅｒａｆｉｌｍ包缠法，提高了转化效率。拟转化植株的叶圆片抗Ｋａｎ能力分析结果表明，锦橙、新会橙和沙田袖的转化效率分别达到４６．３％，３９．５％和４３．７％。根据对Ｋａｎ阳性植株的ＰＣＲ分析，证明有抗菌肽基因出现。结果表明，这是一种简便、高效、重复性好的实用基因转化方法。

关键词：柑桔基因转化根癌农杆菌抗菌肽基因育种

Gas chromatographic determination of lignin in sediment

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Acta Oceanologica Sinica 1993年第3期12卷 417-423页

作者： Fu Tianbao, chen Song and Jiang shanchun Third Institute of Oceanography, State Oceanic Administration, Xiamen 361005, China Institute of Geochemistry, Academia Sinica, Guangzhou 510640, China Third Institute of Oceanography State Oceanic Administration Xiamen 361005 China China

After the oxidation of river and marine sediments with CuO under alkaline conditions, the phenolic compounds in the oxidation products are determined gas chromatographically and compared to that of lignin oxidation products. The method of CuO oxidation is compared to that of nitrobenzen. The quantitative determination of produced phenolic compounds by capillary gas chromatography is examined and the blank and repetibility of the method are tested.

关键词： Lignin CuO oxidation GC determination

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面神经断伤吻合后功能恢复变化的实验研究

临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 2008年第7期22卷 318-321页

作者：陈沛包敏俞善纯龚树生华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻咽喉科武汉430022 华中科技大学同济医学院附属协和医院肌电图室武汉430022

目的:观察大鼠面部行为、功能学的恢复变化,为面神经损伤修复研究提供可靠的实验性功能评估手段。方法:建立大鼠面神经断伤吻合模型,术后每周观察触须拂动与瞬目等面部运动,记录健患两侧面神经电图(ENoG)与瞬目反射(BR)的变化。结果:术... 详细信息

目的:观察大鼠面部行为、功能学的恢复变化,为面神经损伤修复研究提供可靠的实验性功能评估手段。方法:建立大鼠面神经断伤吻合模型,术后每周观察触须拂动与瞬目等面部运动,记录健患两侧面神经电图(ENoG)与瞬目反射(BR)的变化。结果:术后患侧触须拂动与瞬目动作消失,但立即出现细微的触须颤抖,术后1个月左右面部运动开始恢复,2个月时可出现瞬目动作同时耳周肌肉的联带运动。ENoG检测时,术后患侧复合肌动作电位(M波)仍可引出,21d时其潜伏期值开始延长,1个月时达高峰并开始恢复,3、4个月时基本稳定但仍不能恢复至健侧水平,其中28～63d时健患两侧潜伏期值的变化与其他各时间点相比差异均有统计学意义(均P<0.05)。健患两侧M波振幅与刺激强度值变化无明显规律,潜伏期、振幅与刺激强度三值间也无相关性。BR检测时,患侧R1波在术后7、14d消失,1个月后恢复检出,2个月左右可在同侧口轮匝肌处记录到提示联带的R1样肌电反射波(R1oris),此后两者潜伏期值均减低,而且2个月时的R1oris潜伏期值均长于此后各时点值(P<0.05)。结论:ENoG和BR检测方法客观可靠,可用以反映大鼠面瘫模型的面部行为、功能学恢复变化,进一步完善后有助于面神经损伤修复机制的相关研究。

关键词：面神经麻痹瞬目反射神经电图

预应力管桩在沿海深厚软土地基施工中出现质量问题的情况分析

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建筑结构 2019年第S2期49卷 863-864页

作者：陈凡朱善春温州市工业设计院温州325000

沿海吹填土地基采用预应力管桩,出现较多工程质量事故,主要原因是基坑开挖时,挖土机处理不当所致。为避免工程质量事故,应采取可靠措施。

关键词：深厚软土预应力管桩开裂断桩挖土机