柑橘抗溃疡病转录因子CsAP2-09互作蛋白筛选与分析

作     者：祁静静 窦万福 张庆雯 胡安华 陈善春 雷天刚 彭爱红 许兰珍 姚利晓 何永睿 李强 QI Jingjing;DOU Wanfu;ZHANG Qingwen;HU Anhua;CHEN Shanchun;LEI Tiangang;PENG Aihong;XU Lanzhen;YAO Lixiao;HE Yongrui;LI Qiang

作者机构：西南大学/中国农业科学院柑桔研究所国家柑桔工程技术研究中心重庆400712 

出 版 物：《园艺学报》 (Acta Horticulturae Sinica)

年 卷 期：2020年第47卷第3期

页      面：432-444页

核心收录：

学科分类：09[农学] 0902[农学-园艺学] 090201[农学-果树学] 

基　　金：国家重点研发计划项目(2018YFD1000300) 中央高校基本科研业务费项目(SWU115025) 广西科技重大专项(桂科AA18118046-6) 国家现代农业产业技术体系建设专项资金项目(CARS-26) 重庆市社会事业与民生体系保障科技创新专项(cstc2016shms-ztzx80001,cstc2017shms-xdny80051) 

主　　题：柑橘 柑橘溃疡病 GST pull-down CsAP2-09 AP2/ERF 互作蛋白 

摘      要：以前期获得的柑橘抗溃疡病的正调控转录因子基因CsAP2-09超表达植株为材料,利用GST融合蛋白沉降技术(GST pull-down)联合液相色谱串联质谱(LC–MS/MS)方法筛选并鉴定CsAP2-09的互作蛋白。首先原核表达并纯化GST-CsAP2-09作为诱饵蛋白,然后与CsAP2-09超表达植株叶片总蛋白孵育、洗脱后进行SDS-PAGE验证,最后进行LC–MS/MS鉴定。得到17个互作蛋白,将蛋白进行注释、GO分析、KEGG分析,发现其中5个可能与植物抗病相关(如过氧化氢酶Cs3g27280)。构建这17个蛋白的互作网络,其中14个蛋白的互作关系得到已有数据的支持。对CsAP2-09与互作蛋白的共表达分析发现CsAP2-09超表达引起了16个蛋白表达上调和1个蛋白表达下调。