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MicroRNA-184 negatively regulates corneal epithelial wound healing via targeting CDC25A,CARM1,and LASP1

Eye and Vision 2020年第2期7卷 336-346页

作者： qiongjie cao Weiwei Xu Weiwei Chen Dewei Peng Qi Liu Jing Dong Peter S.Reinach Dongsheng Yan School of Ophthalmology and Optometry Eye HospitalWenzhou Medical University270 Xueyuan RoadWenzhou 325027ZhejiangChina State Key Laboratory of Ophthalmology Optometry and Visual ScienceWenzhouZhejiangChina

Background:MicroRNAs(miRNAs)play critical roles in corneal development and functional *** previous study identified miR-184 as one of the most highly expressed miRNAs in the corneal *** though its expression level plummeted dramatically during corneal epithelial wound healing(CEWH),its precise role in mediating corneal epithelial renewal was *** present study aimed to reveal the function and mechanism of miR-184 in regulating ***:Quantitative RT-PCR analysis characterized the miR-184 expression pattern during CEWH in *** miR-184 injection determined its effect on this process in *** evaluated the effects of miR-184 and its target genes on the proliferation,cell cycle,and migration of human corneal epithelial cells(HCECs)using MTS,flow cytometry,and wound-healing assay,*** analysis,in conjunction with gene microarray analysis and cell-based luciferase assays,pinpointed gene targets of miR-184 contributing to ***:MiR-184 underwent marked downregulation during mouse *** miR-184 overexpression delayed this process in ***,miR-184 transfection into HCECs significantly inhibited cell proliferation,cell cycle progression,and cell ***-184 directly targeted CDC25A,CARM1,and LASP1,and downregulated their expression in ***1 downregulation inhibited both HCEC proliferation and migration,whereas a decrease in LASP1 gene expression only inhibited ***:Our results demonstrate that miR-184 inhibits corneal epithelial cell proliferation and migration via targeting CDC25A,CARM1,and LASP1,suggesting it acts as a negative modulator during ***,identifying strategies to suppress miR-184 expression levels has the potential to promote CEWH.

关键词： miR-184 Corneal epithelial wound healing Proliferation Migration CDC25A CARM1 LASP1

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MicroRNA-199a-3p对脉络膜黑色素瘤细胞增殖的抑制作用

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中华眼视光学与视觉科学杂志 2019年第8期21卷 569-575页

作者：王教王丽花曹琼洁赵云萍陈林华温州医科大学附属眼视光医院省部共建眼视光学和视觉科学国家重点实验室325027

目的:探讨MicroRNA-199a-3p(miR-199a-3p)对脉络膜黑色素瘤细胞OCM290增殖的影响及机制。方法:实验研究。首先采用Real-time PCR技术检测miR-199a-3p在正常的脉络膜黑色素细胞UM96和肿瘤细胞OCM290中的表达情况;其次采用阳离子脂质体Lip... 详细信息

目的:探讨MicroRNA-199a-3p(miR-199a-3p)对脉络膜黑色素瘤细胞OCM290增殖的影响及机制。方法:实验研究。首先采用Real-time PCR技术检测miR-199a-3p在正常的脉络膜黑色素细胞UM96和肿瘤细胞OCM290中的表达情况;其次采用阳离子脂质体Lipofectamine介导的转染方法,将miR-199a-3p转染入体外培养的人脉络膜黑色素瘤细胞OCM290中过表达作为实验组,将随机序列寡核苷酸链转染入OCM290细胞作为阴性对照组;然后在转染的基础上运用细胞增殖实验法(MTS法)、克隆形成实验检测细胞增殖和生长能力。流式细胞术检测细胞周期。Western blot法检测与细胞周期相关的信号蛋白如CDK2、CDK4、E2F1等的表达。组间数据比较采用独立样本t检验。结果:miR-199a-3p在UM96中高表达,而在OCM290中表达明显下调(t=13.2,P<0.001)。OCM290细胞转染miR-199a-3p后,MTS结果显示实验组细胞数为对照组的(23.8±1.7)%,细胞增殖明显被抑制(t=78.1,P<0.001);细胞克隆数减少;细胞周期滞留在G1期(t=-8.5,P=0.001);Western blot法检测发现miR-199a-3p能下调OCM290中CDK2、CDK4、E2F1等的表达水平(t=10.3,P=0.001;t=9.9,P=0.001;t=10.4,P<0.001)。结论:miR-199a-3p通过下调调控细胞周期进程的关键蛋白,影响细胞周期的进程,从而抑制脉络膜黑色素瘤细胞的增殖。

关键词： MicroRNA-199a-3p 脉络膜黑色素瘤增殖

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microRNA-127抑制葡萄膜黑色素瘤细胞增殖的表观遗传调控研究

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中华眼视光学与视觉科学杂志 2018年第9期20卷 546-551,565页

作者：曹琼洁董菁李丽陈晓燕王教闫东升温州医科大学附属眼视光医院省部共建眼视光学和视觉科学国家重点实验室 325027

目的:研究microRNA-127(miR-127)在人葡萄膜黑色素瘤细胞中的表达水平及其对细胞增殖的影响。方法:实验研究。通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测miR-127在葡萄膜黑色素瘤细胞M23和SP6.5与正常葡萄膜黑色素细胞UM95中的表达水平。细胞... 详细信息

目的:研究microRNA-127(miR-127)在人葡萄膜黑色素瘤细胞中的表达水平及其对细胞增殖的影响。方法:实验研究。通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测miR-127在葡萄膜黑色素瘤细胞M23和SP6.5与正常葡萄膜黑色素细胞UM95中的表达水平。细胞实验通过阳离子脂质体介导的方法将miR-127和阴性对照(NC)转染入M23和SP6.5中,并应用细胞增殖实验法(MTS法)和流式细胞技术分别检测细胞增殖能力和细胞周期,采用WesternBlot法检测转染miR-127后细胞周期相关蛋白的表达。另外,通过RT-qPCR检测用表观药物5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-Aza-dC)和(或)曲古抑菌素A(TSA)处理后的M23和SP6.5细胞内miR-127的表达水平。MiR-127的表达量及细胞实验各参数在2组间比较采用独立样本t检验。结果:miR-127在M23和SP6.5中的表达水平低于UM95(t=72.2、591.5,P<0.001)。MTS结果显示,在M23和SP6.5细胞中,转染miR-127组相对细胞数目较NC组的100%分别减少至(62.3±4.2)%和(65.4±2.3)%,差异具有统计学意义(t=12.7、21.6,P<0.001)。流式细胞技术分析显示,转染miR-127组处于G0/G1期的M23和SP6.5细胞数量比例明显高于NC组(t=-6.7,P=0.003;t=-9.9,P<0.001),同时处于S期的M23和SP6.5细胞数量比例明显低于NC组(t=8.6,P=0.001;t=12.7,P<0.001)。WesternBlot结果表明miR-127可明显降低M23和SP6.5细胞内磷酸化Rb蛋白的表达水平(t=22.2、15.6,P<0.001)。此外,miR-127在M23和SP6.5细胞中的表达可被5-Aza-dC和TSA诱导上调(P<0.05)。结论:miR-127通过抑制细胞周期而抑制人葡萄膜黑色素瘤细胞的增殖,并可被DNA甲基化和组蛋白乙酰化表观遗传机制调控。

关键词：葡萄膜黑色素瘤 microRNA-127 细胞周期细胞增殖表观遗传调控

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microRNA-182抑制人角膜上皮细胞增殖和迁移

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中华眼视光学与视觉科学杂志 2018年第8期20卷 503-508页

作者：曹琼洁赵晓婷敬霞王教陈晓燕闫东升瞿佳温州医科大学附属眼视光医院省部共建眼视光学和视觉科学国家重点实验室 325027

目的:通过体内动物实验与体外细胞实验来阐明microRNA-182(miR-182)在角膜上皮损伤修复中的功能。方法:实验研究。体内实验选取5只C57BL/6J野生型小鼠,通过机械刮伤法构建小鼠角膜上皮损伤修复模型作为实验组,对侧眼作为对照组,通过实... 详细信息

目的:通过体内动物实验与体外细胞实验来阐明microRNA-182(miR-182)在角膜上皮损伤修复中的功能。方法:实验研究。体内实验选取5只C57BL/6J野生型小鼠,通过机械刮伤法构建小鼠角膜上皮损伤修复模型作为实验组,对侧眼作为对照组,通过实时定量RT-PCR法检测miR-182在损伤修复过程(损伤后48h)的表达。体外实验采用脂质体介导的方法将miR-182和随机序列寡核苷酸链转染入人角膜上皮细胞(HCECs),通过细胞增殖实验(MTS法)和细胞克隆形成实验检测细胞增殖和生长能力,流式细胞术检测细胞周期,细胞划痕实验检测细胞迁移能力。MiR-182表达量及细胞实验各参数2组间比较采用独立样本t检验。结果:体内实验中,与对照组相比,实验组中5个样本量的miR-182在角膜上皮损伤修复过程中表达水平显著下调(t=147.6、79.2、136.8、41.3、89.8,均P<0.001)。体外实验中,miR-182组相对细胞数目为(81±5)%,与阴性对照组(100%)相比显著减少(t=6.6,P=0.003),同时miR-182组细胞克隆数明显少于阴性对照组。细胞周期检测结果显示实验组处于G1期细胞数量比例为(49±7)%,明显高于阴性对照组的(35±4)%(t=-3.0,P=0.041)。此外,细胞迁移实验结果显示miR-182组HCECs细胞迁移的距离为(99±12)μm,而阴性对照组的迁移距离为(213±14)μm(t=10.8,P=0.001),迁移速度明显变慢。结论:miR-182通过抑制角膜上皮细胞的增殖与迁移,从而对角膜上皮损伤修复起到负调控的作用。

关键词：角膜损伤修复 miR-182 角膜上皮细胞增殖迁移

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中国式现代化城市实践的内涵与路径

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现代经济探讨 2023年第12期 83-90页

作者：曹劲松郑琼洁南京市社科联、南京市社会科学院、江苏省扬子江创新型城市研究院南京210018 南京市社会科学院、江苏省扬子江创新型城市研究院南京210018

中国式现代化是中国共产党领导中国人民开启的新的伟大社会革命,具有社会主义现代化的本质要求和中国特色鲜明的实践特征。现代化城市实践在全面建设社会主义现代化国家中具有经验探索、理论提升、发展带动的重要意义。中国式现代化城... 详细信息

中国式现代化是中国共产党领导中国人民开启的新的伟大社会革命,具有社会主义现代化的本质要求和中国特色鲜明的实践特征。现代化城市实践在全面建设社会主义现代化国家中具有经验探索、理论提升、发展带动的重要意义。中国式现代化城市实践是以人民为中心、以共同富裕为目标、以文明各要素协调共进为主轴的社会创造过程,凝聚着党领导人民共建美好生活、追求人类理想社会的强大力量。立足于城市文明体各要素协同共进这一主轴,可以从增强产业支撑力、发展驱动力、文化引领力、社会协同力和生态持续力五个维度,把握中国式现代化城市实践的内涵,探索城市现代化的经验。结合中国式现代化城市实践的具体内涵,在推进城市现代化的进程中,从实践主体、实践目标、实践动能和实践载体四个维度,进一步聚焦城市实践的具体原则,有助于城市更好地担起引领现代化发展的重要使命。从城市实践的具体内涵要求出发,重点围绕培育和发展新质生产力、人才创造力、文化影响力、社会和谐力和环境吸引力五个方面,深化实践路径的技术再造和方法创新,不断推进中国式现代化城市实践走深走实,为社会主义现代化强国建设打牢坚实的城市基础。

关键词：中国式现代化城市实践内涵原则路径

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基于NLRP3/IL-1β、IL-18通路探讨CARDS Tx在儿童重症肺炎支原体肺炎中的作用

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医学研究杂志 2023年第1期52卷 61-65页

作者：曹囡囡黄莉焦琼杰丁霞燕江雪倪倩兰州大学第二临床医学院 730000 兰州大学第二医院小儿肾病科 730000 兰州大学第二医院小儿呼吸科 730000

目的研究社区获得性呼吸窘迫综合征毒素(community-acquired respiratory distress syndrome toxin,CARDS Tx)与Nod样受体蛋白3(Nod-like receptor protein 3,NLRP3)/白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)通路在儿童重症肺炎支原体肺炎(severe mycoplasma pneumoniae pneumonia,SMPP)中的作用,并评价血清CARDS Tx、NLRP3、IL-1β、IL-18水平对SMPP的预测价值。方法选取2020年10月~2021年9月兰州大学第二医院收治的肺炎支原体肺炎(mycoplasma pneumoniae pneumonia,MPP)患儿为研究对象,根据疾病的严重程度将其分为MPP组与SMPP组,并选择同期至兰州大学第二医院体检的健康儿童为对照组。采用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测3组受检者血清中CARDS Tx、NLRP3、IL-1β、IL-18的水平;收集SMPP组中患儿的患侧与对侧支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF),采用ELISA法检测BALF中CARDS Tx、NLRP3、IL-1β、IL-18的水平。结果血清、BALF中CARDS Tx与NLRP3均呈显著正相关(r>0.45,PMPP组>对照组(P<0.001)。血清中CARDS Tx、NLRP3、IL-1β、IL-18预测SMPP的受试者操作特征(receiver operating characteristic,ROC)的曲线下面积(area under the curve,AUC)均大于0.7(P<0.001)。结论CARDS Tx不仅存在于损伤肺局部,还可进入血液循环,通过激活机体内NLRP3/IL-1β、IL-18通路介导SMPP的发生与进展,并参与SMPP患儿的局部肺损伤机制。血清CARDS Tx、NLRP3、IL-1β、IL-18水平可有效预测SMPP,动态监测其变化情况对于SMPP的疗效评估可能具有重要价值。

关键词：社区获得性呼吸窘迫综合征毒素 Nod样受体蛋白3 白细胞介素-1β 白细胞介素-18 重症肺炎支原体肺炎

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儿童重症肺炎支原体肺炎中TLR7、TLR9和IFN-Ⅰ的变化及意义

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新医学 2023年第3期54卷 177-181页

作者：燕江雪丁霞焦琼杰黄莉曹囡囡董信芳倪倩兰州大学第二医院小儿呼吸科兰州730030 兰州大学第二医院小儿肾脏科兰州730030

目的研究儿童重症肺炎支原体肺炎(SMPP)中Toll样受体7(TLR7)、TLR9和Ⅰ型IFN的变化及意义。方法纳入80例肺炎支原体肺炎(MPP)患儿,分为非重症MPP组(MPP组)和重症MPP组(SMPP组);选择同期于门诊体检的26名健康儿童为健康对照组。收集各组... 详细信息

目的研究儿童重症肺炎支原体肺炎(SMPP)中Toll样受体7(TLR7)、TLR9和Ⅰ型IFN的变化及意义。方法纳入80例肺炎支原体肺炎(MPP)患儿,分为非重症MPP组(MPP组)和重症MPP组(SMPP组);选择同期于门诊体检的26名健康儿童为健康对照组。收集各组儿童血清,并收集SMPP组影像学检查仅表现为单侧肺实变、肺不张、肺脓肿或肺组织坏死的26例患儿患侧和对侧肺泡灌洗液(BALF),采用ELISA检测血清及BALF中TLR7、TLR9、髓样分化因子88(MyD88)、IFN-α、IFN-β的含量。结果与健康对照组相比,SMPP组和MPP组血清中TLR7、TLR9、MyD88、IFN-α、IFN-β水平均升高,且SMPP组血清中各因子的水平均高于MPP组(P均<0.05)。患侧BALF中TLR7、TLR9、MyD88、IFN-α、IFN-β的水平均高于对侧(P均<0.01)。TLR7和MyD88水平预测SMPP的受试者操作特征曲线的曲线下面积分别为0.709、0.723。结论过度诱导和生成的TLR7、TLR9、IFN-α和IFN-β可能是儿童SMPP发生及局部肺组织严重损伤的致病因素。TLR7、MyD88可以作为SMPP的预测指标以指导临床治疗。

关键词：儿童重症肺炎支原体肺炎 Toll样受体7 Toll样受体9 干扰素-α 干扰素-β

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肺炎支原体感染与儿童过敏性紫癜及紫癜性肾炎关系的研究进展

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中国医药 2023年第5期18卷 765-768页

作者：曹永丽焦琼杰祝静赵家敏丁霞倪倩黄莉兰州大学第二临床医学院兰州730000 兰州大学第二医院小儿呼吸科兰州730000 兰州大学第二医院小儿肾病科兰州730000

过敏性紫癜是一种以感染为主要诱因的全身性小血管炎。过敏性紫癜肾损伤又称紫癜性肾炎,是过敏性紫癜最严重的长期并发症。诸多研究发现肺炎支原体感染是导致过敏性紫癜发病的重要因素之一,并可促进和加重紫癜性肾炎的发生和发展。现就... 详细信息

过敏性紫癜是一种以感染为主要诱因的全身性小血管炎。过敏性紫癜肾损伤又称紫癜性肾炎,是过敏性紫癜最严重的长期并发症。诸多研究发现肺炎支原体感染是导致过敏性紫癜发病的重要因素之一,并可促进和加重紫癜性肾炎的发生和发展。现就肺炎支原体所致过敏性紫癜、紫癜性肾炎的临床表现及可能作用机制进行阐述,以期更好地了解其发生发展规律,为临床治疗提供新的思路。

关键词：过敏性紫癜紫癜性肾炎肺炎支原体儿童

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藏南雅鲁藏布江结合带东段琼结杂岩早白垩世变辉绿岩地球化学特征及其地质意义

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沉积与特提斯地质 2018年第4期38卷 1-12页

作者：董磊李光明黄勇曹华文中国地质调查局成都地质调查中心四川成都610081

琼结杂岩(琼结蛇绿构造混杂岩)是1∶5万区域地质调查新划分的填图单元,大体相当于1∶25万地质图中朗县蛇绿混杂岩的一部分,位于雅鲁藏布江结合带东段,主要由基质、块体两大部分组成,其中块体中蛇绿岩残片主要由变辉长岩、变辉绿岩和变... 详细信息

琼结杂岩(琼结蛇绿构造混杂岩)是1∶5万区域地质调查新划分的填图单元,大体相当于1∶25万地质图中朗县蛇绿混杂岩的一部分,位于雅鲁藏布江结合带东段,主要由基质、块体两大部分组成,其中块体中蛇绿岩残片主要由变辉长岩、变辉绿岩和变玄武岩组成。本文通过详细的野外工作,对洛林地区琼结杂岩中的变辉绿岩进行了LAICP-MS锆石U-Pb定年以及地球化学研究,获得的岩浆结晶年龄为111Ma。全岩的主量及微量元素地球化学特征显示,SiO_2含量为46. 06%～49. 27%,具有高Fe OT(平均为11. 71%)、高钛(Ti O_2平均为1. 30%)、高Mg#(Mg#平均为59. 39)等特点;轻、重稀土元素具较弱分馏,LREE/HREE比值为1. 83～2. 05,(La/Yb)N比值平均为1. 35,球粒陨石标准化稀土元素配分型式显示为平坦型,基本不具Eu异常(δEu=0. 81～1. 02),富集高场强元素(HFSE)(Nb、Ta、U、Th)、亏损大离子亲石元素(LILE)(Ba、Sr),呈现出正常洋中脊玄武岩(N-MORB)的地球化学特性。岩浆来自正常洋中脊玄武岩区域,为尖晶石二辉橄榄岩10%～20%左右部分熔融的产物;岩浆上升过程中未受到明显的地壳混染。结合区域地质资料,本文认为琼结杂岩变辉绿岩形成于典型洋中脊构造环境,代表典型的洋中脊残留,揭示出雅鲁藏布江缝合带东段蛇绿岩形成于晚三叠世中期—早白垩世晚期。

关键词：变辉绿岩地球化学 N-MORB 琼结杂岩洛林地区雅鲁藏布江结合带藏南

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