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合并Chiari畸形Ⅰ型和脊髓空洞症的脊柱侧凸与特发性脊柱侧凸影像学特征和矫形效果比较

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脊柱外科杂志 2024年第2期22卷 73-80,86页

作者：夏古尚赵智李韬王迎松孔庆利解京明楚雄彝族自治州人民医院骨科楚雄彝族自治州675000 昆明医科大学第二附属医院骨科昆明650101

目的比较合并Chiari畸形Ⅰ型和脊髓空洞症的脊柱侧凸与特发性脊柱侧凸(IS)患者的影像学特征和矫形效果。方法回顾性分析2007年1月—2015年6月在昆明医科大学第二附属医院接受一期后路脊柱融合术治疗的合并Chiari畸形Ⅰ型和脊髓空洞症... 详细信息

目的比较合并Chiari畸形Ⅰ型和脊髓空洞症的脊柱侧凸与特发性脊柱侧凸(IS)患者的影像学特征和矫形效果。方法回顾性分析2007年1月—2015年6月在昆明医科大学第二附属医院接受一期后路脊柱融合术治疗的合并Chiari畸形Ⅰ型和脊髓空洞症的22例脊柱侧凸患者资料(研究组),并与年龄、性别、主弯位置、侧凸数量、冠状面影像学参数1∶1配对的22例IS患者(IS组)进行比较。记录所有患者手术时间、预估出血量、融合节段数、螺钉密度等。在手术前后站立位脊柱全长正侧位X线片上测量并计算冠状面影像学参数(主弯Cobb角、侧曲角、柔韧性、顶椎位置、冠状面平衡)、矢状面后凸角、胸椎后凸角(TK)、腰椎前凸角(LL)、矢状位垂直轴(SVA)、畸形角度比(DAR)、矫形率及矫形丢失率。结果所有手术顺利完成,研究组随访(6.2±1.2)年,IS组随访(6.2±1.1)年。2组患者手术时间、预估出血量、融合节段数、螺钉密度差异均无统计学意义(P> 0.05)。2组患者手术前后影像学参数差异均无统计学意义(P> 0.05)。所有患者均未发生螺钉松动、断裂、术后神经功能损伤等并发症。结论术前年龄、性别、主弯位置、侧凸数量、冠状面影像学参数相匹配的情况下,伴发Chiari畸形Ⅰ型和脊髓空洞症的脊柱侧凸患者与IS患者具有相似的矢状面影像学参数和主弯柔韧性,且在一期后路脊柱融合术治疗后可获得相似的矫形效果。

关键词：脊柱侧凸 Arnold-Chiari畸形脊髓空洞症脊柱融合术内固定器

Protection of Immuno-Compromised Mice from Lethal Infection of Klebsiella pneumonia by rAAV2-BPI23-Fcγ1 Gene Transfer

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Cellular & Molecular Immunology 2008年第6期5卷 439-445页

作者： Jing Li qingli kong Zhe Lv Yuanzhi Guan Yong Qiu Chen Li Mingjie Sun Zhenlong Liu Yunqing An Department of Immunology Capital Medical University Beijing 100069China Laboratory Department Capital Institute of Pediatrics Beijing 100020China Department of Microbiology Institute of Basic Medical Sciences ChineseAcademy of Medical Sciences ＆ Peking Union Medical College Beijing100005 China Laboratory Department Beijing Shijitan Hospital Beijing 100038 China China Rehabilitation Center Institute of Medical Sciences Beijing 100077China

In previous research, chimerical BPI23-Fcy1 gene which consisted of human bactericidal/permeability increasing protein （BPI） gene of encoding the functional N terminus （amino acid residues 1 to 199） of human BPI and Fcy1 gene of encoding the Fc segment of human immunoglobulin G1 was successfully reconstructed within a recombinant adeno-associated virus serotype 2 （rAAV2） vector as rAAV2-BPI23-Fcy1. Here, to evaluate the potentiality of applying gene therapy to gram negative bacterial （GNB） infection in high-risk patients, we investigated protection of immuno-compromised mice and immunocompetent mice from challenge with minimal lethal dose （MLD） Klebsiella pneumonia infection after rAAV2-BPI23-Fcy1 gene transferred. The results showed that the survival rate of rAAV2-BPI23-Fcy1 transferred immunocompetent mice as well as immuno-compromised mice （40.0% and 44.4%, respectively） were significant higher than that of corresponding control mice （6.7% and 4.4%, respectively）; the bacteria counting, level of endotoxin and proinflammatory cytokines in the rAAV2-BP123-Fcy1 transferred immuno-compromised mice were markedly lower than that of rAAV2-EGFP and rAAV2-Null transferred immuno- compromised mice. Our data suggest that rAAV2-BPI23-Fcy1 gene transferring offered immuno-compromised mice with resistance against GNB infection, so it is quite potential in preventing GNB infection of clinical high-risk patients. Cellular ＆ Molecular Immunology. 2008;5（6）：439-445.

关键词： rAAV2 BPI immuno-compromised mouse Klebsiella pneumonia gene transfer

Two-color emissive AIEgens with anti-Kasha property for dual-organelle imaging and phototherapy

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Science China Chemistry 2024年第5期67卷 1740-1752页

作者： Pu Chen Guogang Shan qingli Nie Yuting Yan Pengfei Zhang Zujin Zhao Hai-Tao Feng Ben Zhong Tang AIE Research Center Shaanxi Key Laboratory of PhytochemistryCollege of Chemistry and Chemical EngineeringBaoji University of Arts and SciencesBaoji 721013China Institute of Functional Material Chemistry and National&Local United Engineering Lab for Power Battery Faculty of ChemistryNortheast Normal UniversityChangchun 130024China College of Chemistry&Materials Science Northwest UniversityXi’an 710127China Guangdong Key Laboratory of Nanomedicine CAS-HK Joint Lab of BiomaterialsCAS Key Laboratory of Biomedical Imaging Science and SystemShenzhen Engineering Laboratory of Nanomedicine and NanoformulationsCAS Key Lab for Health InformaticsShenzhen Institutes of Advanced TechnologyChinese Academy of SciencesShenzhen 518055China State Key Laboratory of Luminescent Materials and Devices Key Laboratory of Luminescence from Molecular Aggregates of Guangdong ProvinceSouth China University of TechnologyGuangzhou 510640China School of Science and Engineering Shenzhen Institute of Aggregate Science and TechnologyThe Chinese University of Hong KongShenzhen(CUHK-Shenzhen)Shenzhen 518172China

Despite the rapid development of probes for targeting single organelle, the construction of robust dual-organelle targeting probes with multicolor emission was rarely reported. Herein, two dual-emissive aggregation-induced emission luminogens(AIEgens)with donor-π-acceptor structures were designed and synthesized, namely QT-1 and QF-2. Both two AIEgens exhibited excitation wavelength-dependence defying the Kasha's rule, and could stain lipid droplets(LDs) and mitochondria in blue and red fluorescence, respectively. Moreover, thanks to the near-infrared emission and abundant reactive oxygen species(ROS) generation efficiency of QT-1, it was chosen as a photodynamic therapy agent to selectively kill cancer cells from normal cells. Upon light irradiation, an obvious decrease of mitochondrial membrane potential(MMP) and serious change of mitochondrial shape in cells were observed, which corresponded to the efficient inhibition of tumor growth in vivo. This work afforded a promising strategy for the construction of multicolor emission by tuning anti-Kasha behaviors and expanding their application in dualorganelle targeting-based phototheranostics.

关键词： aggregation-induced emission anti-Kasha luminescence fluorescent probe bioimaging photodynamic therapy

人杀菌/渗透增强蛋白N端功能片段基因突变文库的构建和鉴定

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首都医科大学学报 2017年第6期38卷 903-910页

作者：李晶琴孔庆利安云庆首都医科大学燕京医学院医学检验学系北京101300 首都医科大学基础医学院免疫学系北京100069

目的为提高杀菌/渗透性增强蛋白N端功能片段BPI_(23)对内毒素(lipopolysaccharides,LPS)的亲和性,通过易错聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)和DNA改组技术,对其编码序列BPI_(600)进行突变,在大肠杆菌XL10-Gold中构建BPI_(600)基因突变体库。方法通过控制Mg2+和Mn2+的浓度进行易错PCR,获得BPI_(600)随机突变基因片段,经测序和基因比对,确定BPI_(600)的随机突变率。再对易错PCR产物进行DNA改组,将改组产物克隆至pYD1载体中,转化大肠杆菌XL10-Gold,从Amp抗性(LuriaBertani,LB)固体培养平板上任选10个单菌落,增菌后提取质粒,得到pYD1-shuffled BPI_(600)重组质粒,将质粒进行HindⅢ/XhoⅠ酶切鉴定,取5个阳性质粒进行DNA测序,通过基因和氨基酸比对鉴定突变情况。结果测序和基因比对显示,BPI_(600)经易错PCR所获突变文库的随机突变率达2.3%;改组后重组质粒的酶切结果表明,在随机选择的10个菌落所提质粒中,有6个含BPI_(600),表明构建了重组质粒pYD1-shuffled BPI_(600);在5个阳性质粒中,有4个重组质粒的BPI_(23)编码序列分别发生了6、9、11和14个碱基突变;1个不仅有10个碱基突变,还存在1个碱基的缺失。氨基酸比对表明,有2个质粒(分别有6和14个碱基突变)具有正确的读码框,能够翻译完整的蛋白质,各有4或14个氨基酸突变。3个质粒因含终止密码子而不能表达完整目的蛋白。结论成功构建pYD1-shuffled BPI_(600)重组质粒,获得库容量为2×105的突变文库,为高内毒素亲和力突变体的筛选奠定了基础。

关键词：人杀菌渗透增强蛋白定向进化易错PCR DNA改组

Runt相关转录因子3修饰对人肝SMMC-7721细胞放射增敏的影响

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中华实验外科杂志 2020年第5期37卷 857-859页

作者：孔庆利梁志鹏李川天津市第四中心医院肝胆胃肠外科 300140 中国人民解放军总医院第八医学中心普外科北京100019

目的:观察Runt相关转录因子3(Runx3)基因修饰对肝癌SMMC-7721细胞放射增敏的影响。方法:重组表达载体pcDNA3.1-Runx3转染肝癌SMMC-7721细胞,分为pcDNA3.1-Runx3组、空载pcDNA3.1组及空白组。转染3 d后,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋... 详细信息

目的:观察Runt相关转录因子3(Runx3)基因修饰对肝癌SMMC-7721细胞放射增敏的影响。方法:重组表达载体pcDNA3.1-Runx3转染肝癌SMMC-7721细胞,分为pcDNA3.1-Runx3组、空载pcDNA3.1组及空白组。转染3 d后,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质印迹法(Western blot)测定Runx3 mRNA和蛋白表达,集落形成法测定细胞放射敏感性,原位缺口末端标记法(TUNEL)法行细胞凋亡检测,裸鼠移植瘤实验检测Runx3修饰对肝癌放射敏感性影响,Western blot检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3蛋白表达。多组比较采用单因素方差分析(ANOVA),两组数据比较使用 t检验。结果:pcDNA3.1-Runx3组Runx3 mRNA和蛋白表达明显升高;经过射线放射处理后,pcDNA3.1-Runx3组细胞的增殖能力显著降低( P<0.05),细胞放射敏感性升高;10 Gy照射后,pcDNA3.1-Runx3组凋亡率为(38.56±2.18)%,高于空载pcDNA3.1组[(19.52±1.76)%]和空白组[(18.95±1.48)%, P<0.05];射线处理后pcDNA3.1-Runx3组移植瘤生长显著抑制( P<0.05)。pcDNA3.1-Runx3组移植瘤细胞E-cadherin、Caspase-3蛋白水平明显升高( P<0.05)。结论:Runx3基因修饰可增加肝癌SMMC-7721细胞对X线的敏感性,抑制裸鼠肝癌SMMC-7721细胞移植瘤的生长,增强肿瘤的放射敏感性。

关键词：基因修饰 Runt相关转录因子3 放射增敏作用肝癌

蓝莓花色苷对阿霉素诱导心衰大鼠心功能的改善效果

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中国继续医学教育 2020年第25期12卷 176-179页

作者：孔庆黎中国船舶重工集团公司第七二二研究所内科湖北武汉430079

目的探讨蓝莓花色苷对阿霉素诱导的慢性心力衰竭大鼠心功能的影响。方法将雄性SD大鼠28只随机分为对照组(n=8)、心衰组(n=10)和治疗组(n=10)。心衰模型采用尾静脉注射阿霉素诱导构建。治疗组给予蓝莓花色苷(80 mg/kg体质量)灌胃处理,对... 详细信息

目的探讨蓝莓花色苷对阿霉素诱导的慢性心力衰竭大鼠心功能的影响。方法将雄性SD大鼠28只随机分为对照组(n=8)、心衰组(n=10)和治疗组(n=10)。心衰模型采用尾静脉注射阿霉素诱导构建。治疗组给予蓝莓花色苷(80 mg/kg体质量)灌胃处理,对照组和心衰组给予0.5%羧甲基纤维素钠(CMC)溶液(4 mL/kg体质量)灌胃处理。各组灌胃每日1次,持续2周后,行左心导管检测HR、LVSP、LVEDP、Max dP/dt及Min dP/dt指标的情况。结果心衰组和治疗组大鼠的HR和LVEDP与对照组相比无明显改变(P>0.05),而LVSP、Max dP/dt及Min dP/dt较对照组显著降低(P0.05)。结论阿霉素诱导心衰后,大鼠左室功能显著减低,经蓝莓花色苷治疗后,阿霉素诱导的心衰大鼠的心功能能得到明显改善。

关键词：蓝莓花色苷阿霉素心力衰竭左心室功能左室内压最大上升速率左室内压最大下降速率

4-苯基丁酸钠缓解大鼠开胸手术后胰岛素抵抗

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国际麻醉学与复苏杂志 2018年第5期39卷 410-413页

作者：李凌海陈燕王春孔庆利首都医科大学附属北京胸科医院麻醉科北京市结核病胸部肿瘤研究所 101149 首都医科大学附属北京胸科医院检验科北京市结核病胸部肿瘤研究所 101149 首都医科大学基础医学院免疫学系北京100069

目的研究骨骼肌内质网应激对大鼠开胸手术后胰岛素抵抗的影响。方法建立大鼠开胸手术模型，采用随机数字表法将24只SD大鼠分为4组（每组6只）：对照组、4-苯基丁酸钠（4-phenyl butyric acid, 4-PBA）组、手术组、4-PBA＋手术组。手... 详细信息

目的研究骨骼肌内质网应激对大鼠开胸手术后胰岛素抵抗的影响。方法建立大鼠开胸手术模型，采用随机数字表法将24只SD大鼠分为4组（每组6只）：对照组、4-苯基丁酸钠（4-phenyl butyric acid, 4-PBA）组、手术组、4-PBA＋手术组。手术次日抽血检测血清游离脂肪酸，行高胰岛素-正常血糖钳夹实验，记录葡萄糖输注速率（glucose infusion rate, GIR）。取比目鱼肌检测内质网应激标志蛋白［重链结合蛋白（binding immunoglobulin protein, BiP）］。结果术后手术组大鼠血清游离脂肪酸、血糖、胰岛素、高胰岛素-正常血糖钳夹实验GIR及BiP的表达显著高于对照组、4-PBA组和4-PBA＋手术组（P〈0.05）。结论内质网应激参与了大鼠开胸手术术后的胰岛素抵抗，内质网应激抑制剂4-PBA可以缓解术后引起的胰岛素抵抗。

关键词：内质网应激胰岛素抵抗高胰岛素-正常血糖钳夹实验

巨噬细胞集落刺激因子对喉鳞状细胞癌喉癌细胞株的作用

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临床耳鼻咽喉科杂志 2005年第6期19卷 265-268页

作者：葛平江张宝泉张建民高志强孔庆利何维广东省人民医院耳鼻咽喉头颈外科广州510080 中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院耳鼻咽喉科中国医学科学院中国北京协和医学院基础研究所免疫室

目的:了解和探讨巨噬细胞集落刺激因子(MCSF)及其受体对喉鳞状细胞癌细胞株(Hep2)细胞系的作用。方法:使用氚标记胸腺嘧啶核苷(3HTDR)掺入法和MTT法测试MCSF作用于Hep2后细胞的增殖状况,并测试加入巨噬细胞集落刺激因子受体(MC-SFR)抗... 详细信息

目的:了解和探讨巨噬细胞集落刺激因子(MCSF)及其受体对喉鳞状细胞癌细胞株(Hep2)细胞系的作用。方法:使用氚标记胸腺嘧啶核苷(3HTDR)掺入法和MTT法测试MCSF作用于Hep2后细胞的增殖状况,并测试加入巨噬细胞集落刺激因子受体(MC-SFR)抗体后细胞生长情况。ELISA法测试M-CSF作用Hep2细胞后上清中的MCSF的浓度变化。结果:Hep2细胞培养后较培养前的上清中的MCSF的浓度升高。加入的M-CSF浓度越大,细胞增殖越差,加入MCSFR抗体浓度越大细胞增殖越好。结论:MCSF对喉癌细胞Hep2细胞的增殖具有抑制作用。

关键词：喉肿瘤癌.鳞状细胞巨噬细胞集落刺激因子增殖 Hep-2细胞系

纤维胶凝素通过调控巨噬细胞M1极化加重脂多糖诱导的急性肺损伤

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首都医科大学学报 2023年第2期44卷 196-202页

作者：李燕秀徐祉轩孔庆利周玉洁张须龙首都医科大学基础医学院免疫学系北京100069

目的本研究拟探究纤维胶凝素(ficolin,Fcn)在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的急性肺损伤中的作用及可能机制。方法 SPF级C57BL/6小鼠和相应ficolin基因敲除鼠分别按照实验要求分为6组:WT-磷酸盐缓冲液(phosphate buffered soluti... 详细信息

目的本研究拟探究纤维胶凝素(ficolin,Fcn)在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的急性肺损伤中的作用及可能机制。方法 SPF级C57BL/6小鼠和相应ficolin基因敲除鼠分别按照实验要求分为6组:WT-磷酸盐缓冲液(phosphate buffered solution,PBS)组、WT-LPS组、Fcna^(-/-)-PBS组、Fcna^(-/-)-LPS组、Fcnb^(-/-)-PBS组以及Fcnb^(-/-)-LPS组。LPS组用5 mg/kg LPS剂量滴鼻,2 d后建立急性肺损伤小鼠模型;取肺组织做苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,H&E)染色观察肺病理损伤情况;流式细胞术检测肺中性粒细胞和巨噬细胞的比例变化;Western blotting检测肺组织中诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)的表达变化。体外分离培养野生型和ficolin敲除鼠骨髓来源的巨噬细胞,LPS刺激后检测细胞iNOS的表达变化及上清液中一氧化氮(nitric oxide,NO)的浓度。结果 LPS滴鼻法成功建立了急性肺损伤模型,肺中大量炎性细胞浸润,免疫病理损伤加重;肺中性粒细胞和间质巨噬细胞比例增高;经体内体外LPS刺激后,小鼠肺组织和骨髓来源巨噬细胞中iNOS表达升高,NO产生增多;敲除ficolin可显著减少肺间质巨噬细胞比例,降低iNOS的表达和NO的产生,改善LPS诱导的急性肺损伤。结论 Ficolin可通过促进巨噬细胞M1极化参与LPS介导的急性肺损伤,其可能是急性肺损伤治疗的潜在靶点。

关键词：纤维胶凝素脂多糖急性肺损伤巨噬细胞诱导型一氧化氮合酶