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Mechanisms of fibronectin-binding protein A(FnBPA110-263) vaccine efficacy in Staphylococcus aureus sepsis versus skin infection

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Research progress in immune escape and immune prevention of MRSA infections

第十三届全国免疫学学术大会

作者： qianfei zuo Rui Zhang Sun Li Xiaokai Zhang Yu Wang Lina Wang Quanming Zou National Engineering Research Center of Immunological Products Department of Microbiology and Biochemical Pharmacy College of Pharmacy Army Medical University

Increasing rates of life-threatening infections and decreasing susceptibility to antibiotics urge an effective vaccine targeting Staphylococcus *** we investigate the role of cellular immunity in FnBPA mediated protection in Staphylococcus aureus *** study revealed FnBPA broadly protected mice from seven FnBPA isotypes strains in the sepsis *** immunized B-cell deficient mice were protected against lethal challenge, while T-cell deficient mice were *** mice with FnBPA specific CD4+ T-cells conferred antigen specific *** vitro assays indicated that isolated FnBPA specific splenocytes from immunized mice produced abundant ***-17A deficient mice were not protected from a lethal challenge by FnBPA ***, neutralizing IL-17A, but not IFN-γ,reverses FnBPA-induced protective efficacy in sepsis and skin infection *** findings suggest that IL-17A producing Th17 cells play an essential role in FnBPA vaccine-mediated defense against *** sepsis and skin infection in mice.

关键词： Staphylococcus aureus fibronectin-binding protein A vaccine Th17 immune protection

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MicroRNA-30a在胃癌组织的表达分析及其靶基因成纤维活化蛋白α的鉴定

2012全国临床微生物与感染免疫学术研讨会

作者： Zeng Hao,zuo qianfei,Zou Quanming Department of Clinical Microbiology and Immunology,College of Medical Laboratory Science,the Third Military Medical University

The pathogen Staphylococcus aureus,a leading cause of human bacterial infections worldwide,is an opportunistic bacterial pathogen responsible for a diverse spectrum of human diseases,which are from mild and common skin and soft tissue infections to severe,necrotizing and highly invasive *** the high prevalence of *** infections,it is,perhaps,not surprising that -30%of non-institutionalized individuals are permanently colonized with the ***,*** may be considered a component of normal human flora. These findings are noteworthy because nasal carriage of S aureus has been associated with subsequent infection. The epidemiology of *** disease is strongly influenced by rapid acquisition of antibiotic resistance,as some strains become resistant to nearly all front-line *** that are caused by antibiotic-resistant strains often occur in epidemic waves that are initiated by one or a few successful ***-resistant S. aureus(MRSA) features prominently in these *** associated with hospitals and other health care settings,MRSA has now emerged as a widespread cause of community *** or communityassociated MRSA(CA-MRSA) can spread rapidly among healthy *** of CA-MRSA infections have been reported ***,the isolation of MRSA strains that have also become resistant to vancomycin, the last drug to which the organism had been uniformly sensitive,raises the spectre of a return to the pre-antibiotic era. *** expresses a wide array of secreted and cell surface- associated virulence factors,including surface proteins that promote adhesion to damaged tissue and to the surface of host cells,that bind proteins in blood to help evade immune responses,and that promote iron *** strains express a polysaccharide *** organism can secrete an array of extracellular enzymes such as proteases,a hyaluronidase,a lipase and a nuclease that facilitate tiss

关键词： Staphylococcus aureus MRSA Immune escape Immune prevention

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第三军医大学学报 2016年第6期38卷 560-563页

作者：龚莉左钱飞余婷汪莉娜肖斌曾浩第三军医大学药学系微生物与生化药学教研室暨国家免疫生物制品工程技术研究中心重庆400038

目的分析microRNA-30a(miR-30a)在胃癌中的表达水平并鉴定其新的靶基因。方法选取29例胃癌患者的肿瘤组织和癌旁组织,利用qRT-PCR检测miR-30a的表达。通过miRNA靶基因预测数据库Target Scan预测miR-30a的靶基因。构建含有miR-30a结合位... 详细信息

目的分析microRNA-30a(miR-30a)在胃癌中的表达水平并鉴定其新的靶基因。方法选取29例胃癌患者的肿瘤组织和癌旁组织,利用qRT-PCR检测miR-30a的表达。通过miRNA靶基因预测数据库Target Scan预测miR-30a的靶基因。构建含有miR-30a结合位点的3'UTR片段的荧光素酶载体(p MIR-FAPα),通过荧光素酶报告实验对预测靶基因进行检测。利用Western blot和qRT-PCR对预测靶基因成纤维活化蛋白α(fibroblast activation proteinα,FAPα)的表达进行检测。结果 miR-30a在胃癌组织样本中的表达明显下调,通过生物信息学预测(Target Scan)和荧光素酶实验表明miR-30a mimic可与FAPα基因结合,qRT-PCR和Western blot结果表明miR-30a mimic可抑制FAPαmRNA和蛋白质水平的表达。结论 miR-30a在人胃癌组织样本中表达下调,FAPα是其靶基因。

关键词：胃癌 miR-30a 成纤维活化蛋白α

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噬菌体展示技术在全人源性抗体发现中的应用

免疫学杂志 2023年第10期39卷 910-915页

作者：刘碧霞刘媛谢静郭郑斌王斌左钱飞张睿西南交通大学医学院成都610031 西部战区总医院检验科成都610083 陆军军医大学第二附属医院呼吸与危重症医学中心重庆400037 陆军军医大学药学与检验医学系微生物与生化药学教研室重庆400038

噬菌体展示技术是目前应用最广泛的体外抗体筛选技术,它以噬菌体为载体,将外源抗体库基因插入到噬菌体衣壳蛋白基因中,在噬菌体表面表达衣壳蛋白的同时也展示了抗体分子。抗体药物因靶向优势在肿瘤免疫和病原生物感染中都发挥着重要作用... 详细信息

噬菌体展示技术是目前应用最广泛的体外抗体筛选技术,它以噬菌体为载体,将外源抗体库基因插入到噬菌体衣壳蛋白基因中,在噬菌体表面表达衣壳蛋白的同时也展示了抗体分子。抗体药物因靶向优势在肿瘤免疫和病原生物感染中都发挥着重要作用,是其成为医药研发领域热点的重要推动力。因此,本文对噬菌体展示技术的研发背景、基本原理、抗体库构建类型及抗体展示片段类型进行综述,并对基于噬菌体展示的全人源性抗体的最新进展和应用前景进行了展望。

关键词：噬菌体抗体展示技术全人源性抗体抗体库抗体筛选

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外膜囊泡医学应用研究进展

免疫学杂志 2021年第2期37卷 179-184页

作者：李笋戚远通苟强张卫军左钱飞邹全明解放军第九六八医院卫勤处锦州121000 陆军军医大学药学与检验医学系药剂学教研室重庆400038 陆军军医大学微生物与生化药学教研室国家免疫生物制品工程技术研究中心重庆400038

外膜囊泡(OMV)是细菌自然生长的产物,呈球形双层膜纳米结构,其表面包含众多PAMPs,与免疫应答相关。OMV具有免疫原性和固有佐剂活性,因此可作为疫苗或单独的疫苗佐剂使用。OMV的中空结构可以作为药物储存载体,同时利用其外部结构实现药... 详细信息

外膜囊泡(OMV)是细菌自然生长的产物,呈球形双层膜纳米结构,其表面包含众多PAMPs,与免疫应答相关。OMV具有免疫原性和固有佐剂活性,因此可作为疫苗或单独的疫苗佐剂使用。OMV的中空结构可以作为药物储存载体,同时利用其外部结构实现药物的靶向作用。OMV在医学领域研究甚广,但要充分发挥其功能须清楚了解其研究进展和作用机制。本文通过对OMV在医学方面的应用进行简要综述,以便研究者快速获得此领域进展信息。

关键词：外膜囊泡疫苗佐剂载体肿瘤应用

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建立幽门螺杆菌感染动物模型需考虑的因素

免疫学杂志 2020年第10期36卷 914-920页

作者：李笋戚远通苟强孙思季露左钱飞李海波邹全明陆军军医大学药学与检验医学系微生物与生化药学教研室国家免疫制品工程技术研究中心重庆400038 陆军军医大学药剂学教研室重庆400038

幽门螺杆菌感染具有普遍性和长期性,感染后若不治疗,将持续存在并对胃的生理造成影响,从而引发各种疾病。目前幽门螺杆菌治疗主要以抗生素为主,随着耐药率上升,疫苗成为理想的对抗手段。在幽门螺杆菌疫苗的研究工程中,动物模型的建立至... 详细信息

幽门螺杆菌感染具有普遍性和长期性,感染后若不治疗,将持续存在并对胃的生理造成影响,从而引发各种疾病。目前幽门螺杆菌治疗主要以抗生素为主,随着耐药率上升,疫苗成为理想的对抗手段。在幽门螺杆菌疫苗的研究工程中,动物模型的建立至关重要。本文通过查阅文献,简要综述幽门螺杆菌感染模型建立需考虑的因素,根据菌株特性确定感染使用的菌株,再根据菌株确定动物种属,然后再细化感染细节,从而使模型更接近于人类感染情况,才能进一步验证疫苗的安全性和有效性,促进幽门螺杆菌疫苗的研发。

关键词：幽门螺杆菌动物模型预处理毒力因子

幽门螺杆菌毒力因子CagA通过靶向SHARPIN促进炎症反应的机制研究

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免疫学杂志 2023年第12期39卷 1021-1027页

作者：苏娜贇王廷义左钱飞路倩赵喆梅浩王斌陈东风兰春慧陆军军医大学陆军特色医学中心(大坪医院)消化内科、消化系统肿瘤精准防治重庆市重点实验室重庆400042 陆军军医大学院微生物与生化药学教研室、国家免疫工程中心重庆400038

目的幽门螺杆菌(***)引起的慢性炎症是胃癌的主要原因之一,本研究旨在探讨幽门螺杆菌的重要毒力因子细胞毒素相关蛋白A(CagA)促炎的作用及其调控机制。方法采用质谱鉴定CagA在AGS细胞内的相互作用蛋白,并通过免疫共沉淀、免疫荧光验证... 详细信息

目的幽门螺杆菌(***)引起的慢性炎症是胃癌的主要原因之一,本研究旨在探讨幽门螺杆菌的重要毒力因子细胞毒素相关蛋白A(CagA)促炎的作用及其调控机制。方法采用质谱鉴定CagA在AGS细胞内的相互作用蛋白,并通过免疫共沉淀、免疫荧光验证其相互作用。通过使用siRNA敲低后,免疫印迹法检测通路蛋白表达、qRT-PCR检测炎症因子mRNA水平、ELISA检测蛋白水平。使用血红素-伊红染色法(H&E)检测临床样本中CagA诱导的炎症反应。结果CagA与SHARPIN具有相互作用。与CagA敲除株相比,CagA激活了NF-κB信号通路并上调了炎症因子IL-6、IL-8、TNF-α的mRNA水平和蛋白表达(P均<0.05)。通过siRNA敲低SHARPIN后,炎症水平降低、NF-κB信号被部分抑制。临床样本中CagA^(+)样本炎症反应显著增加。结论CagA促进宿主炎症反应,干扰SHARPIN可部分抑制CagA所致炎症反应,表明CagA通过与SHARPIN结合这一新机制激活NF-κB信号通路促炎。

关键词：幽门螺杆菌细胞相关蛋白A 炎症

幽门螺杆菌感染的慢性胃炎与凋亡基因的相关性研究

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重庆医学 2014年第29期43卷 3858-3860页

作者：兰春慧黎博胜常辉左钱飞廖盛涛邹全明陈东风第三军医大学大坪医院野战外科研究所消化内科重庆400042 第三军医大学药学系微生物与生化药学教研室重庆400038 第三军医大学学员旅五营重庆400038

目的探讨幽门螺杆菌(HP)感染相关胃炎程度与胃黏膜细胞凋亡基因表达的相关性。方法将2013年11～12月大坪医院消化内镜中心45例慢性胃炎患者纳入研究,快速尿素酶实验和13 C-呼气实验检测HP感染情况,病理分析HP感染部位胃炎严重程度,实时... 详细信息

目的探讨幽门螺杆菌(HP)感染相关胃炎程度与胃黏膜细胞凋亡基因表达的相关性。方法将2013年11～12月大坪医院消化内镜中心45例慢性胃炎患者纳入研究,快速尿素酶实验和13 C-呼气实验检测HP感染情况,病理分析HP感染部位胃炎严重程度,实时定量PCR(qRT-PCR)法检测HP感染部位胃黏膜组织和无HP感染的胃黏膜组织中凋亡相关基因Bax、Bak、Bcl-2的表达,Person相关分析HP感染的慢性胃炎程度与凋亡基因表达的相关性。结果 45例患者13 C-呼气实验和胃窦黏膜快速尿素酶实验均阳性,提示HP感染。病理结果显示45例(100%)患者均为慢性胃窦胃炎,其中28例(62.2%)为轻度,16例(35.6%)为中度,1例(2.0%)为重度;9例(20.0%)肠化生,5例(11.1%)低级别上皮内瘤变。45例患者胃体黏膜尿素酶实验阴性,提示无HP感染,其中6例胃体组织显示轻度慢性炎症(13.3%),39例无炎症(86.7%);无肠化生及上皮内瘤变。qRT-PCR结果显示HP感染胃黏膜中Bax mRNA的表达明显高于HP未感染胃黏膜患者(P0.05)。结论 HP感染的慢性胃炎程度与胃黏膜细胞凋亡呈正相关,提示HP感染可能导致胃上皮细胞中Bax基因的表达从而促进细胞凋亡。

关键词：螺杆菌 ,幽门胃炎细胞凋亡基因

囊型棘球蚴病Antigen 5 iELISA检测方法的建立和应用

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国际检验医学杂志 2022年第11期43卷 1359-1363页

作者：余闻静叶航羊严茹心左钱飞范俊杰龙宇鹏陆军第九五八医院检验科重庆400023 西藏军区总医院肝胆科西藏拉萨850000 陆军军医大学第一附属医院肿瘤科重庆400038 陆军军医大学药学系微生物与生化教研室重庆400038

目的基于Antigen 5(Ag5)建立一种具有较高灵敏度和特异度的检测囊型棘球蚴病(CE)的间接酶联免疫吸附试验(iELISA)法。方法构建pGEX-6p-2-Ag5表达载体,经表达及亲和纯化后的重组蛋白作为包被抗原,经过标准品血清的检测,确定其临界值。... 详细信息

目的基于Antigen 5(Ag5)建立一种具有较高灵敏度和特异度的检测囊型棘球蚴病(CE)的间接酶联免疫吸附试验(iELISA)法。方法构建pGEX-6p-2-Ag5表达载体,经表达及亲和纯化后的重组蛋白作为包被抗原,经过标准品血清的检测,确定其临界值。对184例CE患者按照感染时期,包囊数量、状态,是否接受药物及手术治疗分组,利用建立的iELISA法进行检测,并与商品化试剂盒方法比较。结果当临界吸光值(A)比值为0.46时,该iELISA法具有最佳的灵敏度(91.6%)和特异度(96.3%)。处于过渡期(CE3a、CE3b)的CE患者血清中含有较高水平的特异性抗体。iELISA方法对于CE4和CE5期患者的阳性率分别为83.3%和63.0%,明显高于商品化试剂盒检测的阳性率(P<0.05);iELISA方法对于健康人血清的检测,阳性率为2.4%。另外,活性包囊、多包囊以及经过药物治疗的CE患者具有更高的阳性率。结论该研究建立的iELISA法具有较高的灵敏度及特异度,为CE患者的临床诊断提供了一种有价值的检测手段。

关键词：囊型棘球蚴病 Antigen 5 间接酶联免疫吸附试验临床诊断