检索结果-南通市图书馆

Journal of Integrative Agriculture 2021年第5期20卷 1314-1326页

作者： CHEN Chang-long YUAN Fang LI Xiao-ying ma rong-cai XIE Hua Beijing Agro-Biotechnology Research Center Beijing Academy of Agriculture and Forestry SciencesBeijing 100097P.R.China Beijing Key Laboratory of Agricultural Genetic Resources and Biotechnology Beijing 100097P.R.China

Chinese cabbage(Brassica rapa ***)suffers from soft rot disease caused by Pectobacterium carotovorum(Pc).To uncover the mechanisms underlying the defense response of Chinese cabbage to Pc,we constructed a suppression subtractive hybridization(SSH)library from Pc-infected cabbage and obtained 1919 non-redundant expressed sequence tags(ESTs),which were used for cDNA *** detected 800 differentially expressed genes(DEGs)in cabbage at different time points post-Pc inoculation,which were further confirmed by quantitative real-time *** quarter of these DEGs were involved in the biotic stress pathways visualized by *** them,8,8,1,3,and 2 DEGs were related to jasmonic acid(JA),ethylene(ET),JA+ET,auxin,and abscisic acid(ABA)signaling pathways,respectively,while no DEG was detected for salicylic acid(SA)*** of phytohormone production in the Pc-infected leaves showed that JA and ET production was increased,while SA production was *** with JA,methyl jasmonate(MeJA),the ET precursor 1-aminocyclopropane-1-carboxylate(ACC),or combinations thereof,reduced the disease severity,and the JA and JA+ACC treatments were superior and performed equally *** findings suggest that JA and ET may act synergistically against Pc infection in Chinese cabbage,and JA-mediated signaling might be the most significant.

关键词： Brassica rapa Pectobacterium carotovorum gene expression defense response hormone signaling

桃(Prunus perscia)中一个AGAMOUS同源基因第二内含子序列的克隆和鉴定

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中国生物工程杂志 2008年第9期28卷 104-110页

作者：陈瑶徐勇马荣才北京农业生物技术研究中心

研究首先从桃中克隆了AGAMOUS(AG)同源基因PpmaDS4的第二个内含子——pPpmaDS4,全长约2.1kb。序列分析表明,该内含子含有一些对基因表达十分重要的调控元件。同时,克隆了七个不同桃品种中的PpmaDS4基因的第二内含子,序列比对和SNP测算表... 详细信息

研究首先从桃中克隆了AGAMOUS(AG)同源基因PpmaDS4的第二个内含子——pPpmaDS4,全长约2.1kb。序列分析表明,该内含子含有一些对基因表达十分重要的调控元件。同时,克隆了七个不同桃品种中的PpmaDS4基因的第二内含子,序列比对和SNP测算表明,PpmaDS4第二内含子是一段SNP富集区域,具有高度的核苷酸多态性,但是在这段序列上各个调控元件的序列和位置都非常保守,暗示了这些调控元件可能具有很重要的生物学功能。为了认识这一内含子的调控功能,将pPpmaDS4与minimal35S连接并与GUS基因融合,构建表达载体转入野生型拟南芥中。GUS染色显示,其表达主要分布在花的两轮生殖器官上,这与拟南芥中AG第二内含子调控的GUS着色部位相似,但存在着差异。PpmaDS4第二内含子能够特异启动GUS在花发育晚期的表达。

关键词：桃(Prunus perscia) maDS box基因 AGAMOUS 第二内含子 GUS染色

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植物功能基因组研究中出现的新型分子标记

中国生物工程杂志 2007年第8期27卷 104-110页

作者：赵雪谢华马荣才首都师范大学生命科学学院北京100037 北京农业生物技术研究中心北京100097

随着功能基因组学的发展,表达序列标签(expressed sequence tags,ESTs)已经成为开发以PCR为基础的新型分子标记的重要资源。综述了植物功能基因组研究中出现的EST-SSR、CAPS、SNP、SRAP和TRAP等新型分子标记的基本原理和特点。这些标记... 详细信息

随着功能基因组学的发展,表达序列标签(expressed sequence tags,ESTs)已经成为开发以PCR为基础的新型分子标记的重要资源。综述了植物功能基因组研究中出现的EST-SSR、CAPS、SNP、SRAP和TRAP等新型分子标记的基本原理和特点。这些标记具有其显著的优势,如开发简便、信息量高和通用性好等,尤其是由于它们来源于基因编码区(ORFs),因此具有很高的物种间通用性,并且其多态性与基因功能变异相关联。目前,这些功能基因分子标记已广泛应用于遗传图谱构建、重要性状基因定位、比较作图、遗传多样性和品种鉴别、分子标记辅助选择育种等研究中。简要介绍了近年来所开展的功能基因分子标记工作,并说明了在使用这些功能基因分子标记时可能会出现的问题。

关键词： EST-SSR CAPS SNP SRAP TRAP

植物maDS-box基因FRUITFULL(FUL)研究进展

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中国生物工程杂志 2010年第9期30卷 98-104页

作者：褚婷婷谢华徐勇马荣才首都师范大学生命科学学院北京100048 北京市农林科学院农业生物技术研究中心北京100097

植物maDS-box基因家族的不同成员在植物生长发育过程中起着非常重要的作用。拟南芥maDS-box基因FRUITFULL(FUL)在控制拟南芥开花时间、花分生组织分化、茎生叶形态以及心皮和果实的发育中起到重要作用。其他植物中,FUL的同源基因也在调... 详细信息

植物maDS-box基因家族的不同成员在植物生长发育过程中起着非常重要的作用。拟南芥maDS-box基因FRUITFULL(FUL)在控制拟南芥开花时间、花分生组织分化、茎生叶形态以及心皮和果实的发育中起到重要作用。其他植物中,FUL的同源基因也在调控花发育、果实发育以及叶片发育等方面各自起到重要作用。综述了FUL基因及其同源基因的表达模式和功能,并就其在农作物及果树育种上的潜在应用价值进行了讨论。

关键词： maDS-box基因 FUL 植物发育

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HC-Pro基因片段介导的高抗TuMV

作物学报 2014年第3期40卷 550-555页

作者：叶艳英曾钢曹鸣庆马荣才吴才君姚磊北京市农林科学院/农业生物技术研究中心北京100097 江西农业大学农学院江西南昌330045

芜菁花叶病毒(turnip mosaic viruses,TuMV)是侵染重要经济作物的主要病毒之一,寄主范围十分广泛,尤其是对十字花科作物的危害最为严重。为了获得对TuMV持久稳定的高度抗性,本研究以TuMV HC-Pro基因的453 bp保守序列为靶标,构建了植物表... 详细信息

芜菁花叶病毒(turnip mosaic viruses,TuMV)是侵染重要经济作物的主要病毒之一,寄主范围十分广泛,尤其是对十字花科作物的危害最为严重。为了获得对TuMV持久稳定的高度抗性,本研究以TuMV HC-Pro基因的453 bp保守序列为靶标,构建了植物表达RNAi载体pBBBTu-HC-Pro,并转化了TuMV的天然宿主拟南芥。对转基因拟南芥用北京地区流行的TuMV强致病株BJ-C4进行了抗病接种鉴定。鉴定的13个单拷贝转基因株系中有4个对TuMV的BJ-C4株表现出高度抗性,抗性比对照提高约80%以上,且抗性可以稳定遗传。经半定量和荧光定量PCR方法检测,在高抗转基因植株体内几乎检测不到病毒的累积,抗病效果明显。该载体在利用基因工程抗TuMV育种中具有广阔的应用前景。

关键词：芜菁花叶病毒 HC-Pro 基因片段 RNAi 抗性

北京地区芹菜细菌性软腐病菌鉴定及其致病力分析

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植物病理学报 2016年第4期46卷 433-442页

作者：田宇马亚丽何付新马荣才谢华北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心农业基因资源与生物技术北京市重点实验室北京100097

对从北京地区芹菜软腐组织中分离到的37株细菌性软腐病菌株,进行了微生物碳源利用(BiologTM)、生化特性、特异性PCR、ITS-RFLP带型以及基于16S rDNA完整序列遗传关系分析。结果如下:菌株革兰氏染色阴性、具周生鞭毛;可在5%和7%NaCl及28... 详细信息

对从北京地区芹菜软腐组织中分离到的37株细菌性软腐病菌株,进行了微生物碳源利用(BiologTM)、生化特性、特异性PCR、ITS-RFLP带型以及基于16S rDNA完整序列遗传关系分析。结果如下:菌株革兰氏染色阴性、具周生鞭毛;可在5%和7%NaCl及28℃和37℃条件下生长;可分解柠檬酸盐及液化明胶;Biolog分析将这些菌株均鉴定为Pectobacterium carotovorum ***(Pcc)。生化特性分析发现,其中36株菌株能利用D-山梨醇、D-阿拉伯糖醇、异麦芽酮糖和α-甲基葡萄糖苷,与对照菌株*** ***(Pco)S7一致;另外1株菌株Q34不能利用上述糖醇,与对照菌株*** ***(Pcb)BC1和*** ***(Pcc)ECC71表现一致。利用pel(pectate lyase)基因特异性引物Y1/Y2在所有的37株菌株中均扩增出预期片段(434 bp),表明其基因组中均含有果胶酶基因。Pcb特异性PCR引物BR1f/L1r仅在Q34菌株与Pcb BC1中扩增出预期片段(322 bp),而Pcc特异性PCR引物EXPCCF/EXPCCR则在除Pcb BC1外所有菌株中均扩增出预期片段(550 bp)。Rsa I酶切16S-23S rDNA ITS片段结果显示,Q34酶切带型与Pcb BC1相同,其余36株带型与Pcc ECC71和Pco S7相同。基于16S rDNA基因完整序列,以Dickeya dadantii菌株582为外群,该37株菌株与已发表的Pectobacterium菌株系统发育树聚类分析结果表明,Q34与已发表的其他Pcb菌株形成了明显的Pcb类群,其余36株菌株则与已发表的其他Pco菌株形成了明显的Pco类群。综合多种鉴定结果,36株被鉴定为Pco,Q34被鉴定为Pcb。菌株致病力测试结果显示,36株Pco菌株中仅Q47表现为低等的致病力,其余24株和11株分别表现为中等和高等致病力;Pcb菌株Q34则表现出中等致病力。

关键词：芹菜(Apium graveolens L.) 细菌性软腐病 Pectobacterium carotovorum subsp.oaor/ferum Pectobacterium carotovorum subsp.brasilience 鉴定致病力

基于AlcR/alcA和Cre/loxP系统的标记基因诱导删除体系

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中国农业科学 2011年第17期44卷 3491-3500页

作者：赵青郭仰东谢华马荣才姚磊中国农业大学农学与生物技术学院北京市农林科学院农业生物技术研究中心北京市农业局

【目的】通过构建能够在植物生长发育阶段经乙醇诱导将选择标记基因删除的载体,消除选择标记基因带来的潜在安全隐患。【方法】利用AlcR/alcA诱导系统和Cre/loxP位点特异性重组系统删除选择标记基因。当外源诱导物乙醇存在时,激活下游Cr... 详细信息

【目的】通过构建能够在植物生长发育阶段经乙醇诱导将选择标记基因删除的载体,消除选择标记基因带来的潜在安全隐患。【方法】利用AlcR/alcA诱导系统和Cre/loxP位点特异性重组系统删除选择标记基因。当外源诱导物乙醇存在时,激活下游Cre的表达。Cre重组酶识别2个同向loxP位点,剔除位点之间的DNA片段,包括选择标记基因、AlcR/alcA系统和Cre/loxP系统,而目的基因gus在诱导前后均为组成型表达。【结果】拟南芥转基因植株受乙醇诱导严格控制Cre表达的"开"和"关"。经诱导的转基因植株不能在选择培养基上继续生长。分子生物学检测显示,2个同向loxP位点间序列均已删除,表明标记基因删除效果明显。【结论】基于AlcR/alcA和Cre/loxP系统的标记基因诱导删除体系切实可行,有广泛的应用前景。

关键词： Cre/loxP重组系统 AlcR/alcA诱导系统删除选择标记基因

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拟南芥对细菌性软腐病抗性变异分析

中国生物工程杂志 2008年第11期28卷 36-42页

作者：叶雪凌曹鸣庆马荣才首都师范大学生命科学学院北京100037 北京农业生物技术研究中心北京100097

由胡萝卜软腐欧文氏菌胡萝卜软腐亚种Erwinia carotovora ***(Ecc)引起的细菌性软腐病是世界性的重要流行病害,由于缺乏天然抗源,研究进展缓慢,拟南芥成为软腐病抗性研究的主要试材。选用29份拟南芥材料,制定了病情分级标准,以接种后48... 详细信息

由胡萝卜软腐欧文氏菌胡萝卜软腐亚种Erwinia carotovora ***(Ecc)引起的细菌性软腐病是世界性的重要流行病害,由于缺乏天然抗源,研究进展缓慢,拟南芥成为软腐病抗性研究的主要试材。选用29份拟南芥材料,制定了病情分级标准,以接种后48小时的病情指数作为软腐病抗性的鉴定指标,筛选出抗软腐病材料CS906和感病材料CS20。通过分析抗、感材料接种Ecc后AOS、ERF1-1、PR1、PDF1.2和PAL1等5个基因的表达变化,发现SA、ET和MJ信号途径都参与了拟南芥对Ecc的防卫反应,且基因表达模式在抗、感材料中相似,差异体现在表达量上。对深入探讨拟南芥软腐病抗病机制具有重要意义。

关键词：软腐病菌拟南芥抗病性鉴定

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高产番茄红素链霉菌选育及摇瓶发酵研究

中国生物工程杂志 2009年第12期29卷 64-68页

作者：王敏杨慧高俊莲马荣才北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心北京100097

番茄红素的抗氧化能力目前在类胡萝卜素中最强,是近年来国际上功能食品成分研究的热点。在国内首次利用龟裂链霉菌(Streptomyces rimosus)发酵生产番茄红素,建立了分光光度计法和HPLC法等番茄红素测定方法;以一株龟裂链霉菌Fc作为出发菌... 详细信息

番茄红素的抗氧化能力目前在类胡萝卜素中最强,是近年来国际上功能食品成分研究的热点。在国内首次利用龟裂链霉菌(Streptomyces rimosus)发酵生产番茄红素,建立了分光光度计法和HPLC法等番茄红素测定方法;以一株龟裂链霉菌Fc作为出发菌株,进行紫外诱变,筛选到一株突变高产菌株Fc’,其番茄红素产量较出发菌株提高2.5倍;通过摇瓶发酵实验优化培养条件,使菌株Fc’的番茄红素产量达到230 mg/L,并且在不添加任何阻断剂的情况下,利用链霉菌发酵可获得纯度较高的番茄红素。该结果为今后利用链霉菌工业化生产番茄红素奠定了良好基础。

关键词：番茄红素龟裂链霉菌紫外诱变摇瓶发酵测定方法

白菜伤害反应中内源信号分子及其基因表达变化

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农业生物技术学报 2016年第6期24卷 847-858页

作者：何付新远方田宇马荣才谢华北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心

白菜(Brassica rapa ***)在种植加工和运输过程中,易遭受各种机械伤害。本研究对白菜叶片进行伤害处理,利用气相色谱-质谱(gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)联用、GC和高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)分别测定内源信号分子茉莉酸(jasmonic acid,JA)、水杨酸(salicylic acid,SA)和乙烯(ethylene,ET)的含量或释放量变化,并利用c DNA芯片杂交分析伤害处理后基因表达总体变化,结合半定量RT-PCR分析JA、ET和SA信号途径中标志基因表达量变化。结果显示,大量基因在白菜伤害后上调表达,包括转录因子、小G蛋白、受体蛋白激酶、蛋白激酶、防御相关基因、JA/ET合成途径基因、吲哚芥子油苷降解途径基因、细胞壁修饰相关基因、色氨酸生物合成途径基因、苯丙烷和生物碱代谢途径相关基因、分子伴侣等。对伤害处理后JA含量及其信号途径标志基因表达分析发现,在伤害处理后6、12、24和48 h,叶片JA含量显著高于未进行伤害处理的空白对照叶片中JA含量(P<0.05);JA合成途径关键酶基因丙二烯氧合酶(allene oxide synthase,AOS)、丙二烯环氧化酶(allene oxide cyclase,AOC)和脂氧合酶(lipoxygenase,LOX)、JA合成途径上游的磷脂酶D(phospholipase D,PLD)和JA途径的应答标志基因黑芥子酶作用蛋白(myrosinase-associated protein,MYAP)诱导上调表达,表明JA介导的信号途径在白菜伤害应答反应中起了重要作用。对伤害处理后ET释放速度及其信号途径基因表达分析发现,ET在伤害处理后2和6 h大量合成,ET合成途径基因1-氨基环丙烷-1-羧酸合成酶6(1-aminocyclopropane-1-carboxylicacid(ACC)synthase 6,ACS6)和ACC氧化酶(ACC oxidase,ACO)在伤害早期诱导上调表达,乙烯响应转录因子4(ethylene-responsive transcription factor 4,ERF4)在伤害后0.17、0.5、2、6、12和24 h均上调表达,表明ET途径参与了早期的伤害反应。JA和ET共同调控途径的标志基因β-1,3葡聚糖酶(β-1,3 glucanase,BGL)在伤害各时间点均上调表达,表明JA和ET协同调控白菜伤害反应。对伤害处理后SA含量及其信号途径基因表达分析发现,游离态SA和总SA的含量明显下降,SA途径的标志基因病程相关蛋白(pathogenesis-related protein 1a,PR1a)和PR5在伤害后期有一定程度的诱导表达,而在伤害早期其表达受到抑制或未发生变化,表明SA信号途径在伤害早期受到抑制,在伤害后期活化,可能参与了伤害后期的防卫反应。本研究阐明了白菜在伤害处理后,基因表达总体水平产生变化,JA、ET和SA合成及其介导的信号途径标志基因表达产生变化,有助于揭示白菜伤害反应分子机制。

关键词：白菜伤害反应茉莉酸(JA) 乙烯(ET) 水杨酸(SA) 基因表达