基于AlcR/alcA和Cre/loxP系统的标记基因诱导删除体系
Excision of Selectable Markers Based on Inducible AlcR/alcA and Cre/loxP Systems作者机构：中国农业大学农学与生物技术学院 北京市农林科学院农业生物技术研究中心 北京市农业局
出 版 物：《中国农业科学》 (Scientia Agricultura Sinica)
年 卷 期：2011年第44卷第17期
页 面：3491-3500页
核心收录：
学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 090102[农学-作物遗传育种]
基 金：国家“863”计划项目(2008AA10Z154,2009AA10Z104-2) 北京市科技计划(Z07070501770704) 北京市农林科学院科技创新能力建设专项(KJCX201102003) 中央高校基本科研业务费专项资金(2009-2-06)
主 题：Cre/loxP重组系统 AlcR/alcA诱导系统 删除 选择标记基因
摘 要：【目的】通过构建能够在植物生长发育阶段经乙醇诱导将选择标记基因删除的载体,消除选择标记基因带来的潜在安全隐患。【方法】利用AlcR/alcA诱导系统和Cre/loxP位点特异性重组系统删除选择标记基因。当外源诱导物乙醇存在时,激活下游Cre的表达。Cre重组酶识别2个同向loxP位点,剔除位点之间的DNA片段,包括选择标记基因、AlcR/alcA系统和Cre/loxP系统,而目的基因gus在诱导前后均为组成型表达。【结果】拟南芥转基因植株受乙醇诱导严格控制Cre表达的开和关。经诱导的转基因植株不能在选择培养基上继续生长。分子生物学检测显示,2个同向loxP位点间序列均已删除,表明标记基因删除效果明显。【结论】基于AlcR/alcA和Cre/loxP系统的标记基因诱导删除体系切实可行,有广泛的应用前景。
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