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福建产圆斑蝰蛇(Vipera russelli siamensis)蛇毒磷酯酶A的分离纯化及部分性质研究

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Zoological Research 1981年第S1期2卷 3-8页

作者：冉永禄涂光俦王计平段志忠刘广芬王睛川陈清澄胡纫秋王锦兰武祥福中国科学院昆明动物研究所福建医科大学药理教研组中国科学院生物物理研究所中国科学院上海生物化学研究所

采用羧甲基葡聚糖C-50柱层析、葡聚糖G-75凝胶过滤和二乙氨基乙基葡聚糖A-50柱层析三步分离程序,获得了一个聚丙烯酰胺凝胶盘电泳纯的毒性磷酯酶A。用葡聚糖凝胶过滤法测得分子量为18,000,用SDS-平板聚丙烯酰胺凝胶梯度电泳法测得分子量... 详细信息

采用羧甲基葡聚糖C-50柱层析、葡聚糖G-75凝胶过滤和二乙氨基乙基葡聚糖A-50柱层析三步分离程序,获得了一个聚丙烯酰胺凝胶盘电泳纯的毒性磷酯酶A。用葡聚糖凝胶过滤法测得分子量为18,000,用SDS-平板聚丙烯酰胺凝胶梯度电泳法测得分子量为15,000,用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦法测得等电点为7.6。纯化的毒性磷酯酶A对昆明品系小白鼠的ld;(腹腔注射)是2微克/每克体重。磷酯酶A的比活性为24微克分子/分/毫克。纯化成分的产率是1—1.2%。

关键词：磷酯酶羧甲基葡聚糖柱层析圆斑蝰蛇聚丙烯酰胺凝胶梯度电泳比活性凝胶过滤

重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗(H5N1 Re-8株+H7N9 H7-Re1株)对商品肉鸡的免疫效力研究

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中国预防兽医学报 2019年第6期41卷 611-615页

作者：吴姣姣曾显营陈晓涵臧金凯包红梅施建忠邓国华郭兴福刘景利毛胜刚杨帆陈志宇孙项楠路通陈化兰田国彬中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/国家禽流感参考实验室黑龙江哈尔滨150069 哈尔滨维科生物技术有限公司黑龙江哈尔滨150069

为评估重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗(H5N1 Re-8株+H7N9 H7-Re1株)对商品肉鸡的免疫保护效果,本研究将该疫苗按照现地免疫程序分别接种10日龄白羽肉鸡和14日龄黄羽肉鸡,疫苗接种前和接种后每周采血,分离血清,检测H5亚型Re-8株和H7... 详细信息

为评估重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗(H5N1 Re-8株+H7N9 H7-Re1株)对商品肉鸡的免疫保护效果,本研究将该疫苗按照现地免疫程序分别接种10日龄白羽肉鸡和14日龄黄羽肉鸡,疫苗接种前和接种后每周采血,分离血清,检测H5亚型Re-8株和H7亚型H7-Re1株禽流感病毒(AIV)HI抗体滴度,并在初次免疫后3周和出栏时以鼻腔感染方式分别进行攻毒试验。结果显示,免疫前,所有肉鸡血清中H7亚型H7-Re1株AIV HI抗体滴度均低于1log2,H5亚型Re-8株AIV平均HI抗体滴度分别为5.3log2(白羽肉鸡)和4.1log2(黄羽肉鸡);一次免疫的白羽肉鸡在免疫后3周至出栏时,2种亚型AIV平均HI抗体滴度在6.0log2~6.7log2;2次免疫的黄羽肉鸡在初次免疫后3周至出栏时,2种亚型AIV平均HI抗体滴度均在6.0log2以上。在一次免疫后3周时和出栏时,采用高致病性H5、H7亚型AIV攻毒后,对照组白羽肉鸡和黄羽肉鸡均全部死亡,免疫组白羽肉鸡和黄羽肉鸡均不发病、不排毒、不死亡,获得100%的免疫保护。本研究结果表明,重组AIV二价灭活疫苗对商品肉鸡具有良好的免疫效果,为该疫苗的现地应用提供了参考依据。

关键词：禽流感灭活疫苗 H5+H7 商品肉鸡免疫效力

金黄色葡萄球菌肠毒素B精制免疫球蛋白对小鼠中毒模型的免疫救治效果研究

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生物技术通讯 2019年第6期30卷 756-761页

作者：韩慧李敏杨晓岚段跃强谷宏婧范铁炯李鑫杨鹏辉刘媛闫芳郑源强石艳春赵忠鹏内蒙古自治区分子生物学重点实验室内蒙古医科大学内蒙古呼和浩特010058 病原微生物生物安全国家重点实验室军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所北京100071 上海赛伦生物技术股份有限公司上海201707 解放军总医院第五医学中心北京100039 山西农业大学动物科技学院山西太谷030800

目的:研制金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)精制免疫球蛋白,即马抗SEB免疫球蛋白F(ab′)2制品,为SEB中毒的救治提供候选药。方法:利用传统的发酵和纯化工艺制备天然SEB纯品,并建立小鼠实验动物模型;利用分子克隆和蛋白质纯化技术,克隆、表达... 详细信息

目的:研制金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)精制免疫球蛋白,即马抗SEB免疫球蛋白F(ab′)2制品,为SEB中毒的救治提供候选药。方法:利用传统的发酵和纯化工艺制备天然SEB纯品,并建立小鼠实验动物模型;利用分子克隆和蛋白质纯化技术,克隆、表达、纯化重组SEB,加入适量弗氏佐剂充分乳化,免疫马匹,测定免疫马匹血清中和抗体效价后采血,分离血清,按照成熟的生产工艺制备治疗性抗体成品;对成品进行安全性检测及免疫救治效果评价。结果:纯化的天然SEB经SDS-PAGE和HPLC法测定纯度大于90%,对小鼠腹腔注射的半数致死量为0.5μg/kg;纯化的重组SEB表达量超过2 mg/mL,经SDS-PAGE和HPLC法测定纯度大于90%,对小鼠腹腔注射的半数致死量为50μg/kg;免疫马匹血清中和抗体效价达2000 U/mL以上时,采血并制备F(ab′)2成品,经SDS-PAGE和HPLC法测定纯度在80%以上,中和抗体效价超过2500 U/mL;安全性符合现行《中国药典》要求;对SEB中毒动物模型有很好的免疫救治效果。结论:建立了SEB精制免疫球蛋白制品生产工艺,制备的成品符合现行《中国药典》要求,为SEB中毒的救治提供了候选药。

关键词：金黄色葡萄球菌肠毒素B 免疫球蛋白动物模型

糖皮质激素在老年患者蝮蛇咬伤致全身炎症反应综合征及多器官功能损伤中的应用价值

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中华老年多器官疾病杂志 2013年第10期12卷 725-728页

作者：苏琴刘红升党伟门保忠袁晓玲果应菲陈春鸣张建波秦宇红张宪姚咏明赵晓东解放军总医院第一附属医院急救部北京100048

目的探讨小剂量氢化可的松琥珀酸钠在老年患者蝮蛇咬伤全身炎症反应综合征（SIRS）及多器官功能损伤中的应用价值。方法采用前瞻性研究方法，选择2009年4月至2013年4月我科收治的合并SIRS和多器官功能受损的蝮蛇咬伤老年患者60例，随机... 详细信息

目的探讨小剂量氢化可的松琥珀酸钠在老年患者蝮蛇咬伤全身炎症反应综合征（SIRS）及多器官功能损伤中的应用价值。方法采用前瞻性研究方法，选择2009年4月至2013年4月我科收治的合并SIRS和多器官功能受损的蝮蛇咬伤老年患者60例，随机分为对照组和治疗组（n=30），两组均给予常规程序化治疗，治疗组加用小剂量氢化可的松琥珀酸钠，测定两组患者治疗前及治疗后1，3，5d的炎症相关指标及血生化指标。结果治疗前两组各项指标比较，差异均无统计学意义（P〉0．05）。与治疗前比较，对照组肌酸激酶（CK）和肌酸激酶同工酶（CK—MB）治疗后第3天差异有统计学意义（P〈0．05），体温（T）、脉搏（P）、白细胞计数（WBC）、C反应蛋白（CRP）、天冬氨酸转氨酶（AST）、丙氨酸转氨酶（ALT）和乳酸脱氢酶（ldH）第5天出现统计学差异（P〈0．05）；治疗组T，CK和CK-MB在第1天时差异即有统计学意义（P〈0．05），WBC，CRP，AST，ALT和ldH在第3天时差异有统计学意义（P〈0．05）。治疗组与对照组间各项指标比较，3d时CK和CK-MB差异有统计学意义（P〈0．05），5d时AST，ALT和ldH差异有统计学意义（P〈0．05）。结论小剂量氢化可的松琥珀酸钠能减轻老年患者蝮蛇咬伤的炎症反应，对重要器官的功能有一定的保护作用。

关键词：老年人蛇咬伤糖皮质激素类全身炎症反应综合征多脏器功能损伤

高功率ld侧面泵浦Nd:YAG激光器四镜折叠腔分析与设计

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天津理工学院学报 2004年第1期20卷 28-31页

作者：周建勇于意仲姚建铨陈进温午麒李君王鹏周睿天津大学精密仪器与光电子工程学院激光与光电子研究所天津300072

运用ABCD传输矩阵理论,把增益介质作为类透镜处理,对ld侧面泵浦地Nd:YAG激光器四镜折叠腔进行了分析,特别讨论了增益介质内部基模光斑半径和基模体积随泵浦功率变化的关系.在此基础上得到了一组腔的优化参数,能使激光器实现大基模体积... 详细信息

运用ABCD传输矩阵理论,把增益介质作为类透镜处理,对ld侧面泵浦地Nd:YAG激光器四镜折叠腔进行了分析,特别讨论了增益介质内部基模光斑半径和基模体积随泵浦功率变化的关系.在此基础上得到了一组腔的优化参数,能使激光器实现大基模体积热稳运转,并很好地补偿了像散.

关键词：类透镜基模体积 ld侧面泵浦 Nd:YAG激光器折叠腔

四川省德格县2株疑似喜马拉雅旱獭鼠疫菌株的鉴定

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中国地方病学杂志 2009年第1期28卷 48-53页

作者：祁芝珍罗志丹巴段勇军李敏崔百忠戴瑞霞冯建萍李存香于守鸿王祖郧王虎金星赵海红辛有全任玲玲张青雯魏荣杰金丽霞金泳熊浩明罗孝林泽仁桑珠王洪张珊瑚郭文涛王雪丹巴泽里翁丹王代礼青海省地方病预防控制所鼠疫预防控制科西宁811602 四川省甘孜州疾病预防控制中心鼠疫布病炭疽科四川省德格县疾病预防控制中心四川省德格县卫生局

目的通过对四川省德格县自毙喜马拉雅旱獭体内分离出的2株疑似鼠疫菌株进行生化特征、毒力鉴定，确定四川省是否存在早獭鼠疫自然疫源地。方法菌株鉴定采用细菌形态染色、培养特性、鼠疫噬菌体裂解试验、生化及糖醇类酵解试验、毒力因... 详细信息

目的通过对四川省德格县自毙喜马拉雅旱獭体内分离出的2株疑似鼠疫菌株进行生化特征、毒力鉴定，确定四川省是否存在早獭鼠疫自然疫源地。方法菌株鉴定采用细菌形态染色、培养特性、鼠疫噬菌体裂解试验、生化及糖醇类酵解试验、毒力因子、毒力、营养需求、质粒、基因检测及基因分型方法进行。结果光镜下，2株被检菌株均为革兰染色阴性，呈球杆状，两极浓染、两端钝圆；在赫氏普通琼脂上24～48h．被检菌株形态呈中心发暗，有黄褐色粗糙颗粒，边缘不整呈锯齿状、薄而透明的花边；存赫氏血琼脂t，菌落隆起，色泽深，花边消失或残留锯齿状痕迹。2株被检菌株均能酵解阿胶糖、麦芽糖、甘油，不酵解鼠李糖、密二糖，脱氮阳性；毒力因子均为F1’、VW’、Pgm’、PstI’；携带鼠疫菌常见的质粒，相对分子质量（胁）为6．0×10^6、45．0×10^6、65．0×10^6，具有鼠疫菌的毒力相关质粒基因Pla、calfl、krG；对小鼠的毒力试验，绝对致死量（ld100）均为50个菌；营养需求上，对苯丙氨酸、甲硫氨酸依赖；基因型是Genomovar5；与假结核菌（FFB）在鉴别培养基尿素、奥腾、枸橼酸盐上有明显区别，含鼠疫菌特有的PstI和F1抗原，22℃下能被鼠疫噬菌体完全裂解，含有鼠疫菌特有的3a片段。结论四川省德格县喜马拉雅旱獭体内分离的2株疑似菌株均为鼠疫耶尔森菌，具有青藏高原喜马拉雅旱獭型鼠疫菌株的特性，四川省存在喜马拉雅旱獭鼠疫自然疫源地。

关键词：耶尔森菌鼠疫生物学鉴定喜马拉雅旱獭鼠疫自然疫源地