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Spleen-kidney supplementing formula alleviates insulin resistance via regulating AKT/glycogen synthase kinase 3β pathway in rats with type 2 diabetic induced by high-fat diet

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Journal of Traditional Chinese Medicine 2019年第2期39卷 199-206页

作者： Tian Chunyu Wang Ya la xiaojin Li Ji'an Zhang Biwei Department of Traditional Chinese Medicine North China University of Science and Technology

OBJECTIVE: To explore the molecular mechanism underpinning the action by investigating its effect on glycogen content and AKT(also known as protein kinase B)/glycogen synthase kinase 3β(GSK-3β) pathway in the liver of rats with type 2 diabetic induced by high-fat ***: The rat model of type 2 diabetes was induced by high-fat diet and multiple low-dose streptozotocin injection. Diabetic rats were divided into five groups: the model control group, the Metformin group, spleen-kidney supplementing formula groups of low, medium and high doses. Fasting blood glucose(FBG) levels were measured before treatment and every two weeks during *** the treatment, oral glucose tolerance test was performed, and hemoglobin A1c (HbA1c) and C-peptide were measured to assess the formula's effect on glucose metabolism and insulin resistance. The protein expression levels of AKT, GSK-3βand their phosphorylated forms in the liver were also measured to study the formula's role in insulin signaling ***: Spleen-kidney supplementing formula significantly relieved the symptoms of polydipsia,polyuria and weight loss in type 2 diabetic rats, reduced FBG and HbA1c levels, increased glycogen content, and improved insulin sensitivity. The anti-diabetic effects of spleen-kidney supplementing formula are dose dependent. It also increased the total AKT protein level and the GSK-3β phosphorylation in the liver of type 2 diabetic ***: Spleen-kidney supplementing formula has hypoglycemic effect and relieves insulin resistance by enhancing AKT/GSK-3β signaling pathway in the liver of type 2 diabetic rats.

关键词： Spleen-kidney supplementing formula Insulin resistance Proto-oncogene proteins c-akt Glycogen Phosphorylation

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Regulation of Zishen Qinggan( Shuangyi) Prescription to Insulin Resistance of GK Rats

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Medicinal Plant 2017年第3期8卷 19-22页

作者： Chunyu TIAN Chen XING Haimei BO Liang ZHU xiaojin la Huijuan CAO Xin YAN Yuyang YANG Xuemei ZHOU Ji'an LI Yongsen JIA North China University of Science and Technology

[Objective] To study the effects of Zishen Qinggan( Shuangyi) Prescription on blood glucose,Hb A1c( glycosylated hemoglobin A1c),C-peptide( C-P),glucagon-like peptide( GLP-1),and α-glucosidase activity in GK( Goto-Kakizaki) rats. [Methods]Selected fasting blood glucose( FBG) > 11. 1mmol/L GK rats and randomly divided into groups: model group,Zishen Qinggan( Shuangyi) Prescription low dosage( ig,400 mg/kg/d),medium dosage( ig,800 mg/kg/d),and high dosage groups( ig,1600 mg/kg/d),and metformin group(ig,85 mg/kg/d). After continuous administration for 28 d,fasting blood glucose(FBG),oral glucose tolerance test(OGTT),Hb A1 c,C-P,GLP-1 and α-glucosidase activity were detected. [Results] Compared with the control group,FBG and Hb A1 c of the model group was significantly higher( P < 0. 01); compared with the model group,Zishen Qinggan( Shuangyi) Prescription could significantly reduce the levels of blood glucose,Hb A1 c,and the elevated blood glucose levels after 120 min of glucose loading in OGTT( P < 0. 05,P < 0. 01),and also can significantly improve the level of C-P,GLP-1( P < 0. 05,P < 0. 01),reduce Homa-IR,and inhibit α-glucosidase activity. [Conclusions]Zishen Qinggan( Shuangyi) Prescription can effectively reduce the blood glucose of GK rats,the action mechanism of which is possibly that it can improve insulin resistance,increase GLP-1 content and inhibit α-glucosidase activity.

关键词： Zishen Qinggan(Shuangyi) Prescription Type 2 diabetes(diabetes mellitus) Insulin resistance

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慢性心力衰竭合并骨骼肌萎缩大鼠模型的建立与评价

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中西医结合心脑血管病杂志 2023年第5期21卷 816-820页

作者：张美沙宿玮洁王勇喇孝瑾程顺昇李小龙常宏华北理工大学中医学院河北唐山063210 河北省中西医结合防治糖尿病及其并发症重点实验室河北唐山063210 北京中医药大学中医学院

目的:探讨慢性心力衰竭合并骨骼肌萎缩模型建立方法,通过观察骨骼肌组织形态学和涉及萎缩相关的指标,探讨慢性心力衰竭合并骨骼肌萎缩涉及的分子靶点。方法:通过结扎大鼠左侧冠状动脉前降支的方法来建立大鼠慢性心力衰竭模型。术后3 d... 详细信息

目的:探讨慢性心力衰竭合并骨骼肌萎缩模型建立方法,通过观察骨骼肌组织形态学和涉及萎缩相关的指标,探讨慢性心力衰竭合并骨骼肌萎缩涉及的分子靶点。方法:通过结扎大鼠左侧冠状动脉前降支的方法来建立大鼠慢性心力衰竭模型。术后3 d进行心电图检测。术后饲养12周,检测大鼠心脏射血分数(EF)和血清N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)浓度,观察心脏大体结构和苏木精-伊红(HE)染色后组织形态,确定心力衰竭模型是否复制成功。同时测量大鼠抓力、腓肠肌重量,观察腓肠肌的大体结构和HE染色后组织形态,确定大鼠慢性心力衰竭合并骨骼肌萎缩模型成功建立。应用蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测腓肠肌组织中肌球蛋白重链(MyHC)、肌萎缩Fbox-1蛋白(Atrogin-1)、肌肉环指蛋白-1(MuRF-1)、叉头转录因子1(FOXO1)蛋白表达。结果:与假手术组相比,模型组心电图出现病理性Q波,心脏EF明显下降(P<0.01),血清NT-proBNP浓度明显升高(P<0.01),心脏体积变大而且水肿,左心室前壁明显凹陷,HE染色观察到心肌组织的排列很不规则;大鼠腓肠肌组织疏松,颜色偏暗淡,抓力和腓肠肌重量下降(P<0.01),肌纤维横截面积明显缩小(P<0.01)。Western Blot检测显示,与假手术组比较,模型组大鼠萎缩相关蛋白Atrogin-1、MuRF-1和FOXO1表达明显升高(P<0.05),而MyHC蛋白表达下降(P<0.05)。结论:FOXO1-Atrogin-1/MuRF-1通路在慢性心力衰竭合并骨骼肌萎缩中发挥重要作用,该模型的建立为临床防治此类疾病提供了实验基础。

关键词：慢性心力衰竭骨骼肌萎缩 N末端脑钠肽前体心脏射血分数实验研究

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双益方剂及其有效成分对胰岛素抵抗小鼠胰岛β细胞株胰岛素分泌、增殖、凋亡的影响

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山东医药 2017年第39期57卷 23-26页

作者：田春雨马雷雷喇孝瑾华北理工大学河北唐山063210

目的观察双益方及其有效成分对胰岛素抵抗的小鼠胰岛β细胞株Min6胰岛素分泌水平和细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法培养Min6细胞并分为正常组、IR模型组、二甲双胍组、双益方组、双益方组方单味中药组(山茱萸、黄芪、黄连... 详细信息

目的观察双益方及其有效成分对胰岛素抵抗的小鼠胰岛β细胞株Min6胰岛素分泌水平和细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法培养Min6细胞并分为正常组、IR模型组、二甲双胍组、双益方组、双益方组方单味中药组(山茱萸、黄芪、黄连、葛根、桑白皮、佩兰)及双益方有效成分组(1-脱氧野尻霉素、小檗碱、黄芪甲苷、熊果酸、马钱苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、葛根素)。正常组加入无酚红培养液正常培养;其余各组加入葡萄糖和棕榈酸制作胰岛素抵抗的Min6细胞模型。二甲双胍组加入100μg/L的二甲双胍。双益方组、山茱萸组、黄芪组、黄连组、葛根组、桑白皮组、佩兰组、葛根素组、1-脱氧野尻霉素组、小檗碱组、黄芪甲苷组、马钱苷组、熊果酸组、毛蕊异黄酮葡萄糖苷组分别加入50、100、200μg/L的相应药物。各组于给药24 h后进行胰岛素分泌实验,检测胰岛素分泌水平。各组分别于给药24、48 h采用CCK-8试剂盒检测细胞增殖能力。于给药24 h后采用双染法检测正常组、IR模型组、二甲双胍组、双益方组的凋亡细胞,计算细胞凋亡率;采用Western blotting法检测细胞中的ERK1/2、p-ERK1/2、MEK1/2蛋白。结果 IR模型组细胞高糖、低糖刺激下胰岛素分泌水平均低于正常组(P均<0.05)。二甲双胍组、黄芪组、葛根组、双益方组、黄芪甲苷组、山茱萸组、1-脱氧野尻霉素组、葛根素组、小檗碱组胰岛素分泌水平高于IR模型组(P均<0.05)。IR模型组细胞增殖能力低于正常组(P均<0.05);二甲双胍组、双益方组、黄芪组、黄芪甲苷组、1-脱氧野尻霉素组、山茱萸组细胞增殖能力高于IR模型组(P均<0.05)。IR模型组细胞凋亡率高于正常组,双益方各组细胞凋亡率均低于IR模型组(P均<0.05)。IR模型组细胞中MEK1/2、ERK1/2、pERK1/2蛋白相对表达量低于正常组(P均<0.05);二甲双胍组及双益方组细胞中MEK1/2、ERK1/2、p-ERK1/2蛋白相对表达量高于IR模型组(P均<0.05)。结论双益方及其黄芪、葛根、黄芪甲苷、山茱萸、1-脱氧野尻霉素、葛根素、小檗碱等成分可有效提高胰岛素抵抗的Min6细胞的胰岛素分泌水平,促进细胞增殖并抑制其凋亡,作用机制可能与ERK1/2、p-ERK1/2、MEK1/2蛋白表达上调有关。

关键词：双益方 2型糖尿病胰岛素抵抗胰岛素分泌实验细胞增殖细胞凋亡小鼠胰岛β细胞株

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基于转录组学探讨滋肾清肝方改善2型糖尿病糖、脂代谢的作用机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第8期30卷 109-117页

作者：王景存田春雨张帆喇孝瑾吴范武朱亮马雷雷华北理工大学河北唐山063210 河北省中西医结合防治糖尿病及其并发症重点实验室河北唐山063210 唐山市中药药理重点实验室河北唐山063210

目的:基于网络药理学及转录组学探讨滋肾清肝方(ZSQGF)改善2型糖尿病(T2DM)模型大鼠糖、脂代谢的作用机制。方法:基于网络药理学分析ZSQGF与T2DM的差异基因,进行基因本体(GO)富集分析与京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,并... 详细信息

目的:基于网络药理学及转录组学探讨滋肾清肝方(ZSQGF)改善2型糖尿病(T2DM)模型大鼠糖、脂代谢的作用机制。方法:基于网络药理学分析ZSQGF与T2DM的差异基因,进行基因本体(GO)富集分析与京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,并通过分子对接分析对接能,验证成分与靶点结合。通过高脂喂养及注射链脲佐菌素的方法建立T2DM大鼠模型,并随机分为正常组、模型组、二甲双胍组(二甲双胍72 mg·kg^(-1))和ZSQGF高、中、低剂量组(分别折合生药量4.8、2.4、1.2 g·kg^(-1)的药液);监测大鼠的生活状态;检测大鼠血清总胆固醇(TC)、总甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)含量;对肝脏组织进行苏木素-伊红(HE)染色和油红O染色;通过肝脏转录组学分析差异基因、进行GO与KEGG富集分析,绘制蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络图筛选核心靶点;结合网络药理学与转录组学分析结果进行蛋白通路验证,通过蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝脏核转录因子-κB(NF-κB)、基质金属蛋白酶(MMP-1、MMP-9)的蛋白表达量,通过实时荧光定量聚合酶链式反应(Realtime PCR)验证B细胞淋巴瘤(Bcl)-2修正因子(BMF)、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶4(NOX4)、脂肪酸合酶(FASN)的mRNA表达,通过免疫荧光染色检测MMP-1、MMP-9在肝脏的表达情况。结果:转录组学与网络药理学分析ZSQGF可能通过糖脂代谢通路、炎症通路作用于糖脂代谢、保护肝脏。实验证明给药8周后大鼠体质量、血糖、血清指标、病理染色结果均有改善,Western blot结果表明ZSQGF组肝脏NF-κB、MMP-1、MMP-9蛋白相对表达量降低,Real-time PCR结果表明ZSQGF高剂量组BMF、NOX4、FASN转录表达降低,免疫荧光结果ZSQGF组肝脏MMP-1、MMP-9蛋白表达量降低。结论:ZSQGF可以抑制FASN的表达、减少脂质合成,并通过调节NF-κB信号通路改善糖脂代谢。

关键词：滋肾清肝方 2型糖尿病糖脂代谢网络药理学转录组学

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双益方、组方单味中药及其有效成分对α-葡萄糖苷酶、二肽基肽酶-4抑制作用实验研究

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辽宁中医药大学学报 2018年第4期20卷 36-39页

作者：田春雨马雷雷喇孝瑾华北理工大学

目的：研究双益方、组方单味中药及其有效成分对α-葡萄糖苷酶、二肽基肽酶-4的抑制作用。方法：建立体外α-葡萄糖苷酶活性筛选模型,测定、计算各实验组对α-葡萄糖苷酶（α-glucosidase）抑制率和IC50值,检测各成分对α-glucosidase... 详细信息

目的：研究双益方、组方单味中药及其有效成分对α-葡萄糖苷酶、二肽基肽酶-4的抑制作用。方法：建立体外α-葡萄糖苷酶活性筛选模型,测定、计算各实验组对α-葡萄糖苷酶（α-glucosidase）抑制率和IC50值,检测各成分对α-glucosidase的抑制作用;建立二肽基肽酶4（DPP-4）抑制作用的体外筛选模型,研究双益方及其有效成分对DPP-4的抑制作用。结果：当双益方提取物浓度达到250μg·L-1时,对α-葡萄糖苷酶的抑制率为91.52%,其IC50值为（17.25±1.06）μg·L-1;双益方组方中药中,以黄芪对α-葡萄糖苷酶的抑制作用较好,其IC50值为（7.68±0.32）μg·L-1;双益方有效成分中,以1-脱氧野尻霉素对α-葡萄糖苷酶的抑制作用较好,其IC50值为（0.85±0.04）μg·L-1,与阿卡波糖（0.39±0.02）μg·L-1较为接近;黄芪、山茱萸、黄连、葛根、桑白皮、佩兰、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、熊果酸、马钱苷、小檗碱对DPP-4抑制作用〈10%;1-脱氧野尻霉素、双益方提取物、黄芪甲苷、葛根素对DPP-4抑制作用〉10%。选择对DPP-4抑制率〉10%的双益方提取物、单味药及有效成分进行DPP-4抑制率复筛,对DPP-4抑制作用顺序为磷酸西格列汀〉1-脱氧野尻霉素〉双益方提取物〉黄芪甲苷〉葛根素。对DPP-4的IC50分别为：1-脱氧野尻霉素（18.78±1.08）μg·L-1,双益方提取物（74.52±3.24）μg·L-1,黄芪甲苷（50.24±2.22）μg·L-1,葛根素（100.24±4.25）μg·L-1。结论：抑制α-葡萄糖苷酶及DPP-4活性可能是该复方治疗2型糖尿病的作用机制。

关键词：双益方 α-葡萄糖苷酶二肽基肽酶-4

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AIM在炎症反应和脂质代谢疾病中的作用

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中国比较医学杂志 2024年第3期34卷 142-148页

作者：张帆田春雨王景存喇孝瑾付茜茹李洁付文浩华北理工大学河北唐山063210 河北省中西医结合防治糖尿病及其并发症重点实验室河北唐山063210

巨噬细胞凋亡抑制因子(apoptosis inhibitor of macrophage,AIM),是清道夫受体富含半胱氨酸残基超家族(scavenger receptor cysteine rich-super family,SRCR-SF)B组的成员之一。AIM为巨噬细胞分泌的一种可溶性蛋白,该蛋白的表达受肝X受体(liver X receptor,LXR)控制,且在机体的免疫反应中起重要作用。AIM作为巨噬细胞的一种分泌蛋白,发挥着广泛的作用,不仅对巨噬细胞的凋亡具有抑制作用,并且可参与调控巨噬细胞极化。还有相关研究发现,AIM参与炎症、肥胖、动脉粥样硬化和癌症等多种生理、病理过程;可以作为结核病和肝硬化等疾病的生物诊断标志物;可以通过抑制脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)活性从而促进脂肪细胞的脂解,在调节脂质内稳态平衡、脂质代谢与自身免疫疾病中发挥着重要的作用。该文论述了AIM的分子特征及其在炎症反应和脂质代谢等相关疾病方面的作用,展示AIM的多种功能特点,为相关的医学研究提供依据。

关键词： AIM 炎症反应脂质代谢

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双益方对2型糖尿病患者疗效临床观察

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辽宁中医药大学学报 2018年第2期20卷 156-158页

作者：田春雨喇孝瑾朱亮周雪梅华北理工大学

目的：进行双益方的临床观察,为其临床应用提供依据。方法：随机选取2015年5月—2016年5月在华北理工大学中医学院门诊部就诊的2型糖尿病患者,共63例,在常规治疗的基础上,将63例2型糖尿病患者随机分为二甲双胍治疗组（31例）及双益方治... 详细信息

目的：进行双益方的临床观察,为其临床应用提供依据。方法：随机选取2015年5月—2016年5月在华北理工大学中医学院门诊部就诊的2型糖尿病患者,共63例,在常规治疗的基础上,将63例2型糖尿病患者随机分为二甲双胍治疗组（31例）及双益方治疗组（32例）,观察双益方对2型糖尿病患者空腹血糖（FBG）、餐后血糖（PBG）、糖耐量（OGTT）、糖化血红蛋白（HbAlc）及胰岛素抵抗指数的影响。结果：双益方可显著降低2型糖尿病患者FBG、HbAlc、OGTT 2h AUC、Homa-IR。结论：双益方具有较好的调节糖代谢作用。

关键词：双益方临床观察 2型糖尿病

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滋肾清肝代平方化学成分初步研究

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辽宁中医药大学学报 2015年第6期17卷 45-49页

作者：田春雨薄海美喇孝瑾朱亮天津中医药大学天津300193 华北理工大学河北唐山063000

目的:研究滋肾清肝代平方(桑叶、桑椹、制首乌、决明子)的化学成分,为其有效成分研究提供基础。方法:采用硅胶、Sephadex LH-20等柱色谱法进行分离、纯化,根据化合物的理化性质和波谱学数据鉴定其结构。结果:从滋肾清肝代平方各提取物... 详细信息

目的:研究滋肾清肝代平方(桑叶、桑椹、制首乌、决明子)的化学成分,为其有效成分研究提供基础。方法:采用硅胶、Sephadex LH-20等柱色谱法进行分离、纯化,根据化合物的理化性质和波谱学数据鉴定其结构。结果:从滋肾清肝代平方各提取物中分离得到19个化合物,分别为:大黄素甲醚(1)、钝叶素(2)、大黄素(3)、甲基钝叶决明素(4)、决明子苷(5)、决明子苷B(6)、红镰霉素龙胆二糖苷(7)、大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷(8)、淫羊藿素(9)、白藜芦醇(10)、羽扇豆醇(11)、β-谷甾醇(12)、乌发醇(13)、齐墩果酸(14)、熊果酸(15)、β-胡萝卜苷(16)、芦丁(17)、2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(18)、l-脱氧野尻霉素(19)。结论:19个化合物均为首次从该复方中分离得到的已知化合物,这些化合物能部分反映出该复方的有效成分。

关键词：滋肾清肝代平方 2型糖尿病化学成分

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中药防治2型糖尿病的临床用药分析

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中国民族民间医药 2014年第13期23卷 27-28页

作者：晏斌王洪彬喇孝瑾李继安河北联合大学河北唐山063000

目的:探讨中医药防治2型糖尿病的用药特点及组方规律。方法:在CNKI、VIP数据库检索中医药防治2型糖尿病的文献,建立中药及方剂文献数据库,采用频次研究的方法对用药特点及组方规律进行分析。结果:①出现频率最高的单味药是黄芪、山药、... 详细信息

目的:探讨中医药防治2型糖尿病的用药特点及组方规律。方法:在CNKI、VIP数据库检索中医药防治2型糖尿病的文献,建立中药及方剂文献数据库,采用频次研究的方法对用药特点及组方规律进行分析。结果:①出现频率最高的单味药是黄芪、山药、丹参、生地黄,药类以补虚药、清热药、活血化瘀药出现频次最高。②防治2型糖尿病方剂应用频次最高的为六味地黄汤,其次为左归丸和消渴方。结论:中医药防治2型糖尿病用药规律研究,为临床选择防治2型糖尿病最佳药物及组方提供了依据。

关键词： 2 型糖尿病中药方剂频次

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