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小肠结肠炎耶尔森氏菌可视化LAMP检测方法的建立

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中国兽医科学 2021年第3期51卷 281-288页

作者：徐云明朱孟玲杨剑波孙智远卞蓉蓉陈爱宁郭丽娟孙玉琴王一伊郑墁墁仲思远周弇扬李叶辉柳增善任洪林江苏农林职业技术学院畜牧兽医学院江苏句容212400 句容市农业农村局江苏句容212400 吉林大学人兽共患病研究所吉林长春130062

通过优化LAMP反应体系中镁离子、甜菜碱、dNTP等反应组成成分,而后进行特异性试验,并优化钙黄绿素与氯化锰的比例放入LAMP体系内,最后应用LAMP检测含有小肠结肠炎耶尔森氏菌(耶氏菌)的肉品,从而建立一种能够检测耶氏菌并通过肉眼观察和... 详细信息

通过优化LAMP反应体系中镁离子、甜菜碱、dNTP等反应组成成分,而后进行特异性试验,并优化钙黄绿素与氯化锰的比例放入LAMP体系内,最后应用LAMP检测含有小肠结肠炎耶尔森氏菌(耶氏菌)的肉品,从而建立一种能够检测耶氏菌并通过肉眼观察和判断试验结果的LAMP方法。结果显示,优化的25μL反应体系如下:9 mmol/L Mg2+、1.8 mmol/L dNTPs、1.0 mol/L betaine、0.2μmol/L外引物、0.8μmol/L内引物、1μL Bst DNA polymerase(8 U/μL)、2.5μL 10×thermpol reaction buffer、228μmol/L钙黄绿素、324μmol/L氯化锰,反应温度65℃孵育60 min。LAMP检测耶氏菌基因组DNA的最低检测限是85.3×10^(-6)ng/μL,比文献PCR方法灵敏性高出2个数量级。LAMP方法对耶氏菌g DNA的最低检测限对应的基因拷贝数最低检测限是35,对应的CFU最低检测限是7×10^(2)CFU/m L。本试验建立的这种可视化的检测耶氏菌的LAMP方法,为耶氏菌的检测提供了一种新的参考。

关键词：小肠结肠炎耶尔森氏菌 LAMP 可视化检测

中国新诊断2型糖尿病胰岛素分泌和胰岛素抵抗特点调查

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中华内分泌代谢杂志 2008年第3期24卷 256-260页

作者：安雅莉高妍朱倩宁光贾伟平黄勤许雯李成江周智广施秉银单忠艳陈璐璐许樟荣王姮严励钟惠菊姬秋和李红薛元明张木勋谷卫郭晓蕙高蕾丽洪洁刘芳邹大进李延兵张小英李桢郭辉赵晓娟吴汉妮王玉珍赵维纲张少玲吴静张南雁杨凤英张云周鑫荣任跃忠李光伟无卫生部中日友好医院内分泌代谢中心北京100029 中国胰岛素分泌研究组北京大学第一医院内分泌科北京大学人民医院内分泌科上海交通大学医学院附属瑞金医院内分泌代谢病科上海交通大学附属上海市第六人民医院内分泌科中国人民解放军第二军医大学附属长海医院内分泌科上海中山大学附属第一医院内分泌科广州浙江大学附属第一医院内分泌科杭州中南大学湘雅医学院附属第二医院内分泌科长沙西安交通大学医学院第一附属医院内分泌科中国医科大学附属第一医院内分泌科沈阳华中科技大学同济医学院附属协和医院内分泌科武汉中国人民解放军三○六医院内分泌科北京中国医学科学院协和医院内分泌科北京中山大学第二附属医院内分泌科广州中南大学湘雅医学院附属第一医院内分泌科长沙中国人民解放军第四军医大学西京医院内分泌科西安昆明医学院附属第一医院内分泌科云南省人民医院内分泌科昆明华中科技大学同济医学院附属同济医院内分泌科武汉浙江大学附属第二医院内分泌科杭州

目的研究中国新诊断2型糖尿病患者胰岛素分泌功能（IS）及胰岛素抵抗（IR）状况。方法对405例新诊断2型糖尿病患者和40名糖耐量正常者（对照组）测量身高、体重；行口服葡萄糖耐量试验（OGTF）及胰岛素释放试验。按空腹血糖（FPG）水平... 详细信息

目的研究中国新诊断2型糖尿病患者胰岛素分泌功能（IS）及胰岛素抵抗（IR）状况。方法对405例新诊断2型糖尿病患者和40名糖耐量正常者（对照组）测量身高、体重；行口服葡萄糖耐量试验（OGTF）及胰岛素释放试验。按空腹血糖（FPG）水平分为4组，与对照组比较。93例FPG≥8．3mmol／L者应用格列齐特（达美康）缓释片进行干预治疗1—3个月，血糖达标后重复OGTT并计算干预后的IR及IS。结果（1）随着FPG水平的升高，糖尿病各组IR、IS逐级恶化：在FPG≥9．7mmol／L组，胰岛素敏感性为正常组的30％，IS仅为正常组的5％；（2）在FPG〈9mmol／L组，IR能解释70％的血糖水平变化，而在FPG高于≥9mmol／L组，IS能解释60％的血糖变化；（3）格列齐特缓释片干预治疗IR及IS有了显著的改善。结论新诊断2型糖尿病的IR及IS随空腹血糖升高而恶化，但是IS恶化更为严重；这种双重恶化在高血糖状态得到纠正后在相当程度上是可逆的。

关键词：糖尿病,2型胰岛素抵抗胰岛素分泌功能干预治疗格列齐特

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阴虚肠燥证便秘大鼠模型的建立及其评价

世界科学技术-中医药现代化 2023年第3期25卷 1140-1146页

作者：谢丽陈冬梅朱星珲成词松成都中医药大学基础医学院成都611137

目的采用“汗下复合法”复制阴虚肠燥证便秘大鼠模型,并从动物宏观表征、微观指征两个方面进行疾病模型和“以方测证”证候模型评价,为阴虚肠燥证便秘大鼠模型研究提供实验依据。方法筛选80只大鼠随机分为空白组、模型组、模型对照组、... 详细信息

目的采用“汗下复合法”复制阴虚肠燥证便秘大鼠模型,并从动物宏观表征、微观指征两个方面进行疾病模型和“以方测证”证候模型评价,为阴虚肠燥证便秘大鼠模型研究提供实验依据。方法筛选80只大鼠随机分为空白组、模型组、模型对照组、气虚方证组、血虚方证组、阴虚方证组、阳虚方证组、热秘方证组,每组10只。模型组和5个方证组大鼠采用汗下复合法(毛果芸香碱注射+大黄酸灌胃),模型对照组采用洛哌丁胺灌胃,连续造模14天。造模结束后,各方证组采用相应经典方剂进行干预治疗,即气虚方证组-黄芪汤、血虚方证组-润肠丸、阴虚方证组-增液汤、阳虚方证组-济川煎、热秘方证组-麻子仁丸,持续治疗4天。观察大鼠一般情况、24 h粪便颗粒数、5 h粪便含水量、结肠内粪便颗粒数、结肠黏液分泌变化,采用EliSA法检测血清VIP含量、比色法检测血清NO含量、免疫组织化学法检测结肠AQP3、AQP8表达。结果(1)疾病模型评价:模型组大鼠的被毛稀疏湿润,耳、鼻、唇、尾光泽暗淡,造模前期粪便稀溏而后期干硬,5 h粪便含水量、24 h粪便颗粒数明显低于空白组和模型对照组(P<0.05),结肠内粪便颗粒数明显高于空白组和模型对照组(P<0.01)。在微观指征方面,模型组大鼠的结肠组织杯状细胞数和阳性细胞表达面积都明显低于空白组和模型对照组(P<0.01),血清神经递质(NO、VIP)含量、结肠水通道蛋白(AQP3、AQP8)表达明显高于空白组(P<0.05);(2)证候模型的“以方测证”评价:阴虚方证组对5 h粪便含水量、24 h粪便颗粒数、肠内粪便颗粒数、结肠组织杯状细胞数和阳性细胞表达面积、血清神经递质(NO、VIP)含量、结肠水通道蛋白(AQP3、AQP8)表达的整体干预效果优于其它方证组。结论持续14天毛果芸香碱注射复合大黄酸灌胃的“汗下复合法”造模方法可以建立便秘阴虚肠燥证大鼠模型。

关键词：动物模型汗下复合法便秘阴虚肠燥证大鼠

不同循环冷冻消融术对西藏小型猪肝部冷冻消融效果的比较

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中华肝胆外科杂志 2012年第11期18卷 867-870页

作者：姚飞曾健滢陈继冰周亮刘卫群吴炳辉方刚邓春娟陈志贤冷尹邓敏张波邓春梅李家亮何丽华牛立志左建生徐克成暨南大学医学院附属广州复大肿瘤医院中心实验室广州510665

目的以西藏小型猪为模型，比较肝部双循环冷冻复温与三循环冷冻一复温消融效果的差异。方法西藏小型猪9头，开腹后行肝冷冻消融术。每头猪分别实施两循环冷冻一复温（10-5-10-5，min）消融和三循环冷冻一复温（5-5-5-5-10-5，min）消融... 详细信息

目的以西藏小型猪为模型，比较肝部双循环冷冻复温与三循环冷冻一复温消融效果的差异。方法西藏小型猪9头，开腹后行肝冷冻消融术。每头猪分别实施两循环冷冻一复温（10-5-10-5，min）消融和三循环冷冻一复温（5-5-5-5-10-5，min）消融，两组总冷冻时间相同。冷冻过程中分别测量冷冻中心点温度、冷冻形成冰球最大直径。术后7d取肝组织解剖、测量冷冻引起的表面损伤区最大长径及内部坏死区最大长径，并观察冷冻区域病理变化情况。结果三循环冷冻组形成的冰球表面最大长径大于两循环组；7d后两冷冻组冷冻后形成表面和深度损伤区大小相近。两循环冷冻组与三循环组冷冻损伤区病理分区相同，但三循环冷冻组引起完全坏死区域更大。结论相同的冷冻时间内，三循环冷冻组对肝脏的冷冻消融效果更好。

关键词：肝脏冷冻消融西藏小型猪

三氯乙酸染毒对肝L-02细胞的增殖作用及对DNA甲基化水平的影响

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毒理学杂志 2008年第5期22卷 333-336页

作者：杨建平袁建辉胡恭华纪卫东张文娟许玉玲徐薇杨淋清张锦州吴丽明胡福勇朱志良吴礼康庄志雄中山大学北校区公共卫生学院广东广州510080 深圳市疾病预防控制中心深圳市宝安区疾病预防控制中心职业病卫生科赣南医学院预防医学教研室

目的检测三氯乙烯（TCE）主要代谢产物三氯乙酸（TCA）对人肝L-02细胞染毒24h后的增殖作用，以及对DNA总体甲基化水平的影响，探索TCE对肝L02细胞的表型遗传毒性。方法选择0．1～0．9mmol／L浓度TCA作为合适的染毒剂量对肝L-02细胞染毒... 详细信息

目的检测三氯乙烯（TCE）主要代谢产物三氯乙酸（TCA）对人肝L-02细胞染毒24h后的增殖作用，以及对DNA总体甲基化水平的影响，探索TCE对肝L02细胞的表型遗传毒性。方法选择0．1～0．9mmol／L浓度TCA作为合适的染毒剂量对肝L-02细胞染毒24h后分别进行下列试验：以CCK-8试剂盒观测细胞的生长曲线；以抗5-mC抗体进行免疫荧光检测细胞核中胞嘧啶甲基化总体水平（TCA0．9mmol／L染毒24h）；以流式细胞仪（FCM）检测其对细胞周期的影响及凋亡情况；提取细胞DNA进行琼脂糖电泳分析其对DNA的损伤作用。以上试验必要时设置5-氮杂胞苷（5-aza—dC5μmol／L）处理的L-02细胞为基因组DNA低甲基化的对照以及肝癌细胞作为细胞周期分析的对照。结果TCE在0．1～0．9mmol／L浓度下染毒24h后可以促进肝L-02细胞生长，并在0．9mmol／L浓度作用下24h可致肝L-02细胞DNA总体甲基化水平降低，荧光强度和正常细胞比较明显减弱；细胞周期分析发现TCA处理24h后再用正常培养基继续培养24h后可使细胞S＋G2期中细胞比例增加（与肝癌细胞接近）；DNA梯状电泳分析未发现DNA损伤性改变。结论TCA染毒24h可促进细胞生长，可诱导基因组DNA低甲基化，并造成细胞周期的改变，提示TCA对肝细胞的早期细胞毒性作用与表型遗传机制有关。

关键词：三氯乙烯三氯乙酸 DNA甲基化表型遗传甲基胞嘧啶

HIF-1α、MMP-1和 VEGF-C 在喉鳞癌组织中的表达及其与颈转移的相关性研究

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中国实用医刊 2014年第24期41卷 6-9页

作者：王银霞任金龙张富生任丽媛高竹娟张丹梅王剑疆程继霞山西省汾阳医院 032200

目的：比较声门上型喉鳞状细胞癌与癌旁正常组织中缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、基质金属蛋白酶-1（MMP-1）和血管内皮生长因子-C（VEGF-C）的表达，探讨其与临床病理参数、颈淋巴转移之间的关系以及三者之间的相关性。方法免疫组化 SP... 详细信息

目的：比较声门上型喉鳞状细胞癌与癌旁正常组织中缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、基质金属蛋白酶-1（MMP-1）和血管内皮生长因子-C（VEGF-C）的表达，探讨其与临床病理参数、颈淋巴转移之间的关系以及三者之间的相关性。方法免疫组化 SP 法检测30例声门上型喉鳞状细胞癌及其癌旁正常组织中 HIF-1α、MMP-1和VEGF-C 的表达情况，并对喉癌组织按年龄、T 分期、病理分级、淋巴转移进行分组，探讨三者与各临床病理参数、颈淋巴转移之间的关系。结果喉鳞状细胞癌组织中 HIF-1α、MMP-1、VEGF-C 高表达明显高于癌旁正常组织，差异有统计学意义（P 〈0.05），在癌组织中，三者表达均与病理分级、TNM 分期有关（ P 〈0.05），与年龄无关（ P ＆gt;0.05），三者在淋巴结转移组中的高表达率明显高于未转移组，HIF-1α和 VEGF-C、HIF-1α和 MMP-1、MMP-1和VEGF-C 均呈正相关。结论喉鳞癌中 HIF-1α、MMP-1、VEGF-C 的高表达与颈淋巴转移密切相关，三者可能成为预测喉鳞癌转移和预后的生物学指标。

关键词：缺氧诱导因子-1α 基质金属蛋白酶-1 血管内皮生长因子-C 喉鳞状细胞癌淋巴转移

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金元四大家论治乳腺癌理论浅探

按摩与康复医学 2023年第1期14卷 57-59页

作者：刘玲曾永蕾杨静田季文李松伟安徽中医药大学安徽合肥230000 安徽中医药大学第二附属医院安徽合肥230061

乳腺癌已成为妇科最高发的恶性肿瘤,金元四大家对乳腺癌的病机认识与诊治思路各树一帜。刘完素以五运六气为基,以火热立论,开创了清热解毒治癌肿的先河;张从正从病由邪生立论,妙用“汗、吐、下”三法,因势利导,驱邪外出;李东垣从阴火学... 详细信息

乳腺癌已成为妇科最高发的恶性肿瘤,金元四大家对乳腺癌的病机认识与诊治思路各树一帜。刘完素以五运六气为基,以火热立论,开创了清热解毒治癌肿的先河;张从正从病由邪生立论,妙用“汗、吐、下”三法,因势利导,驱邪外出;李东垣从阴火学说、脾胃论治,以“甘温除热”法消虚火,祛癌瘤;朱丹溪以气血痰郁为纲,将窼囊理论与乳腺癌防治相结合,气血同调。四位医家论治乳腺癌各富特色,其学术思想进一步完善了乳腺癌的中医诊疗体系,也为其他恶性肿瘤的理论研究和临床治疗提供了学术指导及经验参考。

关键词：金元四大家乳腺癌肿瘤临床经验理论

低剂量CT扫描及肺功能检查对COPD小气道参数的研究

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医学影像学杂志 2021年第4期31卷 574-577,589页

作者：郝润松朱学云徐晓倩霍天宇郝思娴邱思强李娟山东第一医科大学第三附属医院(济南市第四人民医院)医学影像科山东济南250031

目的探讨低剂量CT扫描和肺功能检查在评价COPD患者气道重塑方面的作用和关系。方法选取COPD患者60例为观察组,同时选择与观察组患者年龄匹配的健康体检者30例为对照组。应用低剂量CT扫描并观察患者肺部影像学表现,运用后处理软件测量COP... 详细信息

目的探讨低剂量CT扫描和肺功能检查在评价COPD患者气道重塑方面的作用和关系。方法选取COPD患者60例为观察组,同时选择与观察组患者年龄匹配的健康体检者30例为对照组。应用低剂量CT扫描并观察患者肺部影像学表现,运用后处理软件测量COPD患者气道壁厚度(T)、气道壁面积(WA)及气道外径(D)等参数,评估气道重塑的程度。结果1)实验组支气管管壁厚度与外径比值的2倍(2T/D)和管壁横断面积占支气管总面积的百分比(WA%)显著高于对照组(P<0.01),差异有统计学意义;2)对照组肺功能指标(FEV1/预计值)%、(FEV1/FVC)%显著大于观察组(P<0.01),差异具有统计学意义;3)经直线相关分析,观察组患者FEV1%与(2T/D)成负相关(P<0.01);与WA%成负相关(P<0.01)。结论低剂量CT扫描在评估COPD气道重塑方面具有非常高的准确性,肺功能指标(FEV1/预计值)%、(FEV1/FVC)%与COPD患者气道重塑关系密切。

关键词：慢性阻塞性肺疾病气道重塑肺功能体层摄影术,X线计算机

堆积模型及其应用 Ⅰ.三氯化镧尿素配合物[LaCl_2(urea)_6]·Cl分子结构的推测与测定

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化学学报 1989年第3期47卷 270-275页

作者：朱占洋张大川林政炯李朴钟爱珍王令今张承曾魏毅徐英庭沈天骥郭敖凌李醒夫中国科学院生物物理研究所北京化工学院应用化学系中国科学院高能物理研究所应用部

镧系元素具有形成高配位数的特点,但由简单配位形成的多面体,最高配位数只能达到九,例如,[Ln(H_2O)_9]^(+[2])。有些从化学式来看符合九配位的化合物,如LnCl_3(H_2O)_6实际结构是八配位[LnCl_2(H_2O)_6]^(+[3])或六配位[LnCl_3(H_2O)_3]... 详细信息

镧系元素具有形成高配位数的特点,但由简单配位形成的多面体,最高配位数只能达到九,例如,[Ln(H_2O)_9]^(+[2])。有些从化学式来看符合九配位的化合物,如LnCl_3(H_2O)_6实际结构是八配位[LnCl_2(H_2O)_6]^(+[3])或六配位[LnCl_3(H_2O)_3]·3H_2O~[4])。这种情况促使我们对另一系列化合物LnCl_3(urea)_6~[5]产生兴趣。我们根据堆积模型推测LaCl_3(urea)_6的实际结构应当是[LaCl_2(urea)_6]^+Cl^-(见图1、2)。培养了这一化合物的单晶,进行了结构测定。本文报道有关结果。

关键词：镧配合物尿素分子结构堆积模型