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基于mtDNA Cytb基因序列的新疆两个地方黄牛品种遗传多样性和系统发育研究

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黑龙江畜牧兽医 2024年第12期 35-40,122页

作者：王盼盼巴合提·博代博拉提汗·马哈托夫曾伟欣吾热力哈孜·哈孜汗石河子大学动物科技学院新疆石河子832003 哈萨克斯坦哈萨克农业科学院阿拉木图050057

为了探讨新疆地方黄牛品种的遗传多样性和母系起源,试验以新疆2个地方黄牛品种(哈萨克牛72头和阿勒泰白头牛34头)为研究对象,利用PCR技术扩增其线粒体DNA(mtDNA)细胞色素b(Cytb)基因序列并进行多态位点、单倍型、核苷酸多样度(Pi)、单... 详细信息

为了探讨新疆地方黄牛品种的遗传多样性和母系起源,试验以新疆2个地方黄牛品种(哈萨克牛72头和阿勒泰白头牛34头)为研究对象,利用PCR技术扩增其线粒体DNA(mtDNA)细胞色素b(Cytb)基因序列并进行多态位点、单倍型、核苷酸多样度(Pi)、单倍型多样度(Hd)及平均核苷酸差异(K)和中性检验分析,并与我国部分黄牛品种的mtDNA Cytb基因序列进行综合分析以探讨二者的母系起源。结果表明:哈萨克牛和阿勒泰白头牛Cytb基因序列全长为463 bp, A、T、C三种碱基含量均为32.3%、27.0%、 26.2%,G碱基含量分别为14.5%和14.6%;A+T含量均为59.3%,G+C含量分别为40.7%和40.8%,A+T含量高于G+C含量;共检测到19个多态位点,包含12个转换、4个颠换和3个颠换/转换,其中单一多态位点10个,简约信息位点9个,导致6个氨基酸发生错义突变;19个多态位点共定义了24种单倍型(即Hap-1~24),总单倍型多样度为0.701±0.046,总核苷酸多样度为0.003 45±0.000 46,平均核苷酸差异为1.598;72头哈萨克牛Cytb基因序列的单倍型多样度为0.674±0.059,核苷酸多样度为0.003 28±0.000 53,且中性检验结果不显著(0.050.10);哈萨克牛和阿勒泰白头牛的优势单倍型均为Hap-1、Hap-6、Hap-3,起源于德国普通牛和瘤牛两大混合母系,以德国普通牛血统为主。说明哈萨克牛和阿勒泰白头牛的遗传多样性较匮乏,且有两个共同的母系祖先。

关键词：新疆黄牛哈萨克牛阿勒泰白头牛线粒体DNA(mtDNA) 细胞色素b(Cytb)基因遗传多样性系统发育

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抑制素对促卵泡素作用机制的研究进展

黑龙江畜牧兽医 2023年第1期 37-41,126,127页

作者：马继福巴合提·博代贾昊天吾热力哈孜·哈孜汗石河子大学动物科技学院新疆石河子832003

抑制素(inhibins)是一种主要由卵巢颗粒细胞和睾丸支持细胞分泌的性腺激素,可以选择性抑制垂体促卵泡素(FSH)的合成与分泌。文章综述了众多学者建立的抑制素对FSH的作用机制,以及该作用机制与近年来研究结果的矛盾之处,并依据近年来的... 详细信息

抑制素(inhibins)是一种主要由卵巢颗粒细胞和睾丸支持细胞分泌的性腺激素,可以选择性抑制垂体促卵泡素(FSH)的合成与分泌。文章综述了众多学者建立的抑制素对FSH的作用机制,以及该作用机制与近年来研究结果的矛盾之处,并依据近年来的研究结果修正了抑制素对FSH的作用机制模型,以期为将来研究抑制素提供新的思路。

关键词：抑制素激活素Ⅱ型受体 β-多糖促卵泡素促性腺激素细胞

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用充氧—吸痰双腔管预防吸痰诱发的低氧血症

国际护理学杂志 1988年第3期 109-109页

作者： bodai BI 江学成

常规吸痰并非着一种无任何弊端的措施。许多文章报告了吸痰的严重副作用,如心律失常,甚至心脏骤停。通常认为这些副作用是由吸痰诱发的低氧血症或迷走神经兴奋所致。目前,对吸痰诱发的低氧血症进行了大量的研究,同时也出现了许多吸痰的... 详细信息

常规吸痰并非着一种无任何弊端的措施。许多文章报告了吸痰的严重副作用,如心律失常,甚至心脏骤停。通常认为这些副作用是由吸痰诱发的低氧血症或迷走神经兴奋所致。目前,对吸痰诱发的低氧血症进行了大量的研究,同时也出现了许多吸痰的方法。当前流行的过度氧合,即前氧合(Preoxygenation),以100%氧过度充气或挤压呼吸袋。这类措施对病人有害吗?需要吗?1973年,Demers和Saklad陈述:这些严重并发症的发生已有报告,即使没有明显的后遗症也不能说吸痰措施没有一点缺点。他们还认为这种不适当技术的结果不值得欣赏。1975年,Harkin提议

关键词：吸痰管过度充气低氧血症双腔管充氧

提高动物科学专业本科生创新能力培养的几点思考

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教育教学论坛 2019年第42期 114-115页

作者：吾热力哈孜·哈孜汗巴合提·博代石河子大学动物科技学院

推动大学生创新型人才培养是高等学校本科教学质量与教学改革工程的重要内容,是大学生创新意识和创新能力培养的关键。文章以培养具有一定实践能力的复合型、创新型人才为主要目标,以加强动物科学专业本科生实践教育与现代畜牧业生产实... 详细信息

推动大学生创新型人才培养是高等学校本科教学质量与教学改革工程的重要内容,是大学生创新意识和创新能力培养的关键。文章以培养具有一定实践能力的复合型、创新型人才为主要目标,以加强动物科学专业本科生实践教育与现代畜牧业生产实践紧密结合为出发点,针对动物科学专业实践教学环节存在的突出问题,结合自己从事实践教学过程中所积累的经验,分析总结了当前影响农类院校实践教学质量的主要因素,在如何充分发挥实践教学在学生综合能力培养方面的特殊作用提出了几点看法。

关键词：动物科学实践教学创新能力

哈萨克羊INHβA基因克隆及生物信息学分析

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中国畜牧兽医 2019年第5期46卷 1290-1298页

作者：解津刚巴合提.博代热衣扎别克.哈德坎吾热力哈孜.哈孜汗石河子大学动物科技学院石河子832000 哈萨克国立农业大学动物生物资源系阿拉木图050010

试验旨在克隆哈萨克羊抑制素βA(inhibin beta A,INHβA)基因序列,并探究其序列特征及编码蛋白的结构和功能。根据GenBank中绵羊INHβA基因序列(登录号:NM_001009458.1)设计1对特异性引物,通过RT-PCR方法对哈萨克羊INHβA基因进行扩增,... 详细信息

试验旨在克隆哈萨克羊抑制素βA(inhibin beta A,INHβA)基因序列,并探究其序列特征及编码蛋白的结构和功能。根据GenBank中绵羊INHβA基因序列(登录号:NM_001009458.1)设计1对特异性引物,通过RT-PCR方法对哈萨克羊INHβA基因进行扩增,将获得的INHβA基因片段插入到pMD19-T载体中进行克隆测序,并结合生物信息学方法预测和分析其核苷酸序列、氨基酸序列、蛋白跨膜、蛋白修饰位点及二级结构、三级结构模型等。结果显示,哈萨克羊INHβA基因长1 278 bp,编码425个氨基酸。哈萨克羊INHβA基因与绵羊、牛、野猪、小鼠、人、大鼠、猫、兔、马的同源性分别为98.6%、97.7%、90.4%、87.9%、91.1%、88.2%、91.8%、89.8%和91.8%,表明INHβA基因在不同物种之间具有较高的保守性。INHβA蛋白分子式为C_(2072)H_(3325)N_(603)O_(628)S_(26),分子质量为47.57 ku,理论等电点(pI)为7.87,不稳定系数为66.16,脂溶指数为78.47,亲水值为-0.507。INHβA是一种碱性不稳定的亲水性脂溶性蛋白,没有跨膜结构,含有信号肽。二级结构预测显示,INHβA蛋白α-螺旋、β-转角、无规则卷曲、延伸链分别占22.59%、4.47%、54.12%和18.82%。三级结构预测显示,INHβA蛋白以α-螺旋为主,是含有8种蛋白修饰位点的β-桶状蛋白。本试验结果为深入研究哈萨克羊INHβA蛋白功能及探讨INHβA基因对提高哈萨克羊繁殖力的影响提供参考数据。

关键词：哈萨克羊 INHβA基因克隆序列分析

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用Xecl准分子激光治疗特应性皮炎

世界核心医学期刊文摘（皮肤病学分册） 2006年第10期2卷 6-6页

作者： Baltás E. Csoma Z. bodai l. 任建文 Department of Dermatology and Allergology University of SzegedPOBox 427H-6701 SzegedHungary

Background:Narrow-band ultraviolet B phototherapy is an effictive and safe treatment for atopic *** have previously found that the 308 nm xenon chloride excimer laser was more effective than the narrow-band ultraviolet B light for the treatment of psoriasis,suggesting that ultraviolet B laser might offer advantages over narrow-band ultraviolet ***:The purpose of this study was to evaluate the therapeutic efficacy of the 308 nm excimer laser in atopic *** and methods:Fifteen patients with atopic dermatitis(less than 20%body area involvement)were treated with a xenon chloride excimer laser(XTRAC laser,Photomedex Inc.)twice *** severity of the atopic dermatitis was assessed via(i)a clinical score characterizing the intensity of erythema,infiltration,lichenification and excoriation;(ii)the quality of life,determined by means of a questionnaire;and(iii)a visual linear analogue scale,with which the patients scored the severity of their ***:After 1 month of laser therapy,the clinical scores were significantly lower than the initial *** decreases were observed for the quality of life and pruritus *** serious or unpleasant side-effects were ***:These results suggest that thexenon chloride excimer laser is an effective and well-tolerated treatment for localized atopic dermatitis.

关键词：特应性皮炎 Xecl 准分子激光激光仪银屑病瘙痒程度中波紫外线表皮剥脱皮损面积临床评分

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抑制素α亚基特异性纳米抗体基因筛选与鉴定

中国畜牧兽医 2023年第4期50卷 1532-1542页

作者：马继福巴合提·博代黑子别克·哈孜别克李振伟吾热力哈孜·哈孜汗石河子大学动物科技学院石河子832000 新疆阿勒泰地区富蕴县喀拉布勒根乡农业发展服务中心富蕴836103

【目的】从新疆双峰驼淋巴细胞基因组中筛选出抑制素α亚基(INHα)特异性纳米抗体(VHH)基因,制备新型抑制素免疫制剂,以期间接提高动物血液促卵泡素(FSH)水平、排卵率和产羔率。【方法】利用pET32a-INHA原核表达载体诱导表达INHα蛋白... 详细信息

【目的】从新疆双峰驼淋巴细胞基因组中筛选出抑制素α亚基(INHα)特异性纳米抗体(VHH)基因,制备新型抑制素免疫制剂,以期间接提高动物血液促卵泡素(FSH)水平、排卵率和产羔率。【方法】利用pET32a-INHA原核表达载体诱导表达INHα蛋白并纯化,纯化后的INHα蛋白经尿素溶液复性后免疫新疆双峰驼。通过对免疫前和免疫后全血中淋巴细胞VHH基因进行巢式PCR扩增、高通量测序并建立VHH氨基酸差异数据库;分别对免疫前和免疫后血清及从免疫后血清中筛选出的INHα特异性抗体进行液相色谱质谱/质谱联用(lC-MS/MS)分析获得质谱数据;对质谱数据进行蛋白数据库检索和数据分析后建立INHα特异性抗体和免疫后特异性抗体的肽段库和蛋白库;通过将VHH氨基酸差异数据库分别与INHα特异性抗体和免疫后特异性抗体的肽段库进行序列比对,筛选出INHα特异性纳米抗体基因;对筛选出的VHH基因进行序列比对、三维结构预测和蛋白-蛋白模拟对接。【结果】试验成功诱导表达并纯化了INHα蛋白,INHα蛋白免疫新疆双峰驼获得的抗体效价达1∶1024000;成功从淋巴细胞中克隆出VHH基因,从免疫后血清中筛选出INHα特异性抗体;通过高通量测序、质谱分析及数据处理筛选出5个INHα特异性VHH基因,其氨基酸序列比对结果显示,整体相似性为70.98%,其中互补决定区1(CDR1)长10~13个氨基酸,CDR2长12~13个氨基酸,CDR3长12~22个氨基酸,CDR3在3个互补决定区中氨基酸序列差异最大;系统进化树显示,选择的5条氨基酸序列具有丰富的多样性;蛋白-蛋白模拟对接结果表明,除VHH-267外其余4株纳米抗体均可与INHα配对连接,且主要作用力为疏水相互作用和氢键。【结论】本研究首次通过高通量测序技术联合质谱分析从新疆双峰驼淋巴细胞基因组中筛选出5个INHα特异性VHH基因。本研究结果可为提高动物机体FSH水平及排卵率提供理论指导和技术支持,对繁殖免疫学的发展具有一定参考价值。

关键词：抑制素α亚基(INHα) 双峰驼纳米抗体高通量测序质谱分析

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基于噬菌体展示技术筛选抑制素α亚基特异性纳米抗体

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中国畜牧兽医 2023年第5期50卷 2032-2043页

作者：马继福阿德力·克坦解津刚巴合提·博代李振伟吾热力哈孜·哈孜汗石河子大学动物科技学院石河子832000 新疆塔城地区动物疾病控制与诊断中心塔城834700

【目的】通过噬菌体展示技术构建抗抑制素α亚基(INHα)纳米抗体文库,并筛选出针对绵羊INHα的特异性纳米抗体,以期制备出新型抑制素免疫制剂,为提高绵羊外周血促卵泡素(FSH)水平和排卵率做前期准备。【方法】利用pET32a-INHA原核表达... 详细信息

【目的】通过噬菌体展示技术构建抗抑制素α亚基(INHα)纳米抗体文库,并筛选出针对绵羊INHα的特异性纳米抗体,以期制备出新型抑制素免疫制剂,为提高绵羊外周血促卵泡素(FSH)水平和排卵率做前期准备。【方法】利用pET32a-INHA原核表达载体诱导表达INHα蛋白,并对诱导表达的INHα蛋白进行SDS-PAGE和Western blotting鉴定;用Ni琼脂糖凝胶纯化后的INHα蛋白免疫新疆双峰驼。通过巢式PCR扩增制备骆驼噬菌体展示纳米抗体文库,通过三轮免疫亲和淘选及噬菌体ElISA从该文库中富集和筛选INHα特异性纳米抗体,并通过测序得知纳米抗体的基因序列;用蛋白-蛋白模拟对接初步鉴定该纳米抗体与INHα蛋白的亲和性。【结果】通过原核诱导表达及Ni琼脂糖凝胶纯化得到了大小为36 ku的INHα重组蛋白,通过Western blotting检测到约36 ku的蛋白条带;双峰驼通过6次INHα蛋白免疫抗体效价达到1∶1024000;通过巢式PCR获得了400 bp左右的VHH基因,通过电转化等试验构建了库容量为1.05×10^(12)CFU的纳米抗体文库,文库阳性率为94%;通过三轮免疫亲和淘选获得3.0×10^(8)CFU的抗INHα纳米抗体文库,利用噬菌体ElISA获得了4株(VHH-4、VHH-29、VHH-89、VHH-108)INHα特异性纳米抗体,且4株INHα特异性纳米抗体基因序列相似度为80.31%;通过蛋白-蛋白模拟对接鉴定发现4株纳米抗体均与INHα具有较强的亲和性。此外,VHH-4与INHα的总自由能为-576.28 kJ/mol,是4种VHH中的最佳抗体。【结论】成功构建了抗INHα纳米抗体库,并从该库中获取了VHH-4、VHH-29、VHH-89和VHH-1084株INHα特异性纳米抗体。本研究结果可为纳米抗体在生殖免疫学中的应用提供参考。

关键词：抑制素α亚基(INHα) 纳米抗体噬菌体展示技术