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黄芪-丹参药对活性成分网络药理学研究

中医学报 2017年第11期32卷 2171-2175,2180页

作者：李伟霞刘现磊唐进法孟祥乐李学林河南中医药大学第一附属医院河南郑州450000

目的:采用网络药理学方法对黄芪-丹参药对的主要活性成分的作用机制进行分析,探讨其多成分、多靶点、多通路的相关关系。方法:首先将黄芪-丹参药对中14个主要活性成分(黄芪甲苷、芒柄花苷、芒柄花素、毛蕊异黄酮、异鼠李素、丹酚酸B、... 详细信息

目的:采用网络药理学方法对黄芪-丹参药对的主要活性成分的作用机制进行分析,探讨其多成分、多靶点、多通路的相关关系。方法:首先将黄芪-丹参药对中14个主要活性成分(黄芪甲苷、芒柄花苷、芒柄花素、毛蕊异黄酮、异鼠李素、丹酚酸B、紫草酸、迷迭香酸、丹参素、原儿茶醛、丹参酮IIA、二氢丹参酮I、丹参酮I、隐丹参酮)依据Pharm Mapper数据库构建多成分-蛋白网络;然后采用MAS和KEGG数据库获得靶蛋白的作用通路;最后,采用Cytoscape软件建立黄芪-丹参药对成分-靶点-通路网络模型。结果:黄芪-丹参药对中的14个效应成分涉及63个靶点蛋白和69条作用通路。预测结果得到文献印证。网络模型中每个靶点蛋白、每条作用通路出现的平均频次分别为8.31次、7.62次,每个效应成分的平均靶点蛋白数、平均作用通路数分别为4.57、4.93。结论:为深入研究黄芪-丹参药对的药效作用及其机制提供参考。

关键词：黄芪丹参药对网络分析靶点预测

基于分子对接和实验验证的五味子乙素在人肝微粒体中的代谢酶表型研究

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中药药理与临床 2023年第3期39卷 47-52页

作者：王晓艳李伟霞张辉冯科冉张明亮吴娅丽陈毓龙李琨王星唐进法河南中医药大学第一附属医院河南省中药临床应用、评价与转化工程研究中心河南省中药临床药学中医药重点实验室郑州1450000 河南中医药大学呼吸疾病中医药防治省部共建协同创新中心郑州450046 河南中医药大学药学院郑州450046 首都医科大学中医药学院北京100069

目的:基于分子对接和肝微粒体体外实验分析参与五味子乙素(Sch B)代谢的CYP450酶,确定其在人肝微粒体中的代谢表型。方法:首先利用分子对接方法从人体内9种重要的CYP450酶筛选出与Sch B亲和力强的药物代谢酶,其次采用体外人肝微粒体温... 详细信息

目的:基于分子对接和肝微粒体体外实验分析参与五味子乙素(Sch B)代谢的CYP450酶,确定其在人肝微粒体中的代谢表型。方法:首先利用分子对接方法从人体内9种重要的CYP450酶筛选出与Sch B亲和力强的药物代谢酶,其次采用体外人肝微粒体温孵体系,结合CYP450亚酶特异性抑制剂实验验证参与Sch B代谢的CYP450亚型。结果:分子对接研究结果发现CYP2A6、CYP2C8、CYP2C19、CYP2E1等代谢酶具有较高的得分,表明这些酶可能与Sch B具有较强的结合。体外抑制实验结果显示甲氧沙林(CYP2A6特异性抑制剂)、盐酸噻氯吡啶(CYP2C19特异性抑制剂)和4-甲基吡唑(CYP2E1特异性抑制剂)在一定程度上抑制了人肝微粒体对Sch B的代谢,表明CYP2A6、CYP2C19、CYP2E1可能在参与Sch B代谢中发挥重要作用,并对其与Sch B的结合模式进行分析。结论:本研究初步探索了参与Sch B代谢的CYP450酶亚型,为进一步研究Sch B的体内代谢及五味子的临床合理配伍提供参考。

关键词：五味子乙素肝药酶亚型分子对接人肝微粒体

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当归-川芎药对改善脑缺血再灌注急性损伤的代谢组学机制分析

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郑州大学学报（医学版） 2023年第6期58卷 757-763页

作者：翟优李琨陈毓龙泥文娟纪秋如王晓艳张辉孟伟亭唐进法李伟霞河南中医药大学中医学院(仲景学院) 郑州450046 河南中医药大学第一附属医院河南省中药临床应用、评价与转化工程研究中心河南省中药临床药学中医药重点实验室河南省中药安全评价与风险防控工程研究中心郑州450000 天津中医药大学中药制药工程学院天津301617

目的:运用代谢组学方法探究当归-川芎药对抗脑缺血再灌注急性损伤的可能机制。方法:60只雌性SD大鼠随机分成6组,每组10只。DG、CX和GX组按5倍临床剂量给药当归、川芎、当归-川芎药对;NM组按照20 mg/(kg·d)灌胃尼莫地平片混悬液;假手术... 详细信息

目的:运用代谢组学方法探究当归-川芎药对抗脑缺血再灌注急性损伤的可能机制。方法:60只雌性SD大鼠随机分成6组,每组10只。DG、CX和GX组按5倍临床剂量给药当归、川芎、当归-川芎药对;NM组按照20 mg/(kg·d)灌胃尼莫地平片混悬液;假手术组和模型组大鼠灌胃等体积生理盐水;连续灌胃7 d。除假手术组,其他5组于第7天采用线栓法制备大脑中动脉栓塞/再灌注(MCAO/R)损伤大鼠模型。再灌注24 h后,采集血清和脑组织标本,采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-QTOF/MS)技术进行非靶向代谢组学检测,利用非监督主成分分析(PCA)、有监督型偏最小二乘-判别分析(PLS-DA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)筛选差异代谢物,并进行代谢通路注释。结果:假手术组和模型组血清和脑组织代谢轮廓存在明显差异(P<0.05),共筛选出与MCAO/R相关的嘌呤类、磷脂类、脂肪酸类等19个潜在生物标志物,其中血清生物标志物5个,脑组织生物标志物14个。与当归-川芎药对治疗MCAO/R损伤密切相关的生物标志物有11个,主要与抗坏血酸与醛酸代谢、烟酸和烟酰胺代谢、甘油磷脂代谢、戊糖和葡糖醛酸的相互转化、柠檬酸循环等代谢通路有关。结论:当归-川芎药对可逆转脑缺血再灌注急性损伤大鼠的代谢紊乱,筛选出的内源性差异代谢物或可成为该药对治疗脑缺血再灌注急性损伤的潜在靶点。

关键词：当归-川芎药对脑缺血再灌注损伤代谢组学 UPLC-QTOF/MS 大鼠

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正交试验优选归藤通管灌肠剂水提取工艺

中国现代中药 2015年第2期17卷 164-166页

作者：王红丽唐进法卫爱武翟海容程伟康冰亚河南中医学院第一附属医院河南郑州450000 河南中医学院河南郑州450046

目的:优选归藤通管灌肠剂水提取工艺。方法:以绿原酸为指标,采用HPLC测定其含量,选取加水倍数、煎煮时间、煎煮次数为考察因素,采用正交试验法优选归藤通管灌肠剂水煎煮工艺。结果:最佳提取工艺为加6倍量水,煎煮2次,每次1.5 h。结论:优... 详细信息

目的:优选归藤通管灌肠剂水提取工艺。方法:以绿原酸为指标,采用HPLC测定其含量,选取加水倍数、煎煮时间、煎煮次数为考察因素,采用正交试验法优选归藤通管灌肠剂水煎煮工艺。结果:最佳提取工艺为加6倍量水,煎煮2次,每次1.5 h。结论:优选的水提取工艺稳定、合理,可为归藤通管灌肠剂的制剂生产提供参考。

关键词：归藤通管灌肠剂绿原酸正交试验高效液相色谱法

基于系统药理学分析黄连-吴茱萸药对治疗胃肠道疾病

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中医学报 2020年第5期35卷 1065-1072页

作者：张书琦李伟霞张辉王晓艳宋少华唐进法河南中医药大学河南郑州450046 河南中医药大学第一附属医院河南郑州450000

目的:运用系统药理学方法,整合中医药大数据,探讨黄连-吴茱萸药对治疗胃肠道疾病的作用机制。方法:在中药系统药理学分析平台(platform for systematic pharmacology analysis of traditional Chinese medicine,TCMSP)分别检索“黄连”... 详细信息

目的:运用系统药理学方法,整合中医药大数据,探讨黄连-吴茱萸药对治疗胃肠道疾病的作用机制。方法:在中药系统药理学分析平台(platform for systematic pharmacology analysis of traditional Chinese medicine,TCMSP)分别检索“黄连”“吴茱萸”获得其化学成分,以口服生物利用度(bioavailability,OB)、类药性(drug-likeness,DL)、Caco-2渗透率为指标筛选其活性成分,并通过文献检索补充不满足上述条件的黄连-吴茱萸药对活性成分或质量标志物;采用TCMSP、PharmMapper、GAD、TTD等数据库获取成分和胃肠道疾病相关靶标;运用生物学信息注释数据库(biological information annotation database,DAVID)对靶标进行通路注释和功能富集分析。构建成分、靶标、疾病、通路相互作用网络并进行可视化分析。结果:通过数据库和文本挖掘共筛选得到黄连-吴茱萸药对中与胃肠道疾病相关成分38个,涉及PTGS1、PTGS2、NOS2A、SLC64A、F2、MMP3等42个作用靶标,通过调控炎症性肠病、癌症通路、细胞因子-细胞因子受体相互作用、肿瘤坏死因子信号通路等20条信号通路发挥治疗胃肠道疾病的作用机制。结论:黄连-吴茱萸药对治疗胃肠道疾病具有多通路、多靶点的特点,为该药对及其相关中药制剂的研究提供思路和参考。

关键词：黄连吴茱萸药对成分-靶标-疾病网络胃肠道疾病系统药理学信号通路左金丸

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GBM倾向评分加权法用于因果推断的研究

世界科学技术-中医药现代化 2017年第9期19卷 1462-1472页

作者：杨伟唐进法易丹辉李学林李伟霞周晓华中国中医科学院中医临床基础医学研究所北京100700 中央民族大学理学院北京100081 河南中医药大学第一附属医院郑州450000 中国人民大学应用统计科学研究中心北京100872 北京大学北京国际数学研究中心北京100871

目的:在观察性研究或非随机化试验中,由于混杂因素***的存在,研究人员从数据中进行因果推断的能力受到阻碍,本研究利用GBM倾向评分加权法对一组观察性医学数据进行了分析,以期指导相关医学人员进行他们自己的因果推断研究。方法:目前,... 详细信息

目的:在观察性研究或非随机化试验中,由于混杂因素***的存在,研究人员从数据中进行因果推断的能力受到阻碍,本研究利用GBM倾向评分加权法对一组观察性医学数据进行了分析,以期指导相关医学人员进行他们自己的因果推断研究。方法:目前,四类主要的倾向评分法:匹配、分层、逆概率加权和混杂变量调整,已经被普遍用于因果推断的研究。倾向评分法理论上是可以消除可观测到的混杂因素的偏倚,使处理变量接近随机分配设计的效果,从而达到估计处理因素对结局因果效应的目的。结果:考虑到逆概率加权法相对于其它方法的优势,本文概括了它用于因果效应估计的适用条件,特别说明了运用一个现代多元非参数统计技术——广义Boosted模型(GBM)倾向评分加权法的关键环节及优劣。结论:当存在大量不同类型的混杂因素且它们与处理因素之间的线性、非线性或交互效应等函数形式无法确定以及其它问题的时候,GBM倾向评分加权法能克服在精确地估计倾向评分过程中所受到的阻碍,并给出相对更加接近于随机化的因果效应。

关键词： GBM 倾向评分加权因果推断观察性研究非随机化试验

超高效液相色谱法测定丹红注射液中丹参素和原儿茶醛的含量

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中医学报 2015年第4期30卷 554-556页

作者：张晓东曹站霞李学林鲁静宋云香唐进法河南中医学院第一附属医院河南郑州450000

目的：建立同时测定丹红注射液中丹参素和原儿茶醛含量的超高效液相色谱法。方法：采用BEHShieLdPRl8色谱柱（2．1mm×100．0mm，1．7μm），以甲醇一（体积分数）0．5％冰醋酸水溶液（11：89）为流动相，流速0．2mL·min-1，检测波长27... 详细信息

目的：建立同时测定丹红注射液中丹参素和原儿茶醛含量的超高效液相色谱法。方法：采用BEHShieLdPRl8色谱柱（2．1mm×100．0mm，1．7μm），以甲醇一（体积分数）0．5％冰醋酸水溶液（11：89）为流动相，流速0．2mL·min-1，检测波长279nm，柱温30℃。结果：丹参素和原儿茶醛的峰面积与含量呈良好的线性关系（r=0．9999），两种成分的回收率分别为100．03％和99．22％，RSD值分别为0．08％和0．59％，三批丹红注射液中丹参素的含量为1．4599—1．4759g·L-1，原儿茶醛的含量为0．2290～0．2360g·L-1。结论：所建立的丹红注射液q-丹参素和原儿茶醛含量的超高效液相色谱法简便、准确、快速，为该制剂的质量控制提供了有效手段。

关键词：丹红注射液丹参素原儿茶醛含量测定超高效液相色谱法

基于网络药理学的甘草黄酮类成分药效作用研究

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中医学报 2020年第1期35卷 155-163页

作者：王晓艳李伟霞张辉张明亮张书琦王炎唐进法河南中医药大学第一附属医院河南郑州450000 河南中医药大学河南郑州450046

目的:以甘草黄酮类成分预测其作用靶点和药效作用,构建甘草黄酮多成分-多靶点网络。方法:依托中药系统药理学分析平台(traditional Chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform,TCMSP)检索甘草的化学成分,... 详细信息

目的:以甘草黄酮类成分预测其作用靶点和药效作用,构建甘草黄酮多成分-多靶点网络。方法:依托中药系统药理学分析平台(traditional Chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform,TCMSP)检索甘草的化学成分,把口服生物利用度(oral bioavailability,OB)≥50%和类药性(drug likeness,DL)≥0.18作为筛选条件,并根据分子结构筛选黄酮类成分;通过TCMSP和Swiss Target Prediction数据库获取黄酮类活性成分的相关靶点。通过UniProt数据库提取作用靶点的基因名称,并利用生物学信息注释数据库(database for annotation,visualization and integrated discovery,DAVID)对靶点进行相关通路富集。最后用Cytoscape 3.2.0软件构建"成分-靶点"和"靶点-通路"网络图。结果:筛选得到28个黄酮类活性成分,可作用于97个潜在靶点和61条相关通路,涉及抗肿瘤、抗炎、内分泌调节和氨基酸代谢等多个环节,预测结果得到文献印证。结论:通过网络药理学验证了甘草黄酮多成分、多靶点、多通路的作用特点,为系统研究甘草活性成分药效作用及机制提供了参考。

关键词：甘草黄酮类网络药理学药效成分-靶点靶点-通路

基于代谢组学的补骨脂致特异质肝损伤机制研究

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中国药物警戒 2021年第11期18卷 1014-1019页

作者：王晓艳李伟霞张辉张明亮吴娅丽曹站霞泥文娟陈毓龙李琨冯科冉唐进法河南中医药大学第一附属医院中药临床评价技术河南省工程实验室河南郑州450000 河南中医药大学药学院河南郑州450008

目的从代谢组学层面探索补骨脂肝损伤机制,筛选相关生物标志物及代谢通路。方法采用尾静脉注射脂多糖(LPS)法建立特异质肝损伤模型,实验动物随机分为对照组(CMC组)、补骨脂组(BGZ组)、LPS组、BGZ+LPS组,检测血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草... 详细信息

目的从代谢组学层面探索补骨脂肝损伤机制,筛选相关生物标志物及代谢通路。方法采用尾静脉注射脂多糖(LPS)法建立特异质肝损伤模型,实验动物随机分为对照组(CMC组)、补骨脂组(BGZ组)、LPS组、BGZ+LPS组,检测血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性。通过UPLC-QTOF/MS分析不同组别大鼠血清样品的代谢轮廓谱,借助Progenesis QI(v2.4)、SIMCA v13.0等软件及MetaboAnalyst v5.0在线数据库,分析各组血清代谢标志物及其代谢通路。结果补骨脂单独给药对ALT和AST无明显影响,而联合LPS后ALT和AST显著升高,发生明显肝损伤。OPLS-DA结果显示,CMC、BGZ、LPS和BGZ+LPS组血清代谢物谱得到明显分离,筛选14个与补骨脂特异质肝损伤相关的潜在生物标志物,涉及17条代谢通路。结论补骨脂肝损伤为特异质肝损伤,其机制可能与调节鞘脂代谢、酪氨酸代谢等代谢途径相关。

关键词：补骨脂特异质肝损伤代谢组学生物标志物代谢通路