检索结果-南通市图书馆

水痘带状疱疹病毒gE-Foldon融合蛋白的表达及免疫效果的分析

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病毒学报 2024年第2期40卷 314-325页

作者：李海鑫曹蕾郭晋源孙馨胡宏俏时雨晴张丽武婕慧谢智博张瑶张燕李海李栋山东第一医科大学山东省医学科学院公共卫生与健康管理学院济南250117 国家卫生健康委医学病毒和病毒病重点实验室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206

水痘带状疱疹病毒(Varicella-zoster virus,VZV)是引起全球老年人带状疱疹(Herpes zoster,HZ)的主要病原体,VZV gE蛋白是诱导机体产生免疫应答的主要结构蛋白,基于gE蛋白设计的重组蛋白疫苗Shingrix已经在我国批准上市。多种研究表明聚... 详细信息

水痘带状疱疹病毒(Varicella-zoster virus,VZV)是引起全球老年人带状疱疹(Herpes zoster,HZ)的主要病原体,VZV gE蛋白是诱导机体产生免疫应答的主要结构蛋白,基于gE蛋白设计的重组蛋白疫苗Shingrix已经在我国批准上市。多种研究表明聚体蛋白可以诱导更强的免疫应答,本研究应用中国仓鼠卵巢细胞cho-S表达连接Foldon结构域的蛋白(gE-Foldon)、连接Fc片段的蛋白(gE-Fc)和gE蛋白。三种抗原(gE-Foldon、gE-Fc和gE)分别联合AlOH+CpG佐剂,比较在BALB/c小鼠中的免疫效果,同时,将商品化的Shingrix作为对照。SDS-PAGE和WB结果显示成功表达纯化三种抗原,非还原条件下可以观察到gE-Foldon以三聚体形式存在。与gE和gE-Fc抗原相比,gE-Foldon在小鼠中诱导产生的IgG抗体(40492)和中和抗体滴度(1190.5)最高(P<0.01),与Shingrix相当。此外gE-Foldon诱导小鼠产生的分泌IL-2、IL-4的淋巴细胞数量显著高于其他免疫组(P<0.0001,P<0.05)。综上所述,gE-Foldon蛋白联合AlOH+CpG佐剂可诱导较强的体液和细胞免疫应答,因此可以作为预防HZ的潜在候选疫苗。

关键词：水痘带状疱疹病毒 gE-Foldon蛋白免疫效果

无血清悬浮驯化cho-K1单克隆细胞株的建立及其表达验证

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中国生物制品学杂志 2024年第8期37卷 945-951页

作者：谢涛孙青彭秀娥张朝张宽王翠刘伯宁李文宾姚兵石药集团巨石生物制药有限公司河北石家庄050000 石药集团新型药物制剂与辅料国家重点实验室河北石家庄050000

目的通过无血清悬浮驯化cho-K1细胞,筛选出单克隆源性可追溯、生长状态良好的宿主细胞株,并进行表达验证。方法采用逐步降低血清含量的方法,将贴壁状态的cho-K1细胞驯化成适应无血清培养基培养的悬浮细胞;通过单细胞接种/成像系统Verifi... 详细信息

目的通过无血清悬浮驯化cho-K1细胞,筛选出单克隆源性可追溯、生长状态良好的宿主细胞株,并进行表达验证。方法采用逐步降低血清含量的方法,将贴壁状态的cho-K1细胞驯化成适应无血清培养基培养的悬浮细胞;通过单细胞接种/成像系统Verified In-Situ Plate Seeding(简称VIPS系统)筛选单克隆,经连续培养综合评估单克隆细胞的倍增时间、结团率、细胞直径等参数,确定候选克隆;将候选克隆分别转染携带绿色及红色荧光蛋白的质粒,根据荧光蛋白表达情况确定1株克隆作为工程细胞株的宿主细胞。结果驯化获得的cho-K1细胞适应无血清悬浮培养,倍增时间为20~24 h;通过单克隆筛选和产量评估确定的单克隆细胞株单克隆源性良好且可追溯,以0.5×10~6个/mL的细胞密度接种,培养7 d最高细胞密度可达8.27×10~6个/mL,活率不低于80%,平均倍增时间20.31 h,能较好地表达外源基因。结论通过无血清驯化培养,成功获得单克隆源性可追溯、生长状态良好且能够用于蛋白高表达的cho-K1细胞株。

关键词： cho-K1细胞无血清培养细胞驯化单克隆筛选外源蛋白表达

稳定表达细胞色素P4502B6的Flp-In^(TM)cho细胞系的建立及鉴定

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贵州医科大学学报 2024年第10期49卷 1435-1439,1446页

作者：李靖陆定艳陈帅帅孙佳郑林李勇军刘亭贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室&省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 万山区人民医院药剂科贵州铜仁554200 贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵州贵阳550004

目的构建稳定表达细胞色素P4502B6(CYP2B6)的Flp-In^(TM)cho细胞系。方法将Flp-In^(TM)cho细胞分为Flp-In^(TM)cho组、Flp-In^(TM)cho空载体组及Flp-In^(TM)cho-CYP2B6组,通过Lipofectamine2000转染试剂,分别将pcDNA5/FRT空质粒和pcDNA5/FRT-CYP2B6重组质粒转染至Flp-In^(TM)cho空载体组细胞和Flp-In^(TM)cho-CYP2B6组细胞中,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白免疫印迹(Western blot)及荧光素酶实验检测转染细胞中CYP2B6 mRNA水平、蛋白表达水平及活性,用四氮唑盐(MTS)测定转染CYP2B6的Flp-In^(TM)cho细胞对环磷酰胺的毒性敏感性。结果与Flp-In^(TM)cho组和Flp-In^(TM)cho空载体组相比,Flp-In^(TM)cho-CYP2B6组细胞中CYP2B6的mRNA和蛋白表达水平显著升高(Pcho细胞系,为研究药物代谢和筛选毒性药物提供工具。

关键词：细胞色素P4502B6 稳定表达酶活性环磷酰胺 Flp-In^(TM)cho细胞系

非诺贝特治疗难治型原发性胆汁性胆管炎的有效性和安全性

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中华临床免疫和变态反应杂志 2019年第5期13卷 361-365页

作者：李春蕾杨云娇曹逸涵孙晓川王立张奉春中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院风湿免疫病学教育部重点实验室风湿免疫病学教育部重点实验室北京100730 清华大学医学院北京100084

目的评价非诺贝特用于治疗难治型原发性胆汁性胆管炎/肝硬化(primary biliary cholangitis/cirrhosis,PBC)患者的有效性和安全性。方法入组19例熊去氧胆酸(UDCA)应答不良的患者,在维持原有熊去氧胆酸治疗基础上予非诺贝特200 mg/d,在开... 详细信息

目的评价非诺贝特用于治疗难治型原发性胆汁性胆管炎/肝硬化(primary biliary cholangitis/cirrhosis,PBC)患者的有效性和安全性。方法入组19例熊去氧胆酸(UDCA)应答不良的患者,在维持原有熊去氧胆酸治疗基础上予非诺贝特200 mg/d,在开始非诺贝特前、使用非诺贝特3、6、12个月等不同时间点监测患者血生化等指标变化,评价其安全性和有效性。结果使用非诺贝特治疗的难治型PBC患者,1例血清胆红素上升,其他无严重不良反应;使用非诺贝特治疗后患者的ALP、GGT及AST较用药前下降,其中ALP由(210. 2±113. 2) U/L降为(110. 1±75. 8) U/L,GGT由(258. 5±201. 2) U/L降为(128. 2±103. 4) U/L,AST由(58. 3±30. 6) U/L降为(39. 2±16. 0) U/L,差异有统计学意义(P<0. 05)。结论对熊去氧胆酸应答不良的难治型PBC患者,加用非诺贝特有助于血ALP、GGT和AST水平的下降,且相对安全,不良反应较少。

关键词：肝硬化胆管炎胆汁性非诺贝特

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急性冠脉综合征患者血尿酸升高相关因素分析

山东医药 2011年第11期51卷 37-38页

作者：刘军翔张华王麒汤庆林孙睿轩张桂芬周学兵张明华周欣庞博天津医科大学研究生院天津300070 天津武警医学院附属医院

目的探讨急性冠脉综合征(ACS)患者血尿酸升高的相关危险因素。方法将228例ACS患者按照血尿酸水平分为A组(血尿酸376.5μmol/L)组,观察各组性别、年龄、高血压史、糖尿病史、吸烟史、左心室的射血分数(LVEF)、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)... 详细信息

目的探讨急性冠脉综合征(ACS)患者血尿酸升高的相关危险因素。方法将228例ACS患者按照血尿酸水平分为A组(血尿酸376.5μmol/L)组,观察各组性别、年龄、高血压史、糖尿病史、吸烟史、左心室的射血分数(LVEF)、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)、总胆固醇(cho)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、空腹血糖(BFS),采用Logistic回归分析血尿酸升高的主要因素。结果四组间性别、吸烟史、BUN、Cr、TG和LVEF存在统计学差异,P<0.05;Logistic回归分析显示,BUN、Cr、TG、吸烟史是ACS患者血尿酸升高的危险因素。结论 BUN、Cr、TG水平升高和吸烟可能为ACS患者发生高尿酸血症的重要原因。

关键词：急性冠脉综合征尿酸危险因素

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高丹草饲喂辽宁绒山羊的营养价值评定

现代畜牧兽医 2024年第11期 29-33页

作者：冀红芹孙亚波王春燕郑旭于明张贺春贾富勃辽宁农业职业技术学院畜牧兽医学院辽宁营口115009 辽宁省现代农业生产基地建设工程中心辽宁沈阳110000 朝阳市朝牧种畜场有限公司辽宁朝阳122000

试验旨在评定成熟期海德高丹草在辽宁绒山羊中的饲用价值。试验测定高丹草营养成分和CNCPS组分,采用尼龙袋法测定了高丹草主要营养物质在辽宁绒山羊瘤胃内的降解特性,并进行了粗饲料分级指数(GI)计算。结果显示:高丹草中总能(GE)为15.92... 详细信息

试验旨在评定成熟期海德高丹草在辽宁绒山羊中的饲用价值。试验测定高丹草营养成分和CNCPS组分,采用尼龙袋法测定了高丹草主要营养物质在辽宁绒山羊瘤胃内的降解特性,并进行了粗饲料分级指数(GI)计算。结果显示:高丹草中总能(GE)为15.92 MJ/kg,粗蛋白(CP)、粗脂肪(EE)、粗纤维(CF)、中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)、粗灰分(Ash)的含量分别为14.94%、2.00%、42.85%、73.58%、38.40%、8.95%。高丹草碳水化合物(cho)、快速降解碳水化合物(CA)、中速降解碳水化合物(CB1)、慢速降解碳水化合物(CB2)、不可降解碳水化合物(CC)含量分别为74.29%、1.87%、8.42%、61.77%、27.93%,非蛋白氮(PA)、快速降解真蛋白(PB1)、中速降解真蛋白(PB2)、慢速降解真蛋白(PB3)、不可被降解蛋白(PC)含量分别为29.59%、6.23%、17.76%、23.77%、22.65%。高丹草在辽宁绒山羊瘤胃中DM、CP、CF、NDF、ADF的有效降解率分别为42.78%、50.20%、42.41%、40.74%、39.40%。高丹草的GI为2.37,属于第3级。研究表明,高丹草可被辽宁绒山羊采食利用,属于中等品质粗饲料。

关键词：高丹草辽宁绒山羊 CNCPS 瘤胃降解率饲用价值

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磁共振波谱在颈部淋巴结病变中的应用价值

现代医用影像学 2016年第2期25卷 195-197页

作者：阮锦荣彭永军梁永圣李立新孙莉梁健峰陈婵清广东省阳江市中医医院影像科 529500

目的:探讨氢质子磁共振波谱(1H-MRS)在颈部淋巴结病变中的应用价值。材料与方法:收集经手术病理证实的33例颈部淋巴结患者的1H-MRS资料,其中包括恶性淋巴结病变26例,良性淋巴结病变7例。常规检查后,用背景抑制技术显示目标淋巴结并编号... 详细信息

目的:探讨氢质子磁共振波谱(1H-MRS)在颈部淋巴结病变中的应用价值。材料与方法:收集经手术病理证实的33例颈部淋巴结患者的1H-MRS资料,其中包括恶性淋巴结病变26例,良性淋巴结病变7例。常规检查后,用背景抑制技术显示目标淋巴结并编号,对其行磁共振波谱检测,采用后处理软件包进行波谱图处理分析,观察在3.2 ppm处有无胆碱(cho)峰,并记录病变的cho峰信噪比(SNR)值。将已编号淋巴结手术切除后,常规包埋、无间隔连续切片。将波谱分析与病理结果的良、恶性进行对照分析。结果:26个颈部恶性淋巴结中20个有cho峰,6个无cho峰,其平均SNR值为5.1154±5.7442;7个颈部良性淋巴结3个有cho峰,4个无cho峰,其平均SNR值为0.9157±1.0842。经统计学处理,良性与恶性淋巴结之间有无cho峰无显著统计学意义(P=0.0817>0.05);良性与恶性淋巴结之间cho峰的SNR值有显著统计学意义(t=3.5034,Pcho峰的SNR值较良性者高,对鉴别颈部良恶性淋巴结有一定价值,而不能以有无cho峰判断颈部良、恶性淋巴结。

关键词：磁共振波谱颈部淋巴结肿瘤炎症

新药长毒试验动物血液生化测定规范化研究系列之二——样品制备方法对血液生化值的影响

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中国比较医学杂志 2006年第2期16卷 69-72页

作者：齐云蔡润兰宋杨刘彬孙虹高南南赵德明中国医学科学院中国协和医科大学药用植物研究所北京100094 中国农业大学实验动物研究所

目的探讨血液不同制备方法对其血液生化值的影响。方法采用全自动生化仪对不同制备方法血液中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、总胆红素(TBil)、碱性磷酸酶(ALP)、尿素(Urea)、肌酐(Cre)、葡萄糖(Glu... 详细信息

目的探讨血液不同制备方法对其血液生化值的影响。方法采用全自动生化仪对不同制备方法血液中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、总胆红素(TBil)、碱性磷酸酶(ALP)、尿素(Urea)、肌酐(Cre)、葡萄糖(Glu)、总胆固醇(cho)等生化值进行测定。结果相同动物血清血浆、不同离心温度及禁食后不同时间点采血均影响血液生化值。结论建议在长毒试验动物血液生化测定中,对测定样品的制备方法应进行规范与统一。

关键词：血液样品制备生物化学血液学 Beagle 犬科大鼠

BPI_(m23)-Fcγ1重组抗菌蛋白在cho细胞中的表达及其对耐药菌的作用

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首都医科大学学报 2006年第2期27卷 150-154页

作者：靖学芳吕喆李晨刘振龙孙明洁高燕安云庆首都医科大学免疫学系

目的在cho细胞中表达功能性BPIm23-Fcγ1重组抗菌蛋白，检测该种抗菌蛋白对临床常见耐药性革兰阴性菌（G^-菌）（大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌）的抑杀作用。方法用pSNAV-signal-syn BPIm600-Fcγ1700转染cho-K1细胞，通过Dot blot筛... 详细信息

目的在cho细胞中表达功能性BPIm23-Fcγ1重组抗菌蛋白，检测该种抗菌蛋白对临床常见耐药性革兰阴性菌（G^-菌）（大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌）的抑杀作用。方法用pSNAV-signal-syn BPIm600-Fcγ1700转染cho-K1细胞，通过Dot blot筛选获得高表达BPIm23-Fcγ1目的蛋白的阳性细胞克隆，经PF-cho培养基扩大培养，获得分泌表达的BPIm23-Fcγ1重组抗菌蛋白。采用离子交换层析、Western blot和ELISA方法纯化、鉴定目的重组蛋白。采用微量细菌定量药敏试验法检测目的抗菌蛋白对耐药性大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌的抑杀作用。结果获得了高表达BPIm23-Fcγ1目的重组蛋白的阳性细胞克隆，目的蛋白表达量约为25-50mg／L。目的蛋白经Western blot和ELISA方法检测证实确为BPIm23-Fcγ1重组蛋白。该重组抗菌蛋白对耐药和非耐药性大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌具有同等抑杀作用。结论获得了功能性BPIm23-Fcγ1重组抗菌蛋白，该重组蛋白（O．4mg／L）能有效抑杀耐药性大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌。

关键词： BPIm23-Fcγ1重组抗菌蛋白 cho-K1细胞耐药菌