检索结果-南通市图书馆

重组腺病毒介导肝细胞生长因子基因对铅致动脉内皮细胞损伤的保护作用

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公共卫生与预防医学 2011年第2期22卷 8-11页

作者：贾庆华徐娟杨志华杨霄鹏哈小琴昌业伟中国人民解放军兰州军区兰州总医院医学实验中心甘肃省干细胞与基因药物重点实验室兰州730050

目的观察重组腺病毒介导肝细胞生长因子基因(Ad-HGF)对铅致动脉内皮细胞损伤的保护作用,为Ad-HGF保护血脑屏障提供理论依据。方法实验设正常组、转染组、铅染组、转染加铅染毒组。转染加铅染毒组用Ad-HGF转染动脉内皮细胞48 h后,加入20... 详细信息

目的观察重组腺病毒介导肝细胞生长因子基因(Ad-HGF)对铅致动脉内皮细胞损伤的保护作用,为Ad-HGF保护血脑屏障提供理论依据。方法实验设正常组、转染组、铅染组、转染加铅染毒组。转染加铅染毒组用Ad-HGF转染动脉内皮细胞48 h后,加入20μmol/L的醋酸铅,24 h、48 h后分别用G iem sa染色法观察细胞形态学变化;细胞免疫化学法检测P53的表达;流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果染色显示出铅单独染毒组细胞成凋亡形态学改变。转染加铅染毒组动脉内皮细胞的免疫化学结果显示P53阳性表达较对照组下降。MTT结果表明铅处理不同时间点(6 h、12 h、18 h、24 h、48 h)后,转染加铅染毒组细胞增殖率与铅单独染毒组比较没有显著升高(P>0.05),转染组的增殖率略高于对照组(P<0.05)。醋酸铅组细胞凋亡率较对照组明显升高,转染组较未转染组比较细胞凋亡率明显下降。结论 Ad-HGF具有抗细胞凋亡作用,为解释Ad-HGF对铅致血脑屏障的损伤保护效应提供有力的理论和实验依据。

关键词： Ad-HGF 铅动脉内皮细胞凋亡血-脑屏障

Myostatin基因打靶载体的构建及猪胎儿成纤维细胞Myostatin基因的敲除

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生物技术通讯 2010年第5期21卷 699-704页

作者：李鸿辉冯冲王宁闫军哈福陈红星樊宝良潘登科云南农业大学动物科学技术学院云南昆明650201 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业部畜禽遗传资源与利用重点开放实验室北京100193 军事医学科学院生物工程研究所北京100071 河北农业大学动物科学技术学院河北保定071001

目的:用缺口修复等技术构建Myostatin(肌肉生长抑制素,MSTN)基因打靶载体,并对大白猪胎儿成纤维体细胞进行转染,获得基因敲除细胞。方法与结果:首先构建用于MSTN基因同源长臂(LA)的抓捕载体,然后在大肠杆菌内利用Red同源重组系统介导的... 详细信息

目的:用缺口修复等技术构建Myostatin(肌肉生长抑制素,MSTN)基因打靶载体,并对大白猪胎儿成纤维体细胞进行转染,获得基因敲除细胞。方法与结果:首先构建用于MSTN基因同源长臂(LA)的抓捕载体,然后在大肠杆菌内利用Red同源重组系统介导的缺口修复,从含大白猪MSTN基因座的细菌人工染色体上亚克隆9.9 kb的LA到抓捕载体上,经过部分序列测定,同源性为100%;通过PCR获得1.4 kb的同源短臂(sa);将LA和sa连入载体pLOXP,构建含有neo和tk正负筛选标记基因的MSTN基因打靶载体pLOXP-MSTN-KO;将线性化的pLOXP-MSTN-KO通过电转染整合到大白猪胎儿成纤维细胞基因组中,利用G418和丙氧鸟苷进行药物筛选,获得抗性细胞克隆890个,通过PCR和DNA测序鉴定获得基因敲除的细胞克隆4个。结论:构建了有效的MSTN基因打靶载体,通过转染获得基因敲除细胞,为利用体细胞核移植制备MSTN基因敲除猪奠定了基础。

关键词： Myostatin基因缺口修复基因打靶正负筛选大白猪

北京市某区1例人感染H7N9禽流感病毒的ha和NA基因特征分析

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实用预防医学 2020年第6期27卷 667-671页

作者：吴杨牛桓彩庄鹏李东迅刘重程李飒舒高林潘阳北京市昌平区疾病预防控制中心北京102200 北京市疾病预防控制中心北京100013

目的了解北京市某区1例人感染H7N9禽流感病毒基因特征,为禽流感病例的早期发现、疫情控制提供参考。方法提取病例临床样本病毒核酸,反转录扩增后进行病毒血凝素基因(hemagglutinin, ha)、神经氨酸酶基因(neuraminidase, NA)序列测定。... 详细信息

目的了解北京市某区1例人感染H7N9禽流感病毒基因特征,为禽流感病例的早期发现、疫情控制提供参考。方法提取病例临床样本病毒核酸,反转录扩增后进行病毒血凝素基因(hemagglutinin, ha)、神经氨酸酶基因(neuraminidase, NA)序列测定。获得的病毒序列与全球流感共享数据库中H7N9禽流感病毒株进行序列分析,比较该病毒与北京市既往发现株和其他省市毒株同源性,构建系统发育树,并对部分耐药位点和糖基化位点进行分析。结果北京市某区1例H7N9禽流感病毒为低致病性禽流感。ha、NA与北京既往发现的29株毒株氨基酸同源性为97.2%~100%和96.8%~100%,基于系统进化分析与之最为相近的疫苗株为A/Hunan/02650/2016。ha蛋白受体结合位点发生了G186V、Q226L突变,ha和NA的糖基化位点均未发生变化。结论该区出现的H7N9病毒与北京地区既往发现H7N9毒株具有高度同源性,部分氨基酸位点存在变异,但未发生耐药突变。

关键词： H7N9 禽流感序列分析

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平山湖温性荒漠草地草畜平衡现状及发展措施

草原与草坪 2009年第6期29卷 69-72页

作者：高占琪温洪王国生张洁陆飒李昀王东辉魏玉兵甘肃省草原技术推广总站甘肃兰州730010 甘肃省张掖市甘州区草原站甘肃张掖743000

2008年通过对张掖市平山湖蒙古族乡草地、农牧业生产经营情况的入户调查,全乡有天然草地8.67万hm^2,可利用草地6.38万hm^2。草地理论载畜量为2.03万羊单位,实际存栏6.843万羊单位,超载4.813万羊单位,达237%。由于草地严重超载过牧,造成... 详细信息

2008年通过对张掖市平山湖蒙古族乡草地、农牧业生产经营情况的入户调查,全乡有天然草地8.67万hm^2,可利用草地6.38万hm^2。草地理论载畜量为2.03万羊单位,实际存栏6.843万羊单位,超载4.813万羊单位,达237%。由于草地严重超载过牧,造成温性荒漠草地退化加剧,裸露草地数量增加,水土流失严重,草原生态环境日益恶化,使当地农牧民生产、生活受到严重的影响。必须通过调整优化畜群结构,使饲养牲畜公母比例由1∶1.4提高到1∶2.5-3.0,改变传统的全放牧饲养方式,加快畜群周转,达到草畜平衡,实现草地畜牧业可持续发展。

关键词：温性荒漠草地草畜平衡分析