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1型糖尿病小鼠肠道菌群与免疫状态演变的实验研究

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中华糖尿病杂志 2024年第3期16卷 328-335页

作者：黄宝江林小雅张军郭松李燕虹马华梅陈红珊陈秋莉广州中山大学附属第一医院儿科广州510080

目的探究链脲佐菌素(STZ)诱导的1型糖尿病(T1DM)小鼠在不同时期的肠道功能、血清相关抗体、脾脏细胞因子谱表达与肠道菌群的演变。方法取3~4周龄雄性C57BL/6小鼠28只,采用随机抽样法分为对照组(NC组,13只)和STZ组(15只)。STZ组连续5 d... 详细信息

目的探究链脲佐菌素(STZ)诱导的1型糖尿病(T1DM)小鼠在不同时期的肠道功能、血清相关抗体、脾脏细胞因子谱表达与肠道菌群的演变。方法取3~4周龄雄性C57BL/6小鼠28只,采用随机抽样法分为对照组(NC组,13只)和STZ组(15只)。STZ组连续5 d空腹腹腔注射STZ 50 mg·kg-1·d-1,NC组注射等体积溶剂。实验第3周测定随机血糖>16.7 mmol/L为建模成功,定义为基线水平,两组各取6只小鼠处死,剩余小鼠观察4周,即实验第7周(实验终点)处死剩余小鼠。每周测量体重、随机血糖和每日饮水量。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测脾脏细胞因子谱[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-6、IL-17、IL-4、IL-10、转化生长因子-β(TGF-β)]、血清相关抗体[胰岛细胞抗体(ICA)、胰岛素自身抗体(IAA)与谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)]和结肠紧密连接蛋白1(ZO-1)的表达;采用流式细胞术检测脾脏CD4+FoxP3+调节性T细胞(Treg)水平;对粪便进行16SrRNA菌群测序分析。组间比较采用独立样本t检验。采用Spearman相关分析法分析CD4+FoxP3+Treg细胞、肠道菌群、各免疫生化指标之间的相关性。结果流式细胞术与ELISA结果显示,在基线水平,与NC组相比,STZ组小鼠脾脏CD4+FoxP3+Treg、TGF-β、TNF-α、IFN-γ、IL-6、IL-17与血清ICA、IAA表达水平增加,脾脏IL-4、IL-10表达水平下降(均Pman相关性分析结果表明,乳杆菌属丰度与IL-10水平呈正相关(r=0.65,P<0.05),与TNF-α、IFN-γ、IL-6、IL-17和GADA水平呈负相关(r值-0.61~-0.58,均P<0.05);颤螺菌属丰度与TGF-β、TNF-α、IL-6和IAA水平呈正相关(r值0.55~0.72,均P<0.05),与IL-10水平呈负相关(r=-0.59,P<0.05)。结论多次低剂量STZ诱导的T1DM小鼠可能存在CD4+Foxp3+Treg及TGF-β介导的负性免疫调节和以增加结肠ZO-1表达的肠道调节,其中颤螺菌属与乳杆菌属丰度改变可能参与免疫调节。

关键词：糖尿病 1型链脲佐菌素肠道菌群免疫反应自身免疫抗体

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雌性大鼠性早熟对糖脂代谢的影响

中山大学学报（医学科学版） 2024年第2期45卷 233-242页

作者：林小雅黄宝江张军郭松马华梅李燕虹杜敏联陈秋莉中山大学附属第一医院儿科广东广州510080

【目的】探究雌性大鼠性早熟对糖代谢和脂代谢的影响。【方法】将60只两天龄的雌性大鼠随机分为性早熟组和正常组两组,分别在5天龄时给予达那唑(300μg/只)或溶剂大豆油进行皮下注射,从21天龄起每天观察大鼠的阴道开口状况。建模成功的... 详细信息

【目的】探究雌性大鼠性早熟对糖代谢和脂代谢的影响。【方法】将60只两天龄的雌性大鼠随机分为性早熟组和正常组两组,分别在5天龄时给予达那唑(300μg/只)或溶剂大豆油进行皮下注射,从21天龄起每天观察大鼠的阴道开口状况。建模成功的两组按照阴道开口顺序分别于阴道开口后3 d、7周龄和12周龄进行处死,处死前空腹12 h。【方法】测量麻醉后的体重和鼻肛长,通过酶联免疫吸附试验测量葡萄糖、胰岛素、血脂、雌二醇、瘦素和脂联素的浓度,病理切片观察肾周脂肪、子宫和卵巢的变化。【结果】通过正常组和早熟组两组3个时间点对比,早熟组在阴道开口3 d时体质量和鼻肛长小于正常组,但是不影响后续生长发育,7周龄和12周龄时两组体质量和鼻肛长差异无统计学意义。两组的胰岛素浓度对比在阴道开口后3天内有统计学意义(P=0.001),早熟组存在高胰岛素血症,且早熟组此时的肾周脂肪细胞增多,在7和12周龄差异无统计学意义,两组3个时间点的雌二醇、瘦素和脂联素浓度差异均无统计学意义,两组卵巢和子宫与体质量的比重差异无统计学意义。【结论】通过两组大鼠的对比,性早熟使机体提前跨越发育的时间窗,不能适应内环境的骤变,产生的一系列变化只是暂时性且可逆性,至成年期会恢复。

关键词：性早熟糖代谢脂代谢胰岛素抵抗雌性大鼠

Clinical evaluation of recombinant human growth hormone injection in children with growth hormone deficiency

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Frontiers of Medicine 2009年第2期3卷 171-176页

作者： Ling HOU Xiaoping LUO Minlian DU huamei ma Chunxiu GONG Yuchuan LI Shuixian SHEN Zhuhui ZHAO Li LIANG Guanping DONG Chaoying YAN Hongwei DU Department of Pediatrics Tongji HospitalTongji Medical CollegeHuazhong University of Science and TechnologyWuhan 430030China Department of Pediatrics the First Affiliated Hospital of Zhongshan UniversityGuangzhou 510080China Department of Endocrinology Beijing Children's Hospital Affiliated to Capital Medical UniversityBeijing 100045China Department of Pediatric Endocrinology and Metabolism Children's Hospital of Fudan UniversityShanghai 201102China The Affiliated Children's Hospital of Zhejiang University School of Medicine Hangzhou 310003China Department of Pediatrics The First Hospital of Jilin UniversityChangchun 130021China

Recombinant human growth hormone(rhGH)has been widely used in the clinical treatment of growth hormone deﬁ*** simplify the injection process and increase drug compliance,application of the GH injection has become a new treatment plan in recent *** purpose of the current study was to evaluate the efﬁcacy and safety of rhGH injection for the treatment of growth hormone deﬁciency(GHD)in children in *** a nationwide,noncomparative,prospective,randomized,open trial,31 children with conﬁrmed complete GHD received subcutaneous injection of rhGH at 0.25 mg/kg$wk(0.107 IU/kg$d).The injection was given daily and the total weekly amount was separated into 6–7 *** patients were followed up at 3-month intervals and the treatment duration was 12 *** height(HT),annual growth velocity(GV),mean height standard deviation score(HT SDS),blood serum insulin-like growth factor I(IGF-I),insulin-like growth factor binding protein 3(IGFBP-3),and bone maturity before and after treatment were compared,and the safety of the treatment was *** mean HT,GV,and HT SDS were increased from 109.0�14 cm,2.7�0.9 cm/yr,and–4.62�1.46 at baseline to 121.8�13.4 cm,12.9�3.3 cm/yr,and–2.47�1.86 after 12 months of treatment,respectively(Pmaturation was *** serious adverse events occurred during the treatment,and the drug-related adverse events were mainly decreased thyroid *** conclude that rhGH injection is a safe and effective drug for treatment of growth hormone deﬁciency in children.

关键词： srecombinant human growth hormone injection growth hormone deficiency

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儿童肾上腺皮质功能减退症诊治进展

中华实用儿科临床杂志 2015年第8期30卷 574-579页

作者：马华梅中山大学附属第一医院儿科广州510080

儿童肾上腺皮质功能减退（AI）是指源于下丘脑-垂体-肾上腺轴功能损害的一组综合征,可为原发肾上腺衰竭（原发性）,或继发于下丘脑-垂体轴病变的肾上腺疾病（中枢性）.临床表现为糖皮质激素（GC）分泌不足或作用缺陷,伴或不伴盐皮质激... 详细信息

儿童肾上腺皮质功能减退（AI）是指源于下丘脑-垂体-肾上腺轴功能损害的一组综合征,可为原发肾上腺衰竭（原发性）,或继发于下丘脑-垂体轴病变的肾上腺疾病（中枢性）.临床表现为糖皮质激素（GC）分泌不足或作用缺陷,伴或不伴盐皮质激素分泌异常、伴或不伴雄激素分泌异常.因临床特点非特异而常不被知悉,急性肾上腺危象则可威胁生命,需要立即得到诊治.长期GC替代、家庭教育是儿童AI管理的2个重要组成部分,同时必须严密监测以防治疗不足或过度.氢化可的松新型制剂——双释放剂型已经研制成功,其对于改善患儿的治疗依从性、维持皮质醇的分泌节律、改善患儿的预后可能具有广阔的前景.

关键词：肾上腺皮质功能减退肾上腺危象糖皮质激素盐皮质激素

46，XX青春期原发性卵巢功能不全诊治进展

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中华实用儿科临床杂志 2017年第8期32卷 570-573页

作者：马华梅中山大学附属第一医院儿科广州510080

46，XX青春期原发性卵巢功能不全（primary ovarian insufficiency，POI）是指40岁以前卵巢活性丧失、染色体核型46，XX的一组综合征，属少见病（发病率低于1%，其中约2.5%为青春期患者）。主要临床特点是月经紊乱（闭经、月经稀发），... 详细信息

46，XX青春期原发性卵巢功能不全（primary ovarian insufficiency，POI）是指40岁以前卵巢活性丧失、染色体核型46，XX的一组综合征，属少见病（发病率低于1%，其中约2.5%为青春期患者）。主要临床特点是月经紊乱（闭经、月经稀发），生化特点为高促性腺激素性腺功能减退、低雌激素水平。46，XX POI病因复杂，包括遗传、自身免疫性、医源性等多种因素，大多数病因不明，一旦诊断明确，必须尽可能寻找原因。目前认为，自发性POI病因复杂，多有遗传学基础。随着分子生物学技术的发展，POI的病因诊断率有了显著提高。管理方面包括疾病教育、激素发育治疗、相关疾病治疗和预防等，需要多学科合作。

关键词：原发性卵巢功能不全脆性X综合征自身免疫性卵巢炎

先天性肾上腺皮质增生症21羟化酶缺乏儿童代谢综合征研究进展

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中华实用儿科临床杂志 2016年第8期31卷 631-634页

作者：林娟马华梅中山大学附属第一医院儿科广州510080

先天性肾上腺皮质增生症（CAH）21羟化酶缺乏（21-OHD）是相对常见的遗传性内分泌疾病，其治疗方法是糖／盐皮质激素替代、维持正常生长发育，过度治疗或治疗不足则是治疗中常见的2种现象。研究发现，CAH21-OHD成人患者的代谢紊乱及心... 详细信息

先天性肾上腺皮质增生症（CAH）21羟化酶缺乏（21-OHD）是相对常见的遗传性内分泌疾病，其治疗方法是糖／盐皮质激素替代、维持正常生长发育，过度治疗或治疗不足则是治疗中常见的2种现象。研究发现，CAH21-OHD成人患者的代谢紊乱及心脑外周血管疾病发生率显著增高；对儿童患者代谢紊乱的研究则较少，国内尚未见报道。现综述近年来关于21-OHD患者的代谢紊乱的表现及发病机制的研究进展。

关键词：先天性肾上腺皮质增生症 21羟化酶缺乏代谢综合征心血管疾病

母乳中胰岛素样生长因子1水平对新生儿生长发育的影响

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中华儿科杂志 2002年第9期40卷 518-520页

作者：苏喆杜敏联赖峰马华梅中山医科大学附属第一医院儿科广州510080

目的　动态观察人类母乳中胰岛素样生长因子 1(IGF 1)在初乳及成熟乳中的变化及其与泌乳量的关系 ;探讨母乳中IGF 1水平对新生儿生长发育的影响。方法　监测 38名足月新生儿生后 6周身长、体重、头围的增长及其母亲体重指数。采用双抗... 详细信息

目的　动态观察人类母乳中胰岛素样生长因子 1(IGF 1)在初乳及成熟乳中的变化及其与泌乳量的关系 ;探讨母乳中IGF 1水平对新生儿生长发育的影响。方法　监测 38名足月新生儿生后 6周身长、体重、头围的增长及其母亲体重指数。采用双抗放射免疫法测定初乳 (生后 3～ 5d)和成熟乳 (生后 4 2d)中IGF 1的浓度并测量同日母乳量 ,测量新生儿生后 3～ 5d血清IGF 1浓度 ,并分析两者之间的关系。结果　 (1)初乳中IGF 1浓度 [(6 3± 1 6 ) μg/L]显著高于成熟乳 [(4 7± 2 1) μg/L],差异有显著意义 (t=3 2 32 ,P <0 0 5 )。 (2 )初乳和成熟乳中IGF 1的浓度 [分别为 (6 3± 1 6 ) μg/L ,(4 7± 2 1) μg/L]均与同日母乳分泌量 [分别为 (380± 114 )ml/d ,(783± 199)ml/d]呈正相关 (r分别为 0 6 17,0 793) ;乳量绝对不足的母亲初乳中IGF 1浓度 [(4 1± 1 5 ) μg/L]明显低于能维持母乳喂养者 [(6 3± 1 6 ) μg/L],差异有显著意义 (t=4 4 5 4 ,P <0 0 0 1)。 (3)与新生儿体重、头围增长相关的因素按相关性大小依次为成熟乳量、初乳中IGF 1的浓度、新生儿生后早期血清IGF 1水平以及母亲哺乳期的体重指数。结论　初乳中足够的IGF 1浓度是启动泌乳并使之得以维持的重要条件 ,乳腺分泌的IGF 1可能通过促进?

关键词：母乳新生儿胰岛素样生长因子1 生长体重

雌激素对增殖期ATDC5细胞生长及C型利钠肽信号通路蛋白表达的影响

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中华儿科杂志 2014年第8期52卷 596-601页

作者：郑丕媚马华梅苏喆张璧涛杜敏联中山大学附属第一医院儿科广州510080 香港大学李嘉诚医学院香港大学李嘉诚医学院儿科及青少年医学系广州510080 海南省人民医院儿科海口570206

目的观察雌二醇（E2）对增殖期ATDC5细胞的生长及c型利钠肽（CNP）信号通路蛋白[包括CNP、利钠肽B受体（NPR-B）及利钠肽c受体（NPR·C）]表达的影响。方法以胰岛素（10μ／m1）诱导分化第6天的ATDC5细胞为研究对象，观察E2对细胞生长... 详细信息

目的观察雌二醇（E2）对增殖期ATDC5细胞的生长及c型利钠肽（CNP）信号通路蛋白[包括CNP、利钠肽B受体（NPR-B）及利钠肽c受体（NPR·C）]表达的影响。方法以胰岛素（10μ／m1）诱导分化第6天的ATDC5细胞为研究对象，观察E2对细胞生长的影响（MTT法）及CNP、NPR-B及NPR-C蛋白表达的影响（Western-blot法）：（1）量效研究：分别加入7个不同浓度（10^-11～10^-5m0L／L）的E2（浓度组）及DMSO溶剂（对照组）共8组，比较作用24h后各组细胞数吸光度（A）值及作用48h后各组细胞的蛋白水平；（2）时效研究：加E：（10^-8moL／L）作用不同时间（0、24、48、72、96、120h）（6组），除0h外，各时间点均设相应溶剂对照组。比较不同时间点细胞数与其对照组的差值；比较0～96h细胞蛋白水平；（3）雌激素受体阻断试验：分别加入E：（10^-8moL／L）（E2组）、雌激素受体阻断剂ICI182782（10^-7moL／L）（ICI组）、E2（10^-8moL／L）和ICI182780（10^-7mol／L）（E2＋ICI组）以及溶剂DMSO（对照组），比较作用24h后4组细胞数。结果（1）量效研究：①作用24h后，与对照组（0．38±0．02）相比，随E：浓度增大，ATDC5细胞数呈增加趋势，至浓度为10。和10^-8moL／L时最为显著（4值分别为0．56±0．06和0．52±0．02，P值分别〈0．05和〈0．01）；②作用48h后，与对照组相比，各浓度组细胞CNP、NPR-B及NPR-C蛋白水平均显著增加（P均〈0．01），CNP和NPR—B蛋白增加以10^-10moL／L组最为显著，NPR-C蛋白增加以10-mol／L组最为显著。（2）时效研究：①E：（10-mol／L）分别作用24-96h后，各时间点细胞数均较对照组增多，48h时最为显著（0．030±0．003），随后逐渐减少（P〈0．05或P〈0．01），至120h时（0．007±0．001）与对照组差异无统计学意义。②CNP水平在24h时显著增加（P〈0．05），48h和72h时有增加趋势，96h时则有降低趋势。NPR-B和NPR．C蛋白水平在24h时均有增加趋势（P分别为0．060和0．055），48h则均有降低的趋势，至72h和96h时均低于对照组（P均〈0．05）。（3）雌激素受体阻断试验：作用24h时，E2组、ICI组、（E2＋ICI）组和对照组4组细胞数的差异有统计学意义（P〈0．05）。E2组（0．470±0．032）和（E2＋ICI）组（0．410±0．018）均多于对照组（0．370±0．011），E2组多于（E2＋ICI）组（P均〈0．05）；ICI组（0．360±0．035）与对照组差异无统计学意义。结论E2能通过雌激素受体介导、以时效和量效作用方式促进增殖期ATDC5细胞生长。E2在一定浓度、不同作用时间时可以不同方式调节（上调或下调）CNP、NPR-B和NPR-C蛋白的表达，提示雌激素是CNP信号通路的调节因子之一。

关键词： ATDC5细胞雌二醇利钠肽 C型软骨发生

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儿童癌症远期生存与代谢综合征

国际儿科学杂志 2014年第5期41卷 496-500页

作者：林娟马华梅中山大学附属第一医院儿科 510080

随着全球医疗技术的快速发展，儿童癌症的临床诊治及研究取得了长足进步。儿童癌症生存率大幅提高，儿童癌症幸存者的生活质量开始受到重视。大量研究报道儿童癌症幸存者远期代谢综合征发病率高，特别是经颅照射腹部照射或者全身照射的... 详细信息

随着全球医疗技术的快速发展，儿童癌症的临床诊治及研究取得了长足进步。儿童癌症生存率大幅提高，儿童癌症幸存者的生活质量开始受到重视。大量研究报道儿童癌症幸存者远期代谢综合征发病率高，特别是经颅照射腹部照射或者全身照射的患儿发生代谢综合征的风险更高。代谢综合征是多种代谢异常同时聚集在同一个体的病理状态，显著增加心血管疾病风险。儿童癌症幸存者远期代谢综合征的发病机制尚未阐明，但已明确与抗癌治疗后激素缺乏、药物或放射治疗损害、内皮功能紊乱等因素密切相关。因此，重视儿童癌症幸存者代谢综合征的早期诊断、早期防治，鼓励癌症幸存者改善饮食习惯和增加运动达到理想的体重，以降低代谢综合征、心血管疾病的发病率具有重要的临床意义。

关键词：代谢综合征儿童癌症远期生存心血管疾病