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Three Novel Avastroviruses Identified in Dead Wild Crows

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Virologica Sinica 2021年第6期36卷 1673-1677页

作者： Chunge Zhang Yongchun Yang Tao Hu Hong Zhou Cheng Zhang Jian Cao Juan Li Peihan Wang Gary Wong Xiaodu Wang houhui song George FGao Weifeng Shi Yuhai Bi Key Laboratory of Applied Technology on Green-Eco-Healthy Animal Husbandry of Zhejiang Province College of Animal Science and Technology and College of Veterinary Medicine of ZhejiangA&F UniversityLin'an 311300China CAS Key Laboratory of Pathogenic Microbiology and Immunology Institute of MicrobiologyCenter for Influenza Research and Early-Warning(CASCIRE)CAS-TWAS Center of Excellence for Emerging Infectious Diseases(CEEID)Chinese Academy of SciencesBeijing 100101China Key Laboratory of Etiology and Epidemiology of Emerging Infectious Diseases in Universities of Shandong School of Public HealthShandong First Medical University and Shandong Academy of Medical SciencesTaian 271016China Institut Pasteur of Shanghai Chinese Academy of SciencesShanghai 200031China Département de microbiologie-infectiologie et d'immunologie UniversitéLavalQuébec City G1V 0A6Canada University of Chinese Academy of Sciences Beijing 100049China

Dear Editor,Astroviruses(AstVs)are non-enveloped,single-stranded RNA viruses with a diameter of approximately 35 nm(Madeley and Cosgrove 1975).The genomes of AstVs range in size from 6.8 to 7.9 kb(De Benedictis et al.2011),consisting of a 5'-untranslated region(UTR),three open reading frames(ORFs),a 3'-UTR,and a poly-adenylated(polyA)tail(Pantin-Jackwood et al.2006).In 1975,AstVs were first discovered in faeces of infants(Madeley and Cosgrove 1975).Until now,a variety of animal species,including cows,sheep,pigs,dogs,deer,rats,bats,chickens,ducks,turkeys,sea lions and seals have been reported to be infected with AstVs(Tzipori et al.1981;Cattoli et al.2007;Chu et al.2008,2010;Atkins et al.2009;Toffan et al.2009;Rivera et al.2010;Guix et al.2013;Kang et al.2012;Reuter et al.2012a,2012b;Li et al.2021).Currently,AstVs comprise two genera,Mamastrovirus(MAstV)and Avastrovirus(AAstV).Herein,we describe three novel AAstVs identified from dead crow *** our knowledge,this is the first report for identification of AstVs in crows.

关键词： viruses frames sheep

番茄红素对壬基酚诱导小鼠脾损伤的保护作用及机制研究

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畜牧兽医学报 2022年第2期53卷 637-645页

作者：杨少青邵春艳周彬宋泉江王晓杜宋厚辉姜胜浙江农林大学动物科技学院、动物医学院杭州311300 浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室杭州311300 动物健康互联网检查技术浙江省工程实验室杭州311300

探讨番茄红素(lycopene,LYC)对壬基酚(nonylphenol,NP)亚慢性中毒诱导小鼠脾损伤的保护作用及机制。将40只清洁级ICR小鼠随机分为对照组(CON)、中毒组(NPG)、番茄红素对照组(LCG)和番茄红素干预组(LNG)。对照组,每天8:30灌服玉米油0.1 m... 详细信息

探讨番茄红素(lycopene,LYC)对壬基酚(nonylphenol,NP)亚慢性中毒诱导小鼠脾损伤的保护作用及机制。将40只清洁级ICR小鼠随机分为对照组(CON)、中毒组(NPG)、番茄红素对照组(LCG)和番茄红素干预组(LNG)。对照组,每天8:30灌服玉米油0.1 mL,2 h后重复操作;中毒组,每天8:30灌服玉米油0.1 mL,2 h后灌服150 mg·kg^(-1)壬基酚溶液;番茄红素对照组,每天8:30灌服5 mg·kg^(-1)番茄红素,2 h后灌服0.1 mL玉米油;番茄红素干预组,每天8:30灌服5 mg·kg^(-1)番茄红素,2 h后灌服150 mg·kg^(-1)壬基酚溶液。各组连续进行相应灌胃处理30 d后,记录小鼠体重,颌下静脉采集血样,并对小鼠进行安乐死,剖解后采集小鼠脾称重,分析小鼠日均增重以及脾体系数的组间差异;检查血清中免疫细胞因子IL-2、IFN-γ和TNF-α的变化;检测脾氧化与抗氧化指标MDA、T-AOC、CAT、GSH-Px和SOD的差异变化;检测凋亡通路p53/Bcl-2各蛋白表达的差异。结果表明,与NPG相比,经过LYC干预后NP暴露小鼠日均增重显著升高(P<0.05),血清免疫细胞因子含量和脾抗氧化酶活性显著升高(P<0.05);LYC干预后小鼠脾凋亡通路关键分子Akt、p-Akt和Bcl-2蛋白表达水平显著升高(P<0.05),p53和Bax蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结果提示,LYC对NP诱导的小鼠脾损伤具有保护作用,这与LYC增强脾抗氧化能力,抑制脾细胞凋亡有关。

关键词：番茄红素壬基酚氧化应激凋亡

PI3K/Akt/p53通路介导番茄红素拮抗壬基酚肾毒性

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中国兽医学报 2022年第5期42卷 973-980页

作者：姜胜杨少青周彬宋泉江邵春艳王晓杜宋厚辉浙江农林大学动物科技学院/动物医学学院浙江杭州311300 浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室浙江杭州311300 动物健康互联网检查技术浙江省工程实验室浙江杭州311300

番茄红素(lycopene,LYC)是一种高效抗氧化剂,可抵抗多种毒物对机体的肾毒性。但LYC拮抗壬基酚(nonylphenol,NP)诱导小鼠肾损伤的作用机制尚未明确。本研究通过建立LYC干预小鼠NP染毒模型,研究LYC对NP致小鼠肾毒性的拮抗作用和Akt/p53通... 详细信息

番茄红素(lycopene,LYC)是一种高效抗氧化剂,可抵抗多种毒物对机体的肾毒性。但LYC拮抗壬基酚(nonylphenol,NP)诱导小鼠肾损伤的作用机制尚未明确。本研究通过建立LYC干预小鼠NP染毒模型,研究LYC对NP致小鼠肾毒性的拮抗作用和Akt/p53通路参与此过程的机制。结果显示,经过LYC干预后NP染毒小鼠日增体质量显著升高(P<0.05);小鼠血清肾功指数和肾脏抗氧化酶活性显著升高(P<0.05)。此外,LYC干预后小鼠肾脏凋亡通路蛋白PI3K、p-Akt和Bcl-2表达水平显著升高(P<0.05),p53和Bax表达水平显著降低(P<0.05)。结果表明,LYC能增强肾脏抗氧化能力,激活Akt/p53通路,抑制肾脏细胞凋亡,拮抗NP诱导的小鼠肾脏损伤。

关键词：番茄红素壬基酚氧化应激凋亡

镉胁迫下α-硫辛酸对大鼠肾细胞MAPK信号通路的影响

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中国兽医学报 2023年第5期43卷 1051-1058页

作者：罗通旺李卓悦王晓杜邵春艳宋厚辉浙江农林大学动物科技学院/动物医学院浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室/动物健康互联网检测技术浙江省工程实验室/动物医学与健康管理浙江省国际科技合作基地/中澳动物健康大数据分析联合实验室浙江杭州311300

为了探究α-硫辛酸(α-LA)在镉(Cd)暴露的情况下对大鼠肾细胞MAPK通路的影响,以SD大鼠、大鼠肾小管上皮细胞系(NRK-52E)和大鼠原代肾小管上皮细胞(rPT)为试验模型,设置对照组、Cd暴露组、Cd+α-LA组以及α-LA组。采用透射电镜观察细胞... 详细信息

为了探究α-硫辛酸(α-LA)在镉(Cd)暴露的情况下对大鼠肾细胞MAPK通路的影响,以SD大鼠、大鼠肾小管上皮细胞系(NRK-52E)和大鼠原代肾小管上皮细胞(rPT)为试验模型,设置对照组、Cd暴露组、Cd+α-LA组以及α-LA组。采用透射电镜观察细胞超微结构的变化,用光学显微镜观察肾脏组织病理学的变化,通过Western blot检测MAPK信号通路相关蛋白的相对表达水平。结果显示,与对照组相比,Cd暴露组多数细胞出现细胞核固缩、变形、染色质边聚甚至溶解,细胞内出现大量空泡;HE染色可见细胞变性、细胞管型、管壁变薄甚至破裂的现象;ERK1/2、JNK1/2和p38的磷酸化水平显著或极显著升高。与Cd暴露组相比,Cd+α-LA组细胞核皱缩轻微,染色质分布相对均匀;肾小球毛细血管充血和肾小管变性明显改善;ERK1/2、JNK1/2和p38的磷酸化水平显著或极显著降低。α-LA组与对照组相比无明显差异。结果表明,Cd暴露可诱导大鼠肾细胞损伤并激活MAPK信号通路,而α-LA通过抑制MAPK信号通路的活化缓解Cd诱导的细胞损伤。

关键词：镉 α-硫辛酸 MAPK 肾小管上皮细胞

基于CdSe阳离子交换的玉米赤霉烯酮新型荧光免疫检测方法的建立及应用

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菌物学报 2022年第5期41卷 819-829页

作者：章先徐浩瑜赵鹿如李可张晓峰程昌勇宋厚辉浙江大学医学院浙江杭州310058 浙江农林大学动物科技学院动物医学院浙江临安311300 浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室浙江临安311300 浙江省检验检疫科学技术研究院浙江杭州310012

作为镰刀属真菌的次级代谢产物,玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)具有强烈的生殖毒性和免疫毒性,严重威胁动物和人类健康。本研究通过采用羧基修饰的CdSe水溶性量子点(quantum dots,QDs)标记ZEN单克隆抗体,并基于CdSe阳离子交换信号增强原... 详细信息

作为镰刀属真菌的次级代谢产物,玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)具有强烈的生殖毒性和免疫毒性,严重威胁动物和人类健康。本研究通过采用羧基修饰的CdSe水溶性量子点(quantum dots,QDs)标记ZEN单克隆抗体,并基于CdSe阳离子交换信号增强原理,建立了ZEN新型荧光免疫检测方法(CdSe QDs-FLISA),检测下限(IC_(10))和半数抑制率(IC_(50))分别为0.006 ng/mL和0.17 ng/mL,检测区间(IC_(20)-IC_(80))为0.01-0.45 ng/mL。与ZEN的结构类似物(α-zearalanol、zearalanone、α-zearalenol、β-zearalenol andβ-zearalanol)交叉反应性依次为22.3%、13.1%、6.2%、1.6%和3.9%,与农产品中其他真菌毒素如黄曲霉毒素B1(AFB1)、赭曲霉毒素A(OTA)、呕吐毒素(DON)和伏马毒素B1(FB1)几乎不存在交叉反应。该方法在玉米样本中加标回收率较高,且实际样本中ZEN的定量检测结果与LC-MS/MS一致性较好。本研究建立的CdSe QDs-FLISA操作简单,可实现对样本中ZEN的快速定量检测与分析,便于基层单位推广使用,具有较好的应用前景,同时也可为其他病原微生物检测技术的开发提供参考。

关键词：真菌毒素单克隆抗体量子点信号增强定量检测

猪圆环病毒2型和3型双重荧光定量PCR检测方法的建立

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浙江农业学报 2022年第3期34卷 457-463页

作者：牟泓晔周小杰杨永春王晓杜周莹珊宋厚辉浙江农林大学动物科技学院·动物医学院浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室动物健康互联网检测技术浙江省工程研究中心浙江杭州311300 浙江农林大学动物科技学院·动物医学院浙江省动物医学与健康管理国际科技合作基地中澳动物健康大数据分析联合实验室浙江杭州311300

为建立一种同时检测猪圆环病毒2型(PCV2)和猪圆环病毒3型(PCV3)的方法,参照GenBank上已登录的PCV2 Cap基因和PCV3 Cap基因的保守序列,设计特异性引物和TaqMan探针,通过优化反应条件,建立了同时检测PCV2和PCV3的双重荧光定量PCR检测方法... 详细信息

为建立一种同时检测猪圆环病毒2型(PCV2)和猪圆环病毒3型(PCV3)的方法,参照GenBank上已登录的PCV2 Cap基因和PCV3 Cap基因的保守序列,设计特异性引物和TaqMan探针,通过优化反应条件,建立了同时检测PCV2和PCV3的双重荧光定量PCR检测方法,并对其进行特异性、灵敏性、可重复性检验。特异性试验结果显示,该方法除了对PCV2和PCV3的检测结果为阳性外,对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)、伪狂犬病病毒(PRV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)检测均呈阴性,无交叉反应,特异性较强。敏感性试验结果显示,该检测方法同时检测猪圆环病毒2型和3型质粒标准品的最低检测极限均可达到10拷贝·μL^(-1),敏感性较高;该方法组内和组间的变异系数均小于2%,重复性较好。采集浙江省181份猪肉及全血样品,分别利用本文建立的检测方法与标准普通荧光PCR检测方法进行检测,结果显示,PCV2的阳性率为50.83%(92/181),PCV3的阳性率为37.57%(68/181),PCV2和PCV3共感染率为12.15%(22/181);而普通荧光PCR的上述检测结果分别为50.28%(91/181)、36.46%(66/181),共感染率为11.60%(21/181),两种方法对PCV2和PCV3的检测符合率分别可达98.91%和97.06%,对PCV2和PCV3混合感染符合率为95.45%。综上所述,本试验建立的双重荧光定量PCR检测方法可同时对PCV2和PCV3进行快速鉴别检测,可用于病原学检测和流行病学调查等。

关键词：猪圆环病毒2型猪圆环病毒3型 TaqMan探针双重荧光定量PCR

右美托咪定抑制Ca^(2+)超载保护大鼠脊髓缺血再灌注损伤

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中国兽医学报 2022年第8期42卷 1660-1668页

作者：姜胜杨少青王雨欣宋泉江周彬邵春艳王晓杜宋厚辉浙江农林大学动物科技学院/动物医学院浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室/动物健康互联网检测技术浙江省工程实验室/动物医学与健康管理浙江省国际科技合作基地/中澳动物健康大数据分析联合实验室浙江杭州311300

为了探讨右美托咪定(dexmedetomidine,Dex)对大鼠脊髓缺血再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)损伤的保护作用及机制,通过改良Zivin法夹闭肠系膜上动脉及右肾动脉之间的腹主动脉50 min建立大鼠脊髓I/R模型。I/R前通过尾静脉进行Dex预处理... 详细信息

为了探讨右美托咪定(dexmedetomidine,Dex)对大鼠脊髓缺血再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)损伤的保护作用及机制,通过改良Zivin法夹闭肠系膜上动脉及右肾动脉之间的腹主动脉50 min建立大鼠脊髓I/R模型。I/R前通过尾静脉进行Dex预处理,通过腹腔注射进行NPS2143和KN93预处理。采用BBB评分和HE染色评估脊髓损伤,微板法检测钙离子浓度,Western blot和荧光定量PCR分别分析CaSR和CaMKⅡ蛋白表达和mRNA转录水平分析。结果显示,与假手术组(Sham)比较,I/R 24 h、Dex 24 h、NPS2143+I/R 24 h及KN93+I/R 24 h组大鼠BBB评分均显著降低(P<0.01),I/R 48 h和KN93+I/R 48 h组BBB评分显著降低(P<0.01);与I/R组比较,Dex组大鼠BBB评分显著升高(P<0.01)。I/R 24 h与I/R 48 h组HE染色结果显示,脊髓神经元胞体固缩,胞核结构不清,染色加深,甚至消失,胶质细胞增生,提示脊髓损伤严重,而Sham组神经元未见明显异常,与I/R组比较,HE结果提示Dex组脊髓组织损伤程度轻微。与Sham组比较,I/R 24 h和I/R 48 h组脊髓钙离子浓度显著升高(P<0.01);与I/R 24 h组比较,Dex 24 h组脊髓钙离子浓度显著降低(P<0.01)。与Sham 24 h组比较,I/R 24 h组大鼠脊髓CaSR和CAMKⅡ的蛋白与mRNA表达水平显著升高(P<0.01);Dex 24 h组大鼠脊髓组织CaSR与CAMKⅡ的mRNA和蛋白的表达水平显著降低(P<0.01)。结果表明Dex可下调CaSR和CAMKII的mRNA与蛋白表达水平,减轻钙超载,从而保护脊髓缺血再灌注损伤。该研究为Dexm减轻脊髓I/R损伤的临床应用提供了理论依据。

关键词：右美托咪定脊髓缺血再灌注 CaSR CAMKⅡ

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动物肠缺氧模型研究进展

畜牧兽医学报 2023年第10期54卷 4083-4094页

作者：戴文卞苏舒张聚民宋厚辉周莹珊刘萍王晓杜浙江农林大学动物科技学院·动物医学院、浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室、动物健康、互联网检测技术浙江省工程研究中心、浙江省动物医学与健康管理国际科技合作基地、中澳动物健康大数据分析联合实验室杭州311300 杭州市临安区畜牧农机发展中心杭州311300

肠缺氧是肠组织氧气需求量高于供应量的病理现象,是多种肠道疾病的直接诱发因素、预警信号和关键特征之一。建立真实可靠的肠缺氧状态动物模型或者能模拟肠缺氧的细胞模型,对肠缺氧相关疾病的病理机制研究至关重要。本文综述了近年来适... 详细信息

肠缺氧是肠组织氧气需求量高于供应量的病理现象,是多种肠道疾病的直接诱发因素、预警信号和关键特征之一。建立真实可靠的肠缺氧状态动物模型或者能模拟肠缺氧的细胞模型,对肠缺氧相关疾病的病理机制研究至关重要。本文综述了近年来适用于构建肠缺氧模型的方法,重点围绕循环性、化学性和环境性肠缺氧动物模型,物理法和化学法诱导的离体肠细胞缺氧模型和离体肠道类器官缺氧模型的构建策略、模型优劣及应用场景进行分析,为动物肠缺氧疾病的发病机制研究及治疗药物的发掘和临床药效学评价提供参考。

关键词：肠缺氧细胞模型动物模型肠道类器官

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单增李斯特菌氧化还原蛋白系统研究进展

微生物学报 2021年第2期61卷 346-356页

作者：韩月叶佳雯程昌勇宋厚辉浙江农林大学动物科技学院动物医学院浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室浙江杭州311300

单增李斯特菌是重要的食源性病原微生物,抗氧化应激是李斯特菌生存和致病的关键机制之一。活性氧(reactive oxygen species,ROS)浓度升高会破坏氧化还原平衡,使机体处于氧化胁迫的应激状态,进而导致生物大分子如蛋白质的损伤。蛋白质中... 详细信息

单增李斯特菌是重要的食源性病原微生物,抗氧化应激是李斯特菌生存和致病的关键机制之一。活性氧(reactive oxygen species,ROS)浓度升高会破坏氧化还原平衡,使机体处于氧化胁迫的应激状态,进而导致生物大分子如蛋白质的损伤。蛋白质中半胱氨酸等含硫氨基酸对ROS尤其敏感,半胱氨酸残基脱氢氧化生成二硫键,可以稳定蛋白质空间构象,增加蛋白质的半衰期,进而使蛋白质免受损坏。抗氧化修复通常指的是对半胱氨酸残基的氧化还原过程,即二硫键的形成与打开。硫氧还蛋白家族包含硫氧还蛋白、谷氧还蛋白和Dsb-样蛋白系统,是生物体中常见的氧化还原修复系统。本文根据现有的文献报道,结合本课题组的研究进展,对单增李斯特菌硫氧还蛋白家族进行综述,以期为完善单增李斯特菌硫氧还蛋白调控系统提供参考。

关键词：单增李斯特菌硫氧还蛋白家族硫氧还蛋白谷氧还蛋白 Dsb-样蛋白