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The Metabolism of Methylene Blue and Its Derivatives in Japanese Eel(Anguilla Japonica)

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Journal of Ocean University of China 2020年第3期19卷 653-658页

作者： WANG Yali huang xuanyun DU Bingtan LV Xinmei SUN Jing ZHENG Ruizhou HU Kun National Pathogen Collection Center for Aquatic Animals Shanghai 201306China National Demonstration Center for Experimental Fisheries Science Education Shanghai Ocean UniversityShanghai 201306China Shanghai Engineering Research Center of Aquaculture Shanghai 201306China East China Sea Fisheries Research Institute Chinese Academy of Fishery SciencesShanghai 200090China

Methylene blue(MB) is commonly used in aquaculture as a fungicide and antidotes. This study was designed to explore the pharmacokinetics of MB in Japanese eel(Anguilla Japonica) immersed in 10 mg L^-1 and 20 mg L^-1 MB for 0.5 h. The concentrations of MB and its derivatives in the blood, liver, kidney, skin and muscle were determined by HPLC after immersion. The results showed that the changes of drug concentrations in Japanese eel were basically the same in different dose groups, showing a general trend of increasing at first and then decreasing, but the peak time was slightly different. The peak concentration of the drug was positively correlated with the dose level. The peak concentrations of MB in MB(20 mg L^-1) group, MB, azure A and azure B in the tissues of Japanese eel were significantly higher than those in MB(10 mg L^-1) group. Moreover, MB, azure A and azure B remained for a long time and could still be detected at 64 days, and azure C was not detected in tissues.

关键词： methylene blue Anguilla japonica thiazine dye aquaculture

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呋喃唑酮代谢物在中华绒螯蟹体内消除规律

海洋渔业 2020年第6期42卷 732-739页

作者：黄宣运沈晓盛史永富蔡友琼中国水产科学研究院东海水产研究所农业农村部水产品质量安全与风险评估实验室(上海)上海200090

采用高效液相色谱串联质谱法(HPLC-ESI/MS/MS)分析呋喃唑酮主要代谢物3-氨基-2-恶唑烷酮(AOZ)在中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis,以下简称河蟹)体内的消除规律。以30 mg·kg^-1(P1组)和90 mg·kg^-1(P2组)的呋喃唑酮药饵投喂河蟹(扣蟹),... 详细信息

采用高效液相色谱串联质谱法(HPLC-ESI/MS/MS)分析呋喃唑酮主要代谢物3-氨基-2-恶唑烷酮(AOZ)在中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis,以下简称河蟹)体内的消除规律。以30 mg·kg^-1(P1组)和90 mg·kg^-1(P2组)的呋喃唑酮药饵投喂河蟹(扣蟹),连续投喂5 d,每天投喂2次。在最后1次投喂后的1 h、2 h、4 h、8 h、12 h、24 h、48 h、96 h、192 h、288 h、384 h、480 h、720 h、960 h、1200 h、1440 h、1920 h、2400 h、2880 h和3600 h对河蟹肌肉、肝胰腺和鳃进行取样分析。结果显示:停药后,2个试验组河蟹各组织中AOZ均呈波动下降趋势。在停药1 h后,2个试验组河蟹的肝胰腺、肌肉和鳃中AOZ均为最高值,其中P1组测定值分别为(347.0±25.2)、(172.0±7.2)、(196.0±17.7)μg·kg^-1,P2组测定值分别为(2475.0±128.3)、(952.0±75.2)、(786.0±40.9)μg·kg^-1。P1组各组织AOZ含量低于判定限(1.0μg·kg^-1)的时间分别为停药1440 h(肝胰腺)、960 h(肌肉)和1440 h(鳃),消除速率分别为0.361(肝胰腺)、0.238(肌肉)、0.136(鳃)μg·(kg·h)-1;而P2组各组织AOZ含量低于判定限(1.0μg·kg^-1)的时间分别为停药1920 h(肝胰腺)、1440 h(肌肉)和1920 h(鳃),消除速率分别为1.72(肝胰腺)、0.767(肌肉)、0.409(鳃)μg·(kg·h)-1。研究结果表明,使用呋喃唑酮后,其代谢物在河蟹体内消除慢,残留时间长。

关键词：中华绒螯蟹呋喃唑酮代谢消除规律

柱后衍生高效液相色谱法测定虾中14种磺胺类药物残留量

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色谱 2014年第8期32卷 874-879页

作者：黄冬梅黄宣运顾润润惠芸华田良良冯兵张璇于慧娟中国水产科学研究院东海水产研究所上海200090

建立了虾中14种磺胺类药物残留量的柱后衍生高效液相色谱检测方法。样品在加入内标物磺胺吡啶后用乙酸乙酯提取，提取液浓缩后用4 mL 乙酸乙酯溶解残余物，用盐酸溶液反萃取，正己烷去脂，盐酸溶液经滤膜过滤后，加入乙腈、甲醇和3.5 mo... 详细信息

建立了虾中14种磺胺类药物残留量的柱后衍生高效液相色谱检测方法。样品在加入内标物磺胺吡啶后用乙酸乙酯提取，提取液浓缩后用4 mL 乙酸乙酯溶解残余物，用盐酸溶液反萃取，正己烷去脂，盐酸溶液经滤膜过滤后，加入乙腈、甲醇和3.5 mol / L 乙酸钠溶液（体积比为5：5：20）的混合溶液混匀后，经高效液相色谱分离，用荧光胺衍生试剂进行柱后衍生，荧光检测器检测。采用基质标样添加法绘制标准曲线，内标法定量。对柱后衍生系统参数进行了优化，确定了荧光胺溶液的浓度、流速和反应温度分别为0.2 g / L、0.15 mL / min 和50℃。14种磺胺类药物在5～200μg / L 范围内具有良好的线性。磺胺类药物的定量限（LOQ，S / N =10）为1.0～5.0μg / kg。在1.0～100.0μg / kg 添加水平内，磺胺类药物的平均回收率为77.8％～103.6％，相对标准偏差（ RSD）为2.9％～9.1％（ n =6）。实验结果表明该方法灵敏、准确，重复性好，适用于虾中磺胺类药物的残留检测。

关键词：高效液相色谱柱后衍生荧光检测磺胺类药物虾荧光胺残留

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亚甲基蓝多克隆抗体的制备与鉴定

海洋渔业 2021年第1期43卷 104-111页

作者：黄宣运杨光昕史永富黄冬梅叶洪丽蔡友琼中国水产科学研究院东海水产研究所上海200090 农业农村部水产品质量安全风险评估实验室(上海) 上海200090 上海海洋大学农业农村部鱼类营养与环境生态研究中心上海201306 上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心上海201306

为建立检测水产品中亚甲基蓝及其代谢物残留的酶联免疫吸附检测方法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA),以亚甲基蓝代谢物天青C(azure C)为亚甲基蓝的半抗原,采用戊二醛法,将azure C上的氨基与蛋白上的羧基进行偶联,制备免疫原a... 详细信息

为建立检测水产品中亚甲基蓝及其代谢物残留的酶联免疫吸附检测方法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA),以亚甲基蓝代谢物天青C(azure C)为亚甲基蓝的半抗原,采用戊二醛法,将azure C上的氨基与蛋白上的羧基进行偶联,制备免疫原azure C-BSA和包被原azure C-OVA。利用紫外扫描(UV)和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对免疫原和包被原进行鉴定。以azure C-BSA为免疫原,按0.2 mg·只^(-1)的剂量免疫BALB/c小鼠,对获得的多克隆抗体的效价、灵敏度和特异性进行测定。实验结果表明:制备的人工抗原azure C-BSA和azure C-OVA偶联成功,偶联比约为31∶1和52∶1。经过ELISA测定,多克隆抗体效价均在16000以上,其中2号小鼠抗体效价最高,半数抑制浓度(IC_(50))为43.9 ng·mL^(-1),该抗体与亚甲基蓝代谢物天青A、天青B和天青C存在交叉反应,交叉反应率分别为127.6%、84.7%和138.1%,与其他常见染料不存在交叉反应,说明该抗体特异性良好。实验成功合成亚甲基蓝人工抗原并获得免疫学特性良好的鼠源多抗血清,为后期单克隆抗体的制备及开发免疫学快速检测方法奠定了基础。

关键词：亚甲基蓝半抗原偶联物多克隆抗体

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水产品中多环芳烃检测技术研究进展

食品工业 2018年第11期39卷 259-262页

作者：杨丹丹史永富黄宣运王媛蔡友琼中国海洋大学食品科学与工程学院青岛266003 中国水产科学研究院东海水产研究所上海200090 农业部水产品质量安全风险评估实验室(上海) 上海200090

日益严重的水环境污染导致水产品质量安全问题备受关注,其中对人类具有致癌性的多环芳烃(PAHs)已成为人们关注的焦点。从来源、分布、危害和检测技术等方面对水产品中PAHs的研究进展进行了阐述。对提取方法和检测技术的优缺点和局限性... 详细信息

日益严重的水环境污染导致水产品质量安全问题备受关注,其中对人类具有致癌性的多环芳烃(PAHs)已成为人们关注的焦点。从来源、分布、危害和检测技术等方面对水产品中PAHs的研究进展进行了阐述。对提取方法和检测技术的优缺点和局限性进行了重点介绍,为进一步加强水产品质量安全控制提供参考。

关键词：水产品多环芳烃检测技术

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青蟹对As和Cd的生物富集动力学特性

生态毒理学报 2020年第6期15卷 290-299页

作者：乔艺飘张龙飞刘欢娄晓祎黄冬梅黄宣运韩峰史永富中国水产科学研究院东海水产研究所农业农村部水产品质量监督检验测试中心(上海)上海200090 上海海洋大学食品学院上海201306 中国水产科学研究院农业农村部水产品质量安全重点实验室北京100141

为探究拟穴青蟹(Scylla paramamosain)对砷(As)和镉(Cd)的富集和释放特性,应用半静态双箱模型模拟了拟穴青蟹对As和Cd的生物富集实验数据,通过非线性拟合得到了拟穴青蟹肌肉、肝胰腺和蟹腮对As和Cd的吸收速率常数(k_(1))、释放速率常数(... 详细信息

为探究拟穴青蟹(Scylla paramamosain)对砷(As)和镉(Cd)的富集和释放特性,应用半静态双箱模型模拟了拟穴青蟹对As和Cd的生物富集实验数据,通过非线性拟合得到了拟穴青蟹肌肉、肝胰腺和蟹腮对As和Cd的吸收速率常数(k_(1))、释放速率常数(k_(2))、生物富集系数(BCF)、生物学半衰期(T_(1/2))以及富集平衡时生物体内As和Cd浓度(c Amax)等动力学参数。结果表明,As和Cd在组织器官中的BCF范围分别为46.61~158.3和9.241~2886,T 1/2范围分别为7.416~14.61 d和6.630~19.19 d。实验模型拟合度较好,输出值和实测值之间无显著性差异(P>0.05),拟合方程和参数可信。研究表明,拟穴青蟹肌肉、肝胰腺和蟹腮中As和Cd的浓度与暴露浓度总体呈现正相关性,表现出肝胰腺>蟹腮>肌肉的分布规律;拟穴青蟹对Cd的富集能力明显高于As。拟穴青蟹在不同暴露浓度下对As和Cd的生物富集过程符合双箱动力学模型。

关键词：砷镉拟穴青蟹富集动力学

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实验室标准物质智能管理系统

中国渔业质量与标准 2013年第2期3卷 102-107页

作者：徐捷史永富黄宣运中国水产科学研究院东海水产研究所农业部水产品质量监督检验测试中心上海200090

利用Microsoft office 2007软件设计开发标准物质智能管理系统,通过Excel强大的排序和公式计算功能,配合Word的邮件合并功能,使其具备了标准物质到期前自动提醒和批量导出标准物质使用记录的两大功能。通过简单的表格制作,就可以解决传... 详细信息

利用Microsoft office 2007软件设计开发标准物质智能管理系统,通过Excel强大的排序和公式计算功能,配合Word的邮件合并功能,使其具备了标准物质到期前自动提醒和批量导出标准物质使用记录的两大功能。通过简单的表格制作,就可以解决传统标准物质管理过程中工作量大、效率低、容易出错等问题,使实验室的管理水平得到了提高。

关键词：标准物质智能管理实验室 Excel Word

草鱼肾细胞中细胞色素P450 3A基因诱导表达及其酶活性分析

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中国水产科学 2011年第4期18卷 720-727页

作者：符贵红杨先乐喻文娟胡鲲章海鑫黄宣运上海海洋大学水产与生命学院农业部渔业动植物病原库中国水产科学研究院东海水产研究所农业部水产品质量监督检验测试中心

采用基因克隆技术获取草鱼(Ctenopharyngodon idellus)细胞色素P450 3A(CYP3A)cDNA序列长1 849 bp,包含完整开放阅读框(open reading frame,ORF)1 542 bp,1个终止密码和含polyA信号3′UTR;ORF编码514个氨基酸,含信号肽(29 aa),2个跨膜螺旋区(23 aa,23 aa),血红素结合域(21 aa)和6个底物识别位点(SRS1-6);与其他脊椎动物CYP3A氨基酸序列相似度达60%～92%。用实时定量PCR和分光光度计法分别研究了草鱼肾细胞系(Ctenopharyngodon idellus kidney cell line CIK)中利福平(rifampicin,RIF)诱导CYP3A基因表达和红霉素-N-脱甲基酶(ERND)活性,采用红霉素脱甲基酶活性法测定CYP3A的活性。结果显示,诱导组CIK细胞中CYP3A mRNA表达量在8 h最高,而CYP3A酶活在10 h最高;CYP3A mRNA和酶活性与对照组均具显著差异性(P<0.05)。CYP3A转录水平先于相应酶活变化表达,且转录水平表达显著高于酶活性,这很可能反映了RIF对CYP3A的诱导主要作用于转录水平而不直接作用于酶活,本研究旨为药物对CYP3A转录调控和活性调节提供科学依据,并为渔药代谢酶的研究提供理论依据。

关键词：细胞色素P4503A 肾细胞草鱼 CYP3A基因和酶活性诱导表达利福平

食品中甲霜灵残留的样品前处理技术及检测方法研究进展

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分析试验室 2023年第9期42卷 1251-1259页

作者：张俊黄宣运张璇顾润润席寅峰李思曼伍姿王梦圆尚晓睿黄冬梅中国水产科学研究院东海水产研究所农业农村部水产品质量安全控制重点实验室(上海)农业农村部水产品质量安全风险评估实验室(上海)上海200090 上海海洋大学食品学院上海201306

甲霜灵作为一种农田中常用的杀菌剂,主要用于防治豌豆、马铃薯、水稻等农作物的霜霉病、黑胚病、薯晚疫病等。不规范使用甲霜灵会造成农药残留,残留的甲霜灵通过食物链富集效应导致食品安全问题。目前,对于甲霜灵检测的样品前处理技术包... 详细信息

甲霜灵作为一种农田中常用的杀菌剂,主要用于防治豌豆、马铃薯、水稻等农作物的霜霉病、黑胚病、薯晚疫病等。不规范使用甲霜灵会造成农药残留,残留的甲霜灵通过食物链富集效应导致食品安全问题。目前,对于甲霜灵检测的样品前处理技术包括QuEChERS法、分散液-液微萃取法、温度控制分散液-液微萃取法、基质固相分散萃取法、磁固相萃取法等。检测方法包括色谱法、色谱-质谱法、基质辅助激光解吸电离-成像质谱法、胶体金免疫层析法以及酶联免疫吸附法。本文综述了近年来食品中甲霜灵残留的样品前处理技术及检测方法,并对其发展方向进行了展望,旨在为食品中甲霜灵残留的检测和监控提供参考。

关键词：甲霜灵样品前处理检测基质辅助激光解吸电离-成像质谱