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动物细胞生物反应器研究进展

动物医学进展 2020年第6期41卷 103-108页

作者：李自良赵彩红王美皓王家敏乔自林李倬西北民族大学生物医学研究中心/甘肃省动物细胞技术创新中心甘肃兰州730030 西北民族大学生物医学研究中心/生物工程与技术国家民委重点实验室甘肃兰州730030 西北民族大学生命科学与工程学院甘肃兰州730030

细胞基质生物制品大规模生产工艺的选择首要考虑因素是该产品工艺所涉及的生物反应器系统。论文针对动物细胞培养的基本特点,就不同动物细胞生物反应器的结构和原理、优点与缺点、结构优化、传感器最新进展等进行了综述,其目的在于为生... 详细信息

细胞基质生物制品大规模生产工艺的选择首要考虑因素是该产品工艺所涉及的生物反应器系统。论文针对动物细胞培养的基本特点,就不同动物细胞生物反应器的结构和原理、优点与缺点、结构优化、传感器最新进展等进行了综述,其目的在于为生物制品研发和生产实际应用中选择更加适合培养工艺的生物反应器,提高动物细胞大规模培养生产生物制品的效率,也为促进新型生物反应器的研究与开发提供一定的参考。

关键词：动物细胞生物反应器生物制品

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脂肪组织炎症对动物健康影响因素分析

黑龙江畜牧兽医 2023年第9期 33-37页

作者：柴金宝王含琼刘利王建发卜也岳萌萌孙芳武瑞黑龙江省农业科学院畜牧研究所哈尔滨150086 黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163319 东北农业大学动物科学技术学院哈尔滨150030

脂肪过度沉积或脂肪细胞肥大可导致脂肪组织炎症,表现为脂肪代谢紊乱和慢性脂肪组织炎症,使动物生产性能降低。当动物机体发生慢性脂肪组织炎症时会产生大量巨噬细胞及miRNA,并释放各种炎症因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β... 详细信息

脂肪过度沉积或脂肪细胞肥大可导致脂肪组织炎症,表现为脂肪代谢紊乱和慢性脂肪组织炎症,使动物生产性能降低。当动物机体发生慢性脂肪组织炎症时会产生大量巨噬细胞及miRNA,并释放各种炎症因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)],对机体肝脏、肌肉及其他器官或组织产生不利影响,使机体负担加重,引起各种疾病,造成不必要的经济损失。文章综述了脂肪组织炎症及其发展过程、动物脂肪代谢和脂肪组织炎症相关性,论述了脂肪组织炎症对动物机体各个器官产生的不利影响,以期为提高动物福利提供新的理论参考。

关键词：脂肪组织炎症炎症因子肌肉脂肪代谢紊乱

不同生态环境不同品种绵羊卵巢微动脉解剖学特征

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中国兽医学报 2019年第10期39卷 2006-2010页

作者：王彪杨雅楠刘成泽毛彩琴王欣荣甘肃农业大学动物科学技术学院

从青海西宁、内蒙古赤峰、浙江桐乡和山东菏泽分别采集高原型藏羊、敖汉细毛羊、湖羊和小尾寒羊卵巢各20枚,利用微血管立体构筑和扫描电镜(SEM)技术相结合的方法,研究不同品种绵羊卵巢微动脉的构筑及超微结构特征。结果显示,绵羊卵巢微... 详细信息

从青海西宁、内蒙古赤峰、浙江桐乡和山东菏泽分别采集高原型藏羊、敖汉细毛羊、湖羊和小尾寒羊卵巢各20枚,利用微血管立体构筑和扫描电镜(SEM)技术相结合的方法,研究不同品种绵羊卵巢微动脉的构筑及超微结构特征。结果显示,绵羊卵巢微动脉呈迂曲盘旋的螺旋状,卵巢门动脉经3~4次分支后发出毛细血管;在卵巢微动脉的Ⅱ~Ⅳ级分支表面均有梭形凹痕,呈典型的"树皮样"或"波浪状";在毛细血管前微动脉处有多个与微动脉横轴平行或呈一定夹角的环行缩窄。比较发现,高原型藏羊的卵巢微动脉螺旋程度更高,且各级微动脉的管径均较粗,"树皮样"压痕和环形缩窄较深且密;小尾寒羊卵巢微血管网更密集、分支更多。研究认为,高原型藏羊卵巢微动脉的解剖学特征,有利于增加卵巢内各部分的氧供,调节和分配血液供应以适应高原环境,而小尾寒羊卵巢更密集的微血管网可能是其排卵数高的生理学基础之一。

关键词：绵羊卵巢微动脉

检测猪瘟病毒E0抗体间接ELISA方法的建立及其初步应用

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中国兽医学报 2020年第3期40卷 441-449,456页

作者：王旭蔡梦露马振乾陈洁龚文杰常晓冉张泽财涂长春王新平吉林大学动物医学学院/教育部人兽共患病研究重点实验室吉林长春130062 青岛易邦生物工程有限公司山东青岛266032 军事医学研究院军事兽医研究所吉林长春130122

应用RT-PCR技术扩增了猪瘟病毒的E0基因片段,并将其分别克隆到pGEX-4T-1与pET-28a载体,获得了pGEX-4T-1-E0与pET-28a-E0重组表达质粒。以IPTG诱导表达的纯化GST-E0和His-E0重组蛋白为包被抗原,建立检测猪瘟病毒E0抗体的间接ELISA方法。... 详细信息

应用RT-PCR技术扩增了猪瘟病毒的E0基因片段,并将其分别克隆到pGEX-4T-1与pET-28a载体,获得了pGEX-4T-1-E0与pET-28a-E0重组表达质粒。以IPTG诱导表达的纯化GST-E0和His-E0重组蛋白为包被抗原,建立检测猪瘟病毒E0抗体的间接ELISA方法。采用方阵滴定法,确定出GST-E0抗原和His-E0抗原的最佳包被量分别为50ng/孔和100ng/孔,血清最佳稀释度为160倍。对80份猪瘟阴性血清样品进行了检测与统计学分析,确定出GST-E0和His-E0重组蛋白的间接ELISA方法的临界值分别为0.167和0.176。特异性、敏感性和重复性试验结果表明,本试验建立的基于GST-E0和His-E0蛋白的间接ELISA方法均具有特异、敏感和重复性好等优点。应用GST-E0和His-E0的间接ELISA方法及IDEXX E2抗体检测试剂盒平行检测88份猪血清样品,结果显示基于GST-E0和His-E0的间接ELISA方法与IDEXX试剂盒的符合率分别为78.41%和84.09%。以猪瘟病毒接毒细胞为抗原,应用免疫荧光试验(IFA)对His-E0间接ELISA和IDEXX检测试剂盒检出的阴性与阳性血清样品进行了验证,结果IFA与His-E0间接ELISA方法的符合率为93.18%;IFA与IDEXX试剂盒的符合率为90.91%,表明本试验所建立的基于His-E0的间接ELISA方法用于检测猪瘟抗体优于IDEXX公司检测E2抗体的试剂盒。该方法为鉴别E2亚单位疫苗免疫后的猪群中是否存在野毒感染提供了技术手段。

关键词：猪瘟病毒 E0基因间接ELISA 符合率比较

日粮中添加VEO-馥力康对成年比格犬健康状况的影响

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黑龙江畜牧兽医 2021年第20期 128-132页

作者：陈国赵熠群王军亮牛玉祥蔡旋上海市农业学校上海201600 上海农林职业技术学院上海201600 上海金盟饲料有限公司上海201604 上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海201106

为了分析VEO-馥力康(一种能够控制释放速度的姜黄素)对成年比格犬健康状况的影响,试验将20只体重为8~11 kg、5岁左右的雄性健康比格犬平均分为2组,分别饲喂基础日粮(对照组)和添加了0.024%VEO-馥力康的试验日粮(VEO-馥力康添加组),预试... 详细信息

为了分析VEO-馥力康(一种能够控制释放速度的姜黄素)对成年比格犬健康状况的影响,试验将20只体重为8~11 kg、5岁左右的雄性健康比格犬平均分为2组,分别饲喂基础日粮(对照组)和添加了0.024%VEO-馥力康的试验日粮(VEO-馥力康添加组),预试期7 d,正试期56 d,试验期间观察犬只精神状态,记录采食量,计算平均日采食量;试验开始和结束时对犬只进行称重,分析体重变化情况;并对其血常规及血清生化指标(球蛋白、总蛋白、白蛋白、总胆固醇、三酰甘油、钙、丙二醛含量及天门冬氨酸转移酶、碱性磷酸酶、超氧化物歧化酶活性)进行测定。结果表明:与对照组比较,VEO-馥力康添加组犬只更为活泼;平均日采食量差异不显著(P>0.05);血红蛋白浓度、血细胞比容、平均红细胞血红蛋白浓度显著升高(P0.05);三酰甘油含量、超氧化物歧化酶活性显著升高(P1);VEO-馥力康添加组犬只超氧化物歧化酶活性显著上升(P1),丙二醛含量极显著下降(P1),天门冬氨酸转移酶活性降低但差异不显著(P>0.05)。对照组犬只试验前后所有血常规指标和血清生化指标均差异不显著(P>0.05)。说明VEO-馥力康能够促进比格犬血红蛋白合成,调节比格犬脂肪代谢模式,激活体内抗氧化系统,同时对肝脏具有一定保护作用。

关键词： VEO-馥力康比格犬脂肪代谢血清生化指标健康状况

朝藿定A对原代骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的作用

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中国兽医学报 2021年第5期41卷 980-984,991页

作者：刘颖柴丽娟黄菊阳王琴宋蕾周昆李云章内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018 天津中医药大学中医药研究院天津市中药药理重点实验室天津300193

为了研究朝藿定A对原代骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)向成骨细胞分化的机制,本试验采用正常小鼠骨髓来源的间充质干细胞,通过观察朝藿定A对骨髓间充质干细胞成骨分化、成脂分化和矿化能力的影响,应用EL... 详细信息

为了研究朝藿定A对原代骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)向成骨细胞分化的机制,本试验采用正常小鼠骨髓来源的间充质干细胞,通过观察朝藿定A对骨髓间充质干细胞成骨分化、成脂分化和矿化能力的影响,应用ELISA技术,研究其抗骨质疏松作用及相关分子机制。结果显示,朝藿定A给药3 d后,成骨诱导后的BMSCs分泌了更多碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP),在朝藿定A给药14 d后,矿化结节显著增多,朝藿定A给药10 d后,朝藿定A低剂量组成脂分化的程度没有明显变化,而高剂量组成脂分化较对照组显著降低。BMSCs经成骨诱导及朝藿定A给药7 d后,给予0.01μmol/L朝藿定A时,上清中骨保护素(osteoprotegerin, OPG)水平显著升高,给予0.1 nmol/L朝藿定A时,成骨细胞表达核转录因子(receptor activator for nuclear factor-κB ligand, RANKL)水平呈上升趋势;而给予1,100μmol/L朝藿定A时,RANKL水平呈下降趋势。从OPG/RANKL的结果来看,给予0.1 nmol/L朝藿定A时OPG/RANKL值较对照组显著升高。说明朝藿定A可以促进BMSCs向成骨细胞分化并抑制其成脂分化,可以促进成骨细胞矿化并提高成骨细胞OPG/RANKL水平从而发挥骨保护作用。

关键词：朝藿定A 骨髓间充质干细胞成骨细胞

朝藿定A对破骨细胞及骨质疏松雄性小鼠的作用

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中国兽医学报 2021年第7期41卷 1359-1364页

为了研究朝藿定A对破骨细胞及骨质疏松雄性小鼠的作用,本试验将0.01~1.00μmol/L朝藿定A用于正常小鼠骨髓单核细胞诱导形成破骨细胞,分别于7,14 d进行抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRACP)染色和骨吸收陷窝染... 详细信息

为了研究朝藿定A对破骨细胞及骨质疏松雄性小鼠的作用,本试验将0.01~1.00μmol/L朝藿定A用于正常小鼠骨髓单核细胞诱导形成破骨细胞,分别于7,14 d进行抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRACP)染色和骨吸收陷窝染色;将5,10,20 mg/kg朝藿定A用于去势诱导的骨质疏松雄性小鼠,8周给药结束后处死小鼠并检测血清骨保护素(osteoprotegerin,OPG)和小鼠Ⅰ型胶原C端肽(C-terminal telopeptide of typeⅠcollagen,CTXⅠ)含量,采用Micro-CT对胫骨内部结构进行扫描,用HE染色观察股骨上端骺板软骨细胞和骨小梁。结果显示,在朝藿定A给药后,破骨细胞的形成和TRACP分泌减少,破骨细胞对骨薄片的吸收能力降低;朝藿定A给药组小鼠血清中OPG、CTXⅠ水平降低,小鼠骨小梁数目增加,骨微形态结构有所改善。结果表明,朝藿定A可以通过抑制破骨细胞的形成、分化和骨吸收作用,改善骨质疏松模型小鼠的骨微结构和血清骨转换标志物含量,起到骨保护作用。

关键词：朝藿定A 骨质疏松破骨细胞小鼠

新疆克拉玛依地区奶牛源致病性大肠杆菌的血清型、系统进化群及MLST分析

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中国畜牧兽医 2021年第4期48卷 1414-1422页

作者：江婉琳马勋王静平丽莹蔡思奇石河子大学动物科技学院石河子832000

试验对新疆克拉玛地区106头健康成年荷斯坦奶牛的新鲜粪便进行了致病性大肠杆菌的分离鉴定、分型及遗传进化分析,初步掌握了调查地区奶牛致病性大肠杆菌的流行情况。参考USDA检测法,对106份粪便样品选择性增菌,分别利用麦康凯和伊红美... 详细信息

试验对新疆克拉玛地区106头健康成年荷斯坦奶牛的新鲜粪便进行了致病性大肠杆菌的分离鉴定、分型及遗传进化分析,初步掌握了调查地区奶牛致病性大肠杆菌的流行情况。参考USDA检测法,对106份粪便样品选择性增菌,分别利用麦康凯和伊红美蓝琼脂培养基对大肠杆菌进行分离纯化鉴别,通过PCR方法鉴定,获得55株大肠杆菌分离株,对这些分离株进行致病性大肠杆菌血清型鉴定、系统进化群及多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)分析,利用goeBURST和Mega 7.0生物学软件进行聚类和进化研究,并进行流行病学分析。结果显示,106头健康荷斯坦奶牛的新鲜粪便中大肠杆菌的检出率为51.89%,55株大肠杆菌分离株共鉴定出9种与致病性相关的血清型,检出率为54.55%,其中肠致病性大肠杆菌(EPEC)、肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)和肠产毒性大肠杆菌(ETEC)血清型检出率分别为21.82%、18.81%和14.55%,优势血清型为O142∶K86(B)和O124∶K72(均为10.91%),前者属于肠致病性大肠杆菌,后者属于肠侵袭性大肠杆菌,而肠出血性大肠杆菌(EHEC)血清型检出率为0;系统发育群结果表明,55株大肠杆菌中B1群所占比例最高,为70.91%,其次为A群,占21.82%,D群所占比例较少,占7.27%,B2群未检测出;MLST分析可知,分离株中存在24个ST型,其中优势ST型为ST154(18.18%);进化树分析显示有7个进化分支。结果表明,新疆克拉玛依地区健康成年奶牛粪便大肠杆菌多样性丰富,不仅存在多种致病性大肠杆菌,而且大肠杆菌菌株之间还存在一定的进化关系。因此,健康成年奶牛粪便也具有潜在的安全风险,应加强对奶牛粪便致病性大肠杆菌的检测和监控。

关键词：奶牛源大肠杆菌血清型系统发育群多位点序列分型(MLST)

Single-cell atlas of domestic pig cerebral cortex and hypothalamus

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science Bulletin 2021年第14期66卷 1448-1461,M0004页

作者： Jiacheng Zhu Fang Chen Lihua Luo Weiying Wu Jinxia Dai Jixing Zhong Xiumei Lin Chaochao chai Peiwen Ding Langchao Liang Shiyou wang Xiangning Ding Yin Chen Haoyu wang Jiaying Qiu Feiyue wang Chengcheng Sun Yuying Zeng Jian Fang Xiaosen Jiang Ping Liu Gen Tang Xin Qiu Xingliang Zhang Yetian Ruan Sanjie Jiang Jiankang Li Shida Zhu Xun Xu Fang Li Zhongmin Liu Gang Cao Dongsheng Chen college of Life sciences University of Chinese Academy of SciencesBeijing 100049China BGI-Shenzhen Shenzhen 518083China MGI BGI-ShenzhenShenzhen 518083China Department of Neurobiology NHC and CAMS Key Laboratory of Medical NeurobiologySchool of Brain Science and Brian Medicineand the MOE Frontier Science Center for Brain Research and Brain–Machine IntegrationZhejiang University School of MedicineHangzhou 310031China State Key Laboratory of Agricultural Microbiology Huazhong Agricultural UniversityWuhan 430070China college of veterinary medicine Huazhong Agricultural UniversityWuhan 430070China School of Biological science&Medical Engineering Southeast UniversityNanjing 210096China School of Basic medicine Qingdao UniversityQingdao 266071China college of Life science South China Agricultural UniversityGuangzhou 510642China Shenzhen Children’s Hospital Shenzhen 518083China Research Center for Translational medicine East HospitalTongji University School of MedicineShanghai 200120China college of Biomedicine and Health Huazhong Agricultural UniversityWuhan 430070China

The brain of the domestic pig(Sus scrofa domesticus)has drawn considerable attention due to its high similarities to that of ***,the cellular compositions of the pig brain(PB)remain *** we investigated the single-nucleus transcriptomic profiles of five regions of the PB(frontal lobe,parietal lobe,temporal lobe,occipital lobe,and hypothalamus)and identified 21 cell *** cross-species comparison of mouse and pig hypothalamus revealed the shared and specific gene expression patterns at the single-cell ***,we identified cell types and molecular pathways closely associated with neurological disorders,bridging the gap between gene mutations and *** reported,to our knowledge,the first single-cell atlas of domestic pig cerebral cortex and hypothalamus combined with a comprehensive analysis across species,providing extensive resources for future research regarding neural science,evolutionary developmental biology,and regenerative medicine.

关键词： Domestic pig Brain cell atlas Single-cell transcriptome Neural science