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非洲猪瘟病毒CP312R基因编码蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备与应用

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中国兽医学报 2024年第1期44卷 1-6页

作者：刘佳晨郭子强陈金霞曹云雷童武乔思娜刘长龙赵冉郑海红童光志李丽薇高飞中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 扬州大学江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009 厦门市动物疫病预防控制中心福建厦门361009

为制备ASFV CP312R基因编码蛋白的多克隆抗体,利用PCR方法从非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)的灭活样品中扩增出924 bp的CP312R基因全长序列,利用同源重组法构建出原核表达质粒pCold-Ⅰ-ASFV-CP312R,将其转化至原核表达... 详细信息

为制备ASFV CP312R基因编码蛋白的多克隆抗体,利用PCR方法从非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)的灭活样品中扩增出924 bp的CP312R基因全长序列,利用同源重组法构建出原核表达质粒pCold-Ⅰ-ASFV-CP312R,将其转化至原核表达感受态细胞BL21中,经1 mmol/L的IPTG低温条件下诱导表达CP312R编码蛋白并经过镍柱亲和层析纯化后,利用SDS-PAGE对重组蛋白进行表达鉴定和反应原性分析,表达蛋白的相对分子质量约为34 kDa,通过Western blot分析,该蛋白能被ASFV抗体特异性识别。将所得的蛋白经处理纯化后免疫小鼠3次,得到含多克隆抗体的血清。利用该抗体检测实验室构建并拯救的表达ASFV CP312R基因编码蛋白的重组猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV),结果显示该多抗具有良好的反应原性和特异性,并且证明了ASFV CP312R基因编码蛋白可在PRRSV活载体中稳定表达。

关键词：非洲猪瘟病毒 CP312R基因原核表达多克隆抗体

High-frequency enhanced response based on Sb_(2)Te_(3)topological insulators

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Photonics Research 2022年第10期10卷 2302-2308页

作者： SHI ZHANG CHAOFAN SHI WEIWEI TANG LIBO ZHANG LI HAN CHENGSEN YANG ZHENGYANG ZHANG JIAN WANG MIAO CAI GUANHAI LI changlong liu LIN WANG XIAOSHUANG CHEN WEI LU College of Physics and Optoelectronic Engineering Hangzhou Institute for Advanced StudyUniversity of Chinese Academy of SciencesHangzhou 310024China State Key Laboratory of Infrared Physics Shanghai Institute of Technical PhysicsChinese Academy of SciencesShanghai 200083China Shanghai Institute of Optics and Fine Mechanics Chinese Academy of SciencesShanghai 201800China Department of Optoelectronic Science and Engineering Donghua UniversityShanghai 201620China Terahertz Technology Innovation Research Institute Shanghai Key Laboratory of Modern Optical SystemUniversity of Shanghai for Science and TechnologyShanghai 200093China

Topological insulators represent a new quantum phase of matter with spin-polarized surface states that are protected from backscattering, exhibiting electronic responses to light, such as topological quantum phase transitions. However, the effects of high-frequency driving topological intrinsic systems have remained largely unexplored challenges experimentally for high-sensitivity terahertz detection. In this study, by integrating Sb2Te3 topological insulators with subwavelength metal antennas through micro-nano processing, a high-frequency terahertz detector with high sensitivity is proposed. The enhanced response originates from the asymmetric scattering of the surface electrons in the Sb_(2)Te_(3) flakes induced by the terahertz wave. The device displays room-temperature photodetection with a responsivity of 192 mA/W and equivalent noise power of less than 0.35 nW/Hz^(1/2) in the frequency range from 0.02 to 0.3 THz. These results pave the way for the exploitation of topological insulators for high-frequency operation in real-time imaging within long-wavelength optoelectronics.

关键词： scattering insulator quantum

Cu和Zn离子注入SiO_2中形成Cu-Zn合金纳米颗粒及其光学性能

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硅酸盐学报 2016年第1期44卷 166-171页

作者：任兵刘昌龙天津大学理学院天津300072 天津市低维功能材料物理与制备技术重点实验室天津300072

将100 keV,剂量为5×10^(16)/cm^2的Cu离子和65 keV,剂量为5×10^(16)/cm^2的Zn离子单独或顺次注入到无定形SiO_2中,并在氮气中热处理,研究了Cu-Zn合金纳米颗粒(NPs)的合成、热演变及其光学性质。结果表明:通过离子注入法将顺次注入Cu... 详细信息

将100 keV,剂量为5×10^(16)/cm^2的Cu离子和65 keV,剂量为5×10^(16)/cm^2的Zn离子单独或顺次注入到无定形SiO_2中,并在氮气中热处理,研究了Cu-Zn合金纳米颗粒(NPs)的合成、热演变及其光学性质。结果表明:通过离子注入法将顺次注入Cu和Zn离子的样品在注入态形成了Cu-Zn合金NPs,并在520 nm附近产生了表面等离子共振(SPR)吸收峰。热处理后,合金的SPR吸收峰增强并蓝移;直至800℃时,Cu-Zn合金才分解。Cu-Zn合金NPs能够在700℃稳定存在,同时具有很好的三阶非线性光学性质。

关键词：离子注入铜-锌合金纳米颗粒热稳定性三阶非线性光学性质

The Novel PRRSV Strain HBap4-2018 with a Unique Recombinant Pattern Is Highly Pathogenic to Piglets

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Virologica Sinica 2021年第6期36卷 1611-1625页

作者： Pengfei Chen Xiangmei Tan Mengqin Lao Xia Wu Xiongwei Zhao Shuting Zhou Jiarong Yu Junrui Zhu Lingxue Yu Wu Tong Fei Gao Hai Yu changlong liu Yifeng Jiang Guangzhi Tong Yanjun Zhou Department of Swine Infectious Diseases Shanghai Veterinary Research InstituteChinese Academy of Agricultural SciencesShanghai200241China Shanghai Key Laboratory of Veterinary Biotechnology School of Agriculture and BiologyShanghai Jiao Tong UniversityShanghai200240China Jiangsu Co-Innovation Center for Prevention and Control of Important Animal Infectious Diseases and Zoonoses Yangzhou UniversityYangzhou225009China

Currently, various porcine reproductive and respiratory syndrome virus(PRRSV) variants emerged worldwide with different genetic characteristics and pathogenicity, increasing the difficulty of PRRS control. In this study, a PRRSV strain named HBap4-2018 was isolated from swine herds suffering severe respiratory disease with high morbidity in Hebei Province of China in 2018. The genome of HBap4-2018 is 15,003 nucleotides in length, and compared with NADC30-like PRRSV, nsp2 of HBap4-2018 has an additional continuous deletion of five amino acids. Phylogenetic analysis based on complete genome and ORF5 showed that HBap4-2018 belonged to lineage 8 of PRRSV-2, which was characterized by highly variable genome. However, HBap4-2018 was classified into lineage 1 based on phylogenetic analysis of nsp2,sharing higher amino acid homology(85.3%–85.5%) with NADC30-like PRRSV. Further analysis suggested that HBap4-2018 was a novel natural recombinant PRRSV with three recombinant fragments in the genome, of which highly pathogenic PRRSV(HP-PRRSV) served as the major parental strains, while NADC30-like PRRSV served as the minor parental strains. Five recombination break points were identified in nsp2, nsp3, nsp5, nsp9 and ORF6, respectively,presenting a novel recombinant pattern in the genome. Piglets inoculated with HBap4-2018 presented typical clinical signs with a mortality rate of 60%. High levels of viremia and obvious macroscopic and histopathological lesions in the lungs were observed, revealing the high pathogenicity of HBap4-2018 in piglets.

关键词： Porcine reproductive and respiratory syndrome virus(PRRSV) Genetic variation Nsp2 Recombination Pathogenicity

猪圆环病毒2型Cap蛋白的原核表达及间接ELISA抗体检测方法的初步建立

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中国动物传染病学报 2024年第4期32卷 79-84页

作者：严杰聪王帅勇王曼茱王娟荣新利邢燕茹虞凌雪周艳君单同领童武郑浩刘长龙童光志于海中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心扬州225009

Cap蛋白作为猪圆环病毒2型(PCV2)的主要结构蛋白,构成病毒的核衣壳,是PCV2的主要免疫保护性抗原,在PCV2血清学诊断中具有重要意义。本研究根据PCV2的ORF2基因序列设计特异性引物,通过PCR方法扩增得到去核定位信号肽的ORF2基因,并通过同... 详细信息

Cap蛋白作为猪圆环病毒2型(PCV2)的主要结构蛋白,构成病毒的核衣壳,是PCV2的主要免疫保护性抗原,在PCV2血清学诊断中具有重要意义。本研究根据PCV2的ORF2基因序列设计特异性引物,通过PCR方法扩增得到去核定位信号肽的ORF2基因,并通过同源重组将其克隆至原核表达载体pCold-Ⅰ中,经测序鉴定成功获得重组质粒pCold-Ⅰ-Cap。将重组质粒转化至感受态细胞BL21中进行表达,通过考马斯亮蓝染色以及免疫印迹试验检测Cap蛋白的表达,同时将纯化后的重组蛋白通过优化反应条件建立检测PCV2血清抗体的间接ELISA方法。结果表明:重组去核定位信号肽Cap蛋白可溶性表达且可以与PCV2阳性血清特异性结合,通过探索不同蛋白包被浓度以及不同一抗孵育浓度初步建立了间接ELISA检测方法,进而为PCV2抗体的有效监测奠定基础。

关键词：猪圆环病毒2型 Cap蛋白同源重组表达纯化 ELISA

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猪流行性腹泻病毒PEDV SD株的分离及体外3D肠道类器官感染模型建立

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中国动物传染病学报 2024年第1期32卷 1-8页

作者：蔡鸿明张敏吕丽蕾姜一峰高飞虞凌雪童武李丽薇李国新周艳君刘长龙童光志福建农林大学动物科学学院(蜂学学院) 福州350002 中国农业科学院上海兽医研究所上海200241

猪流行性腹泻病毒(PEDV)是一种主要感染仔猪小肠的肠道冠状病毒。本研究旨在建立一种用于PEDV体外研究的仔猪小肠类器官模型。首先从PEDV发病猪场的临床仔猪腹泻样品中分离PEDV并进行全基因组测序,结果显示成功分离1株PEDV,命名为PEDV S... 详细信息

猪流行性腹泻病毒(PEDV)是一种主要感染仔猪小肠的肠道冠状病毒。本研究旨在建立一种用于PEDV体外研究的仔猪小肠类器官模型。首先从PEDV发病猪场的临床仔猪腹泻样品中分离PEDV并进行全基因组测序,结果显示成功分离1株PEDV,命名为PEDV SD株。另外采用肠道类器官的培养技术,从10日龄健康仔猪小肠中分离小肠隐窝组织,经过体外培养7 d左右分化成具有肠道隐窝结构的猪小肠类器官,并能进行连续传代。然后将分离的PEDV SD株感染传代培养的猪小肠道类器官,通过间接免疫荧光试验显示PEDV可以很好地感染猪小肠道类器官,表明成功建立了PEDV感染肠道类器官的模型。猪小肠类器官感染模型可以在体外很好地重现PEDV感染肠道细胞的复杂结构的过程,为深入研究PEDV的致病机制提供一种新的可再生的体外研究模型。

关键词：猪流行性腹泻病毒肠道类器官感染模型

表达猪源GM-CSF重组PRRSV疫苗对同源高致病性毒株的免疫保护效力评价

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中国动物传染病学报 2024年第2期32卷 106-112页

作者：虞凌雪姜一峰杨莘于海周艳君童武高飞李国新刘长龙郑浩单同领李丽薇孔宁童光志中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 扬州大学江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心扬州225009

为研究表达猪源粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的重组猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)在动物体内的免疫调节特性及对其的保护效力评价,本研究将15头30日龄仔猪随机分成4组,空白对照组(DMEM)4头、疫苗对照组(HuN4-F112株)4头、疫苗... 详细信息

为研究表达猪源粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的重组猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)在动物体内的免疫调节特性及对其的保护效力评价,本研究将15头30日龄仔猪随机分成4组,空白对照组(DMEM)4头、疫苗对照组(HuN4-F112株)4头、疫苗组(rPRRSV-GM-CSF株)3头和攻毒对照组(DMEM^(+)HuN4株)4头。疫苗对照组肌注免疫HuN4-F112株10^(5) TCID_(50)/头、疫苗组肌注免疫rPRRSV-GM-CSF株10^(5) TCID_(50)/头,实验空白组和攻毒对照组肌注DMEM 2 mL/头,免疫后28 d,疫苗组、疫苗对照组和攻毒对照组肌注HuN4株(10_(5) TCID_(50)/头)。攻毒后的试验结果表明,免疫rPRRSV-GM-CSF重组病毒组和疫苗株HuN4-F112组获得完全保护,阴性对照组全部死亡;通过IDEXX试剂盒检测仔猪血清中PRRSV抗体水平可知,在免疫14 d后,疫苗组抗体水平显著高于疫苗对照组(P<0.05);由流式细胞术分析体内免疫细胞亚群比例可知,疫苗组同疫苗对照组相比,疫苗组的重组疫苗株能够引起免疫记忆细胞亚群CD4^(+)CD8^(+)T在免疫后28 d显著升高,以及引发攻毒后其抗原递呈细胞显著增多,进而促进CD4-CD8^(+)T的增殖以发挥抗病毒免疫应答。本研究筛选出了一株具有改善HuN4-F112弱毒疫苗株免疫效果的重组病毒rPRRSV-GM-CSF,为进一步研发广谱通用的新型疫苗奠定基础。

关键词： rPRRSV-GM-CSF 免疫记忆细胞T淋巴细胞杀伤性T淋巴细胞

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Calibration　for　CR－39　Solid　State　Nuclear　Track　Detector　Using　Heavy　Ion　Accelerator　Beams

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IMP & HIRFL Annual Report 1994年 64-65页

作者： Jing Guiru1 Ren Guoxiao Hou Mingdong liu Jie and liu changlong

ＣａｌｉｂｒａｔｉｏｎｆｏｒＣＲ－３９ＳｏｌｉｄＳｔａｔｅＮｕｃｌｅａｒＴｒａｃｋＤｅｔｅｃｔｏｒＵｓｉｎｇＨｅａｖｙＩｏｎＡｃｃｅｌｅｒａｔｏｒＢｅａｍｓ￥ＪｉｎｇＧｕｉｒｕ１；ＲｅｎＧｕｏ... 详细信息

ＣａｌｉｂｒａｔｉｏｎｆｏｒＣＲ－３９ＳｏｌｉｄＳｔａｔｅＮｕｃｌｅａｒＴｒａｃｋＤｅｔｅｃｔｏｒＵｓｉｎｇＨｅａｖｙＩｏｎＡｃｃｅｌｅｒａｔｏｒＢｅａｍｓ￥ＪｉｎｇＧｕｉｒｕ１；ＲｅｎＧｕｏｘｉａｏ；ＨｏｕＭｉｎｇｄｏｎｇ；...

关键词： Nuclear Beams CR Calibration Detector Heavy Ion Accelerator Solid State

基于ESO的LQR控制器在无人机姿态控制中的研究

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系统仿真学报 2018年第2期30卷 753-759页

作者：潘健刘昌龙湖北工业大学电气与电子工程学院武汉430068

由于复杂环境下不确定扰动及模型参数变化等因素的存在,传统线性二次调节控制器(LQR)可能导致控制对象的不稳定,提出了基于扩张状态观测器(ESO)的LQR控制策略,旨在保证控制对象在复杂环境下工作的可靠性。以四旋翼无人机Qball-X4为研究... 详细信息

由于复杂环境下不确定扰动及模型参数变化等因素的存在,传统线性二次调节控制器(LQR)可能导致控制对象的不稳定,提出了基于扩张状态观测器(ESO)的LQR控制策略,旨在保证控制对象在复杂环境下工作的可靠性。以四旋翼无人机Qball-X4为研究对象构建其非线性动力学模型。利用ESO能够实时估计并补偿内扰和外扰的能力改进LQR姿态控制器。通过Matlab/Simulink仿真和四旋翼无人机Qball-X4实际飞行测试验证了该算法的有效性。

关键词：扩张状态观测器(ESO) 线性二次调节器(LQR) 四旋翼无人机姿态控制器