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人源化六基因编辑猪红细胞治疗恒河猴急性失血性休克的疗效观察

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解放军医学院学报 2024年第4期45卷 397-404页

作者：贾志博崔梦一王恺杜嘉祥董阳辉宋翔宇陈蕾佳杨博尧陈胜峰彭熙为许文静潘登科彭江河北北方学院河北张家口075000 解放军总医院第四医学中心骨科医学部研究所全军骨科战创伤重点实验室骨科再生医学北京市重点实验室北京100853 解放军医学院北京100853 贵州医科大学研究生院贵州贵阳550025 成都中科奥格生物科技有限公司四川成都610041

背景临床上血液制品短缺是一项世界难题,猪红细胞与人类红细胞有诸多相似之处,有望解决这一难题。目的将人源化基因编辑猪(GTKO/β4GalNT2KO/CMAHKO/hCD55/hCD46/hTBM)的红细胞输注至非人灵长类动物恒河猴体内,探讨异种输血的可能性。... 详细信息

背景临床上血液制品短缺是一项世界难题,猪红细胞与人类红细胞有诸多相似之处,有望解决这一难题。目的将人源化基因编辑猪(GTKO/β4GalNT2KO/CMAHKO/hCD55/hCD46/hTBM)的红细胞输注至非人灵长类动物恒河猴体内,探讨异种输血的可能性。方法采用盐水介质交叉配血法,检测六基因编辑猪红细胞(6GE-pRBC)与恒河猴的血液凝集情况。通过IgG、IgM结合实验和补体介导的细胞毒性实验验证异种输血安全性,从恒河猴体内抽取25%血容量血液后输注等量的异硫氰酸荧光素标记6GE-pRBC,通过流式细胞分析术监测在其体内的存活状态,并定期采集受体血液样本验证异种输血的有效性,观察6GE-pRBC输注治疗失血性休克恒河猴的可能性。结果6GE-pRBC与恒河猴主次侧交叉配血试验均为阴性;其基因表型鉴定符合预期结果;恒河猴血清与6GE-pRBC的IgG、IgM结合实验结果显示IgG(3.35%)、IgM(4.13%)表达量较低;6GE-pRBC的补体介导细胞毒作用(CDC)显著低于野生猪红细胞(P<0.0001)。输血后60 h 6GEpRBC在恒河猴体内仍存活;血细胞比容失血后为28.6%,60 h升高至35%;血红蛋白含量失血后为92 g/L,60 h升高至116 g/L并维持于失血前正常水平。结论6-GE-pRBC输注给恒河猴在一定时间内能有效地纠正恒河猴休克症状,且未发现免疫排斥反应。随着基因编辑技术不断创新,基因编辑猪红细胞有望替代人红细胞治疗人类急性失血性休克。

关键词：异种输血人源化编辑猪猪红细胞恒河猴免疫排斥反应

异种红细胞联合膜式氧合灌注装置对人断肢离体机械灌注效果观察

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中华移植杂志（电子版） 2023年第3期17卷 152-157页

作者：杨博尧陈胜峰崔梦一贾志博宋翔宇王恺陈蕾佳彭熙为刘亚荣梁西孝许文静许猛彭江解放军医学院北京100853 解放军总医院第四医学中心骨科医学部研究所、北京市骨科再生医学重点实验室、中国人民解放军骨科战创伤重点实验室北京100048 解放军总医院第四医学中心骨科医学部骨科北京100048

目的探究使用异种洗涤红细胞灌注液对人断肢进行离体机械灌注保存的实验流程及可能性。方法收集来源于左下肢恶性肿瘤截肢患者断肢,肢体离断后置于4℃保温箱中转运至实验室。对断肢进行预处理,并将腘静脉、腘动脉插管后连接灌注系统,使... 详细信息

目的探究使用异种洗涤红细胞灌注液对人断肢进行离体机械灌注保存的实验流程及可能性。方法收集来源于左下肢恶性肿瘤截肢患者断肢,肢体离断后置于4℃保温箱中转运至实验室。对断肢进行预处理,并将腘静脉、腘动脉插管后连接灌注系统,使用4℃肝素等渗NaCl溶液对断肢进行灌洗,直至从静脉端流出澄清的等渗NaCl溶液。膜式氧合灌注系统包括:膜式氧合器、蠕动泵、制氧机、储液装置和监护仪。灌注过程中对灌注液电解质和细胞损伤标记物进行监测,同时进行血常规和断肢末端经皮动脉血氧饱和度(SpO_(2))检查;灌注结束后通过苏木精-伊红(HE)染色法进行组织学评价。结果断肢热缺血和冷缺血时间分别为138和65 min。灌注开始后,断肢颜色恢复红润,远端表浅静脉充盈。灌注开始后前6 h断肢末端SpO_(2)维持在98%~100%,最终因断肢末端SpO_(2)下降,灌注终止,灌注时长7 h。灌注开始时白细胞和血小板均处于较低水平,白细胞在灌注开始后有较明显的下降,在3 h后出现上升,最终与灌注开始时数值接近;灌注开始后前4 h内血小板水平较为平稳,4 h后出现较大幅度的上升;灌注过程中红细胞和血红蛋白均呈波动趋势。灌注开始后前6 h内K+浓度较为稳定,之后有较大幅度上升;Na+浓度在整个灌注期间基本维持在生理状态;乳酸脱氢酶和肌酸激酶均呈上升趋势。HE染色示断肢肌肉细胞在灌注过程中体积逐渐恢复后又持续变小,肌间血管可见血栓形成。结论初步验证利用基于异种红细胞对人断肢进行离体机械灌注的可行性,但其保存效果是否达到或接近生理状态并能维持功能,以及免疫排斥反应的程度仍需进一步论证。

关键词：异种红细胞机械灌注静态冷保存断肢移植

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略论黄伯耀小说观念

顺德职业技术学院学报 2013年第2期11卷 88-90页

作者：王灿广州大学人文学院广东广州510006

黄伯耀的小说观念丰富而独特,却没能引起与之相当的重视。他充分肯定了小说巨大的社会作用,也意识到小说源于社会生活的性质;他对我国古代小说作出了客观公允的评价,并关注到因为国人的误读而导致很多小说蒙受不白之冤;他还十分重视小... 详细信息

黄伯耀的小说观念丰富而独特,却没能引起与之相当的重视。他充分肯定了小说巨大的社会作用,也意识到小说源于社会生活的性质;他对我国古代小说作出了客观公允的评价,并关注到因为国人的误读而导致很多小说蒙受不白之冤;他还十分重视小说在国民大众中的普及,并指出普及的办法。黄伯耀的小说观念丰富了中国近代小说理论宝库,足以引起重视,值得深入研究。

关键词：黄伯耀小说观念

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1例离断肢体建立异种交叉循环的初步观察

解放军医学院学报 2023年第1期44卷 38-42页

作者：陈胜峰杨博尧管延军张铁元贾志博宋翔宇李渊源杨亚龙徐风华赵建文许文静张建政彭江解放军医学院北京100853 解放军总医院第四医学中心骨科医学部研究所北京100853 贵州医科大学贵州贵阳550000 河北北方学院河北张家口075132 解放军总医院医疗保障中心药剂科药学基础研究室北京100853 解放军总医院第四医学中心显微外科北京100853

背景异种交叉循环在器官保存领域的应用已取得一定的成果,但其在肢体组织保存方面效果仍未明确。目的探究异种交叉循环术保存断足的效果。方法将因骨肉瘤行截肢手术的断肢再次处理,自踝关节上方约5 cm截断,随后将不含肿瘤的断足主要血... 详细信息

背景异种交叉循环在器官保存领域的应用已取得一定的成果,但其在肢体组织保存方面效果仍未明确。目的探究异种交叉循环术保存断足的效果。方法将因骨肉瘤行截肢手术的断肢再次处理,自踝关节上方约5 cm截断,随后将不含肿瘤的断足主要血管连接至巴马猪股动脉和股静脉,通过趾尖血氧饱和度、趾尖脉率、全血细胞计数和断足肌肉组织形态评估保存效果。结果成功实施了异种交叉循环术,维持断足肌肉组织正常形态超过4 h。趾尖血氧饱和度64%~99%,趾尖脉率45~106/min。白细胞计数(13.3~19.7)×10^(9)/L,淋巴细胞计数(2.1~4.36)×10^(9)/L,血小板计数(242~1534)×10^(9)/L。0 h和4 h断足肌纤维形态正常,8 h断足肌纤维排列紊乱,失去部分组织形态。0 h肌间隙血管未充盈,4 h肌间隙血管有红细胞通过,8 h肌间隙血管内形成血栓。结论异种交叉循环术可维持断足肌肉组织正常形态超过4 h,但如何减少免疫排斥反应仍需进一步研究。

关键词：离断肢体异种交叉循环巴马猪断肢再植免疫排斥反应

黄芪复方浸膏制备工艺优化及对大鼠缺铁性贫血的改善研究

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粮食与油脂 2023年第6期36卷 97-100页

作者：周援邵颖陈安徽王卫东郑秀文徐州工程学院食品与生物工程学院江苏徐州221018 江苏省食品资源开发与质量安全重点建设实验室徐州工程学院江苏徐州221018 安徽亳药千草国药股份有限公司安徽亳州236800

以黄芪、大枣、当归、白芍、熟地黄为主要原料制备黄芪复方浸膏。以浸膏得率为指标,在单因素试验的基础上,采用正交试验优化黄芪复方浸膏提取工艺,并研究其对缺铁性贫血(IDA)大鼠的改善作用。结果表明:最佳浸膏提取工艺为液料比25∶1(mL... 详细信息

以黄芪、大枣、当归、白芍、熟地黄为主要原料制备黄芪复方浸膏。以浸膏得率为指标,在单因素试验的基础上,采用正交试验优化黄芪复方浸膏提取工艺,并研究其对缺铁性贫血(IDA)大鼠的改善作用。结果表明:最佳浸膏提取工艺为液料比25∶1(mL/g)、浸提温度100℃、浸提时间2.0 h、浸提次数3次,在此条件下浸膏得率为37.21%。黄芪复方浸膏具有改善IDA大鼠的作用,可作为保健食品配料。

关键词：黄芪复方浸膏正交试验贫血大鼠

基于改进YOLOv5的幽门螺杆菌免疫印迹图像识别

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计算机与现代化 2022年第9期 78-84,92页

作者：王梦张鸿鑫刘庆华张东江苏科技大学计算机学院江苏镇江212003 无锡铂肴医疗仪器有限公司江苏无锡214142

针对幽门螺杆菌免疫印记图像重度依赖医生目测识别,存在效率低、速度慢等问题,提出一种基于改进YOLOv5的幽门螺杆菌免疫印迹图像检测模型。首先对YOLOv5的特征提取器进行优化,采用DenseNet作为新的特征提取器来解决梯度消失问题;然后通... 详细信息

针对幽门螺杆菌免疫印记图像重度依赖医生目测识别,存在效率低、速度慢等问题,提出一种基于改进YOLOv5的幽门螺杆菌免疫印迹图像检测模型。首先对YOLOv5的特征提取器进行优化,采用DenseNet作为新的特征提取器来解决梯度消失问题;然后通过限制最高下采样倍数,使得模型对小目标检测更加灵敏;最后引入Swish激活函数代替原YOLOv5中的LeakyReLU激活函数并改进Io U来获取更加准确的边界信息。在幽门螺杆菌免疫印记图像数据集上验证改进后的模型检测能力,实验结果表明,改进后模型的F1-score高达0.93、mAP@0.5达95.4%、mAP@0.5:0.95达75.6%、每秒检测帧数达54fps,满足临床上检测时限要求。

关键词：幽门螺杆菌免疫印迹图像特征提取 YOLOv5 目标检测识别深度学习