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研究背景和目的:动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)是一种慢性进行性血管病变,主要由脂质代谢紊乱和全身炎症反应引起,是导致全球心血管疾病发病率和死亡率增加的主要原因之一。在AS的发展过程中,血管内皮细胞(Vascular endothelial cell,VEC)扮演着极其关键的角色,它们通过分泌生理活性物质、调节血管张力等多种方式来维持血管正常的生理功能。然而,受到高血脂、高血糖、高血压、氧化应激和感染等因素的刺激,血管内皮细胞可能发生功能紊乱和炎症反应,这成为导致AS发生和发展的关键因素之一。因此,及早干预和控制血管内皮细胞的炎症反应和功能紊乱,将有助于预防和延缓AS的发生和发展,从而降低心血管疾病的发病率和死亡率。OAS1蛋白是一种由OAS1基因编码的酶,目前研究认为,它参与了抗病毒的先天免疫反应。当双链 RNA(Double strand RNA,dsRNA)刺激 OAS1 时,OAS1 合成 2'-5'寡腺苷酸(2'-5'-oligoadenylate,2-5A),随后,2-5A作为第二信使激活核酸内切酶L(RNase L),从而降解病毒RNA。同时,激活的RNase L还可以引起细胞转录组的改变、翻译的阻滞、功能障碍和凋亡。尽管OAS1在抗病毒免疫方面的作用已被深入研究,但其在调控血管内皮细胞炎症和功能方面的研究尚不明确,特别是在AS发生和发展中的意义和作用方面,值得进一步探讨。课题组前期研究中发现,组织芯片发现OAS1的mRNA在人AS组织中高表达,免疫组化(Immuno histochemistry,IHC)表明OAS1在人AS组织处高表达,提示OAS1在AS中起着一定作用,但OAS1在AS中作用及其是否参与内皮细胞的炎症反应,及其相关机制仍需要进一步探索。本研究旨在探究OAS1在AS组织中的表达,并且使用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导血管内皮细胞炎症模型,研究OAS1在调控血管内皮细胞炎症和功能紊乱方面的作用和机制。方法:第一部分OAS1蛋白在动脉粥样硬化组织中的表达1.采用基因芯片技术鉴定人类AS组织中差异表达基因,使用ELISA法测定表观健康人、心绞痛、心肌梗死和心衰患者血清中的OAS1浓度,进一步收集了不同分期的AS组织样本,Masson染色明确斑块分期,通过IHC检测OAS1与P65蛋白表达水平。2.小鼠AS组织进行油红O染色、Masson染色和HE染色,以验证成模效果;进一步使用IHC检测小鼠AS组织中OAS1蛋白的表达。3.从GEO数据库中检索AS组织mRNA芯片数据,使用R软件(3.6.3版本)并结合limma包、umap包、ggplot2包、ComplexHeatmap包进行数据处理、分组和差异分析,观察OAS1的表达变化。第二部分OAS1蛋白在血管内皮细胞功能紊乱中的作用1.利用LPS浓度梯度、时间梯度,确定刺激浓度和时间;使用LPS刺激血管内皮细胞,建立炎症模型;利用RNAi技术敲减OAS1的表达,免疫印迹实验检测OAS1蛋白表达量,qPCR检测炎症因子ICAM1、VCAM1、IL-6、MCP1、TNFα水平2.给予LPS刺激的同时敲减OAS1,单核细胞黏附实验测定OAS1对内皮细胞黏附单核细胞数量影响;特异性染料染色后流式细胞仪检测OAS1蛋白对血管内皮细胞ROS、NO含量的影响。第三部分OAS1蛋白调控血管内皮细胞中NF-κB通路活性的作用机制研究1.对敲减OAS1的血管内皮细胞同时给予LPS刺激,检测OAS1、NF-κB信号通路关键因子P65和P-P65蛋白的表达。2.功能挽救实验:对血管内皮细胞敲减OAS1和P65并给予LPS刺激,采用单核细胞黏附实验测定OAS1和P65蛋白对内皮细胞黏附单核细胞数量影响;通过流式细胞术检测OAS1和P65蛋白对血管内皮细胞ROS、NO含量影响。结果:第一部分OAS1在AS组织呈高表达,且与AS严重程度有关***1的mRNA在人AS处呈高表达;与表观健康人相比,心绞痛、心梗和心衰病人血清中OAS1蛋白含量上升,且随AS病变程度增高;与Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ分期的人AS组织相比,OAS1蛋白在Ⅳ期中表达明显升高,且与P65蛋白呈正相关。***模型小鼠主动脉斑块面积增大且胆固醇含量明显增高,主动脉胶原纤维沉积明显增多,OAS1蛋白在AS模型小鼠斑块处高表达。***数据库分析得出,相较正常组织,OAS1在AS组织中mRNA表达量上调1.8倍;相较早期斑块,OAS1的mRNA表达量在晚期斑块中明显增高。第二部分OAS1参与调控血管内皮细胞功能紊乱1.血管内皮细胞在LPS的刺激作用下,OAS1蛋白含量相较阴性对照组(Negative Co

关键词：动脉粥样硬化炎症 OAS1 血管内皮细胞 NF-κB

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管网建设年内全部完工 A04

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作者：钟燕黎伟康

本报讯今年初，大岭山污水处理厂主体工程完工，但由于配套的管网工程没能跟上，大岭山污水处理厂遭遇了“巧妇难为无米之炊”的尴尬。记者昨日从市环保产业中心获悉，目前，该污水处理厂的管网工程已修建了90%，年内管网建设将全部完...

本报讯今年初，大岭山污水处理厂主体工程完工，但由于配套的管网工程没能跟上，大岭山污水处理厂遭遇了“巧妇难为无米之炊”的尴尬。记者昨日从市环保产业中心获悉，目前，该污水处理厂的管网工程已修建了90%，年内管网建设将全部完工。上个月，该污水处理厂日处理污水量达?

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东莞污染源约5.5万家 A04

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东莞日报

作者：钟燕黎伟康

本报讯昨日，全省污染源普查质量会审会议在东莞举行，此次会议将持续到25日。会议将对各地上报的普查数据进行质量把关，确保数据的完整性、准确性、可靠性和科学性。除各市交叉会审外，在行业方面，东莞将负责全省造纸行业...

本报讯昨日，全省污染源普查质量会审会议在东莞举行，此次会议将持续到25日。会议将对各地上报的普查数据进行质量把关，确保数据的完整性、准确性、可靠性和科学性。除各市交叉会审外，在行业方面，东莞将负责全省造纸行业的会审。经过两次污染源清查，我市行政区

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切实解决群众实际困难 A02

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作者：尚志岑黎伟康

昨日，全市32镇街再次统一开展党委书记大接访活动。李毓全、刘树基、黄双福、冷晓明、何嘉琪、甄瑞潮、崔建、江凌、王道平、卢广海等市几套班子领导也分赴各镇街督导接访活动，集中解决群众反映强烈的热点、难点问题。 本报讯昨...

昨日，全市32镇街再次统一开展党委书记大接访活动。李毓全、刘树基、黄双福、冷晓明、何嘉琪、甄瑞潮、崔建、江凌、王道平、卢广海等市几套班子领导也分赴各镇街督导接访活动，集中解决群众反映强烈的热点、难点问题。 本报讯昨日，市委副书记、市长李毓全来到麻涌

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11名举报人共获奖金26万元 A03

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东莞日报

作者：钟燕实习生黎伟康

本报讯举报违法排污的11名市民将分享26.8万元的奖金。记者昨日从市环保局获悉，第二批奖励举报违法排放工业废水行为的情况通报已经发出，从去年11月至今年2月份，有奖举报并经查实的违法企业有11家，仅相当于去年10月份查处数量的60...

本报讯举报违法排污的11名市民将分享26.8万元的奖金。记者昨日从市环保局获悉，第二批奖励举报违法排放工业废水行为的情况通报已经发出，从去年11月至今年2月份，有奖举报并经查实的违法企业有11家，仅相当于去年10月份查处数量的60%。11家企业共罚66万元

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重污染行业统一规划 A04

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东莞日报

作者：钟燕实习生黎伟康

本报讯东莞正在积极谋划产业结构调整升级，产业转移园建设是其中的重要环节。产业转移中如何把好环保关，确保不变成“污染大转移”呢？记者昨日从市环保局获悉，在承接产业转移中，承接方将进行严格把关，对重污染行业则实行统一规...

本报讯东莞正在积极谋划产业结构调整升级，产业转移园建设是其中的重要环节。产业转移中如何把好环保关，确保不变成“污染大转移”呢？记者昨日从市环保局获悉，在承接产业转移中，承接方将进行严格把关，对重污染行业则实行统一规划、统一定点。产业转移严把环保

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上半年19家造纸企业关门 A06

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作者：钟燕实习生黎伟康

本报讯记者昨日从市环保局获悉，今年上半年我市125家造纸企业（含卫生纸厂）中已关闭19家，限期关闭11家，完成整改验收15家，正在申报验收28家，正在整改52家，其余相关整改工作亦正在开展。造纸业污染问题挂牌督办...

本报讯记者昨日从市环保局获悉，今年上半年我市125家造纸企业（含卫生纸厂）中已关闭19家，限期关闭11家，完成整改验收15家，正在申报验收28家，正在整改52家，其余相关整改工作亦正在开展。造纸业污染问题挂牌督办继去年被省环保局挂牌督办后，今年东?

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控制生态线控制区内人口数量 A04

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东莞日报

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本报讯《东莞市域生态控制线规划》已获得市政府审批通过，正式划定了1103平方公里的市域生态线范围，约占东莞土地面积的44.7%。生态控制线内已建项目如何妥善处理？如何设定新增项目的准入制度？记者从市城建规划局获悉，目前，该局...

本报讯《东莞市域生态控制线规划》已获得市政府审批通过，正式划定了1103平方公里的市域生态线范围，约占东莞土地面积的44.7%。生态控制线内已建项目如何妥善处理？如何设定新增项目的准入制度？记者从市城建规划局获悉，目前，该局已着手制定《东莞市生态控制线管理规定（?

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中堂欲投12亿用于环保建设 A02

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作者：钟燕实习生黎伟康

本报讯中堂造纸产业基地环境影响报告书日前通过了广东省环保局审批。记者日前从市环保局获悉，中堂造纸产业基地正式成为广东省环保产业基地。中堂镇计划投入120亿元对辖区内的造纸企业进行整合提升，其中环保投入12亿元。造...

本报讯中堂造纸产业基地环境影响报告书日前通过了广东省环保局审批。记者日前从市环保局获悉，中堂造纸产业基地正式成为广东省环保产业基地。中堂镇计划投入120亿元对辖区内的造纸企业进行整合提升，其中环保投入12亿元。造纸污染两度被省挂牌督办据统

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